吳淼，鐘江華，彭振宇，黃康，陸士娟

[海南省海口市人民醫(yī)院（中南大學湘雅醫(yī)院附屬?？卺t(yī)院） 心內(nèi)科，海南 海口 570208]

原發(fā)性高血壓患者血清Fractalkine水平與血管內(nèi)皮功能損傷的相關(guān)性研究*

吳淼，鐘江華，彭振宇，黃康，陸士娟

[海南省?？谑腥嗣襻t(yī)院（中南大學湘雅醫(yī)院附屬海口醫(yī)院） 心內(nèi)科，海南 海口 570208]

目的研究原發(fā)性高血壓患者Fractalkine（FKN）與血管內(nèi)皮功能的相關(guān)性。方法 納入50例原發(fā)性高血壓患者作為高血壓組，50例健康體檢者為對照組。使用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定血清FKN水平，使用高效液相色譜法測定血漿非對稱性二甲基精氨酸（ADMA）水平，硝酸還原酶法測定血清一氧化氮NO水平。使用高分辨超聲檢測肱動脈血流介導的內(nèi)皮依賴性血管舒張功能（FMD）及非內(nèi)皮依賴性舒張功能（NMD）。38例原發(fā)性高血壓患者（剔除12例）接受3個月的規(guī)范降壓治療。比較治療前后收縮壓、FKN、ADMA、NO、FMD的變化水平，進一步分析FKN治療前后變化量絕對值與收縮壓、ADMA、NO、FMD變化量絕對值的相關(guān)性。結(jié)果與對照組比較，高血壓組的血清FKN、血漿ADMA水平升高（P＜0.05），F(xiàn)MD、血清NO水平降低（P＜0.05）。FKN與ADMA、收縮壓、舒張壓呈正相關(guān)（r=0.785、0.730和0.785，均P=0.000），與NO、FMD呈負相關(guān)（r=-0.800和-0.783，均P=0.000）。經(jīng)過3個月的降壓治療，發(fā)現(xiàn)收縮壓、舒張壓、FKN、ADMA比治療前降低，NO、FMD比治療前升高。其中FKN治療變化絕對值（△FKN）與△收縮壓、△舒張壓、△FMD、△ADMA、△NO呈正相關(guān)（r=0.720、0.405、0.707、0.687和0.726，P=0.000、0.012、0.001、0.032和0.001）。結(jié)論原發(fā)性高血壓患者血清FKN水平的升高與血管內(nèi)皮功能的損傷可能有關(guān)。降壓治療可改善原發(fā)性高血壓患者的內(nèi)皮功能，降低血清中的FKN水平。

原發(fā)性高血壓；Fractalkine；非對稱性二甲基精氨酸；內(nèi)皮依賴性血管舒張功能；一氧化氮

原發(fā)性高血壓患者血管壁應力和剪切力升高，促使血管活性物質(zhì)釋放增多，早期可發(fā)生血管內(nèi)皮功能紊亂[1]。目前早期評估內(nèi)皮功能成為研究的熱點。內(nèi)皮功能檢測方法主要包括兩種方法，檢測血管內(nèi)皮細胞合成的血管活性物質(zhì)和通過超聲測量血流介導的血管舒張功能。后者是評價血管內(nèi)皮功能的重要無創(chuàng)方法[2]。Fractalkine（FKN）是1997年發(fā)現(xiàn)的趨化因子CXC3亞類中的唯一成員。近期研究提示，高血壓可引起FKN表達增多，同時FKN表達增多可導致內(nèi)皮細胞紊亂而加重高血壓，形成惡性循環(huán)[3-4]。目前國內(nèi)外關(guān)于FKN與高血壓內(nèi)皮功能的研究僅存在于體外實驗以及動物模型中，尚無評價原發(fā)性高血壓患者血清FKN水平與血管內(nèi)皮功能的研究。本文擬研究原發(fā)性高血壓患者FKN與血管內(nèi)皮功能的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 研究對象

符合2010年中國高血壓防治指南中關(guān)于原發(fā)性高血壓的診斷標準，選擇2013年1～12月海南省海口市人民醫(yī)院心內(nèi)科住院或門診的初診高血壓或自行停用降壓藥物≥2周的高血壓患者，共50例。排除繼發(fā)性高血壓、心力衰竭、糖尿病、腦梗死、腫瘤、嚴重肝腎功能不全者、近1個月接受過他汀類藥物及不配合試驗者。選取同期體檢中心健康對照者50例。

1.2 方法

1.2.1 一般資料 姓名、性別、年齡、身高、體重、體重指數(shù)（BMI）、收縮壓、舒張壓、家族史、既往史、吸煙史、飲酒史、服藥史、月經(jīng)史、血常規(guī)、肝腎功能、空腹血糖、餐后2 h血糖、血脂、心電圖、胸片、心臟彩超、聯(lián)系電話、家庭住址等。

1.2.2 降壓治療 50例高血壓患者中，共剔除12例患者，其中7例血壓輕度升高的患者使用生活方式改變，3例不配合，2例失訪。38例患者經(jīng)3個月的規(guī)范降壓治療。降壓方案使用鈣離子拮抗劑，ACEI/ARB或利尿劑，單獨使用或者聯(lián)合使用。

1.2.3 肱動脈內(nèi)皮依賴性血管舒張功能（FMD）及非內(nèi)皮依賴性血管舒張功能（NMD）測定 肱動脈血管內(nèi)皮功能測定采用SONOS-5500型多普勒超聲診斷儀，周圍血管高頻探頭（4～10 MHz），同步記錄心電圖。用二維超聲成像檢測肱動脈內(nèi)徑，探查深度4cm，在心室舒張末期（即同步心電圖R波頂點時）檢測肱動脈內(nèi)徑血管前后內(nèi)膜間的寬度，每次測量取同一部位，超聲探頭始終處于固定位置，分別測量3個心動周期，取其平均值作為基礎(chǔ)值（D0）。然后將血壓計袖帶縛于患者右前臂肘關(guān)節(jié)下2～3 cm，給袖帶充氣至250 mmHg后，維持4 min后迅速放氣，60～90 s時測定肱動脈內(nèi)徑（D1）。休息15 min，待血管內(nèi)徑恢復試驗前水平時，囑患者舌下含服硝酸甘油0.5 mg，3～4 min后再次記錄肱動脈內(nèi)徑（D2）。反應性充血試驗誘發(fā)的FMD=（D1-D0）/D0×100%，硝酸甘油介導的NMD=（D2-D0）/D0×100%。以上操作均由固定人員實施。

1.2.4 FKN、非對稱性二甲基精氨酸（asymmetric dimethylarginine ADMA）、一氧化氮NO測定 采集清晨空腹肘靜脈血。血清FKN測定使用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定，采用高效液相色譜法分析法測定血漿ADMA濃度。血清NO濃度測定采用硝酸還原酶法測定。

1.3 統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件，計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，用t檢驗，計數(shù)資料用χ2檢驗，雙變量相關(guān)采用Pearson相關(guān)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者基線資料比較

高血壓組與對照組的性別、年齡、空腹血糖、餐后2 h血糖、體重指數(shù)（body mass index，BMI）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（Triglycerides，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、肌酐（serum creatinine，Scr）比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。兩組收縮壓和舒張壓比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）,高血壓組高于對照組。見表1。

2.2 觀察前兩組血清FKN、ADMA、NO和內(nèi)皮功能水平比較

兩組血清FKN、血漿ADMA水平比較，高血壓組高于對照組（P＜0.05）；兩組血清NO水平比較，高血壓組低于對照組（P＜0.05）；兩組FMD水平比較，高血壓組低于對照組（P＜0.05）。兩組NMD水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表2。

2.3 血清FKN與年齡、收縮壓、舒張壓、ADMA、FMD、NO的相關(guān)性

血清FKN與年齡、收縮壓、舒張壓、ADMA呈 正 相 關(guān)（rs=0.335、0.730、0.785和 0.785， 均P=0.000），與FMD、NO呈負相關(guān)（r=-0.783和 -0.800，均P=0.000）。

2.4 高血壓組降壓治療前后血壓及內(nèi)皮功能的變化

高血壓組經(jīng)過3個月的降壓治療后，收縮壓、舒張壓、FKN、ADMA比治療前降低，NO、FMD比治療前升高（P＜0.05）。見表 3。

2.5 高血壓組治療前后血壓與內(nèi)皮功能變化量絕對值的相關(guān)性分析

分析FKN與收縮壓、ADMA、NO和FMD治療前后變化量絕對值的相關(guān)性。其中△FKN與△收縮壓、△舒張壓、△FMD、△ADMA、△NO呈正相關(guān)（r=0.720、0.405、0.707、0.687 和 0.726，P=0.000、0.012、0.001、0.032和0.001）。見附圖。

表1 兩組患者基線資料比較 （n =50）

表2 觀察前兩組血清FKN、ADMA、NO和內(nèi)皮功能比較 （n =50，±s）

表2 觀察前兩組血清FKN、ADMA、NO和內(nèi)皮功能比較 （n =50，±s）

對照組 140.74±38.31 0.20±0.07 54.24±5.40 8.20±0.87 14.95±1.09高血壓組 414.24±98.65 0.44±0.10 31.64±5.80 5.49±0.47 15.39±1.43 t值 18.274 12.660 20.144 19.259 1.750

表3 高血壓組治療前后血壓、FKN、ADMA、NO和FMD比較 （n =38，x±s）

附圖 治療前后△FKN與△收縮壓、△舒張壓、△FMD、△ADMA、△NO的Spearman相關(guān)分析散點圖

3 討論

原發(fā)性高血壓患者由于血管壁應力和剪切力增加，血管活性物質(zhì)釋放增多，早期即發(fā)生血管內(nèi)皮功能紊亂。完整的血管內(nèi)皮功能對維持正常的血管穩(wěn)態(tài)起著重要作用。內(nèi)皮功能紊亂不僅可導致異常的血管收縮、血小板聚集、平滑肌細胞增殖，且能增加外周血管阻力，加速高血壓進程，啟動動脈粥樣硬化，認為是大多數(shù)血管疾病的前兆[5-6]。

目前臨床中早期檢測內(nèi)皮功能紊亂和早期干預已成為研究的熱點。檢測方法主要包括以下2個方面：一方面，血管內(nèi)皮細胞合成的血管活性物質(zhì)（如NO）可以反應內(nèi)皮功能。NO是血管內(nèi)皮釋放的重要內(nèi)源性舒血管物質(zhì)，是正常內(nèi)皮功能的標志物之一。NO減少或生物利用度下降會導致內(nèi)皮依賴性血管舒張功能障礙。因此檢測血清中NO水平是評價內(nèi)皮功能的重要方法[2]。另一方面，原發(fā)性高血壓患者血管內(nèi)皮功能受損會導致FMD降低，通過超聲檢測肱動脈FMD可以反映患者內(nèi)皮功能，這是評價血管內(nèi)皮功能的重要無創(chuàng)方法[7-8]。與以往研究結(jié)果一致，本研究結(jié)果提示，原發(fā)性高血壓患者血清NO及肱動脈FMD均較正常對照組降低。

ADMA是合成NO的底物左旋精氨酸的類似物，能競爭性抑制NO合成酶的活性，減少NO合成，最終導致內(nèi)皮依賴性血管舒張功能下降[9]。體內(nèi)和體外研究表明ADMA可以損傷血管結(jié)構(gòu)，誘導氧化應激，促進血管炎癥反應并加強脂質(zhì)攝取[10]。因此，近年來ADMA成為評價內(nèi)皮功能的重要指標之一。本研究結(jié)果顯示，原發(fā)性高血壓患者血漿中ADMA水平比對照組升高，并且和肱動脈FMD、血清NO呈負相關(guān)，提示ADMA可能在原發(fā)性高血壓患者內(nèi)皮功能損傷過程中起一定作用。

FKN最開始認為是一種趨化因子，其后發(fā)現(xiàn)其在炎癥反應中起重要作用[11-14]。SULLIVAN等[15]發(fā)現(xiàn)，自發(fā)性高血壓大鼠腸系膜動脈FKN水平高于正常血壓WKY大鼠。上述研究提示，高血壓可引起FKN表達增多，同時FKN表達增多可導致內(nèi)皮細胞紊亂而加重高血壓，形成惡性循環(huán)。目前尚無報道FKN在原發(fā)性高血壓患者血清中的表達水平。本研究結(jié)果顯示，與正常人群比較，F(xiàn)KN在原發(fā)性高血壓患者血清中的水平升高。且與NO、FMD呈負相關(guān)，而與ADMA呈正相關(guān)。

為進一步明確FKN和血管內(nèi)皮功能之間的關(guān)系，本實驗比較了高血壓患者治療前后FKN和血管內(nèi)皮功能變化的關(guān)系。經(jīng)過規(guī)范的降壓治療后，患者的血壓基本控制在正常范圍，F(xiàn)KN降低，而反應內(nèi)皮功能的指標NO、AMDA、FMD均較治療前有了改善。進一步通過Spearman秩相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)KN變化的絕對值與收縮壓、NO、AMDA、FMD的變化存在相關(guān)性。提示高血壓可以對患者的內(nèi)皮功能造成損傷，而通過降壓藥物降低血壓后，內(nèi)皮功能得到改善。并且內(nèi)皮功能改善和FKN降低具有相關(guān)性。提示FKN在預測高血壓內(nèi)皮功能損傷中可能具有一定的作用，F(xiàn)KN可能是血管內(nèi)皮功能損傷的早期標志物之一，但仍需要進一步地明確。

本研究結(jié)果顯示，降低血壓可以改善內(nèi)皮功能，并且減少FKN水平。提示血清中FKN可能參與了高血壓內(nèi)皮功能損傷過程，可能是血管內(nèi)皮功能損傷的標志物之一。FKN是否具有致內(nèi)皮功能損傷的作用，干預FKN是否影響內(nèi)皮功能，未來是否能用于動脈粥樣硬化的危險分層，還有待更多的基礎(chǔ)和臨床研究來明確。

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Correlation between serum Fractalkine and impiared vascular endothelial function in primary hypertension patients*

Miao Wu, Jiang-hua Zhong, Zhen-yu Peng, Kang Huang, Shi-juan Lu
[Department of Cardiology, Haikou People’s Hospital (Aff i liated Haikou Hospital, Xiangya School of Medicine of Central South University), Haikou, Hainan 570208, China]

ObjectiveTo assess weather Fractalkine is involved in the impaired vascular endothelial function in primary hypertension patients.MethodsFifty primary hypertensive patients and 50 healthy volunteers were recruited. Serum Fractalkine was determined by ELISA. Plasma asymmetric dimethylarginine (ADMA) was determined by high performance liquid chromatography (HPLC). Serum nitric oxide (NO) was determined by nitrate reductase method. Brachial artery fl ow-mediated vasodilation (FMD) and non-endothelium mediated vasodilation(NMD) were determined by high-frequency ultrasonography. Thirty-eight hypertensive patients (12 of the 50 patients were excluded)

3 months of standard antihypertensive treatment. Correlations of the Fractalkine change with the changes in NO, ADMA, FMD and systolic pressure levels before and after antihypertensive treatment were evaluated.ResultsBaseline characteristics of the two groups were similar. Serum Fractalkine level and plasma ADMA level in the primary hypertension group were higher than those in the controls (P＜ 0.05). FMD and serum NO level in the primary hypertension group were lower than those in the controls (P＜ 0.05). Fractalkine was positively correlated with ADMA, systolic blood pressure and diastolic blood pressure (r= 0.785, 0.730 and 0.785,P= 0.000), but negatively correlated with NO and FMD (r= -0.800 and -0.783,P= 0.000). After antihypertensive treatment for 3 months, systolic blood pressure, diastolic blood pressure, Fractalkine and ADMA levels decreased,whereas NO and FMD were improved. The decline in Fractalkine level was positively correlated with the decrase of systolic blood pressure, diastolic blood pressure and ADMA, increase of FMD and NO (r= 0.720, 0.405, 0.687, 0.707 and 0.726;P= 0.000, 0.012, 0.032, 0.001 and 0.001).ConclusionsFractalkine is a sensitive surrogate marker of endothelial dysfunction in primary hypertension. Antihypertensive therapy improves endothelial function in patients with essential hypertension, and decrease the serum Fractalkine level.

primary hypertension; Fractalkine; asymmetric dimethylarginine; flow-mediated vasodilation;nitric oxide

10.3969/j.issn.1005-8982.2018.01.020

1005-8982（2018）01-0103-05

2016-12-22

2013年度海南省?？谑兄攸c科技計劃項目（No：2013-59）

陸士娟， E-mail：l_shijuan@outlook.com；Tel：0898-66151132

R544.1

A

（張西倩 編輯）