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        生物酶協(xié)同催化體系及其對羊毛纖維的作用機(jī)制

        2018-01-29 06:30:16劉建勇吳勝爭趙笑康
        紡織學(xué)報 2018年1期
        關(guān)鍵詞:生物酶活化劑鱗片

        劉建勇, 吳勝爭, 趙笑康

        (天津工業(yè)大學(xué) 紡織學(xué)院, 天津 300387)

        現(xiàn)階段羊毛纖維防縮處理的方法仍是以氯化法為主,此類方法雖然可大幅改善羊毛的防縮性能,但是因其排放廢水中的可吸附有機(jī)鹵化物(AOX)對生態(tài)環(huán)境極其有害,歐美國家紛紛通過立法的方式對其排放加以限制[1]。在此背景下,羊毛纖維的無氯防縮處理技術(shù)備受關(guān)注。

        生物酶處理為目前研究較多的羊毛無氯處理方法,生物酶可將纖維鱗片層中的部分肽鍵水解,提高鱗片的溶解性,從而部分剝除鱗片層[2-3];但受鱗片惰性結(jié)構(gòu)的影響,生物酶處理法仍需要結(jié)合化學(xué)藥劑的預(yù)處理。周雯等[2]利用Bacillussubtitles制作角蛋白酶,并與蛋白酶一浴處理羊毛,浸泡處理1 h后羊毛鱗片有明顯的的剝離效果,但處理時間長,纖維損傷大;KAUR等[4]通過二步法在pH值為6左右的氯化鈉溶液中,用菠蘿蛋白酶對羊毛進(jìn)行防縮處理,可實(shí)現(xiàn)“機(jī)可洗”的目的,但作用時間較長,很難實(shí)現(xiàn)連續(xù)化處理[5-6]。

        本文研究的生物酶協(xié)同催化體系以蛋白酶(ECOSHINE enzyme 680)與活化劑(ECOSHINE activator 670)為主體構(gòu)成,通過多次浸軋協(xié)同催化體系處理液,可實(shí)現(xiàn)羊毛纖維的連續(xù)化無氯防縮處理。

        1 實(shí)驗(yàn)部分

        1.1 材料與儀器

        毛條,江蘇常熟市新光毛條處理有限公司提供;活化劑,ECOSHINE activator 670,天津綠源天美科技有限公司,工業(yè)級;生物酶,ECOSHINE enzyme 680,天津綠源天美科技有限公司,工業(yè)級;福林試劑,北京朗科百聯(lián)生物技術(shù)有限公司,分析純;無水碳酸鈉、三氯乙酸、四硼酸鈉,天津市盛鑫偉業(yè)化工有限公司,分析純。溴水,天津賽孚瑞科技有限公司,分析純;JFC、柔軟劑,江蘇常熟新光毛條處理有限公司,工業(yè)級。

        水浴鍋,天津市中環(huán)實(shí)驗(yàn)電爐有限公司;分析天平,北京朗科興業(yè)稱重設(shè)備有限公司;烘箱,上海和晟儀器有限公司;HITACHI L-880型氨基酸分析儀,日立高新技術(shù)有限公司;X射線光電子能譜儀,英國VG公司;紫外可見分光光度計(jì),美國PERKIN ELMER公司;分光光度計(jì),上海美譜達(dá)儀器有限公司;Hitachi S4800型掃描電子顯微鏡,日立公司。

        1.2 試樣處理

        預(yù)浸:將羊毛毛條在50 ℃的JFC(1 g/L)溶液中處理30 s。

        連續(xù)浸軋?zhí)幚砉に嚕航?0 s(活化劑,生物酶,在一定溫度、pH值和浴比條件下)→軋液→連續(xù)浸軋n次→水洗→酶滅活(80 ℃)→柔軟處理(1 g/L)→烘干。

        1.3 蛋白酶活力測試

        按照SB/T 10317—1999《蛋白酶活力測定法》制備參比樣及平行樣,測試其吸光度,求取平行樣的平均值,按下式計(jì)算蛋白酶活力:

        式中:A為平均吸光度值;N為樣品的稀釋倍數(shù)。

        1.4 活化劑反應(yīng)速率測試

        一定濃度范圍內(nèi),氧化還原電位與活化劑含量可通過線性回歸作出標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)電位變化間接反映活化劑變化,由下式計(jì)算反應(yīng)速率:

        式中:v為活化劑的反應(yīng)速率,g/min;t為反應(yīng)時間,min;ΔC為活化劑的質(zhì)量濃度變化量,g/L。

        1.5 減量率測試

        取一定質(zhì)量的羊毛纖維,在溫度為105 ℃條件下烘干至恒態(tài)質(zhì)量,記錄質(zhì)量值為m0;按照1.2處理工藝對其處理,同樣條件下烘至恒態(tài)質(zhì)量,記錄質(zhì)量值為m。按下式計(jì)算減量率:

        1.6 紫外分析

        取5 mL羊毛處理液,在轉(zhuǎn)速為14 000 r/min的條件下離心處理15 min,以未處理羊毛的空白處理液為參比,利用UV-2802S型紫外可見分光光度計(jì)在190~320 nm波段內(nèi)對其掃描,繪制吸光度波譜圖。

        1.7 單纖維斷裂強(qiáng)力和伸長率測試

        根據(jù)GB/T 4711—1984《羊毛單纖維斷裂強(qiáng)力和伸長試驗(yàn)方法》,將試樣在標(biāo)準(zhǔn)條件下平衡24 h,每個試樣抽取50根纖維,通過電子纖維強(qiáng)力儀測試其斷裂強(qiáng)力及斷裂伸長率,求取平均值。

        1.8 羊毛表面鱗片形態(tài)觀察

        將纖維制樣后鍍金,放在Hitachi S4800型掃描電子顯微鏡下進(jìn)行觀察,放大倍數(shù)為3 000。

        1.9 上染率測定

        每隔2 min取1次染液,利用分光光度計(jì)測試其吸光度值,并記錄。上染百分率Rd按下式計(jì)算:

        式中:A0為原始染液的吸光度值;A1為取樣染液的吸光度值。

        1.10 氨基酸測試

        采用氨基酸分析儀分別檢測未處理、單純活化劑處理及協(xié)同催化體系處理羊毛樣品的氨基酸種類與含量,并作對比。

        1.11 阿爾瓦登(Allworden)反應(yīng)

        每個試樣抽取幾根纖維放置在載玻片上,將飽和溴水滴在羊毛上,從蓋玻片的一端開始緩慢放置蓋玻片,避免氣泡出現(xiàn),放置20 min后,在光學(xué)顯微鏡下觀察并拍照,放大倍數(shù)為1 000。

        1.12 元素分析

        分別制取不同處理方式后的羊毛纖維樣品,利用X射線光電子能譜儀進(jìn)行測試,激發(fā)源為Al靶Kα射線(1486.6 eV),電壓為15 kV,功率為300 W。

        2 結(jié)果與討論

        2.1 生物酶協(xié)同催化體系的建立

        將由活化劑(ECOSHINE activator 670)和生物酶(ECOSHINE enzyme 680)作為主要有效成分的處理液定義為生物酶協(xié)同催化體系。該體系中ECOSHINE activator 670是一種弱堿性試劑,具有一定的還原性,在特定條件下可將羊毛鱗片層中的二硫鍵還原,隨著胱氨酸轉(zhuǎn)化成半胱氨酸,堅(jiān)硬的鱗片層變得相對疏松,有利于增加生物酶的反應(yīng)可及區(qū)域,提高其作用效率[6]。而伴隨著ECOSHINE enzyme 680作用的不斷深入,也促進(jìn)了活化劑的作用范圍和程度。二者協(xié)同作用大大增強(qiáng)了蛋白酶的水解催化效果。

        圖3 各因素對活化劑反應(yīng)速率的影響Fig.3 Influence of various factors on reaction rate of activator. (a)Concentration;(b)Time;(c)Bath ratio

        2.1.1pH值對蛋白酶活力的影響

        在pH值為7.0~10的范圍內(nèi),設(shè)置梯度為0.5配制緩沖溶液,利用不同pH值的緩沖溶液來配制ECOSHINE enzyme 680待測液,根據(jù)測試結(jié)果繪制pH值與酶相對活力曲線,結(jié)果如圖1所示。

        圖1 pH值對ECOSHINE enzyme 680活力的影響Fig.1 Influence of pH on activity of ECOSHINE enzyme 680

        由圖1可知,蛋白酶活力與pH值關(guān)系曲線呈單峰形式。當(dāng)pH值小于9.5時,隨著pH值的增大ECOSHINE enzyme 680的相對活力不斷提高;pH值超過9.5后,隨著pH值的增大,活力開始降低:因此,根據(jù)pH值與酶相對活力曲線可得出ECOSHINE enzyme 680的最適反應(yīng)pH值為9.5。

        2.1.2溫度對蛋白酶活力的影響

        將待測酶液調(diào)至最適pH值9.5,在反應(yīng)溫度為35~65 ℃之間,設(shè)置梯度為5 ℃,測試不同溫度條件下ECOSHINE enzyme 680的相對活力,根據(jù)測試結(jié)果繪制溫度與酶相對活力曲線,結(jié)果見圖2。

        圖2 溫度對ECOSHINE enzyme 680活力的影響Fig.2 Influence of temperature on activity of ECOSHINE enzyme 680

        由圖2可看出,反應(yīng)溫度對ECOSHINE enzyme 680活力的影響與pH值的影響相近,均呈現(xiàn)單峰形式。在60 ℃以下,隨著反應(yīng)溫度的升高,ECOSHINE enzyme 680的相對活力不斷增大;溫度超過60 ℃后,隨著反應(yīng)溫度的升高,活力迅速降低,因此,根據(jù)溫度與酶相對活力曲線圖可得出ECOSHINE enzyme 680的最適反應(yīng)溫度為60 ℃。

        2.1.3各因素對活化劑反應(yīng)速率的影響

        圖3示出協(xié)同催化體系中活化劑濃度、處理時間與反應(yīng)浴比對活化劑反應(yīng)速率的影響。

        圖3(a)示出活化劑質(zhì)量濃度對反應(yīng)速率的影響。可以看出,在0.5~5 g/L的質(zhì)量濃度范圍內(nèi),隨著ECOSHINE activator 670質(zhì)量濃度的升高,ECOSHINE activator 670與羊毛的反應(yīng)速率不斷增大,二者近似呈線性關(guān)系。這是由于濃度增大,處理液中ECOSHINE activator 670分子數(shù)量不斷增加,與反應(yīng)物碰撞的機(jī)會不斷增加。

        圖3(b)示出處理時間對反應(yīng)速率的影響。可以看出,在反應(yīng)時間為1~10 min時,隨著ECOSHINE activator 670與纖維作用時間的延長,ECOSHINE activator 670的消耗速率先急劇降低后變緩慢,說明活化劑與羊毛的反應(yīng)非??焖?,適用于連續(xù)化加工;但是由于短時間內(nèi)消耗較大,在連續(xù)化工藝設(shè)計(jì)中要注意隨著反應(yīng)時間的延長不斷補(bǔ)加試劑。

        圖3(c)示出反應(yīng)浴比對反應(yīng)速率的影響??梢钥闯?,隨著羊毛對處理液浴比的增大,ECOSHINE activator 670的反應(yīng)速率先快速下降,然后變得相對緩慢,說明浴比越大越容易使反應(yīng)速率趨于穩(wěn)定,越有助于處理前后的均勻性與穩(wěn)定性[5]。綜上所述,為了達(dá)到良好的處理效果,需要對各因素進(jìn)行必要的控制。

        2.1.4生物酶在協(xié)同催化體系中的有效性

        在2.1.1、2.1.2節(jié)中已測得了蛋白酶的最佳反應(yīng)溫度和pH值,但生物酶協(xié)同催化體系由生物酶與活化劑組成,活化劑為一種有機(jī)試劑,為了證實(shí)生物酶在協(xié)同催化體系中的有效性,需對一浴中的蛋白酶活力進(jìn)行研究,將單獨(dú)蛋白酶和協(xié)同催化體系處理液分別在室溫和50 ℃下放置1~4 h,按1.3節(jié)中的方法測試其蛋白酶活力,結(jié)果如表1所示。

        表1 不同條件下的蛋白酶活力Tab.1 Protease activity under different conditions

        由表1看出,在2種不同溫度(常溫與50 ℃)條件下,單獨(dú)ECOSHINE enzyme 680溶液與協(xié)同催化體系中酶的活力十分接近,變化在正常誤差范圍內(nèi)。結(jié)果表明,ECOSHINE activator 670對生物酶ECOSHINE enzyme 680無抑制作用,證實(shí)了生物酶在協(xié)同催化體系中的有效性[5]。

        2.2 協(xié)同催化體系的快速有效性

        2.2.1減量率

        減量率可以用來間接表征生物酶作用的有效性與快速性[7]。將單純活化劑(ECOSHINE activator 670)、單純蛋白酶(ECOSHINE enzyme 680)及協(xié)同催化體系處理羊毛后的減量率做對比,結(jié)果見表2。

        表2 不同方式處理后羊毛纖維的減量率

        由表2看出:隨著處理時間的延長,羊毛的減量率均不斷增加,但這3種處理方式的減量程度相差較大;相同處理?xiàng)l件下,相比于協(xié)同催化體系,經(jīng)單純活化劑(ECOSHINE activator 670)、單純蛋白酶(ECOSHINE enzyme 680)處理后,羊毛的減量率變化不大,約占協(xié)同催化體系減量率的40%,同時,短時間的快速減量也體現(xiàn)出協(xié)同催化體系的快速有效性。

        2.2.2處理液中蛋白含量

        蛋白酶對羊毛角蛋白水解時,可將羊毛中的部分大分子鏈分解為多肽及氨基酸。采用紫外可見分光光度計(jì)掃描分析,通過特定吸收峰(280 nm左右)的強(qiáng)度可間接表征處理液中蛋白質(zhì)的相對濃度[8],測試結(jié)果如圖4所示。

        圖4 不同處理方式下蛋白水解液的紫外掃描譜圖Fig.4 UV spectra of protease hydrolyte solution with different treatments

        從圖4看出,在280 nm左右處均出現(xiàn)吸收峰,且3種處理液的吸收峰大小為協(xié)同催化體系>>單純蛋白酶ECOSHINE enzyme 680>單純活化劑ECOSHINE activator 670;因此,協(xié)同催化體系中活化劑、蛋白酶的相互協(xié)同作用明顯促進(jìn)了羊毛纖維蛋白的水解速度。

        2.2.3力學(xué)性能

        經(jīng)協(xié)同催化體系處理后,羊毛纖維的鱗片層受到了破壞,因此,其力學(xué)性能會受到一定程度的影響。實(shí)驗(yàn)測得原毛的斷裂強(qiáng)力為7.12 cN,斷裂伸長為4.38 mm;生物酶協(xié)同催化體系處理羊毛纖維的斷裂強(qiáng)力為5.96 cN,斷裂伸長為3.59 mm??梢?,相較于原毛,經(jīng)過生物酶協(xié)同催化體系處理后纖維的斷裂強(qiáng)力下降了16.3%左右,斷裂伸長下降了18%左右。經(jīng)過生物酶協(xié)同催化體系處理后羊毛纖維的力學(xué)性能出現(xiàn)了一定程度的下降,但在可接受范圍內(nèi)。

        2.2.4羊毛纖維表面鱗片狀態(tài)的變化

        圖5示出經(jīng)不同工藝處理后羊毛纖維的掃描電鏡照片。可以看出:原毛的鱗片層保存完整,鱗片尖角清晰可見;經(jīng)單純ECOSHINE activator 670溶液處理后纖維的鱗片層并未發(fā)生顯著變化,只是尖角出現(xiàn)稍微翹起的現(xiàn)象,但鱗片的完整性未受到破壞;經(jīng)單純ECOSHINE enzyme 680處理后纖維表面的鱗片層與原毛完全一樣,且并未出現(xiàn)圖5(b)邊緣翹起的現(xiàn)象;經(jīng)過生物酶協(xié)同催化體系處理后,纖維鱗片層的完整性已被大幅度破壞,纖維表面只保留少量鱗片殘余,相較于氯化防縮處理,生物酶協(xié)同催化體系的剝鱗效果更顯著。

        圖5 不同工藝處理后羊毛纖維的掃描電鏡照片(×3 000)Fig.5 SEM images of wool fiber after different treatments (×3 000).(a) Raw wool;(b) Simple activator treatment;(c) Simple protease treatment;(d) Biological enzyme synergistic catalytic system treatment;(e) Chlorination treatment

        2.3 生物酶協(xié)同催化體系作用機(jī)制研究

        2.3.1染色性能分析

        在羊毛纖維染色過程中,纖維表面致密的鱗片層會阻礙染料分子向纖維內(nèi)部擴(kuò)散和滲透,因此,通過研究羊毛的染色性能變化情況,可以間接反映羊毛纖維表面鱗片層的狀態(tài)變化[9]。

        圖6示出不同處理方式的上染率曲線??梢钥闯觯合噍^于未經(jīng)處理的原毛,經(jīng)氯化處理及協(xié)同催化體系處理后,羊毛纖維的染色速率及上染百分率均有了較大提高,且二者上染率曲線十分接近;經(jīng)單純活化劑處理后,羊毛的染色性能也得到了一定程度的改善,但相較于生物酶協(xié)同催化體系還有一定差距;單純經(jīng)蛋白酶處理后羊毛的上染率基本未發(fā)生改善,而且出現(xiàn)了略微下降。

        圖6 不同處理方式的上染率曲線Fig.6 Dyeing rate curves of different treatments

        羊毛纖維的染色性能與纖維的鱗片層結(jié)構(gòu)有較大關(guān)系。單純蛋白酶在短時間內(nèi)很難與角質(zhì)化的鱗片層反應(yīng),因而染料擴(kuò)散的障礙依然存在;同時蛋白酶自身也占據(jù)了染料擴(kuò)散的通道:所以單純蛋白酶處理后纖維的染色性能略有下降。單純活化劑處理的羊毛纖維可將鱗片層中部分二硫鍵打開(見氨基酸分析中胱氨酸含量的變化),斷開了大分子間的相互交聯(lián),使致密的鱗片層變得相對疏松,增大了染料進(jìn)出的通道,但鱗片層依然存在(見圖5)。生物酶協(xié)同催化體系中蛋白酶與活化劑相互協(xié)同催化,導(dǎo)致纖維表面的鱗片被大量剝除,使染料擴(kuò)散的阻礙減小,同時纖維的吸濕膨脹性提高,使染料進(jìn)出的通道變大,所以纖維的染色性能出現(xiàn)大幅度提升。

        2.3.2氨基酸分析

        將原毛、活化劑處理及協(xié)同催化體系處理后的纖維分別進(jìn)行氨基酸分析,部分測試結(jié)果如表3所示。通過對比測試結(jié)果可初步推斷羊毛纖維的變化。

        圖7 不同處理方式后的Allworden反應(yīng)Fig.7 Allworden reaction of different treatments.(a) Raw wool;(b) Simple protease treatment;(c)Simple activator treatment;(d) Biological enzyme synergistic catalytic system treatment;(e) Chlorination treatment

        表3 氨基酸分析的部分結(jié)果Tab.3 Partial results of amino acid analysis %

        注:其他氨基酸含量變化不大,故未全部列出。

        由表3可知,無論是單純活化劑處理還是協(xié)同催化體系處理,羊毛的胱氨酸含量均出現(xiàn)明顯的下降(相比于原毛下降了65%左右),而其他氨基酸含量基本未發(fā)生變化,因此,活化劑ECOSHINE activator 670對胱氨酸的反應(yīng)有很強(qiáng)的選擇性,可將胱氨酸中鍵能很強(qiáng)的二硫鍵打開。

        2.3.3阿爾瓦登(Allworden)反應(yīng)分析

        Allworden反應(yīng)是判斷羊毛纖維鱗片層完整狀況的最好依據(jù)。測試結(jié)果如圖7所示。可以看出,原毛纖維表面整齊的排列著一層密而大的氣泡,出現(xiàn)了明顯的Allworden反應(yīng)。單純生物酶ECOSHINE enzyme 680處理后,相比于原毛表面的氣泡仍很多,未發(fā)生大的變化。上述現(xiàn)象說明,纖維的鱗片表面保存完整,其中的酰胺鍵、二硫鍵等仍保存完好。圖7(c)與圖7(a)、(b)相比,羊毛纖維表面的氣泡變得少而疏,這說明羊毛表面已部分受損,其中的二硫鍵部分被打開,但酰胺鍵未受破壞(這在SEM照片及氨基酸分析中得到佐證)。圖7(d)中纖維的表面基本看不到氣泡,但氯化處理后表面仍保留少量氣泡(如圖7(e)所示)。這種現(xiàn)象表明,協(xié)同催化體系可完全破壞纖維表面的二硫鍵及酰胺鍵,而且這種破壞程度可超過傳統(tǒng)的氯化處理方法。

        2.3.4羊毛纖維表面化學(xué)成分分析

        圖8 羊毛纖維的XPS分析譜圖Fig.8 Analysis spectra of wool fiber.(a) Raw wool;(b) Simple activator treatment; (c) Biological enzyme synergistic catalytic system treatment; (d) Chlorination treatment

        XPS 分析深度為 0.5~5.0 nm,可較準(zhǔn)確地反映羊毛鱗片表面化學(xué)結(jié)構(gòu)的微量變化。圖8示出不同工藝處理后的XPS譜圖。由圖可知,4個XPS分析譜圖的總體形狀相似,在相同的位置均出現(xiàn)了4個特征峰(C1s峰、O1s峰、N1s峰、S2p峰),上述現(xiàn)象說明,相比于原毛,經(jīng)3種不同方式處理后纖維表面的元素種類并未發(fā)生變化,都含有碳、氮、氧與硫等元素。

        不同方式處理后纖維表面 C1s、O1s、N1s、S2p的相對元素含量結(jié)果如表4所示。

        表4 不同處理方式后的表面元素含量Tab.4 Surface element content of different treatments

        從表4可看出,4組試樣中原毛表面的C元素含量最高,且C、N含量比也比其他3組試樣高出很多。這種現(xiàn)象表明原毛的表面覆蓋了一層類脂物。經(jīng)生物酶協(xié)同催化體系處理、氯化防縮處理后,相比于原毛C含量降低,N含量大幅增加,C、N含量比也明顯降低。這說明纖維表面的C含量很高的類脂層已被去除,纖維中N含量相對高的蛋白肽鏈或鱗片層蛋白暴露在纖維表面[11]。

        從4組試樣的O元素含量變化可知,經(jīng)生物酶協(xié)同催化體系處理后,O元素含量略有下降,氯化防縮處理增加了6.3%。產(chǎn)生上述現(xiàn)象的原因是生物酶協(xié)同催化體系處理是將二硫鍵還原打開轉(zhuǎn)變成巰基(—SH);而氯化防縮處理是將表面的部分基團(tuán)氧化,使其變成—SO3H。

        從4組試樣的S元素含量的變化可看出:相較于未經(jīng)處理的原毛,無論生物酶協(xié)同催化體系處理,還是氯化防縮處理,S元素含量都出現(xiàn)了大幅下降,分別下降37.7%和52.4%;但單純活化劑處理后S元素含量并未出現(xiàn)下降。這是由于防縮處理導(dǎo)致鱗片層被剝除,而胱氨酸占鱗片外層氨基酸含量的33%,且鱗片外層又是整個纖維中胱氨酸含量最高的部分;因此,隨著纖維鱗片層的去除,胱氨酸含量出現(xiàn)大幅下降。單純活化劑只是將二硫鍵打開,而沒有蛋白酶的參與,致密堅(jiān)硬的鱗片層只是變得相對疏松而并沒有剝離(這在染色性能及氨基酸分析中可得到驗(yàn)證)。

        為進(jìn)一步研究S元素含量的變化,圖9示出不同處理工藝中S2p的波譜圖。二硫鍵(—S—S—)的吸收峰對應(yīng)的結(jié)合能為163.91 eV,硫的氧化物(—SOx)的吸收峰對應(yīng)的結(jié)合能為168.50 eV[12]。

        圖9 XPS分析中S2p波譜圖Fig.9 Spectra of S2p in XPS.(a) Raw wool;(b) Biological enzyme synergistic catalytic system treatment;(c) Chlorination treatment

        由圖9可看出,在157~175 eV范圍內(nèi),3種試樣均出現(xiàn)了吸收峰。原毛的吸收峰為二硫鍵(對應(yīng)結(jié)合能為164 eV附近),氯化防縮處理后試樣對應(yīng)的吸收峰為硫的氧化物(對應(yīng)結(jié)合能為169 eV附近);但協(xié)同催化體系與上述2個試樣的吸收峰有很大差異,在此范圍內(nèi)出現(xiàn)了2個吸收峰。這說明圖9(b)中存在2種形式的硫元素:一部分可能是以被還原成的—SH形式存在;而另一部分仍以二硫鍵形式存在。

        3 結(jié) 論

        1)通過測定ECOSHINE enzyme 680蛋白酶活力,確定生物酶協(xié)同催化體系的最適溫度為60 ℃,最適pH值為9.5;以活化劑反應(yīng)速率為評價標(biāo)準(zhǔn),探究了活化劑濃度、溫度及浴比對生物酶協(xié)同催化體系中活化劑的影響;將單純生物酶的酶活與生物酶協(xié)同催化體系的酶活進(jìn)行對比,證實(shí)了協(xié)同催化體系的有效性。

        2)將單純蛋白酶、單純活化劑處理與生物酶協(xié)同催化體系處理后的減量率、處理液蛋白含量及表面鱗片形態(tài)作對比可看出,生物酶協(xié)同催化體系可快速將羊毛纖維的鱗片部分甚至全部去除。

        3)通過染色性能測試、氨基酸分析、Allworden反應(yīng)及X射線光電子能譜分析,初步證明生物酶協(xié)同催化體系中生物酶與活化劑在羊毛處理中的協(xié)同作用機(jī)制?;罨瘎┳饔糜诙蜴I使致密的鱗片變得相對疏松,生物酶作用于酰胺鍵使蛋白大分子發(fā)生水解;同時,活化劑與生物酶共浴時,互不干擾,相互協(xié)同促進(jìn),最終達(dá)到快速去除鱗片的作用。

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