姚聰 胡艷玲 周愛芬 張斌

我國新生兒耳聾的發(fā)病率約為1‰，5歲以下聽力障礙兒童的發(fā)病率達到2.7%[1]。傳統(tǒng)聽力篩查對遲發(fā)型、有藥物性耳聾潛在危險的患兒檢出率較低，使部分患兒可能錯過言語發(fā)育的關(guān)鍵時期而導(dǎo)致因聾致啞。隨著新生兒聽力篩查工作的開展，以及耳聾基因診斷技術(shù)的進步，遺傳因素致聽力損失的檢出率顯著提高[2]。第5屆國際新生兒聽力篩查會議特別指出要將耳聾病因?qū)W研究應(yīng)用于新生兒普遍聽力篩查工作，并提出了“超越新生兒聽力篩查”的理念。因此，早期發(fā)現(xiàn)并重視遺傳因素在致聾因素中所起的重要作用顯得尤為關(guān)鍵[3]。自2007起在王秋菊等[4]倡導(dǎo)下，我國開始試點開展新生兒聽力與耳聾基因聯(lián)合篩查，近年來對武漢市117 930例新生兒進行了聽力與耳聾基因聯(lián)合篩查，現(xiàn)分析報告如下。

1 資料與方法

1.1研究對象 以2014年6～12月以及2015年6～11月在武漢市內(nèi)92家助產(chǎn)機構(gòu)出生的117 930例新生兒為研究對象，其中男59 484例，女58 446例，天齡2～15天。經(jīng)知情同意后，由出生醫(yī)院采集新生兒信息并制作合格足跟血片，經(jīng)武漢市婦幼保健院核實相關(guān)信息后，由武漢市衛(wèi)計委公開招標某檢測公司進行統(tǒng)一耳聾基因檢測。

1.2聽力篩查及診斷 采用兩階段篩查模式，所有新生兒均在出生醫(yī)院應(yīng)用篩查型耳聲發(fā)射儀進行畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射(DPOAE)常規(guī)聽力篩查，初篩未通過者在生后42天可至其居住地所在區(qū)級婦幼保健院，采用DPOAE結(jié)合AABR進行聽力復(fù)篩，復(fù)篩未通過者在出生后3個月內(nèi)轉(zhuǎn)診至武漢市婦幼保健院進行免費聽力學(xué)評估和診斷。

1.3耳聾基因篩查 所有新生兒在出生后3天內(nèi)采集4個8 mm足底血斑樣本制作血片，送耳聾基因檢測實驗室統(tǒng)一檢測。重點分析中國人群常見的3個聾病基因的4個位點：GJB2 (235delC)、SLC26A4 (919-2A>G)和線粒體DNA 12SrRNA(1555A>G、1494C>T)。采用中生北控所提供的四項耳聾基因檢測試劑盒，應(yīng)用實時熒光定量PCR法進行檢測。所有篩查陽性病例以及隨機抽取的5%耳聾基因突變陰性病例均經(jīng)試劑盒進行復(fù)查質(zhì)控，同時對所有復(fù)診的基因突變陽性患者進行一代測序復(fù)核以驗證篩查準確性。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件，對不同耳聾基因突變類型患兒的聽力篩查結(jié)果進行χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1聽力篩查及診斷結(jié)果 117 930例新生兒中，5 663例未通過新生兒聽力初篩，未通過率4.80%(5 663/117 930)，4 877例進行了聽力復(fù)篩(86.12%，4 877/5 663)，復(fù)篩未通過358例，復(fù)篩未通過率7.33%(358/4 887)，344例患兒在3月齡時進行了聽力學(xué)診斷，最終確診206例新生兒聽力損失(1.75‰，206/117 930)，其中單耳聽力損失53例(極重度17例，重度9例，中度及以下27例)；雙耳聽力損失153例(極重度26例，重度8例，中度及以下119例)，6例經(jīng)CT檢查確診為雙側(cè)大前庭水管綜合征。

2.2耳聾基因篩查結(jié)果 117 930名新生兒中，共檢出耳聾基因突變者3 541例(3.00%)，各基因突變位點分布見表1。檢出復(fù)合雜合突變34例，其中，GJB2 235delC雜合突變合并SLC26A4 919-2A>G 雜合突變29例，GJB2 235delC雜合突變合并12SrRNA1494C>T突變3例，GJB2 235delC雜合突變合并12SrRNA1555A>G突變1例，SLC26A4 919-2A>G 雜合突變合并12SrRNA1555A>G突變1例。

表1 3 541例新生兒常見耳聾基因突變位點類型及例數(shù)分布(例,%)

2.3耳聾基因與聽力聯(lián)合篩查結(jié)果 117 930例新生兒中，114 389例通過基因篩查，其中109 036例(92.46%，10 936/117 930)通過了基因與聽力聯(lián)合篩查，5 353例(4.54%，5 353/117 930)基因篩查通過而聽力篩查未通過；在3 541例未通過基因篩查新生兒中，3 231例(2.74%，3 231/117 930)聽力篩查通過而基因篩查未通過，310例(0.26%，310/117 930)聽力篩查與基因篩查均未通過。耳聾基因突變患兒的聽力篩查未通過率(8.75%,310/3 541)顯著高于耳聾基因篩查通過新生兒(4.68%,5 353/114 389)(χ2=124.76，P<0.001)。GJB2 235delC突變新生兒的聽力篩查未通過率為10.99%(242/2 203)，SLC26A4 919-2A>G突變新生兒的聽力篩查未通過率為5.21%(59/1 132)，12SrRNA1555A>G突變新生兒聽力篩查未通過率為4.37%(9/26)，19例12SrRNA1494C>T純合突變新生兒全部通過了聽力篩查(表2)。

3 討論

已有的流行病學(xué)研究表明，60%耳聾致病因素與遺傳相關(guān)，其余40%為環(huán)境或未知因素[5]。針對中國人群的流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，GJB2、SLC26A4、線粒體DNA 12SrRNA基因突變是導(dǎo)致中國人耳聾最高發(fā)的基因，約占30%以上，且均存在高發(fā)熱點突變[6]。GJB2的235delC位點是中國耳聾人群最為常見的突變，在我國耳聾群體中，GJB2基因突變所占比例可達12.88%，而235delC為該基因最常見的突變形式，約占70%以上[7]。SLC26A4基因突變與大前庭水管綜合征密切相關(guān)，97.85%的大前庭水管綜合征患者存在該突變，中國人群中該基因突變可占耳聾病因的13.73%[8]。線粒體DNA 12SrRNA作為與氨基糖苷類藥物性聾密切相關(guān)的基因突變，最常見的突變形式為1555A>G突變[9]。本研究結(jié)果顯示3 541例(3.00%)新生兒存在耳聾基因突變，其中GJB2 235delC(1.86%)、SLC26A4 919-2A>G(0.95%)為本地區(qū)熱點突變，各位點突變率與既往研究報道相一致[10]。

表2 各耳聾基因不同突變類型患者聽力篩查通過與未通過例數(shù)分布(例)

新生兒聽力與耳聾基因聯(lián)合篩查可彌補傳統(tǒng)聽力篩查對遲發(fā)型、有藥物性聾潛在危險患兒不能早期發(fā)現(xiàn)的不足，并提供遺傳學(xué)信息以利于高?；純旱脑\治與隨訪，聯(lián)合篩查對聾兒及致聾基因突變攜帶者的檢出率顯著高于單純聽力篩查[11]。本研究顯示18例致病性耳聾基因純合突變患兒中，6例通過了聽力篩查，對此類患兒進行咨詢、指導(dǎo)與定期聽力監(jiān)測，可以有效避免聽力損失風(fēng)險的擴大。對于已出現(xiàn)聽力損失的純合突變患兒，在明確致病原因的情況下，將有利于臨床進一步診斷，為人工耳蝸植入等干預(yù)提供參考。同時本研究發(fā)現(xiàn)206例線粒體DNA 12SrRNA基因突變，這部分新生兒對氨基糖苷類藥物極其敏感，若不作基因篩查，此類患兒將面臨藥物性聾的風(fēng)險。另外，本研究中，部分基因突變攜帶者出現(xiàn)了聽力損失，說明當前基于有限基因位點的耳聾基因篩查有局限性，應(yīng)進一步擴大篩查的基因位點以明確診斷，部分攜帶致病性突變的患兒雖暫未出現(xiàn)聽力損失，仍需繼續(xù)監(jiān)測與追蹤隨訪。

先天性聾在新生兒期的發(fā)病率約為1‰～1.86‰，隨著優(yōu)生優(yōu)育以及二胎政策帶來的遺傳咨詢需求增加，在新生兒中開展耳聾基因篩查非常必要。截至2017年3月，已有103個非綜合癥型耳聾基因以及51個綜合征型耳聾基因被定位克隆(http://hereditaryhearingloss.org/lastupdate:March13th,2017)，因此，針對新生兒群體的大規(guī)模耳聾基因篩查的基因及位點的選取，需要綜合考慮衛(wèi)生經(jīng)濟學(xué)和操作的可行性。本研究發(fā)現(xiàn)家長對耳聾基因篩查有較大需求，特別是聽力篩查未通過或者有耳聾家族史的家庭，希望能夠發(fā)現(xiàn)病因、咨詢和規(guī)避后續(xù)風(fēng)險，指導(dǎo)治療及制定婚育計劃等；同時，也有部分家長不理解基因篩查結(jié)果，多集中于聽力篩查通過而存在基因突變的家庭，其認為篩查方法不準確，或認為遺傳無法改變，因而拒絕復(fù)查。因此，新生兒聽力篩查結(jié)果的解釋、咨詢和隨訪工作必須由耳鼻喉科、遺傳學(xué)及倫理學(xué)等多方面的專業(yè)團隊共同承擔，爭取家長最大程度的理解與配合。需強調(diào)的是，要充分利用耳聾基因篩查所提供的遺傳信息，也要正確對待基因篩查的局限性；基因與聽力聯(lián)合篩查的核心仍在于對篩查結(jié)果的正確解讀及聽力隨訪。

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