解秀平

摘 要：本實驗對墨旱蓮顆粒的制備工藝進行研究并對其質量標準進行研究。采用高校液相測定了墨旱蓮顆粒的含量。方法：采用安捷倫十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱（218mm×4.6mm，5μm），0.2%甲酸-乙腈（94∶6），檢測波長為327nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。綠原酸在0.1～3.2mg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。

關鍵詞：墨旱蓮顆粒；工藝；研究

墨旱蓮別名金陵草（《千金月令》），猢孫頭（《居家必用事類全集》），蓮草（《滇南本草》），墨斗草（《醫(yī)學正傳》），蓮子草（《唐本草》），旱蓮草、旱蓮子（《本草圖經》），白旱蓮（《履巉巖本草》），野水鳳仙（《藥材資料匯編》），水風仙草（《江蘇植藥志》），黑墨草（《廣西藥植圖志》），白花蟛蜞菊（《嶺南采藥錄》），墨記菜（《現(xiàn)代實用中藥》），古城墨（《廣西中藥志》）等。墨旱蓮具有滋補肝腎，涼血止血的功效?！渡菟幮詡湟酚涊d：“治跌打傷，理酒頂，化痰，殺螆，止癢，干水?！蹦瞪徲糜谘例X松動、腰膝酸軟、崩漏下血、須發(fā)早白、眩暈耳鳴、外傷出血等。墨旱蓮含有維生素A，鱧腸素，2-（丁二炔基）-5-（乙烯乙炔基）噻吩，2-（丁-二炔基）-5-（4-氯-3-羥丁炔-1-基）噻吩，乙酸（丁烯-3-炔-1-基）二聯(lián)噻吩基甲醇酯等。墨旱蓮具有保肝、抗纖維化、抗炎鎮(zhèn)痛、免疫調節(jié)、抗自由基抗氧化、抗腫瘤和酶激活等藥理作用。本實驗對墨旱蓮顆粒的制備工藝進行研究。

1 儀器與試藥

vertex高效液相色譜儀（上海禾工科學儀器有限公司）；YP1004萬分之一電子分析天平（南京麒麟分析儀器有限公司）；Orion Star A 臺式/便攜式 基礎型pH測量儀（賽默飛世爾科技水質分析儀器）；US-30M超聲波清洗器（中科儀（北京）儀器有限公司）；通微EasySep-1020高效液相色譜儀（上海通微分析技術有限公司）；SPECORD 250 PLUS紫外可見分光光度計（德國耶拿分析儀器股份公司）；RE-2000E型旋轉蒸發(fā)器（西安禾普生物科技有限公司）。甲醇（揚州市江都區(qū)成宇化工廠）、乙腈（揚州市江都區(qū)成宇化工廠）、正己烷（揚州市江都區(qū)成宇化工廠）、丙酮（揚州市江都區(qū)成宇化工廠）、甲酸（揚州市江都區(qū)成宇化工廠）。淀粉（廣州宏鑫生物科技有限公司）、糊精（廣州宏鑫生物科技有限公司）、乳糖（廣州宏鑫生物科技有限公司）、蔗糖（廣州宏鑫生物科技有限公司）。

2 墨旱蓮顆粒的制備

取墨旱蓮加水溫浸30分鐘，煎煮二次，每次1.5小時，分次濾過，合并濾液，濃縮至相對密度為1.22（70℃）的清膏，冷至40℃時，攪拌下緩緩加入乙醇，使含醇量達70%，充分攪拌，靜置12小時，濾取上清液，回收乙醇至無醇味并濃縮成相對密度為1.30（65℃）的清膏。將蔗糖、糊精等輔料適量，投入CH槽形混合機中，混合15分鐘，加入清膏和適量70%乙醇，混合約10分鐘，制成軟材。將混合制得的軟材放在搖擺式顆粒機中，用14目篩制粒，干燥，干燥后顆粒置10目-60目振動篩整粒。整粒結束后，在總混20分鐘，分裝，即得。

3 質量研究

3.1 性狀本品為顆粒劑。

3.2 含量測定

3.2.1 色譜條件

色譜柱為Kromasil C18（規(guī)格4.6mm×250mm，5μm）；0.2%甲酸-乙腈（94∶6）為流動相；流速1.0mL·min-1；檢測波長為327nm；柱溫：30℃。

3.2.2 供試品溶液的制備

取墨旱蓮顆粒適量加10毫升水溶解，并定容至25mL量瓶中，用0.45μ微孔濾膜過濾，即得。

3.2.3 對照品溶液的制備

精密稱取綠原酸對照品適量，精密稱定，加甲醇制成0.2mg·mL-1的溶液，即得。

3.2.4 陰性干擾試驗

按處方取蔗糖、糊精等輔料，按方中比例和制備工藝方法制成陰性制劑，用供試品溶液制備的方法，制成陰性對照溶液，用以上選定的測定條件進行吸收曲線繪制，觀察在與綠原酸相同的保留時間處是否存在吸收峰，結果：在選定條件下測得的陰性液吸收曲線在與綠原酸相同保留時間處不存在吸收峰，表明選定的條件測定綠原酸無干擾，具有較強的專屬性。

3.2.5 標準曲線的制備

精密稱取適量綠原酸對照品，加入流動相溶液使溶解分別配制成每毫升含0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2毫克的溶液。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）對數為縱坐標，對照品進樣量（X）對數為橫坐標，繪制標準曲線。結果表明，綠原酸在0.1～3.2mg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。

3.2.6 精密度試驗

精密吸取同一供試品溶液各10μL重復進樣6次，測定，記錄峰面積，結果綠原酸的色譜峰面積的RSD（n=6）0.83%。

3.2.7 墨旱蓮顆粒含量

分別測定三批墨旱蓮顆粒，綠原酸含量分別為0.81mg/g、0.82mg/g、0.83mg/g。綠原酸含量限度為不少于0.7mg/g。

4 鑒別

取墨旱蓮顆粒適量，加乙醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液揮干，加無水乙醇1ml溶解殘渣。另取墨旱蓮對照藥材2g，加乙醇20ml，浸泡2小時，超聲處理30分鐘，濾過，濾液揮干，加無水乙醇1ml溶解殘渣，作為對照品溶液。取蔗糖、糊精按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，按上述方法制成陰性對照樣品。吸取上述溶液，分別點于同一高效硅膠預制薄層板（HPTLC-plate Nano-DURASIL-20，MN）上，以正己烷-丙酮（9：1）為展開劑，置用展開劑預飽和15分鐘的展開缸內，展開，取出，晾干，至紫外燈（365nm）下視檢。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，而陰性對照無干擾。

參考文獻

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