摘要：目的：研究核酸檢測(cè)（NAT）與酶免檢測(cè)（ELISA）應(yīng)用于血液篩查中的價(jià)值。方法：2016年1月-2017年7月我站27109分無償獻(xiàn)血者標(biāo)本的ELISA（HBsAg、抗HCV、抗HIV）檢測(cè)結(jié)果和NAT（HBV DNA，HCV RNA，HIV-1 RNA）檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較分析。結(jié)果：27109份無償獻(xiàn)血者標(biāo)本ELISA（HBsAg、抗HCV、抗HIV）反應(yīng)性94份，不合格率為0.35%；NAT（HBV DNA，HCV RNA，HIV-1 RNA）反應(yīng)陽(yáng)性5份，不合格率為0.02%。結(jié)論：NAT與ELISA平行檢測(cè)血液篩查模式不僅能防漏互補(bǔ)，同時(shí)也可以縮短血液檢測(cè)窗口期，提升輸血安全性，降低風(fēng)險(xiǎn)。

關(guān)鍵詞：ELISA NAT 血液篩查

血液安全重點(diǎn)是輸血傳播感染性疾病的防控。目前隨著血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理的加強(qiáng)，ELISA試劑盒質(zhì)量的不斷提高和改進(jìn)，經(jīng)輸血傳播病毒的風(fēng)險(xiǎn)已大大降低，但由于ELISA檢測(cè)方法的局限性主要是“窗口期”問題，加上抗原，抗體蛋白結(jié)構(gòu)的變形，單純的抗原或抗體血清學(xué)檢測(cè)已經(jīng)不是最可靠的辦法[1-2]，而新起的NAT其檢測(cè)原理與ELISA不同，其檢測(cè)的是DNA或RNA，可檢測(cè)因“窗口期”感染、免疫靜默感染、病毒變異等原因漏檢的血液[3]與ELISA形成很好的互補(bǔ)。為進(jìn)一步提高血液質(zhì)量和保證血液安全，本站在ELISA檢測(cè)基礎(chǔ)上增加了NAT（HBV DNA，HCV RNA，HIV-1 RNA）檢測(cè)，現(xiàn)對(duì)NAT與ELISA聯(lián)合應(yīng)用于忻州市無償獻(xiàn)血者血液篩查的意義進(jìn)行探討。報(bào)道如下：

1材料與方法

1.1臨床資料：

2016年1月-2017年7月忻州市中心血站采集的無償獻(xiàn)血者標(biāo)本。獻(xiàn)血者均符合國(guó)家《獻(xiàn)血者健康檢查要求》中的相關(guān)要求。采集每人份血液同時(shí)留取ELISA樣管和NAT樣管，其中NAT樣管 采樣后4h內(nèi)1600g離心20分，離心后2-8℃冰箱保存，72內(nèi)完成檢測(cè)。

1.2檢測(cè)試劑：

ELISA試劑：HBsAg、抗HCV由上?？迫A、英科新創(chuàng)提供；抗HIV由北京萬泰、珠海麗珠提供。

NAT（HBV DNA，HCV RNA，HIV-1 RNA）由上海浩源生物科技有限公司提供[聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）-熒光法]

所有試劑均在有效期內(nèi)使用，并嚴(yán)格按試劑說明書操作。

1.3主要儀器：

深圳愛康Uranus AE100全自動(dòng)酶免儀；上海浩源（臺(tái)灣基亞）ChaTas BSS1200和美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司ABI7500PCR擴(kuò)增儀

1.4檢測(cè)方法：

每人采集3管EDTA-K2抗凝血（2管NAT，1管ELISA）進(jìn)行平行檢測(cè)，檢測(cè)均在72h內(nèi)完成.檢測(cè)前標(biāo)本2-8℃冰箱保存。ELISA實(shí)驗(yàn)采取雙試劑同時(shí)檢測(cè)，同時(shí)具有反應(yīng)性即判定為該項(xiàng)反應(yīng)性；若單試劑反應(yīng)性則同試劑雙孔復(fù)檢，復(fù)檢≥1孔反應(yīng)性則判定為反應(yīng)性，否則非反應(yīng)性。除ELISA雙試劑反應(yīng)性標(biāo)本及ALT不合格標(biāo)本外，其余標(biāo)本繼續(xù)進(jìn)行NAT檢測(cè)。NAT采用8人混檢出現(xiàn)反應(yīng)性再進(jìn)行單檢，單檢反應(yīng)性則為反應(yīng)性。

2 結(jié)果

2.1 NAT與ELISA檢測(cè)結(jié)果：見下表。

ELISA（HBsAg、抗HCV、抗HIV）雙試劑反應(yīng)性65份，不合格率為0.24%；

ELISA（HBsAg、抗HCV、抗HIV）單試劑反應(yīng)性29份，不合格率為0.11%

NAT（HBV DNA，HCV RNA，HIV-1 RNA）反應(yīng)性5份，全部為HBV DNA反應(yīng)性，不合格率0.02%；

其中1份為單試劑反應(yīng)性，NAT反應(yīng)性。

3 討 論

病毒抗原及抗體的蛋白結(jié)構(gòu)易變異，造成ELISA漏檢，而核酸檢測(cè)（NAT）的敏感度高，病毒感染在數(shù)天后可檢測(cè)出血液中的微量病毒，對(duì)縮短窗口期，減少輸血后的病毒感染率具有積極作用，因此將核酸檢測(cè)作為降低ELISA血清學(xué)漏檢的解決辦法.[4]病毒感染人體到發(fā)病到死亡是個(gè)復(fù)雜的過程。一般情況，在人體產(chǎn)生抗體后長(zhǎng)期存在于人體內(nèi)，但在產(chǎn)生抗體濃度很低時(shí)，ELISA無法有效檢測(cè)，這時(shí)的血液已經(jīng)具有了感染性。病毒在體內(nèi)復(fù)制是通過病毒DNA或RNA進(jìn)行的。NAT就是通過將血液中微小的病毒核酸（DNA或RNA）通過PCR進(jìn)行擴(kuò)增，通過熒光信號(hào)進(jìn)行識(shí)別的。雖然病毒在體內(nèi)的發(fā)展過程中可能出現(xiàn)病毒的低濃度，早期檢測(cè)仍然能夠縮短“窗口期”。[5]歐美國(guó)家和地區(qū)NAT血液篩查研究主要針對(duì)的是HCV /HIV；而在我國(guó)HBV成高流行趨勢(shì)，獻(xiàn)血篩查主要存在HBV漏檢的情況，目前已有研究。[6]

從上述數(shù)據(jù)可以看出，NAT在ELISA無反應(yīng)的標(biāo)本中檢4出例HBV DNA病毒，ELISA單試劑反應(yīng)性標(biāo)本中檢出1例HBV DNA病毒。NAT方法在血液篩查中有效地檢測(cè)出ELISA漏檢的病毒早期感染標(biāo)本，有報(bào)道抗HBc反應(yīng)性，HBsAg非反應(yīng)性的供血者可能導(dǎo)致受血者HBV感染，但由于在獻(xiàn)血者中抗HBc醫(yī)療保險(xiǎn)機(jī)構(gòu)在為患者支付和理賠醫(yī)療款項(xiàng)時(shí)，往往需要病案信息作為依據(jù)。如果病案丟失，患者將失去醫(yī)療付款憑證，保險(xiǎn)機(jī)構(gòu)也會(huì)拒付。

3.6醫(yī)療糾紛，維權(quán)證據(jù)

病案信息中涵蓋大量由患者或其家屬簽署的文件，如住院須知、手術(shù)同意書等，這些文件受到法律的認(rèn)可和保護(hù)，具有法律效力。如果在后續(xù)的醫(yī)療服務(wù)中發(fā)生糾紛案件，醫(yī)院可以通過病案信息作為維護(hù)自身合法權(quán)益的證據(jù)。

結(jié)語

綜上所述，在新醫(yī)改政策以及信息化技術(shù)的影響下，信息管理已經(jīng)成為醫(yī)院的主要管理形式。病案通常是記錄患者在醫(yī)院的診斷信息，具有真實(shí)性、時(shí)效性、保密性。在新醫(yī)改涉及到的很多內(nèi)容都強(qiáng)調(diào)了病案信息的重要性，因此，醫(yī)院要通過加大對(duì)病案信息的管理力度，在病案信息的紀(jì)錄收集、整合歸類、存儲(chǔ)保管、錯(cuò)誤排查等方面要多加注意，提高管理的效率，為病案信息的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。病案信息不僅是一種社會(huì)資源，也是患者的隱私資料，所以醫(yī)院在應(yīng)用時(shí)要征得患者的同意，并做好保密工作，這對(duì)于減少醫(yī)療糾紛，維系社會(huì)穩(wěn)定有著重大的現(xiàn)實(shí)意義。

參考文獻(xiàn)：

[1]孫麗，陳麗娟，梁力中等.新醫(yī)改背景下病案信息的利用與管理[J].中國(guó)病案，2016，17（3）：4-6.

[2]黃美蓮.淺談病案信息管理與病案信息的利用[J].中國(guó)傷殘醫(yī)學(xué)，2010，18（3）：157-158.

[3]馬建華.加強(qiáng)病案信息管理 提高病案信息利用度[J].江蘇衛(wèi)生事業(yè)管理，2008，19（1）：58.

[4]馬玉德.病案信息管理與病案信息利用方法[J].中國(guó)社區(qū)醫(yī)師，2015，（31）：165-166.

[5]周峰，董光杰.淺談病案信息管理與病案信息的利用[J].醫(yī)學(xué)信息，2014，（32）：39.