邢天一

食品安全問題已經(jīng)受到了人們的廣泛關(guān)注，因此，這也加強了人們對食品中物質(zhì)的研究。黃曲霉毒素是食品中致癌能力最強的一種毒素，同時，它具有著很強的生存能力特征，也是影響食品安全的主要物質(zhì)，為了保證食品的安全，就需要對這種毒素物質(zhì)進行詳細的研究，下面，本文就針對液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測食品中的黃曲霉毒素實踐進行探討，來研究黃曲霉毒素對食品安全的影響。

1.材料和方法

1.1材料和試劑

材料：市購的花生、玉米、芝麻以及花生核桃乳制飲品、燕麥片。

試劑：黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2混合標準溶液，其中黃曲霉毒素放入B1、G1質(zhì)量濃度為1μg / m L，B2、G2質(zhì)量濃度為0.3μg / m L；乙腈（色譜純）、甲醇（色譜純）、甲酸（分析純）、超純水等。

1.2儀器與設(shè)備

對黃曲霉毒素的檢測儀器主要是借助6430三重四極桿液質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)來實現(xiàn)的，這個聯(lián)用系統(tǒng)配有1200高效液相色譜系統(tǒng)、電噴霧離子源（ESI）及Mass Hunter數(shù)據(jù)處理軟件；另外，主要儀器還包括Mycosep 226真菌毒素凈化柱、FA110電子天平、KQ2200E超聲波清洗器、Milli-Q 超純水儀等設(shè)備。

1.3儀器參數(shù)

儀器參數(shù)色譜條件：

色譜柱為ZORBAX Eclipse XDB-C18 柱（4.6mm×50mm，1.8μm）；流動相為0.1%甲酸溶液-甲醇（60：40）；流速為0.4m L/min；柱溫為35℃；進樣量：5μL。

儀器參數(shù)質(zhì)譜條件：

離子源為電噴霧離子源；干燥氣流速為12mL/min；干燥氣溫度為350℃；霧化氣壓力為50psi；毛細管電壓為4000V；質(zhì)量掃描范圍為100～500（m/z）；掃描模式為正離子模式；4種黃曲霉毒素的MRM掃描參數(shù)為如表：

1.4樣品處理

將選擇試驗的樣品各取25g的量，然后將它們分別放入250mL的錐形瓶中，進而再向錐形瓶中加入100mL乙腈-水溶液，快速攪拌3分鐘，讓它們混合均勻，再將溶液分別通過定性濾紙和Mycosep 226真菌毒素凈化柱，這樣就得到了相應的凈化液，取一定量的凈化液通過0.22μm濾膜，進而收集待進樣。

2.結(jié)果和分析

2.1流動相的選擇

黃曲霉毒素具有著自身的特點，它在甲醇和乙腈中溶解度比較高，因此，在對其流動相的選擇上就可以分別選用甲醇和乙腈與水混合來進行使用。6430三重四極桿液質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)使用中，其流動相的選擇除了考慮其組分的洗脫能力，還要考慮其質(zhì)譜中是否能夠促進所使用的樣品達到要求的標準的離子化效率。通過實驗可以證明，乙腈作為流動相時，其洗脫能力是略高于乙醇的，但是其離子化程度卻明顯不足，因此，在流動相的選擇上常用于乙醇。

2.2質(zhì)譜條件的選擇

根據(jù)黃曲霉毒素的特征，通過電噴霧離子源可以很好的達到其離子化狀態(tài)，電噴霧離子源有兩種模式，分別為正離子模式和負離子模式，而對于黃曲霉毒素的離子化試驗證明正離子模式下其離子化效率比負離子模式下的要高，因此，采用正離子模式來促進四種黃曲霉毒素的離子化狀態(tài)，進而將M+H作為四種黃曲霉毒素的母離子。

2.3凈化小柱的選擇

凈化小柱的選擇也是黃曲霉毒素檢測中的一個重要內(nèi)容，現(xiàn)階段使用的凈化小柱類型主要包括多功能凈化柱以及免疫親和柱兩種，在黃曲霉毒素檢測中，多功能凈化柱是采用復合材料進而實現(xiàn)對蛋白質(zhì)、色素等吸附，但是黃曲霉毒素是不會被吸附的，因此將樣品液體進行凈化，得到黃曲霉毒素液體，但是這種方法出了凈化速度快，卻還存在一定的缺陷，它并不能有效全面的排除雜質(zhì)，因此，在實際的試驗中選擇免疫親和柱方式來進行凈化。

2.4線性范圍和檢測限

針對黃曲霉毒素樣品液體，取不同濃度的樣液按照選擇的色譜條件好質(zhì)譜條件來進行進樣處理，進而將其表現(xiàn)的黃曲霉毒素含量和峰面積分別作為x和y軸進行坐標系的建立，進一步得到相應的線性方程和線性曲線，然后根據(jù)3倍和10倍信噪比計算出檢出限和定量限。

2.5精密度和回收率

在黃曲霉毒素樣品液體的試驗中，對于其精密度以及回收率的測定，需要將每一個樣品液體中連續(xù)進行5次進樣，來測量其峰面積，進而計算相對標準偏差，進而衡量樣液的精密度，進而利用色譜條件和質(zhì)譜條件來計算其加標回收率。然后根據(jù)黃曲霉毒素標準偏差表和加標回收表來進行對照，其標準偏差要小于5%，回收率要在80%-95%之間，才能說明這個方法的精密度和回收率是可以的。

3.通過液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測食品中的四種黃曲霉毒素，這種方法首先是用乙醇流動相進行洗脫，進而在正離子模式質(zhì)譜下進行監(jiān)測，進而計算出四種黃曲霉毒素的檢出限，判斷相應食品中的黃曲霉含量，這種方法不僅具有很高的準確性，同時使用簡單快速，具有很大的使用優(yōu)勢。

（作者單位：226000江蘇省南通市權(quán)證檢驗檢測有限公司）