張三軍，朱鳳霞，陳 奎

（駐馬店市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南 駐馬店 463000）

雞球蟲(chóng)病是由艾美耳科艾美耳屬的球蟲(chóng)寄生于雞的上皮細(xì)胞內(nèi)所引起的一種原蟲(chóng)病，該病在駐馬店地區(qū)普遍存在，但由于養(yǎng)殖戶(hù)的科學(xué)防治意識(shí)不強(qiáng)，目前是造成未成年家禽群體死亡與生長(zhǎng)性能及飼料利用率不佳的主要原因。養(yǎng)雞場(chǎng)對(duì)雞只感染球蟲(chóng)種類(lèi)不清楚，使用藥物有一定的盲目性。為了有效控制雞球蟲(chóng)病及科學(xué)使用藥物、選用球蟲(chóng)疫苗提供依據(jù)，筆者對(duì)駐馬店地區(qū)雞球蟲(chóng)進(jìn)行了蟲(chóng)種鑒定，具體情況如下：

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 試劑

飽和食鹽水、2.5%的重鉻酸鉀溶液、蒸餾水。1.1.2 器材

電熱恒溫培養(yǎng)箱、光學(xué)顯微鏡、多媒體顯微攝像儀、凱特離心機(jī)、燒杯。1.1.3 病料

采自駐馬店各地區(qū)雞場(chǎng)新鮮糞便和禽病獸醫(yī)門(mén)診球蟲(chóng)感染病例雞的新鮮糞便及腸內(nèi)容物。共計(jì)92個(gè)養(yǎng)雞場(chǎng)（戶(hù)），采樣合計(jì)：452份。

1.2 方法

臨床檢查通過(guò)臨床檢查及感染雞發(fā)病情況確定致病力。解剖感染雞觀察整個(gè)腸道的病理變化，了解球蟲(chóng)寄生部位，然后進(jìn)行卵囊鑒定。

1.2.1 卵囊的檢測(cè)

將采集的新鮮糞便或腸內(nèi)容物2g放于燒杯中，加30ml飽和食鹽水?dāng)噭?，過(guò)濾，靜置約30min，然后鏡檢濾液是否有雞球蟲(chóng)卵囊存在。

1.2.2 卵囊的計(jì)數(shù)

采用斯陶爾氏法計(jì)數(shù)，參見(jiàn)文獻(xiàn)，在顯微鏡下觀察計(jì)數(shù)球蟲(chóng)卵囊，得數(shù)乘以100即為1g新鮮糞便或腸內(nèi)容物卵囊數(shù)。

1.2.3 卵囊的純化與收集

取5～10g新鮮待檢樣品，加常水?dāng)噭?糞便篩過(guò)濾，取濾液分裝至離心管中，放于離心機(jī)中2500轉(zhuǎn)/min，離心10min。棄去上清液，向沉淀物中加飽和鹽水至離心管1/2處進(jìn)行離心漂?。?500轉(zhuǎn)/min，離心10min）。吸取上層液，加2倍蒸餾水混勻，離心。連續(xù)2～3次洗去飽和鹽水，收集卵囊。

1.2.4 卵囊的孵育增殖

將收集球蟲(chóng)卵囊加入2.5%的重鉻酸鉀溶液，在培養(yǎng)皿中混合，放于25℃溫箱中，培養(yǎng)2～3d，此間多媒體顯微攝像儀觀察卵囊發(fā)育進(jìn)程，每次不少于100個(gè)卵囊，每2h鏡檢1次，記錄孢子化時(shí)間，最后清洗除去重鉻酸鉀，適當(dāng)稀釋得到孢子化卵囊，備用。

1.2.5 卵囊的測(cè)量與記錄

將增殖得到的卵囊在顯微鏡下觀察，測(cè)量卵囊大小，求出最大值、最小值和平均值，并記錄卵囊形狀、顏色、內(nèi)部構(gòu)造、卵膜孔的寬度。

2 結(jié)果

根據(jù)卵囊的鑒定并結(jié)合上述感染雞球蟲(chóng)的寄生部位、致病性及病變等指標(biāo)與參考的國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)對(duì)比確定蟲(chóng)種。

2.1 駐馬店地區(qū)艾美耳球蟲(chóng)感染率和感染球蟲(chóng)種類(lèi)情況（見(jiàn)表1）

表1 駐馬店地區(qū)雞艾美爾球蟲(chóng)感染率和種類(lèi)

2.2 駐馬店部分地區(qū)不同日齡段雞球蟲(chóng)的感染情況（見(jiàn)表2）

表2 不同日齡段雞球蟲(chóng)的感染情況

3 討論與分析

3.1 球蟲(chóng)種類(lèi)

通過(guò)剖檢，試驗(yàn)雞肉眼可見(jiàn)的球蟲(chóng)引起腸道的變化結(jié)合卵囊大小和形狀指數(shù)、最短潛伏期、致病性及等指標(biāo)進(jìn)行雞球蟲(chóng)種類(lèi)的判斷。卵囊大小可以用來(lái)單純鑒定巨型艾美耳球蟲(chóng)。由于球蟲(chóng)寄生程度不一，從表1和表2結(jié)果來(lái)看各種球蟲(chóng)常?；旌细腥?，所以可能在同一病例鑒定到2種以上球蟲(chóng)。

3.2 主要致病種類(lèi)

目前，全世界公認(rèn)的雞艾美耳球蟲(chóng)有9種，在我國(guó)均存在。從實(shí)驗(yàn)的結(jié)果來(lái)看駐馬店地區(qū)球蟲(chóng)感染率36.5%，主要查出了6種艾美耳球蟲(chóng)，其中柔嫩艾美耳球蟲(chóng)感染率最高，達(dá)26.11%，其能引起盲腸球蟲(chóng)，是雛雞致死的主要原因，所以平時(shí)要注意對(duì)該蟲(chóng)種有效的藥物預(yù)防治療。由于該次實(shí)驗(yàn)也結(jié)合門(mén)診病例，調(diào)查結(jié)果應(yīng)較正常偏高。

3.3 影響因素

病料采集的季節(jié)和時(shí)間以及被采樣雞的預(yù)防和用藥情況對(duì)球蟲(chóng)的檢出有一定影響。這次調(diào)查駐馬店市地區(qū)雞球蟲(chóng)感染率較高，可能與調(diào)查時(shí)間有一定關(guān)系。該次調(diào)查時(shí)間為2017年3月～9月，這個(gè)季節(jié)恰逢駐馬店地區(qū)濕熱多雨季節(jié)，有利于球蟲(chóng)卵囊的生長(zhǎng)發(fā)育。

3.4 防治方案

從筆者這次對(duì)雞球蟲(chóng)蟲(chóng)種的鑒定和調(diào)查來(lái)看，柔嫩艾美耳球蟲(chóng)、堆型艾美耳球蟲(chóng)、巨型艾美耳球蟲(chóng)是地方優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種，15～42日齡為高發(fā)日齡。因此，可根據(jù)球蟲(chóng)種類(lèi)、高發(fā)日齡選用抗球蟲(chóng)藥，優(yōu)化用藥方案，對(duì)科學(xué)使用抗球蟲(chóng)藥有一定的指導(dǎo)作用。

雞球蟲(chóng)病在駐馬店地區(qū)普遍存在，且有的調(diào)查點(diǎn)感染強(qiáng)度很高，而養(yǎng)殖戶(hù)的科學(xué)防治意識(shí)不強(qiáng)，存在球蟲(chóng)耐藥性增強(qiáng)、防治經(jīng)費(fèi)投入較大、藥物殘留嚴(yán)重等問(wèn)題，使用球蟲(chóng)疫苗控制球蟲(chóng)病在很多方面有很多優(yōu)勢(shì)，也是未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)，這次駐馬店地區(qū)蟲(chóng)種的鑒定也為養(yǎng)雞場(chǎng)（戶(hù)）球蟲(chóng)疫苗的選擇提供依據(jù)。