郭咚

長沙血液中心檢驗科,湖南長沙 410000

FAME全自動酶免分析系統(tǒng)將ELISA方法自動化,提高了血液檢測質(zhì)量[1]。但是設(shè)備自身的運(yùn)轉(zhuǎn)必然會導(dǎo)致其性能、技術(shù)狀態(tài)的不斷變化,導(dǎo)致實驗中斷而影響實驗的連續(xù)性和準(zhǔn)確性,對檢測工作造成不利影響[2-3]。因此做好FAME全自動酶免分析系統(tǒng)的日常保養(yǎng)、維護(hù)工作,隨時掌握其工作狀態(tài),保證儀器的正常運(yùn)行[4]。該實驗室通過對FAME全自動酶免分析系統(tǒng)的故障進(jìn)行統(tǒng)計,對因故障造成的試驗中斷原因進(jìn)行分析,并有針對性對FAME全自動酶免分析系統(tǒng)加強(qiáng)維護(hù)工作,同時進(jìn)行維護(hù)后檢測效果的評價。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源

2012年10月—2016年12月長沙市無償獻(xiàn)血者血液篩查標(biāo)本590 848份。

1.2 試劑和儀器

HBsAg,抗-HCV,抗-HIV,抗-TP,各質(zhì)控物含量S/CO值在2～5范圍內(nèi),以上試劑及質(zhì)控物均在有效期內(nèi)使用。檢驗設(shè)備使用瑞士Hamilton FAME24/30全自動酶聯(lián)免疫檢測系統(tǒng)(6臺),瑞士Hamilton Star全自動加樣儀(2臺),瑞士Tecan EVO全自動加樣儀(2臺),瑞士Tecan Sunrise酶標(biāo)儀(2臺),美國BioTek洗板機(jī)(2臺),以上設(shè)備除洗板機(jī)外,驗校周期均為6個月。所有檢測設(shè)備均在有效校驗周期內(nèi)使用。

1.3 方法

使用ELISA檢測試劑盒對無償獻(xiàn)血者血篩標(biāo)本進(jìn)行同一項目的2次檢測。同項目兩次檢測均采用2種不同廠商的試劑進(jìn)行檢測,且由不同的操作者在不同的儀器中,進(jìn)行ELISA方法的HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗TP4個項目的檢測。整個檢測過程中,按照試劑使用說明書要求,在全自動設(shè)備上完成所有步驟。當(dāng)儀器故障導(dǎo)致試驗中斷時,在BioTek洗板機(jī)上洗板,手工完成試驗中斷的后續(xù)檢測。

1.4 統(tǒng)計方法

將數(shù)據(jù)導(dǎo)入SPSS 23.0 統(tǒng)計學(xué)軟件分析處理,計數(shù)資料用[n(%)]表示,采用χ2檢驗,P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

①2012年10月—2013年2月FAME全自動酶免分析系統(tǒng)試驗中斷次數(shù)289次。2013年2月與設(shè)備廠家簽訂保修協(xié)議后,2013年3月—2013年7月FAME全自動酶免分析系統(tǒng)吐板次數(shù)152次,實施相關(guān)維護(hù)措施前后,試驗中斷情況比較,見表1。兩組數(shù)據(jù)比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=54.984,P＜0.01)

表1 吐板次數(shù)及原因分析[n(%)]

②2013年2月與設(shè)備廠家簽訂保修協(xié)議后,以月為單位對同年3—7月FMAE吐板情況具體原因進(jìn)行統(tǒng)計,并分析評價保修協(xié)議后的維護(hù)效果,見表2。

表2 2013年3-7月FAME吐板原因分析

③以5 d為1個周期,將每個月都分為了6個周期,通過將2013年3月—2013年7月的同一周期每個月吐板次數(shù)的累計進(jìn)行統(tǒng)計,見表3。

表3 2013年3-7月吐板次數(shù)周期統(tǒng)計

④將以2個月為周期,對2014—2016年吐板次數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計,7—10月吐板次數(shù)明顯較其它時間段高,見表4。

表4 2014年～2016年吐板次數(shù)周期統(tǒng)計

⑤2013年實施相關(guān)維護(hù)措施后,HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP等無償獻(xiàn)血血液初篩酶免項目的報廢率與2012年報廢率的比較,見表5。

圖5 2012～2016年酶免項目報廢率比較

3 討論

該實驗室在與廠家簽訂維修協(xié)議前,FAME的維護(hù)只能做到儀器自帶的“周維護(hù)”“月維護(hù)”程度,儀器內(nèi)部管路更是需要在半年度設(shè)備校驗時才能進(jìn)行的維護(hù),因此簽訂維護(hù)協(xié)議前對FAME的維護(hù)并沒有完全做到位。簽訂維修協(xié)議后,實驗室加大了FAME維護(hù)力度,采取系列措施后取得一定效果。

2013年3月開始廠家定期對儀器進(jìn)行主動性維護(hù),實驗室同時加強(qiáng)了日常維護(hù)工作的管理:①單獨(dú)編寫儀器維護(hù)操作規(guī)程。②對全員進(jìn)行SOP再培訓(xùn),從個人意識加強(qiáng)對儀器維護(hù)的重要性,減少人為因素及實驗準(zhǔn)備不充分而造成不必要的吐板[5]。③每周安排專人對洗液桶、試劑盒及注射器進(jìn)行維護(hù)液浸泡、清洗后,用蒸餾水充分沖洗后晾干后備用,尤其是避免了洗液桶放置時間過長后桶內(nèi)出現(xiàn)的細(xì)小絮狀物引起注射針的堵塞現(xiàn)象。④每次實驗結(jié)束后,清空洗液桶洗滌液,并使用去蛋白清洗液沖洗FAME管路,清除管路內(nèi)壁的血清蛋白等雜質(zhì),保障管路的暢通[6]。采取上述一系列的維護(hù)措施后,實驗室2013年3—7月FAME因各種原因造成實驗中斷吐板現(xiàn)象與采取維護(hù)措施前吐板現(xiàn)象進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=54.984,P=0.000,P＜0.01)。通過采取維護(hù)措施,尤其是洗板頭堵孔、實驗前準(zhǔn)備不充分造成的ELISA實驗中斷的現(xiàn)象有較為明顯的改善。

在實施措施后,雖然吐板頻率降低了很多,但是通過追蹤統(tǒng)計,發(fā)現(xiàn)3—4月因非洗板頭堵塞造成洗板吐板的現(xiàn)象仍然沒有改觀。經(jīng)過分析,非洗板頭堵塞造成洗板吐板的原因為“酶標(biāo)板尺寸設(shè)置不當(dāng)造成的假堵針報警現(xiàn)象”“酶標(biāo)板高低不一致造成的假堵針報警現(xiàn)象”“設(shè)定洗板參數(shù)時設(shè)置不當(dāng)導(dǎo)致的假堵針報警現(xiàn)象”“洗板單元W13/14電路板板造成的假堵針報警現(xiàn)象”4大類。實驗室采取一下措施來解決這一問題:①通過重新測量每種試劑的酶標(biāo)板尺寸,多次實驗摸索找到每種試劑最佳洗板參數(shù);②原先配平的酶標(biāo)板經(jīng)加樣等一系列處理后,酶標(biāo)板出現(xiàn)高低不平,在進(jìn)板前及時處理;③將原實驗室集中周維護(hù)改為每天對不同儀器進(jìn)行周維護(hù);④日維護(hù)增加對W13板清潔;⑤為防止W14板接口腐蝕,洗板頭必須按FAME清洗洗板頭程序清洗等措施及維護(hù)方案。通過采取維護(hù)措施,實驗室5—7月因非洗板頭堵塞造成洗板吐板現(xiàn)象次數(shù)得到明顯下降。

實驗室加強(qiáng)對試劑盒及注射器的維護(hù)后,尤其是浸泡對注射器造成了較大的損耗,導(dǎo)致2013年5月—6月因注射器損壞造成的吐板現(xiàn)象明顯增多。實驗室采取以下措施來解決這一問題:①將注射器維護(hù)步驟中,“浸泡注射器”更改為“慢速抽吸蒸餾水”,避免過快反復(fù)抽吸及浸泡注射器對注射器的損耗;②將吸液體的注射器垂直掛起以檢測注射器的氣密性,氣密性降低的注射器立即更換,避免因為氣密性降低造成試劑分配不成功的吐板現(xiàn)象。通過采取維護(hù)措施,實驗室7月因非洗板頭堵塞造成洗板吐板現(xiàn)象次數(shù)得到有效控制。

實驗室以1個月的每5天為1個周期,分為6個周期,對2013年3—7月的每個月同周期FAME吐板次數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計。經(jīng)過分析,在每月底澳斯邦工程師對儀器進(jìn)行定期維護(hù)保養(yǎng)后,前15 d儀器運(yùn)行狀況要明顯好于后15 d。9—10月份是實驗室全年標(biāo)本量最多的一個時段,大標(biāo)本量的檢測壓力有可能造成儀器運(yùn)行的不穩(wěn)定。說明儀器故障造成吐板現(xiàn)象與檢測標(biāo)本量為正比關(guān)系及在月維護(hù)前期儀器故障明顯增加等現(xiàn)象表明此階段FAME運(yùn)行不穩(wěn)定性。對此,實驗室通過合理的分配每臺FAME的檢測項目外,月末加強(qiáng)對FAME的維護(hù)監(jiān)控,在采血集中期將主動性維護(hù)周期縮短為24 d。同時發(fā)現(xiàn)7月份長沙持續(xù)高溫,也增加了FAME運(yùn)行的不穩(wěn)定性。另外,2016年新實驗室的投入使用,使實驗室環(huán)境得到的改善,吐板次數(shù)較前幾年有明顯的下降。因此要保證FAME高效、準(zhǔn)確的運(yùn)行,良好的使用環(huán)境也非常重要。

實驗室通過對FAME吐板現(xiàn)象的統(tǒng)計分析,對實驗室日常維護(hù)保養(yǎng)效果進(jìn)行評估[7]。并對發(fā)現(xiàn)的問題采取有針對性的維護(hù)措施。提高FAME 檢測的穩(wěn)定性、準(zhǔn)確性[8],在確保血液質(zhì)量的前提,2013年以后血液檢測ELISA項目報廢率逐年,降低血液不合格率。

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