成 凱，何 茂 ，黃 志，許煒萍，賴 艷

(1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 園藝學(xué)院，成都 611130；2.貴州大學(xué) 農(nóng)學(xué)院，貴陽 550025)

硒是動(dòng)物體必需的微量元素，具有保護(hù)心臟、抗癌、防止大骨節(jié)病、克山病、延緩衰老等作用，因其對(duì)人類和動(dòng)物的健康具有重要作用，日漸受到人們關(guān)注[1]。中國為嚴(yán)重缺硒國家，72%國土面積缺硒，還存在如恩施、永福等高硒地區(qū)，同時(shí)，自然條件下植物硒含量不高，利用硒資源開發(fā)富硒產(chǎn)品具有廣闊前景[2]。植物能將環(huán)境中不易被人體吸收的無機(jī)硒在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒，并提高其生物有效活性[3]，是動(dòng)物和人類獲得硒的主要來源。硒對(duì)植物的生長發(fā)育具有二重性，低濃度時(shí)促進(jìn)植物生長發(fā)育，而高濃度時(shí)則對(duì)植物的生長發(fā)育起抑制作用，過量時(shí)甚至?xí)l(fā)生毒害現(xiàn)象[4-5]。研究證明，低濃度的硒可能通過調(diào)控超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)等的活性、丙二醛(MDA)含量參與梨葉片衰老進(jìn)程的調(diào)控，從而降低膜脂過氧化水平，延長葉片功能期[6]；硒也能通過促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成使作物產(chǎn)量增加、品質(zhì)改善[7]。另一方面，高濃度的硒在植物體內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生大量活性氧，并刺激植物產(chǎn)生大量抗氧化物質(zhì)來抵御脅迫[8]，還可能影響鐵硫蛋白合成從而影響光合作用，還有研究發(fā)現(xiàn)高濃度硒能破壞植物花粉發(fā)育與受精作用，從而抑制植物生長發(fā)育與繁殖[9]。

硫是植物生長的重要中量元素，在活化多種酶和提高抗逆性等方面具有重要作用，適宜濃度的硫能提高植株可溶性蛋白及可溶糖含量，降低MDA含量，提高葉片中過氧化物酶(POD)、過氧化氫酶(CAT)、SOD活性，從而增強(qiáng)植物的抗逆性[10]，促進(jìn)植物的生長[11-12]。

硒和硫?qū)偻逶兀哂休^多相似特性。研究證明，硫是影響硒吸收轉(zhuǎn)運(yùn)的重要因素[13]，高等植物同化Se6+的途徑與同化SO42-的途徑基本相同，硒的吸收轉(zhuǎn)化量受硫含量的影響，硒能夠促進(jìn)植物對(duì)硫的吸收，硫可以增強(qiáng)土壤中的硒可利用性，但高濃度的硫會(huì)抑制硒酸鹽攝取[14]，硫硒配施因濃度和比例不同對(duì)植物有促進(jìn)或者抑制作用[15-16]。

青花菜(BrassicaoleraceaL.var.italica)亦稱西蘭花、綠花菜、綠花椰菜等，為十字花科蕓苔屬甘藍(lán)種中的一個(gè)變種，具有營養(yǎng)豐富、較高藥用價(jià)值的特點(diǎn)，各器官均可加以綜合利用[17]，在預(yù)防癌癥、調(diào)節(jié)高血壓、心臟病等方面有一定功效，能安全控制糖尿病[18]。青花菜具有較強(qiáng)富集硒的能力[19]，是進(jìn)行富硒研究與栽培的可行材料。目前，硫硒配施在青花菜中的研究較少，本試驗(yàn)以青花菜為材料，研究硫硒配施對(duì)青花菜幼苗植株滲透調(diào)節(jié)與抗氧化酶的影響，旨在為青花菜的合理施肥，提高硒、硫利用率提供理論支撐，為富硒青花菜安全、優(yōu)質(zhì)、高效生產(chǎn)提供有價(jià)值的應(yīng)用依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)在四川農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)農(nóng)場(chǎng)內(nèi)進(jìn)行。供試青花菜品種為‘碧秀1號(hào)’，購于四川東葉科技有限公司。硒、硫元素分別以硒酸鈉(Na2SeO4)、硫酸鈉(Na2SO4)形式加入營養(yǎng)液，以硒、硫元素計(jì)算加入量。試驗(yàn)營養(yǎng)液配方采用霍格蘭德營養(yǎng)液配方[20]，低硫濃度時(shí)用MgCl2替代MgSO4·7H2O，鐵鹽制劑用FeCl2或者FeCl3代替FeSO4·7H2O。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

將青花菜種子于55 ℃下不斷攪拌15 min，冷卻至室溫浸泡5 h后，于25 ℃催芽箱中保濕催芽，待60%露白，播種于上口內(nèi)徑15 cm、底內(nèi)徑9 cm、高10.5 cm帶底盤塑料盆中。盆中為155 ℃ 預(yù)滅菌2 h蛭石珍珠巖(體積比3∶1)混合基質(zhì)。每盆4株，常規(guī)營養(yǎng)液培至二葉一心，選取一致性好的植株進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)以及常規(guī)管理。試驗(yàn)采用雙因素區(qū)組設(shè)計(jì)，設(shè)置3組10個(gè)不同的硫、硒處理。分別為普通硫(1 mmol/L)濃度下，不同濃度硒(0、10、20、100 μmol/L)處理；無硫情況下，不同濃度硒(0、5、10、20 μmol/L)處理；硒脅迫(20 μmol/L)下，不同濃度硫(0、1、5、10 mmol/L)處理對(duì)青花菜幼苗的影響。各試驗(yàn)設(shè)計(jì)分別用S1Se0、S1Se10、S1Se20、S1Se100、S0Se0、S0Se5、S0Se10、S0Se20、S5Se20和S10Se20表示，以S0Se0為對(duì)照。硫、硒溶液2 d澆1次，每次每盆澆15 mL，共處理6次。從處理時(shí)開始計(jì)算，分別在第0、4、8、12天測(cè)定相關(guān)數(shù)據(jù)。重復(fù)3次。

1.3 測(cè)定項(xiàng)目與方法

1.3.1 膜質(zhì)滲透相關(guān)指標(biāo) 相對(duì)電導(dǎo)率采用浸泡法測(cè)定[21]；可溶性蛋白采用考馬斯亮蘭法測(cè)定[22]；可溶性糖采用蒽酮法測(cè)定[22]；脯氨酸(Pro)質(zhì)量濃度用酸性茚三酮法測(cè)定[21]；MDA質(zhì)量摩爾濃度用硫代巴比妥酸法測(cè)定[21]。

1.3.2 抗氧化酶活性測(cè)定 SOD活性采用氮藍(lán)四唑(NBT)光還原法[21]；POD活性采用愈創(chuàng)木酚法測(cè)定[21]；CAT活性采用紫外分光光度法測(cè)定[21]。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用EXCEL 2010和SPSS 19.0對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，并用Duncan’s新復(fù)極差法對(duì)不同處理進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 硒、硫互作對(duì)青花菜幼苗滲透調(diào)節(jié)系統(tǒng)的影響

2.1.1 對(duì)青花菜幼苗MDA質(zhì)量摩爾濃度與相對(duì)電導(dǎo)率的影響 由圖1可知，在無硫(S0)或普通硫(S1)處理下，青花菜幼苗葉片的MDA質(zhì)量摩爾濃度隨硒濃度的增加呈先減小后增大的趨勢(shì)，并分別于S0Se10、S1Se10處理下出現(xiàn)無硫、普通硫不同硒濃度處理結(jié)果中的最小值，且隨生長時(shí)間的增加變化趨勢(shì)越來越明顯；高硒(Se20)處理下，隨硫濃度的增加青花菜MDA質(zhì)量摩爾濃度呈先減小后增大的趨勢(shì)，在S1Se20時(shí)出現(xiàn)高硒不同硫濃度處理結(jié)果中的最小值，隨生長時(shí)間的增加，無硫(S0Se20)和高硫(S5Se20和S10Se20)處理下MDA質(zhì)量摩爾濃度顯著高于普通硫處理(S1Se20)。圖1表明，與對(duì)照相比，S1Se10、S0Se10、S1Se0、S0Se5處理下MDA質(zhì)量摩爾濃度均較低，青花菜在S1Se10處理下，處理后第0天、第4天、第8天和第12天青花菜菜幼苗MDA質(zhì)量摩爾濃度分別是對(duì)照的99%、94%、94%、94%，除處理后0 d差異不顯著外，其他均顯著低于對(duì)照；S1Se20、S0Se20、S1Se100、S5Se20、S10Se20處理的MDA質(zhì)量摩爾濃度均較高，且從處理后的第8天開始，S0Se20、S1Se100、S5Se20、S10Se20處理的MDA質(zhì)量摩爾濃度顯著高于對(duì)照。

由圖2可知，在無硫或普通硫處理下，青花菜幼苗相對(duì)電導(dǎo)率隨硒濃度的增加呈先減小后增大的趨勢(shì)，并分別于S0Se10、S1Se10處理下出現(xiàn)無硫、普通硫不同硒濃度處理結(jié)果中的最小值；高硒(Se20)處理下，青花菜幼苗的相對(duì)電導(dǎo)率隨硫濃度的增加呈先減小后增大的趨勢(shì)，在S1Se20時(shí)出現(xiàn)高硒不同硫濃度處理結(jié)果中的最小值。與對(duì)照相比，S1Se10相對(duì)電導(dǎo)率較低且達(dá)顯著差異，S1Se100、S5Se20的相對(duì)電導(dǎo)率隨時(shí)間的延長顯著高于對(duì)照。由此表明，S1Se10處理能有效減少青花菜幼苗的MDA質(zhì)量摩爾濃度和相對(duì)電導(dǎo)率，延緩植株衰老。硒脅迫下，低S處理能緩解硒脅迫導(dǎo)致的MDA質(zhì)量摩爾濃度增多、相對(duì)電導(dǎo)率增大。

不同小寫字母表示處理間差異顯著(P<0.05)，下同 Different lowercase letters indicate the significant differences(P<0.05) under various treatments,The same below

圖1硒、硫互作對(duì)青花菜幼苗MDA質(zhì)量摩爾濃度的影響
Fig.1Effectofinteractionbetweenseleniumandsulfuronmalondialdehydemolalityofbroccoliseedlings

圖2 硒、硫互作對(duì)青花菜幼苗相對(duì)電導(dǎo)率的影響Fig.2 Effect of interaction between selenium and sulfur on relative conductivity of broccoli seedlings

2.1.2 對(duì)青花菜幼苗可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)和脯氨酸質(zhì)量濃度的影響 由表1可知，S1Se10組合的硒硫配施能顯著提高青花菜幼苗可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)。在無硫或普通硫(S1)處理下，青花菜幼苗的可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)隨硒濃度的增加呈先增大后減小趨勢(shì)，并分別于S0Se10、S1Se10處理下出現(xiàn)試驗(yàn)中無硫、普通硫不同硒濃度處理結(jié)果中的最大值，S0Se10處理可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于對(duì)照，且隨時(shí)間的增加差異越來越明顯。隨時(shí)間的增加，S1Se10處理可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)與S1Se0相比，差異越來越明顯，且均達(dá)顯著差異；S1Se100處理可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)始終顯著低于S1Se0處理可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)。高硒(Se20)水平下，青花菜幼苗可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)隨硫的增加呈先增大后減小趨勢(shì)，初期在處理濃度內(nèi)未達(dá)顯著差異，直至處理第12天，S1Se20處理可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于S5Se20和S10Se20。

由表2可知，單硒處理下，隨硒濃度的增加，青花菜幼苗可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)呈先增大后減小的拋物線，在硒10 μmol/L時(shí)，可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)最大，且S0Se10、S0Se5處理可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于S0Se0和S0Se20；S0Se20可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著低于S0Se0。普通硫水平下，可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)隨硒濃度的增加呈先增大后減小的趨勢(shì)，轉(zhuǎn)折點(diǎn)出現(xiàn)在硒為10 μmol/L時(shí)，且S1Se10的可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于S1Se0、S1Se20和S1Se100；S1Se20和S1Se100處理可溶性蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)均顯著低S1Se0。高硒(Se20)水平下，青花菜幼苗可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)隨硫濃度的增加呈先增加后減少的趨勢(shì)，S1Se20與S0Se20相比，其可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)有差異但未達(dá)顯著；S1Se20、S0Se20和S5Se20、S10Se20相比，其可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高且達(dá)到顯著差異。與對(duì)照S0Se0相比，S0Se5、S0Se10、S1Se0、S1Se10處理可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高且達(dá)到顯著差異；S0Se20、S1Se20、S1Se100、S5Se20、S10Se20處理可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)低于對(duì)照且達(dá)顯著差異。結(jié)果表明，Se、S處理隨著時(shí)間的增加，能影響青花菜幼苗體內(nèi)的可溶性糖與可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)，且較低濃度的Se、S配合能顯著增加其質(zhì)量分?jǐn)?shù)，高濃度則顯著降低其質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

表1 硒、硫互作對(duì)青花菜幼苗可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響Table 1 Effect of interaction between selenium and sulfur on soluble sugar mass fraction of broccoli seedlings %

注：不同小寫字母表示處理間差異顯著(P<0.05)，下同。

Note：Different lowercase letters indicate significant differences under different treatments atP<0.05.The same below.

表2 硒、硫互作對(duì)青花菜幼苗可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響Table 2 Effect of interaction between selenium and sulfur onsoluble protein mass fractionof broccoli seedlings mg/g

由圖3可知，在無硫或普通硫處理下，青花菜幼苗體內(nèi)脯氨酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)隨硒濃度的增加呈先增大后減少的趨勢(shì)，并分別于S0Se10、S1Se10處理下出現(xiàn)無硫、普通硫不同硒濃度處理結(jié)果中的最大值。說明補(bǔ)硒能促進(jìn)植物積累脯氨酸，從而提高抗逆性，但補(bǔ)硒超過一定濃度也會(huì)對(duì)植物積累脯氨酸造成一定的負(fù)面影響。高硒水平下，青花菜幼苗體內(nèi)脯氨酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)隨硫濃度的增加呈先增大后減小的趨勢(shì)，在S1Se20時(shí)出現(xiàn)高硒不同硫濃度處理結(jié)果中的最大值，說明高硒處理下，一定濃度的硫能促進(jìn)植物體內(nèi)脯氨酸積累，而硫濃度過高則抑制植物積累脯氨酸。與對(duì)照相比，S0Se5、S0Se10、S1Se0、S1Se10處理下，脯氨酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高且達(dá)顯著差異，S0Se20、S1Se100、S5Se20、S10Se20的脯氨酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)較低且達(dá)顯著差異。

2.2 硫、硒互作對(duì)青花菜幼苗抗氧化酶活性的影響

圖4、圖5、圖6顯示，在無硫或普通硫(S1)處理下，隨硒濃度的增加，CAT、POD、SOD 3種酶的活性逐漸增大，隨時(shí)間的增加酶活性逐漸增強(qiáng)，3種酶均在相同處理時(shí)間分別于S0Se10、S1Se10處理下出現(xiàn)試驗(yàn)中無硫、普通硫不同硒濃度處理結(jié)果中的最大值，顯著高于對(duì)照，且隨時(shí)間變化，CAT活性差異越來越明顯；高硒(Se20)水平下，CAT活性隨硫濃度的增加呈先增加后降低趨勢(shì)，在S1Se20時(shí)出現(xiàn)高硒不同硫濃度處理結(jié)果中的最大值，除第12天與對(duì)照無顯著差異，但S1Se20、S0Se20處理CAT活性卻顯著高于S5Se20、S10Se20；高硒水平下，SOD、POD活性的變化與CAT變化基本相似。與對(duì)照相比，S1Se10處理CAT活性最高且差異顯著，隨著時(shí)間的增加，S0Se10、S1Se0處理的CAT活性顯著高于對(duì)照，S0Se5處理CAT活性高于對(duì)照卻無顯著差異，S0Se20、S5Se20處理CAT活性低于對(duì)照差異顯著，S1Se20、S1Se100處理CAT活性低于對(duì)照于第8天達(dá)顯著差異。就POD活性而言，S0Se5、S1Se0、S1Se20與S0Se0相比有差異卻未達(dá)顯著，S1Se10、S0Se10顯著高于S0Se0，而S0Se20、S1Se100、S5Se20、S10Se20顯著低于S0Se0。就SOD活性而言，S0Se5、S1Se0、S1Se20與S0Se0相比有差異卻未達(dá)顯著，S1Se10、S0Se10顯著高于S0Se0，而S0Se20、S1Se100、S5Se20、S10Se20顯著低于S0Se0。結(jié)果表明，低濃度的硒硫配合處理能有效提高青花菜幼苗的抗氧化能力，高濃度處理則易發(fā)生脅迫作用。

圖3 硒、硫互作對(duì)青花菜幼苗脯氨酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響Fig.3 Effect of interaction between selenium and sulfur on proline mass fraction of broccoli seedlings

圖4 硒、硫互作對(duì)青花菜幼苗CAT活性的影響Fig.4 Effect of interaction between selenium and sulfur on CAT activity of broccoli seedlings

圖5 硒、硫互作對(duì)青花菜幼苗POD活性的影響Fig.5 Effect of interaction between selenium and sulfur on POD activity of broccoli seedlings

圖6 硒、硫互作對(duì)青花菜幼苗SOD活性的影響Fig.6 Effect of interaction between selenium and sulfur on SOD activity of broccoli seedlings

3 討 論

過氧化物MDA是膜脂過氧化指標(biāo)之一，可反映植物細(xì)胞膜脂過氧化程度和植物對(duì)逆境條件適應(yīng)的強(qiáng)弱；相對(duì)電導(dǎo)率的大小可用來衡量細(xì)胞膜透性的大小，相對(duì)電導(dǎo)率越高，細(xì)胞膜完整性遭到破壞的程度就越大，細(xì)胞膜的透性程度也就越大。李瑞平等[23]研究表明，施用5 mg/L硒能顯著降低汞脅迫下小麥的MDA質(zhì)量摩爾濃度，而10 mg/L處理則使MDA質(zhì)量摩爾濃度升高。Zembala等[24]研究表明，硒可以通過減輕小麥鎘脅迫下細(xì)胞質(zhì)膜受傷害的程度，即減輕鎘對(duì)細(xì)胞質(zhì)膜破壞性生理影響保護(hù)小麥免受鎘脅迫?？扇苄蕴鞘枪夂献饔玫闹苯赢a(chǎn)物，是植物體內(nèi)碳代謝的重要產(chǎn)物，其含量多少反映植物的生長水平。一定濃度范圍內(nèi)的硒促進(jìn)青花菜幼苗可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加，而硒濃度增大后，對(duì)青花菜幼苗造成脅迫，使得青花菜幼苗可溶性蛋白合成減少或者青花菜幼苗為了緩解脅迫以致蛋白質(zhì)被蛋白水解酶水解，從而降低青花菜幼苗可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)。適量硒硫比能促進(jìn)硒硫發(fā)揮其功效，進(jìn)而促進(jìn)植株生長，促進(jìn)蛋白質(zhì)合成；而硒硫比不合適導(dǎo)致硒硫相互抑制，對(duì)青花菜幼苗造成脅迫，進(jìn)而使得可溶性蛋白合成減少或者引起青花菜幼苗抵抗脅迫而水解蛋白質(zhì)。夏永香等[25]研究發(fā)現(xiàn)，葉面噴施亞硒酸鈉溶液可顯著提高葉片中可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)。在低硫水平下，適量硒濃度均能提高芥菜可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)[15]，增施硫硒肥也能顯著提高莖瘤芥的粗蛋白與可溶糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)[26]。李海云等[27]研究認(rèn)為，施硫能提高大白菜葉片可溶性蛋白及可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)，降低MDA質(zhì)量摩爾濃度。脯氨酸作為植物蛋白質(zhì)的組成成分，是一種植物滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，其含量在一定程度上可以反映植物的抗逆性，測(cè)定脯氨酸含量可以在一定范圍內(nèi)反映出硒硫配施對(duì)青花菜幼苗的促進(jìn)或者抑制作用以及是否合理。薛瑞玲等[28]研究指出，施少量的硒能誘導(dǎo)小白菜體內(nèi)脯氨酸的產(chǎn)生且質(zhì)量分?jǐn)?shù)與外源Se(IV)濃度呈極顯著正相關(guān)。本試驗(yàn)中，單硒與普通硫處理下，青花菜幼苗葉片的MDA質(zhì)量摩爾濃度、相對(duì)電導(dǎo)率隨硒濃度的增加呈先減小后增大的趨勢(shì)，并在硒濃度為10 μmol/L時(shí)出現(xiàn)最小值，且隨生長時(shí)間的增加變化趨勢(shì)越來越明顯，這說明高濃度硒對(duì)青花菜幼苗有脅迫作用，進(jìn)而加劇了青花菜幼苗葉片的膜脂過氧化水平；可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)伴隨硒濃度的增加呈先增大后減小的趨勢(shì)，并在硒濃度為10 μmol/L時(shí)出現(xiàn)最大值。據(jù)Ríos等[29]發(fā)現(xiàn)，植物中硒在代謝過程中形成的半胱氨酸(Cys)可能主要用于形成有機(jī)硫酸鹽化合物，具有降低硒的毒性作用。本試驗(yàn)中，20 μmol/L硒處理下，隨硫濃度的增加青花菜幼苗MDA質(zhì)量摩爾濃度、相對(duì)電導(dǎo)率呈先減小后增大，可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)和脯氨酸質(zhì)量濃度隨硫濃度的增加呈先增大后減小，這些與已有研究結(jié)果相似。

硒在高等植物中具有抗氧化功能，其組成谷胱甘肽過氧化物酶的必需成分，影響植物體內(nèi)抗氧化物質(zhì)的合成[15]。研究證明，亞硒酸鹽影響植物代謝途徑，其誘導(dǎo)植物產(chǎn)生氧化應(yīng)激作用，可能提高植物耐硒和積累[30]。Yu等[31]發(fā)現(xiàn)硒富集綠茶比普通綠茶具有較高的抗氧化活性。劉群龍等[6]認(rèn)為低濃度的硒可能通過提高SOD、GSH-Px等酶的活性參與葉片衰老進(jìn)程的調(diào)控。Lyi等[32]發(fā)現(xiàn)青花菜中Se-甲基硒代半胱氨酸(SeMSC)積累與青花菜硒甲基蛋氨酸合成酶(BoSMT)的基因表達(dá)與總硒位置密切相關(guān)，高濃度硫酸鹽抑制硒攝取。尚慶茂等[33]研究表明，外源硒可以提高辣椒葉片的SOD、POD和CAT等活性。硒與鎘還可能產(chǎn)生協(xié)同作用，提高谷胱甘肽-抗壞血酸代謝相關(guān)酶的活性，證明利用低濃度外源硒能提高種子對(duì)鎘的耐受性，增強(qiáng)抗氧化防御和丙酮醛解毒系統(tǒng)[34]。硫作為植物所需的中量元素及植物蛋白質(zhì)、氨基酸的組成成分，是酶化反應(yīng)活性中心的必需元素。經(jīng)水稻耐重金屬試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，硫通過激活抗氧化酶類活性迅速增加可消除脅迫產(chǎn)生的膜脂過氧化脅迫[35]。劉中良等[36]水培大蒜試驗(yàn)也表明，在一定濃度范圍內(nèi)，增加營養(yǎng)液中硫的濃度可提高大蒜葉片保護(hù)酶(SOD、POD、CAT)的活性，從而有效減緩葉片的衰老速度。本試驗(yàn)研究表明，低濃度的硒能提高青花菜幼苗葉片的SOD、POD和CAT活性，而高濃度硒則抑制SOD、POD和CAT等抗氧化酶的活性，3種酶活性最大值均出現(xiàn)在硒濃度為10 μmol/L時(shí)，隨時(shí)間的增加酶活性有較大幅度的提高；S1Se10組合的硒硫配施能顯著提高SOD、POD和CAT的活性，且顯著高于S0Se0的酶活性；S5Se20、S10Se20組合的硒硫配施處理下，SOD、POD和CAT活性顯著低于對(duì)照的酶活性。王越等[37]研究同樣表明，硫肥配合低濃度的硒能顯著提高蒜苗葉片的SOD、POD和CAT等抗氧化酶的活性，高濃度的硒配合硫肥處理的蒜苗酶活性較對(duì)照也能明顯提高，但促進(jìn)作用不及低硒水平，這與本研究結(jié)果相似。

綜上所述，硒硫配施影響青花菜幼苗滲透調(diào)節(jié)系統(tǒng)及抗氧化酶活性，低濃度的硒硫配合能提高青花菜幼苗的抗逆性與部分品質(zhì)，在高硒情況下，增施少量硫能一定程度上緩解硒脅迫，其中施用1 mmol/L S、10 μmol/L Se可作為生產(chǎn)中青花菜富硒栽培的參考。硒在植物體中的吸收轉(zhuǎn)化，及硒硫配施在青花菜中硒及含硒蛋白含量的影響及其復(fù)雜相互作用還有待進(jìn)一步研究。

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