吳淼，鐘江華，彭振宇，黃康，陸士娟

[海南省?？谑腥嗣襻t(yī)院（中南大學(xué)湘雅醫(yī)院附屬?？卺t(yī)院） 心內(nèi)科，海南 ?？?570208]

原發(fā)性高血壓患者血清Fractalkine水平與血管內(nèi)皮功能損傷的相關(guān)性研究*

吳淼，鐘江華，彭振宇，黃康，陸士娟

[海南省海口市人民醫(yī)院（中南大學(xué)湘雅醫(yī)院附屬?？卺t(yī)院） 心內(nèi)科，海南 海口 570208]

目的研究原發(fā)性高血壓患者Fractalkine（FKN）與血管內(nèi)皮功能的相關(guān)性。方法 納入50例原發(fā)性高血壓患者作為高血壓組，50例健康體檢者為對(duì)照組。使用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定血清FKN水平，使用高效液相色譜法測(cè)定血漿非對(duì)稱性二甲基精氨酸（ADMA）水平，硝酸還原酶法測(cè)定血清一氧化氮NO水平。使用高分辨超聲檢測(cè)肱動(dòng)脈血流介導(dǎo)的內(nèi)皮依賴性血管舒張功能（FMD）及非內(nèi)皮依賴性舒張功能（NMD）。38例原發(fā)性高血壓患者（剔除12例）接受3個(gè)月的規(guī)范降壓治療。比較治療前后收縮壓、FKN、ADMA、NO、FMD的變化水平，進(jìn)一步分析FKN治療前后變化量絕對(duì)值與收縮壓、ADMA、NO、FMD變化量絕對(duì)值的相關(guān)性。結(jié)果與對(duì)照組比較，高血壓組的血清FKN、血漿ADMA水平升高（P＜0.05），F(xiàn)MD、血清NO水平降低（P＜0.05）。FKN與ADMA、收縮壓、舒張壓呈正相關(guān)（r=0.785、0.730和0.785，均P=0.000），與NO、FMD呈負(fù)相關(guān)（r=-0.800和-0.783，均P=0.000）。經(jīng)過(guò)3個(gè)月的降壓治療，發(fā)現(xiàn)收縮壓、舒張壓、FKN、ADMA比治療前降低，NO、FMD比治療前升高。其中FKN治療變化絕對(duì)值（△FKN）與△收縮壓、△舒張壓、△FMD、△ADMA、△NO呈正相關(guān)（r=0.720、0.405、0.707、0.687和0.726，P=0.000、0.012、0.001、0.032和0.001）。結(jié)論原發(fā)性高血壓患者血清FKN水平的升高與血管內(nèi)皮功能的損傷可能有關(guān)。降壓治療可改善原發(fā)性高血壓患者的內(nèi)皮功能，降低血清中的FKN水平。

原發(fā)性高血壓；Fractalkine；非對(duì)稱性二甲基精氨酸；內(nèi)皮依賴性血管舒張功能；一氧化氮

原發(fā)性高血壓患者血管壁應(yīng)力和剪切力升高，促使血管活性物質(zhì)釋放增多，早期可發(fā)生血管內(nèi)皮功能紊亂[1]。目前早期評(píng)估內(nèi)皮功能成為研究的熱點(diǎn)。內(nèi)皮功能檢測(cè)方法主要包括兩種方法，檢測(cè)血管內(nèi)皮細(xì)胞合成的血管活性物質(zhì)和通過(guò)超聲測(cè)量血流介導(dǎo)的血管舒張功能。后者是評(píng)價(jià)血管內(nèi)皮功能的重要無(wú)創(chuàng)方法[2]。Fractalkine（FKN）是1997年發(fā)現(xiàn)的趨化因子CXC3亞類中的唯一成員。近期研究提示，高血壓可引起FKN表達(dá)增多，同時(shí)FKN表達(dá)增多可導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞紊亂而加重高血壓，形成惡性循環(huán)[3-4]。目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于FKN與高血壓內(nèi)皮功能的研究?jī)H存在于體外實(shí)驗(yàn)以及動(dòng)物模型中，尚無(wú)評(píng)價(jià)原發(fā)性高血壓患者血清FKN水平與血管內(nèi)皮功能的研究。本文擬研究原發(fā)性高血壓患者FKN與血管內(nèi)皮功能的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

符合2010年中國(guó)高血壓防治指南中關(guān)于原發(fā)性高血壓的診斷標(biāo)準(zhǔn)，選擇2013年1～12月海南省?？谑腥嗣襻t(yī)院心內(nèi)科住院或門(mén)診的初診高血壓或自行停用降壓藥物≥2周的高血壓患者，共50例。排除繼發(fā)性高血壓、心力衰竭、糖尿病、腦梗死、腫瘤、嚴(yán)重肝腎功能不全者、近1個(gè)月接受過(guò)他汀類藥物及不配合試驗(yàn)者。選取同期體檢中心健康對(duì)照者50例。

1.2 方法

1.2.1 一般資料 姓名、性別、年齡、身高、體重、體重指數(shù)（BMI）、收縮壓、舒張壓、家族史、既往史、吸煙史、飲酒史、服藥史、月經(jīng)史、血常規(guī)、肝腎功能、空腹血糖、餐后2 h血糖、血脂、心電圖、胸片、心臟彩超、聯(lián)系電話、家庭住址等。

1.2.2 降壓治療 50例高血壓患者中，共剔除12例患者，其中7例血壓輕度升高的患者使用生活方式改變，3例不配合，2例失訪。38例患者經(jīng)3個(gè)月的規(guī)范降壓治療。降壓方案使用鈣離子拮抗劑，ACEI/ARB或利尿劑，單獨(dú)使用或者聯(lián)合使用。

1.2.3 肱動(dòng)脈內(nèi)皮依賴性血管舒張功能（FMD）及非內(nèi)皮依賴性血管舒張功能（NMD）測(cè)定 肱動(dòng)脈血管內(nèi)皮功能測(cè)定采用SONOS-5500型多普勒超聲診斷儀，周圍血管高頻探頭（4～10 MHz），同步記錄心電圖。用二維超聲成像檢測(cè)肱動(dòng)脈內(nèi)徑，探查深度4cm，在心室舒張末期（即同步心電圖R波頂點(diǎn)時(shí)）檢測(cè)肱動(dòng)脈內(nèi)徑血管前后內(nèi)膜間的寬度，每次測(cè)量取同一部位，超聲探頭始終處于固定位置，分別測(cè)量3個(gè)心動(dòng)周期，取其平均值作為基礎(chǔ)值（D0）。然后將血壓計(jì)袖帶縛于患者右前臂肘關(guān)節(jié)下2～3 cm，給袖帶充氣至250 mmHg后，維持4 min后迅速放氣，60～90 s時(shí)測(cè)定肱動(dòng)脈內(nèi)徑（D1）。休息15 min，待血管內(nèi)徑恢復(fù)試驗(yàn)前水平時(shí)，囑患者舌下含服硝酸甘油0.5 mg，3～4 min后再次記錄肱動(dòng)脈內(nèi)徑（D2）。反應(yīng)性充血試驗(yàn)誘發(fā)的FMD=（D1-D0）/D0×100%，硝酸甘油介導(dǎo)的NMD=（D2-D0）/D0×100%。以上操作均由固定人員實(shí)施。

1.2.4 FKN、非對(duì)稱性二甲基精氨酸（asymmetric dimethylarginine ADMA）、一氧化氮NO測(cè)定 采集清晨空腹肘靜脈血。血清FKN測(cè)定使用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定，采用高效液相色譜法分析法測(cè)定血漿ADMA濃度。血清NO濃度測(cè)定采用硝酸還原酶法測(cè)定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)，雙變量相關(guān)采用Pearson相關(guān)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者基線資料比較

高血壓組與對(duì)照組的性別、年齡、空腹血糖、餐后2 h血糖、體重指數(shù)（body mass index，BMI）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（Triglycerides，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、肌酐（serum creatinine，Scr）比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。兩組收縮壓和舒張壓比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）,高血壓組高于對(duì)照組。見(jiàn)表1。

2.2 觀察前兩組血清FKN、ADMA、NO和內(nèi)皮功能水平比較

兩組血清FKN、血漿ADMA水平比較，高血壓組高于對(duì)照組（P＜0.05）；兩組血清NO水平比較，高血壓組低于對(duì)照組（P＜0.05）；兩組FMD水平比較，高血壓組低于對(duì)照組（P＜0.05）。兩組NMD水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 血清FKN與年齡、收縮壓、舒張壓、ADMA、FMD、NO的相關(guān)性

血清FKN與年齡、收縮壓、舒張壓、ADMA呈 正 相 關(guān)（rs=0.335、0.730、0.785和 0.785， 均P=0.000），與FMD、NO呈負(fù)相關(guān)（r=-0.783和 -0.800，均P=0.000）。

2.4 高血壓組降壓治療前后血壓及內(nèi)皮功能的變化

高血壓組經(jīng)過(guò)3個(gè)月的降壓治療后，收縮壓、舒張壓、FKN、ADMA比治療前降低，NO、FMD比治療前升高（P＜0.05）。見(jiàn)表 3。

2.5 高血壓組治療前后血壓與內(nèi)皮功能變化量絕對(duì)值的相關(guān)性分析

分析FKN與收縮壓、ADMA、NO和FMD治療前后變化量絕對(duì)值的相關(guān)性。其中△FKN與△收縮壓、△舒張壓、△FMD、△ADMA、△NO呈正相關(guān)（r=0.720、0.405、0.707、0.687 和 0.726，P=0.000、0.012、0.001、0.032和0.001）。見(jiàn)附圖。

表1 兩組患者基線資料比較 （n =50）

表2 觀察前兩組血清FKN、ADMA、NO和內(nèi)皮功能比較 （n =50，±s）

表2 觀察前兩組血清FKN、ADMA、NO和內(nèi)皮功能比較 （n =50，±s）

對(duì)照組 140.74±38.31 0.20±0.07 54.24±5.40 8.20±0.87 14.95±1.09高血壓組 414.24±98.65 0.44±0.10 31.64±5.80 5.49±0.47 15.39±1.43 t值 18.274 12.660 20.144 19.259 1.750

表3 高血壓組治療前后血壓、FKN、ADMA、NO和FMD比較 （n =38，x±s）

附圖 治療前后△FKN與△收縮壓、△舒張壓、△FMD、△ADMA、△NO的Spearman相關(guān)分析散點(diǎn)圖

3 討論

原發(fā)性高血壓患者由于血管壁應(yīng)力和剪切力增加，血管活性物質(zhì)釋放增多，早期即發(fā)生血管內(nèi)皮功能紊亂。完整的血管內(nèi)皮功能對(duì)維持正常的血管穩(wěn)態(tài)起著重要作用。內(nèi)皮功能紊亂不僅可導(dǎo)致異常的血管收縮、血小板聚集、平滑肌細(xì)胞增殖，且能增加外周血管阻力，加速高血壓進(jìn)程，啟動(dòng)動(dòng)脈粥樣硬化，認(rèn)為是大多數(shù)血管疾病的前兆[5-6]。

目前臨床中早期檢測(cè)內(nèi)皮功能紊亂和早期干預(yù)已成為研究的熱點(diǎn)。檢測(cè)方法主要包括以下2個(gè)方面：一方面，血管內(nèi)皮細(xì)胞合成的血管活性物質(zhì)（如NO）可以反應(yīng)內(nèi)皮功能。NO是血管內(nèi)皮釋放的重要內(nèi)源性舒血管物質(zhì)，是正常內(nèi)皮功能的標(biāo)志物之一。NO減少或生物利用度下降會(huì)導(dǎo)致內(nèi)皮依賴性血管舒張功能障礙。因此檢測(cè)血清中NO水平是評(píng)價(jià)內(nèi)皮功能的重要方法[2]。另一方面，原發(fā)性高血壓患者血管內(nèi)皮功能受損會(huì)導(dǎo)致FMD降低，通過(guò)超聲檢測(cè)肱動(dòng)脈FMD可以反映患者內(nèi)皮功能，這是評(píng)價(jià)血管內(nèi)皮功能的重要無(wú)創(chuàng)方法[7-8]。與以往研究結(jié)果一致，本研究結(jié)果提示，原發(fā)性高血壓患者血清NO及肱動(dòng)脈FMD均較正常對(duì)照組降低。

ADMA是合成NO的底物左旋精氨酸的類似物，能競(jìng)爭(zhēng)性抑制NO合成酶的活性，減少NO合成，最終導(dǎo)致內(nèi)皮依賴性血管舒張功能下降[9]。體內(nèi)和體外研究表明ADMA可以損傷血管結(jié)構(gòu)，誘導(dǎo)氧化應(yīng)激，促進(jìn)血管炎癥反應(yīng)并加強(qiáng)脂質(zhì)攝取[10]。因此，近年來(lái)ADMA成為評(píng)價(jià)內(nèi)皮功能的重要指標(biāo)之一。本研究結(jié)果顯示，原發(fā)性高血壓患者血漿中ADMA水平比對(duì)照組升高，并且和肱動(dòng)脈FMD、血清NO呈負(fù)相關(guān)，提示ADMA可能在原發(fā)性高血壓患者內(nèi)皮功能損傷過(guò)程中起一定作用。

FKN最開(kāi)始認(rèn)為是一種趨化因子，其后發(fā)現(xiàn)其在炎癥反應(yīng)中起重要作用[11-14]。SULLIVAN等[15]發(fā)現(xiàn)，自發(fā)性高血壓大鼠腸系膜動(dòng)脈FKN水平高于正常血壓WKY大鼠。上述研究提示，高血壓可引起FKN表達(dá)增多，同時(shí)FKN表達(dá)增多可導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞紊亂而加重高血壓，形成惡性循環(huán)。目前尚無(wú)報(bào)道FKN在原發(fā)性高血壓患者血清中的表達(dá)水平。本研究結(jié)果顯示，與正常人群比較，F(xiàn)KN在原發(fā)性高血壓患者血清中的水平升高。且與NO、FMD呈負(fù)相關(guān)，而與ADMA呈正相關(guān)。

為進(jìn)一步明確FKN和血管內(nèi)皮功能之間的關(guān)系，本實(shí)驗(yàn)比較了高血壓患者治療前后FKN和血管內(nèi)皮功能變化的關(guān)系。經(jīng)過(guò)規(guī)范的降壓治療后，患者的血壓基本控制在正常范圍，F(xiàn)KN降低，而反應(yīng)內(nèi)皮功能的指標(biāo)NO、AMDA、FMD均較治療前有了改善。進(jìn)一步通過(guò)Spearman秩相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)KN變化的絕對(duì)值與收縮壓、NO、AMDA、FMD的變化存在相關(guān)性。提示高血壓可以對(duì)患者的內(nèi)皮功能造成損傷，而通過(guò)降壓藥物降低血壓后，內(nèi)皮功能得到改善。并且內(nèi)皮功能改善和FKN降低具有相關(guān)性。提示FKN在預(yù)測(cè)高血壓內(nèi)皮功能損傷中可能具有一定的作用，F(xiàn)KN可能是血管內(nèi)皮功能損傷的早期標(biāo)志物之一，但仍需要進(jìn)一步地明確。

本研究結(jié)果顯示，降低血壓可以改善內(nèi)皮功能，并且減少FKN水平。提示血清中FKN可能參與了高血壓內(nèi)皮功能損傷過(guò)程，可能是血管內(nèi)皮功能損傷的標(biāo)志物之一。FKN是否具有致內(nèi)皮功能損傷的作用，干預(yù)FKN是否影響內(nèi)皮功能，未來(lái)是否能用于動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)分層，還有待更多的基礎(chǔ)和臨床研究來(lái)明確。

[1]HIRSCH A T. Vascular disease, hypertension, and prevention: from endothelium to clinical events[J]. Journal of the American College of Cardiology, 2003, 42(2): 377-379.

[2]BIAN K, DOURSOUT M F, MURAD F. Vascular system: role of nitric oxide in cardiovascular diseases[J]. Journal of Clinical Hypertension, 2008, 10(4): 304-310.

[3]IMAIZUMI T, YOSHIDA H, SATOH K. Regulation of CX3CL1/fractalkine expression in endothelial cells[J]. Journal of Atherosclerosis and Thrombosis, 2004, 11(1): 15-21.

[4]IMAIZUMI T, YOSHIDA H, SATOH K. The CX3C chemokine fractalkine induces vascular dysfunction by generation of superoxide anions[J]. Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology, 2007, 27(1): 55-62.

[5]VERSARI D, DAGHINI E, VIRDIS A, et al. Endotheliumdependent contractions and endothelial dysfunction in human hypertension[J]. British Journal of Pharmacology, 2009, 157(4):527-536.

[6]TADDEI S, VIRDIS A, GHIADONI L, et al. The role of endothelium in human hypertension[J]. Current Opinion in Nephrology and Hypertension, 1998, 7(2): 203-209.

[7]DATTILO G, LAMARI A, CROSCA S, et al. Correlation between insulin resistance and endothelial dysfunction assessed by flowmediated dilation[J]. Recenti Progressi in Medicina, 2012, 103(9):328-332.

[8]PADILLA J, JOHNSON B D, NEWCOMER S C, et al.Adjusting fl ow-mediated dilation for shear stress stimulus allows demonstration of endothelial dysfunction in a population with moderate cardiovascular risk[J]. Journal of Vascular Research,2009, 46(6): 592-600.

[9]PERTICONE F, SCIACQUA A, MAIO R, et al. Endothelial dysfunction, ADMA and insulin resistance in essential hypertension[J]. International Journal of Cardiology, 2010, 142(3):236-241.

[10]SIBAL L, AGARWAL S C, HOME P D, et al. The role of asymmetric dimethylarginine (ADMA) in endothelial dysfunction and cardiovascular disease[J]. Current Cardiology Reviews, 2010,6(2): 82-90.

[11]MOATTI D, VELE O, NEMERSON Y. Induction of fractalkine by endothelial cells under shear stress[J]. Blood Coagulation Fibrinolysis, 2004, 15(2): 197.

[12]MORARI J, ANHE G F, NASCIMENTO L F, et al. Fractalkine(CX3CL1) is involved in the early activation of hypothalamic in fl ammation in experimental obesity[J]. Diabetes, 2014, 63(11):3770-3784.

[13]CLARK A K, STANILAND A A, MALCANGIO M. Fractalkine/CX3CR1 signalling in chronic pain and in fl ammation[J]. Current Pharmaceutical Biotechnology, 2011, 12(10): 1707-1714.

[14]姚康,張書(shū)寧,吳彥, 等. 慢性充血性心力衰竭患者新型趨化因子循環(huán)Fractalkine及其受體CX3CR1水平研究[J]. 中國(guó)循環(huán)雜志, 2014, 29(4): 992-995.

[15]SULLIVAN J C, PARDIECK J L, DORAN D, et al. Greater fractalkine expression in mesenteric arteries of female spontaneously hypertensive rats compared with males. American journal of physiology[J]. Heart and Circulatory Physiology, 2009,296(4): H1080-H1088.

Correlation between serum Fractalkine and impiared vascular endothelial function in primary hypertension patients*

Miao Wu, Jiang-hua Zhong, Zhen-yu Peng, Kang Huang, Shi-juan Lu
[Department of Cardiology, Haikou People’s Hospital (Aff i liated Haikou Hospital, Xiangya School of Medicine of Central South University), Haikou, Hainan 570208, China]

ObjectiveTo assess weather Fractalkine is involved in the impaired vascular endothelial function in primary hypertension patients.MethodsFifty primary hypertensive patients and 50 healthy volunteers were recruited. Serum Fractalkine was determined by ELISA. Plasma asymmetric dimethylarginine (ADMA) was determined by high performance liquid chromatography (HPLC). Serum nitric oxide (NO) was determined by nitrate reductase method. Brachial artery fl ow-mediated vasodilation (FMD) and non-endothelium mediated vasodilation(NMD) were determined by high-frequency ultrasonography. Thirty-eight hypertensive patients (12 of the 50 patients were excluded)

3 months of standard antihypertensive treatment. Correlations of the Fractalkine change with the changes in NO, ADMA, FMD and systolic pressure levels before and after antihypertensive treatment were evaluated.ResultsBaseline characteristics of the two groups were similar. Serum Fractalkine level and plasma ADMA level in the primary hypertension group were higher than those in the controls (P＜ 0.05). FMD and serum NO level in the primary hypertension group were lower than those in the controls (P＜ 0.05). Fractalkine was positively correlated with ADMA, systolic blood pressure and diastolic blood pressure (r= 0.785, 0.730 and 0.785,P= 0.000), but negatively correlated with NO and FMD (r= -0.800 and -0.783,P= 0.000). After antihypertensive treatment for 3 months, systolic blood pressure, diastolic blood pressure, Fractalkine and ADMA levels decreased,whereas NO and FMD were improved. The decline in Fractalkine level was positively correlated with the decrase of systolic blood pressure, diastolic blood pressure and ADMA, increase of FMD and NO (r= 0.720, 0.405, 0.687, 0.707 and 0.726;P= 0.000, 0.012, 0.032, 0.001 and 0.001).ConclusionsFractalkine is a sensitive surrogate marker of endothelial dysfunction in primary hypertension. Antihypertensive therapy improves endothelial function in patients with essential hypertension, and decrease the serum Fractalkine level.

primary hypertension; Fractalkine; asymmetric dimethylarginine; flow-mediated vasodilation;nitric oxide

10.3969/j.issn.1005-8982.2018.01.020

1005-8982（2018）01-0103-05

2016-12-22

2013年度海南省?？谑兄攸c(diǎn)科技計(jì)劃項(xiàng)目（No：2013-59）

陸士娟， E-mail：l_shijuan@outlook.com；Tel：0898-66151132

R544.1

A

（張西倩 編輯）