貢磊磊+原會(huì)俊+王嵐+殷小杰+許海玉+梁日欣+楊洪軍

[摘要] 該文采用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS），建立大鼠血漿中槲皮素（QCT）、山柰酚（KMF）、異鼠李素（ISR）、銀杏內(nèi)酯A（GA）、銀杏內(nèi)酯B（GB）、銀杏內(nèi)酯C（GC）、白果內(nèi)酯（BB）7種成分的分析方法。同時(shí)，探討單次灌胃給藥銀丹心腦通軟膠囊后上述7種成分在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征。方法學(xué)考察結(jié)果表明，7種化合物線性關(guān)系良好（r≥0.997 1），日內(nèi)、日間精密度和準(zhǔn)確度的RSD均小于11%，基質(zhì)效應(yīng)和回收率分別為93.28%～103.6%和72.43%～95.77%，樣品室溫放置6，12 h，-20 ℃反復(fù)凍存和-20 ℃長(zhǎng)期凍存后基本穩(wěn)定，其RSD均在11%以下，方法學(xué)考察符合生物樣品分析要求。大鼠灌胃銀丹心腦通軟膠囊后，上述7種成分的血漿藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)如下： Cmax （45.02±11.28），（49.90±13.82），（27.85±8.38），（76.31±18.19），（76.54±15.43），（35.35±10.28），（48.70±12.34） μg·L-1；tmax （0.33±0.11），（0.50±0.23），（0.33±0.14），（0.75±0.29），（1.0±0.35），（1.5±0.23），（0.75±0.50） h；該研究建立的UPLC-MS/MS方法適于對(duì)大鼠口服銀丹心腦通軟膠囊后的槲皮素、山柰酚、異鼠李素、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C和白果內(nèi)酯的藥代動(dòng)力學(xué)研究。

[關(guān)鍵詞] 銀丹心腦通軟膠囊； 活性成分； 血漿； 藥代動(dòng)力學(xué)

[Abstract] To estabish ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry （UPLC-MS/MS） method for simultaneous determination of quercetin（QCT）， isorhamnetin（ISR）， kaempferol（KMF）， ginkgolide A（GA）， ginkgolide B（GB）， ginkgolide C（GC） and bilobalide（BB） in rat plasma and investigate the pharmacokinetic process of seven compounds after oral administration of Yindan Xinnaotong Ruanjiaonang， The results indicated that all calibrations curves showed good linearity （r≥0.997 1）. RSD of intra-day and inter-day precisions were all within 11%. The matrix effects and extraction recovery were in the range of 93.28%-103.6% and 72.43%-95.77% respectively. The peak concentration （Cmax） of QCT， ISR， KMF， GA， GB， GC and BB were （45.02±11.28）， （49.90±13.82）， （27.85±8.38）， （76.31±18.19）， （76.54±15.43）， （35.35±10.28）， （48.70±12.34） μg·L-1， respectively. The peak time （tmax） of seven constituents were （0.33±0.11）， （0.50±0.23）， （0.33±0.14）， （0.75±0.29）， （1.0±0.35）， （1.5±0.23）， （0.75±0.50） h， respectively. UPLC-MS/MS method established in this research was proved to be so rapid and sensitive that it can be applied to the pharmacokinetic study of seven bioactive constituents in Yindan Xinnaotong Ruanjiaonang.

[Key words] Yindan Xinnaotong Ruanjiaonang； bioactive compounds； rat plasma； pharmacokinetics

銀丹心腦通軟膠囊（YXC）是貴州百靈企業(yè)集團(tuán)制藥股份有限公司在20世紀(jì)70年代根據(jù)苗族醫(yī)學(xué)“兩病兩綱”理論研制的復(fù)方制劑，由銀杏葉、丹參、絞股藍(lán)、燈盞細(xì)辛、大蒜、三七、山楂、天然冰片8味中藥組成，具有活血化瘀、行氣止痛、消食化滯等功效[1]，主要用于氣滯血瘀引起的胸痹，癥見胸悶、氣短、心悸等。目前，銀丹心腦通軟膠囊已被《中國(guó)藥典》2015年版收載，是目前臨床上廣為應(yīng)用的大品種民族藥物。為了闡明銀丹心腦通軟膠囊科學(xué)內(nèi)涵，課題組前期對(duì)銀丹心腦通軟膠囊化學(xué)成分、藥理作用及作用機(jī)制進(jìn)行了較為系統(tǒng)和深入的研究。采用UPLC-MS/MS在銀丹心腦通軟膠囊中鑒別出70個(gè)化合物，其中黃酮類和銀杏內(nèi)酯為其主要成分，且大部分黃酮類成分是以槲皮素、山柰酚和異鼠李素為苷元的苷類化合物[2]。藥效學(xué)研究表明，銀丹心腦通軟膠囊結(jié)合游泳運(yùn)動(dòng)后能夠改善動(dòng)脈粥樣硬化大鼠的血液流變學(xué)指標(biāo)，對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化有積極的預(yù)防作用，其作用機(jī)制可能與減少內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1，PECAM-1的分泌，抑制細(xì)胞凋亡有關(guān)[4-6]。此外，銀丹心腦通軟膠囊、主要成分及主要成分配伍對(duì)離體心臟缺血再灌注損傷有一定的保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能與抗氧化、減輕鈣超載、減少炎性因子釋放、調(diào)節(jié)Toll 樣受體相關(guān)[7-8]。endprint

中藥復(fù)方化學(xué)組成復(fù)雜，其所含的化學(xué)成分在生物活性、理化性質(zhì)和含量等方面存在明顯差異，因此藥效作用可能主要來自其所含的的部分關(guān)鍵成分[9]。前期研究發(fā)現(xiàn)銀丹心腦通軟膠囊中黃酮類成分槲皮素、山柰酚、異鼠李素、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C、白果內(nèi)酯含量較高，且這些成分具有抗炎、抗氧化、擴(kuò)張血管、抑制血小板聚集、抗動(dòng)脈粥樣硬化及對(duì)心肌缺血再灌注后的損傷具有保護(hù)作用[10-11]，這些成分的藥理作用及作用機(jī)制與課題組前期對(duì)銀丹心腦通軟膠囊研究相吻合，因此，認(rèn)為這些成分可能為銀丹心腦通軟膠囊中的關(guān)鍵成分。研究表明，藥效活性較強(qiáng)且體內(nèi)暴露顯著的成分可能為復(fù)方中的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，為了闡明銀丹心腦通軟膠囊藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本實(shí)驗(yàn)建立高效、便捷、靈敏的UPLC-MS/MS方法，用于測(cè)定大鼠口服銀丹心腦通軟膠囊后7種主要活性成分的血藥濃度，并用于銀丹心腦通軟膠囊在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究，為最終闡明銀丹心腦通軟膠囊藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、藥物安全性評(píng)價(jià)、臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

Agilent 6490 QQQ LC-MS分析系統(tǒng)，包括Agilent UPLC 1290液相色譜儀及Agilent 6490 QQQ三重四極桿質(zhì)譜檢測(cè)器（美國(guó)Agilent公司），Mass-hunter工作站（美國(guó)Agilent公司）；QL-901渦旋混合器（江蘇海門市麒麟醫(yī)用儀器有限公司） ；Backman J30i離心機(jī)（美國(guó)Backman公司）；1/10萬(wàn)分析天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）；NA-5L氮?dú)?空氣一體機(jī)（北京中興匯利科技有限公司）。

1.2 試劑與藥品

異鼠李素（批號(hào)110860-201109）、銀杏內(nèi)酯A（批號(hào)110862-201310）、銀杏內(nèi)酯B（批號(hào)110863-201209）、銀杏內(nèi)酯C（批號(hào)110864-201307）、白果內(nèi)酯（批號(hào)110865-201306）購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研究院；槲皮素（批號(hào)H-009-131012）、山柰酚（批號(hào)S-014-131118）購(gòu)于成都瑞芬思生物科技有限公司；黃芩素（IS，批號(hào)CHB-H-041，成都克洛瑪生物科技有限公司）。所有對(duì)照品純度均大于98%。甲醇為色譜級(jí)（北京化工廠），乙腈為HPLC級(jí)（美國(guó)Fisher公司），乙酸乙酯（北京化工廠），98%甲酸（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），β-葡萄糖醛酸酶、硫酸酯酶（美國(guó)Sigma-Aldrich公司）。銀丹心腦通軟膠囊（貴州百靈企業(yè)集團(tuán)制藥股份有限公司，批號(hào)20140426）。

1.3 動(dòng)物

SD大鼠，雄性，體質(zhì)量（250±20） g，中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)SCXK（軍）2012-0004。

2 方法

2.1 給藥與樣品采集

取健康SD大鼠6只，實(shí)驗(yàn)前12 h禁食不禁水。灌胃銀丹心腦通軟膠囊（2.4 g·kg-1），分別于給藥后5，10，15，20，30，45，60，90，120，150，180，240，360，480，720，1 440 min經(jīng)大鼠眼球后靜脈叢采血約0.5 mL，置肝素化試管中，4 000 r·min-1離心10 min，分取上清，血漿置于-20 ℃冰箱中保存待測(cè)。

2.2 血漿樣品處理方法

取出樣品，37 ℃水浴解凍后，精密吸取血漿樣品200 μL，加入0.2 mol·L-1醋酸鹽緩沖液（pH 4.6）（0.2 mol·L-1醋酸鈉和醋酸以4.69∶5.10混合）120 μL，加入內(nèi)標(biāo)溶液100 μL，再加入980 U·mL-1葡萄糖醛酸苷水解酶和硫酸酯酶[以pH 4.6 0.2 mol·L-1醋酸鹽緩沖液稀釋葡萄糖醛酸苷水解酶和硫酸酯酶而得]80 μL，37 ℃振蕩水浴下水解30 min，加入甲醇600 μL終止反應(yīng)。渦旋2 min后，13 000 r·min-1離心10 min，取上清液，50 ℃下氮?dú)獯蹈?，加入甲?00 μL溶解，15 000 r·min-1離心10 min，取上清液進(jìn)樣分析。

2.3 對(duì)照品溶液及內(nèi)標(biāo)溶液的配制

精密稱取槲皮素（QCT），山柰酚（KMF），異鼠李素（ISR），銀杏內(nèi)酯A（GA），銀杏內(nèi)酯B（GB），銀杏內(nèi)酯C（GC），白果內(nèi)酯（BB）和黃芩素（IS）對(duì)照品適量置于10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻后，按一定比例配置成混合對(duì)照品儲(chǔ)備液。取黃芩素1 mg，加甲醇稀釋至質(zhì)量濃度為100 μg·L-1內(nèi)標(biāo)液。

2.4 系列基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品和質(zhì)控樣品制備

混合對(duì)照品儲(chǔ)備液以75%甲醇溶液按一定比例稀釋，得QCT，ISR，KMF，GA，GB，GC，BB質(zhì)量濃度為1，5，10，20，50，100 μg·L-1的系列混合對(duì)照品溶液。取空白血漿加入系列混合對(duì)照品溶液得系列基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。取200 μL血漿，加入混合對(duì)照品工作溶液低、中、高3個(gè)濃度的樣品，按2.2項(xiàng)處理得到含對(duì)照品的質(zhì)控樣品，進(jìn)UPLC-MS/MS分析。

2.5 色譜和質(zhì)譜條件

色譜柱為Agilent SB-Aq C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），流動(dòng)相為0.1%甲酸水（A）-乙腈（B）；梯度洗脫0～1.0 min，75%～10% A；1.0～3.5 min，10%～10% A；3.5～5.0 min，75%～10% A。流速0.3 mL·min-1，柱溫30 ℃。

APCI ESI離子源，MRM模式，碎裂電壓均為350 V，離子源條件為干燥氣溫度290 ℃；干燥氣體流速15 L·min-1；霧化氣壓力50 psi（1 psi=6.895 kPa）；鞘氣溫度350 ℃，流速12 L·min-1。在0～1 min，通過切換閥將色譜柱流出的組分切至waste閥，以免污染質(zhì)量分析器。QCT，KMF，ISR，GA，GB，GC，BB和IS采用負(fù)離子掃描模式，定量分析離子對(duì)質(zhì)譜條件見表1。各化合物的產(chǎn)物離子質(zhì)譜圖見圖1。endprint

2.6 方法學(xué)考察

2.6.1 專屬性考察 取大鼠空白血漿、空白血漿加對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)、給藥后血漿樣品（加內(nèi)標(biāo)），其余按2.2項(xiàng)下方法操作，獲得各供試品色譜圖，考察是否存在內(nèi)源性干擾。

2.6.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線與最低定量限 取系列濃度的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品，按2.2項(xiàng)下處理，建立UPLC-MS/MS方法分析后，以樣品濃度（X）為橫坐標(biāo)，待測(cè)成分峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值（Y）為縱坐標(biāo)，以加權(quán)（權(quán)重1/X2）最小二乘法進(jìn)行線性回歸計(jì)算，進(jìn)行線性回歸，得到待測(cè)樣品標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍、相關(guān)系數(shù)和定量下限，實(shí)驗(yàn)以S/N≥10作為定量標(biāo)準(zhǔn)。

2.6.3 準(zhǔn)確度和精密度 按2.4項(xiàng)下方法配置低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度的質(zhì)控樣品，每個(gè)濃度取6份樣本，1 d內(nèi)分別測(cè)定6份樣品，分別取1份樣品，連續(xù)測(cè)定3 d，計(jì)算待測(cè)樣品峰面積和內(nèi)標(biāo)峰面積的比值，代入當(dāng)天的標(biāo)準(zhǔn)曲線求得實(shí)測(cè)濃度及實(shí)測(cè)濃度準(zhǔn)確度，計(jì)算日內(nèi)、日間精密度和準(zhǔn)確度，以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）表示。

2.6.4 提取回收率和基質(zhì)效應(yīng) 按2.4項(xiàng)下方法配置低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度的質(zhì)控樣品，每個(gè)濃度樣本平行6份，按2.5項(xiàng)下質(zhì)譜和色譜條件測(cè)定，得各成分峰面積A；取200 μL空白血漿按2.2項(xiàng) 下處理后，改用低、中、高3個(gè)濃度的混合對(duì)照品溶液復(fù)溶，每個(gè)濃度樣本平行6份，按2.5項(xiàng)下質(zhì)譜和色譜條件測(cè)定，得各成分峰面積B；取相同濃度的混合對(duì)照品溶液，按2.5項(xiàng)下質(zhì)譜和色譜條件測(cè)定，所得的色譜峰面積為C。提取回收率=A/B×100%，樣品的基質(zhì)效應(yīng)=B/C×100%。

2.6.5 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 按2.4項(xiàng)下方法配置低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度的質(zhì)控樣品，分別在在室溫放置6，12 h，考察樣品的短期穩(wěn)定性；-20 ℃下反復(fù)凍融3次，考察樣品凍融的穩(wěn)定性；-20 ℃下冷藏4周考察樣品的長(zhǎng)期穩(wěn)定性。計(jì)算結(jié)果以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）表示。經(jīng)測(cè)定在4種情況下得到的7種化合物的峰面積與零時(shí)間點(diǎn)的RSD均在15%以內(nèi)，提示實(shí)驗(yàn)條件下血漿樣品穩(wěn)定性良好。

2.6.6 大鼠口服銀丹心腦通軟膠囊后血漿中7種化合物藥代動(dòng)力學(xué)研究 大鼠灌胃給予銀丹心腦通軟膠囊后，采用UPLC-MS/MS測(cè)定血漿中7種化合物的濃度，將大鼠血漿藥物濃度作為縱坐標(biāo)（concentration）和時(shí)間作為橫坐標(biāo)（time）作圖，獲得大鼠口服銀丹心腦通軟膠囊后7種主要成分的平均血藥濃度-時(shí)間曲線。

在DAS 2.1.1軟件中輸入所測(cè)得的7種化合物在各時(shí)間點(diǎn)的血藥濃度，采用統(tǒng)計(jì)矩方法擬合可獲得藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。以藥物半衰期（t1/2）、達(dá)峰濃度（Cmax）、達(dá)峰時(shí)間（tmax）和藥-時(shí)曲線下面積（area under the time-concentration curve，AUC）等參數(shù)表征該藥物的藥動(dòng)學(xué)特征。

3 結(jié)果

3.1 專屬性考察

空白血漿、空白血漿加混合對(duì)照品以及給藥后所得血漿樣品色譜圖見圖2，QCT，ISR，KMF，GA，GB，GC，BB及內(nèi)標(biāo)物IS保留時(shí)間分別為2.433，2.582，2.557，2.497，2.494，2.323，2.454，2.611 min。經(jīng)考察7種待測(cè)化合物和內(nèi)標(biāo)化合物均不受內(nèi)源性物質(zhì)的干擾，方法特異性良好，適用于7種成分的含量測(cè)定。

3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍

以QCT，ISR，KMF，GA，GB，GC，BB濃度為橫坐標(biāo)，以7種成分與內(nèi)標(biāo)峰面積比值為縱坐標(biāo)，以加權(quán)最小二乘法進(jìn)行線性回歸運(yùn)算，得標(biāo)準(zhǔn)曲線、相關(guān)系 數(shù)、線性范圍及定量限見表2。結(jié)果表明，7種成分在1～100 μg·L-1線性關(guān)系良好，定量下限為1 μg·L-1（S/N≥10），表明該方法靈敏度較高，可用于7種成分的微量分析。血漿中7種化合物的標(biāo)準(zhǔn)曲線、相關(guān)系數(shù)、線性范圍及定量限見表2。

3.3 日內(nèi)、日間精密度和準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)

精密度和準(zhǔn)確度結(jié)果見表3，結(jié)果表明，7種化合物的日內(nèi)精密度RSD均小于9.9%，日間精密度RSD均小于11%，準(zhǔn)確度為92.27%～107.5%，結(jié)果均符合生物樣品分析方法指導(dǎo)原則的要求。

3.4 基質(zhì)效應(yīng)及回收率試驗(yàn)

基質(zhì)效應(yīng)及回收率結(jié)果見表4，結(jié)果表明，7種成分低、中、高3個(gè)濃度提取回收率在76.86%～95.77%，且RSD均小于11%，符合生物樣品分析要求?；|(zhì)效應(yīng)測(cè)定結(jié)果表明，7種成分低、中、高3個(gè)濃度機(jī)制效應(yīng)為94.25%～103.3%，且RSD均小于12%，基質(zhì)效應(yīng)及回收率實(shí)驗(yàn)表明該方法提取回收率較高，無內(nèi)源性成分干擾，符合生物樣品的分析方法的要求。

3.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，7種質(zhì)控樣品室溫放置6，12 h，-20 ℃反復(fù)凍存和-20 ℃長(zhǎng)期凍存后基本穩(wěn)定，其RSD均在11%以下，符合生物樣品測(cè)定要求，見表5。

3.6 藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)

大鼠灌胃給予銀丹心腦通軟膠囊后，采用建立的UPLC-MS/MS方法測(cè)定各時(shí)間點(diǎn)血藥濃度，7種化合物在大鼠體內(nèi)的平均藥-時(shí)曲線見圖3，血藥濃度數(shù)據(jù)采用DAS 2.1.1軟件進(jìn)行計(jì)算，以藥物半衰 期（t1/2）、達(dá)峰濃度（Cmax）、達(dá)峰時(shí)間（tmax）和藥-時(shí)曲線下面積（area under the time-concentration curve，AUC）等參數(shù)表征該藥物的藥動(dòng)學(xué)特征，見表6。結(jié)果顯示大鼠給藥后5 min在血中可以檢測(cè)到7種成分，從達(dá)峰時(shí)間來看，槲皮素、山柰酚和異鼠李素達(dá)峰時(shí)間較快，分別為0.33，0.5，0.33 h，其次為銀杏內(nèi)酯A（0.75 h）、白果內(nèi)酯（0.75 h）、銀杏內(nèi)酯B（1.0 h）、銀杏內(nèi)酯C（1.5 h）。從半衰期看，槲皮素、銀杏內(nèi)酯C、白果內(nèi)酯半衰期較短，分別為2.69，5.45，5.55 h，其次為銀杏內(nèi)酯A（7.52 h）、銀杏內(nèi)酯B（7.84 h）、異鼠李素（8.19 h）、山柰酚半衰期最常（10.48 h）。從體內(nèi)暴露程度量來看，銀杏內(nèi)酯B在大鼠血漿中AUC最大，說明銀杏內(nèi)酯B具有較好的生物利用度。從平均血藥濃度-時(shí)間曲線可以看出，3種黃酮類成分存在明顯的雙峰現(xiàn)象?？诜y丹心腦通軟膠囊后，黃酮類成分達(dá)峰時(shí)間快，在體內(nèi)滯留時(shí)間較長(zhǎng)，消除較慢；而銀杏內(nèi)酯類成分達(dá)峰時(shí)間較慢，半衰期較黃酮類時(shí)間短，體內(nèi)滯留時(shí)間短，消除快。endprint

4 討論

銀丹心腦通軟膠囊口服后，體內(nèi)的槲皮素、山柰酚和異鼠李素藥-時(shí)曲線存在明顯的雙峰，表明這3種成分在體內(nèi)可能通過肝腸循環(huán)進(jìn)行重吸收，這與文獻(xiàn)中報(bào)道的一致[12-13]，這將增加和維持銀丹心腦通軟膠囊3種成分在體內(nèi)較高的血藥濃度，是藥物作用的持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)。

黃酮類成分tmax均在0.5 h以內(nèi)，說明銀丹心腦通軟膠囊中黃酮類成分能被迅速地吸收，這可能與其較大的脂溶性，易透過細(xì)胞膜有關(guān)。銀杏內(nèi)酯類成分tmax均在0.75 h以上，在體內(nèi)吸收較慢。槲皮素和銀杏內(nèi)酯類成分MRT和t1/2均在10.58 h以內(nèi)，說明單次給藥后，在體內(nèi)消除較快，不易在體內(nèi)產(chǎn)生殘留和蓄積。而山柰酚和異鼠李素MRT均超過13.91 h，在體內(nèi)消除較慢，且兩種成分均出現(xiàn)雙峰，因此每日3次服用藥物有助于維持穩(wěn)態(tài)血藥濃度。血漿中7種成分依據(jù)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)Cmax的平均值排序?yàn)镚B>GA>KMF>BB>QCT>GC>ISR；AUC0–t的平均值排序?yàn)镚B>GA>QCT>KMF>BB>ISR>GC；t1/2的平均值排序?yàn)镵MF>ISR>GB>GA>BB>GC>QCT。由此可見，GB的Cmax和AUC0–t最大，而t1/2相對(duì)較小，說明GB被吸收入血的量最多，并能被很快消除。研究表明GB是銀杏內(nèi)酯類化合物中抑制血小板活化最強(qiáng)的一種，并且已經(jīng)被開發(fā)為銀杏內(nèi)酯B注射液在臨床用于治療心腦血管疾病[14-15]。

綜上，本文建立了一種簡(jiǎn)便、快速且靈敏度高的UPLC-MS/MS測(cè)定方法，樣品處理方法簡(jiǎn)單，能同時(shí)檢測(cè)出銀丹心腦通軟膠囊中7種成分的含量，適用于銀丹心腦通軟膠囊的藥代動(dòng)力學(xué)研究。通過藥代動(dòng)力學(xué)研究，了解銀丹心腦通軟膠囊中7種主要成分在體內(nèi)的暴露，有利于更精確地研究這些成分的藥效作用，并為闡明銀丹心腦通軟膠囊體內(nèi)藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和安全合理用藥提供了科學(xué)依據(jù)。

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[責(zé)任編輯 呂冬梅]endprint