（重慶市渝北區(qū)畜牧水產(chǎn)站，重慶 401120）

奶牛人工授精技術(shù)始于20世紀(jì)80年代，后經(jīng)多年推廣實踐，已相當(dāng)普及，但難配奶牛多，是許多配種人員的共識。為克服此問題，筆者從多年生產(chǎn)實踐中總結(jié)出六點技術(shù)措施供同行參考。

1 掌握好奶牛發(fā)情鑒定

普遍采用外部觀察法與直腸觸摸法相結(jié)合來進行發(fā)情鑒定。

1.1 外部觀察法可歸納為“六看”原則

一看外部表現(xiàn)。母牛發(fā)情初期興奮不安、敏感、哞叫，不接受其他牛爬胯；發(fā)情盛期接受爬胯，被追逐爬胯時尾巴高舉，站立不動，神情安靜；發(fā)情末期神情平靜，漸不接受它牛爬胯。

二看外陰變化。發(fā)情初期陰戶微微腫脹，發(fā)情盛期陰戶腫大豐滿，柔軟繃緊，發(fā)情后期陰戶腫脹消退縮小，顯出皺紋。

三看陰道黏膜顏色。陰道黏膜發(fā)情初期充血淡紅有光澤，發(fā)情盛期充血潮紅，發(fā)情末期潮紅減退，顏色變淡。

四看子宮頸口開張度與顏色。子宮頸口發(fā)情初期微紅，其口微開，發(fā)情盛期紅潤有光澤，頸口開張能容納一指，發(fā)情末期顏色變淡，頸口漸閉。

五看陰戶流出黏液的變化，發(fā)情初期陰戶流出的黏液有如雞蛋清清亮透明，牽縷性強，量不多。發(fā)情盛期黏液如玻璃棒狀，透明黏稠，牽縷性稍差，量稍多，易粘于尾根、臀端及后肢關(guān)節(jié)被毛上。發(fā)情末期黏液逐漸變白、濃厚黏稠、數(shù)量減少、牽縷性降低。

六看產(chǎn)奶量與食欲變化。發(fā)情初期產(chǎn)奶量與食欲漸減，發(fā)情盛期減少明顯，發(fā)情末期逐漸恢復(fù)。

1.2 直腸檢查法

是將打磨掉指甲，戴上超薄手套的手伸入掏空糞便的母牛直腸，透過腸壁觸摸子宮及卵巢上卵泡發(fā)育情況來判定母牛發(fā)情進程，確定輸精時間的方法。

母牛發(fā)情初期，直腸檢查子宮變軟，卵巢有一側(cè)增大，增大側(cè)卵巢上有卵泡生長，無彈性，維持8～10h進入發(fā)情中期。中期子宮松軟，卵泡體積增大，直徑可達1～1.5cm，明顯突出于卵巢表面，彈性強，有波動感，維持8～10h進入發(fā)情末期。末期子宮頸變松軟，卵泡壁變薄、繃緊、有彈性、有波動感、有一觸即破之感、好似熟透之葡萄，此期維持大約8～10h。

2 鑒別異常發(fā)情

正常發(fā)情的母牛多表現(xiàn)為：敏感不安，食欲下降，產(chǎn)奶量下降，性欲旺盛，追逐爬胯它?；蛟敢饨邮芩Ｅ揽?，外陰部顏色與腫脹變化明顯，流出大量透明黏液，子宮頸口開張，卵巢上有卵泡發(fā)育等變化。異常發(fā)情的奶牛，不系統(tǒng)規(guī)律地出現(xiàn)上述變化。如隱性發(fā)情奶牛雖有卵泡發(fā)育，但其他臨床表現(xiàn)不明顯或缺失；假發(fā)情奶牛雖食欲下降，產(chǎn)奶量下降，性欲旺盛、追逐爬胯它牛或愿接受它牛爬胯，卵巢卻無卵泡發(fā)育；持續(xù)發(fā)情奶牛如因卵泡囊腫引起，發(fā)情癥狀明顯，發(fā)情期較長，有卵泡發(fā)育卻不破裂排卵，卻繼續(xù)增生腫大；持續(xù)發(fā)情奶牛如因卵泡交替發(fā)育引起，導(dǎo)致母牛正常發(fā)情表現(xiàn)期延長。

3 選擇最適宜輸精時間

母牛的發(fā)情周期是21d，發(fā)情表現(xiàn)期為1～2d，持續(xù)時間約20～30h，排卵多發(fā)生在發(fā)情表現(xiàn)結(jié)束后6～10h，細管精子在母牛生殖道內(nèi)的存活時間多在10～20h，精子在輸卵管內(nèi)還需4～6h 獲能后才能與卵子結(jié)合，卵泡破裂排出卵子后6～12h內(nèi)有與精子結(jié)合的能力。因此，母牛最適宜輸精時間是發(fā)情末期或排卵前6h，多在發(fā)情開始后18～24h開始第一次輸精，此時臨床表現(xiàn)有母牛己不愿接受爬胯、陰門腫脹消退、顯出皺紋，陰道黏液淡白色，濃稠量少，用拇指與食指蘸取少量黏液，距離6～7cm，牽拉6～7次即斷，為適中，超過7次不斷為尚早，低于6次即斷為第一次輸精稍遲。此時直腸檢查可摸到卵泡突出于卵巢表面，壁薄繃緊、有彈性、有一觸即破之感。第二次輸精時間在第一次后輸精后10h左右為宜。

4 選擇優(yōu)質(zhì)細管冷凍精液

凍精質(zhì)量是影響受精率高低的重要因素之一，在進行人工輸精前，必須對精子進行活力檢查。一般在38℃的環(huán)境下，用顯微鏡觀察，合格的細管精液解凍后質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求是：活力0.35以上，精子密度800萬以上，畸形精子率低于18%，否則不能用于人工輸精。

5 掌握規(guī)范化輸精操作技術(shù)

配種是門技術(shù)活，配種員必需技術(shù)熟練、快速準(zhǔn)確完成操作，要求必須做好以下“四關(guān)”。

一是清洗關(guān)。固定好母牛，然后掏出直腸內(nèi)宿糞，將母牛外陰部及尾根近端附近用溫水沖洗干凈，再用0.1%新潔爾滅溶液消毒，最后用消毒毛巾擦拭干凈。

二是消毒關(guān)。配種所用輸精槍、鑷子、細管剪、紗布等必須經(jīng)過嚴(yán)格消毒后才能使用，配種員提前剪短磨光指甲，并使用一次性醫(yī)用超薄長手套。

三是精液解凍關(guān)。準(zhǔn)備好38℃～40℃的溫?zé)崴b入杯中，用預(yù)冷的鑷子從液氮罐提筒中利索地取出凍精細管，注意提筒不能提出罐口，將冷凍細管直接伸入溫水中擺動10s取出，消毒紗布拭去水珠，剪去封口端，斷端朝前裝入輸精槍，解凍后的精液在常溫下應(yīng)迅速使用，保存時間不能超過1h。

四是技術(shù)操作關(guān)。一只手伸入直腸內(nèi)把握好子宮頸口，另一只手握輸精槍，將輸精槍通過陰道緩緩插入子宮頸口到達子宮深部。動作要輕柔，遇到母牛努責(zé)時不能硬插，等努責(zé)過了再輕插。哪側(cè)卵巢排卵，就將精液慢慢推注入排卵側(cè)子宮角內(nèi)。徐徐抽出輸精槍，直腸中手留在直腸內(nèi)繼續(xù)按摩子宮頸口一會，促進子宮收縮，防止精液倒流，增強母牛興奮性，促進排卵。10h后重復(fù)輸液一次，可有效提高受胎率。

6 掌握好排卵側(cè)、排卵時間與輸精部位關(guān)系

透過直腸檢查卵泡技術(shù)過硬的輸精人員，能較準(zhǔn)確判定哪側(cè)卵巢發(fā)育排卵及推斷排卵時間，可將精液推送至排卵側(cè)子宮角內(nèi)。如距離排卵時間稍久，推送至子宮角淺部；如距排卵時間近，則推送精液至子宮角深部；只能從臨床表現(xiàn)判定輸精時間，不能判定哪一側(cè)卵巢發(fā)育排卵的輸精人員，將精液推送至子宮體深部即可。