崔 曉 王慶武 安秀榮 唐麗娜

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泰山花臉香蘑的生物學(xué)特性研究

崔 曉 王慶武 安秀榮 唐麗娜

（泰安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院食用菌研究所，山東 泰安 271000）

對泰山花臉香蘑菌株TSlep.1生物學(xué)特性的研究結(jié)果表明，該菌株最佳碳源為葡萄糖，最佳氮源為酵母膏、牛肉膏，碳源對該菌菌落形態(tài)的形成有重要作用；菌絲適宜生長溫度為20～30 ℃，適宜pH為5～7。適宜的碳氮源濃度組合為葡萄糖1%，麥芽糖0.5%，酵母膏0.2%，牛肉膏0.2%。

泰山花臉香蘑；生物學(xué)特性；碳氮源組合

花臉香蘑（）又叫紫花臉、紫晶蘑等[1]，屬擔(dān)子菌門、層菌綱、傘菌目、口蘑科、香蘑屬[2]。其色鮮艷，氣濃郁，味鮮美，不僅是餐桌佳品還兼具防癌、抗腫瘤[3]等功效。其子實體干品的蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30.03%，18種氨基酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為24.37%[4]，是一種名貴優(yōu)良食藥用菌[5~6]，極具藥用開發(fā)潛力[7]。主要分布于我國東北地區(qū)及河北、四川、云南、貴州等省。其人工栽培還處于試驗階段，對其生物學(xué)特性的研究目前著重在單因素方面。筆者采用單因素和多因素正交組合的方法，研究泰山花臉香蘑的生物學(xué)特性，旨在為其馴化提供基礎(chǔ)科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試菌株為泰安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院保存的泰山花臉香蘑“TSlep.1”菌株。

基礎(chǔ)培養(yǎng)基配方：葡萄糖20 g，蛋白胨2 g，KH2PO43 g，MgSO41.5 g，瓊脂20 g，加水定容至1 L。每平板培養(yǎng)基定量為20 mL。

PDA（馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基）：馬鈴薯（去皮）200 g，葡萄糖20 g，KH2PO43 g，MgSO41.5 g，瓊脂20 g，加水定容至1 L。每平板培養(yǎng)基定量為20 mL。

1.2 試驗方法

（1）菌落生長速度。用打孔器在菌落邊緣取相同菌齡、直徑為5 mm的接種塊，接種于平板培養(yǎng)基上，25 ℃恒溫培養(yǎng)。當(dāng)其中1個處理的菌絲長滿培養(yǎng)基后為實驗結(jié)束，采用十字交叉法測量菌絲直徑，觀察并記錄菌絲生長情況，計算菌絲日均生長速度。每處理重復(fù)5次。

（2）菌絲生長勢。菌絲生長濃密、健壯、長勢旺盛，用“+++”表示；菌絲生長較密、較健壯、長勢較好，用“++”表示；菌絲生長稀、不健壯、長勢差，用“+”表示；菌絲不生長，用“－”表示。

（3）碳源試驗。分別以葡萄糖、麥芽糖、淀粉、果糖、蔗糖、乳糖作為碳源，碳源濃度參照基礎(chǔ)培養(yǎng)基?；A(chǔ)培養(yǎng)基中不添加碳源，為碳源空白對照。重復(fù)處理和測量方法同（1）。

（4）氮源試驗。分別以酵母膏、蛋白胨、牛肉膏、(NH4)2SO4、NH4NO3作為氮源，氮源濃度參照基礎(chǔ)培養(yǎng)基。基礎(chǔ)培養(yǎng)基中不添加氮源，為氮源空白對照。重復(fù)處理和測量方法同（1）。

（5）溫度試驗。將接種直徑5 mm菌塊的培養(yǎng)基置于恒溫箱中培養(yǎng)，溫度設(shè)定為15 ℃，20 ℃，25 ℃，30 ℃，35 ℃共5個處理，重復(fù)處理和測量方法同（1）。

（6）pH試驗。pH設(shè)4、5、6、7、8、9、10共7個處理，重復(fù)處理和測量方法同（1）。

（7）最佳碳氮源濃度組合。通過上述單因素試驗得到適宜碳氮源，采用正交試驗，篩選適合生長的最佳碳氮源濃度組合配方。以菌絲日生長速度為衡量指標(biāo)，采用L9（34）正交表進(jìn)行四因素三水平正交試驗。

相關(guān)數(shù)據(jù)采用EXCEL2010整理，以Duncan’ s 新復(fù)極差法對各處理進(jìn)行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同碳源的菌絲生長情況

不同碳源對TSlep.1的菌絲生長速度和長勢的影響見表1。菌絲生長速度由快到慢的碳源為：葡萄糖＞麥芽糖＞果糖＞淀粉＞蔗糖＞乳糖。菌絲的長勢，除葡萄糖外，其他碳源培養(yǎng)基上菌絲生長呈不規(guī)則圓形，氣生菌絲多，鋪展不開，菌落厚薄不一致，尤以淀粉、蔗糖為明顯。在對照的無碳源培養(yǎng)基上，菌絲生長速度和長勢均很慢，說明TSlep.1菌絲生長需要碳源，而本實驗6種碳源中以葡萄糖為最適宜。

表1 不同碳源對菌絲生長的影響

注：數(shù)值后不同大小寫字母分別表示在 0.01 和 0.05 水平上的差異?！?”越多，長勢越好。下同。

2.2 不同氮源的菌絲生長情況

由表2可知，菌絲生長速度由快到慢的氮源為：酵母膏＞牛肉膏＞蛋白胨＞(NH4)2SO4＞NH4NO3＞尿素。菌絲的長勢，NH4SO4、NH4NO3、尿素培養(yǎng)基上的長勢弱，菌落邊緣稀疏；其他氮源培養(yǎng)基的菌絲長勢好，邊緣一致。在無氮源對照培養(yǎng)基上，菌絲生長慢，長勢弱。說明TSlep.1菌絲生長需要適宜的氮源，且以酵母膏、牛肉膏較為適宜。

表2 不同氮源對菌絲生長的影響

2.3 菌絲生長的最適溫度

試驗結(jié)果表明，泰山花臉香蘑菌絲在15～35 ℃均可生長，其中15～25 ℃條件下，隨著溫度的升高菌絲生長加快。25 ℃條件下菌絲長速最快，為4.41 mm/d，25～35 ℃條件下，隨著溫度的升高菌絲生長減慢。溫度高于35 ℃時，菌絲生長停止?？梢?，菌絲生長的適宜溫度為20～30 ℃，最適為25 ℃。

2.4 菌絲生長的最適pH

試驗結(jié)果表明，pH為6時，菌絲長速快，為3.81 mm/d，長勢好。pH低于6時，隨pH升高，菌絲生長加快。pH高于6時，隨pH升高，菌絲生長減弱。其適宜pH為5～7，在此pH范圍內(nèi)菌絲長速快、菌絲濃密、長勢旺。

2.5 菌絲生長的適宜碳氮源濃度組合

選用L9（34）正交表進(jìn)行四因素三水平正交試驗，測定其菌絲培養(yǎng)中的碳氮源最佳濃度組合。值越大，因子對菌絲生長的影響越大。極差分析結(jié)果表明，4個單因子對菌絲生長的影響順序為：A＞D＞B＞C，即葡萄糖對菌絲生長速度影響最大，牛肉膏、麥芽糖居次，酵母膏最?。ū?，表4）。綜合評價，在本試驗條件下，各因素對菌絲生長速度和長勢的最佳碳氮源組合為A1B1C2D1，即：葡萄糖1%、麥芽糖0.5%、酵母膏0.2%、牛肉膏0.2%。

表3 正交試驗因素水平表

3 小結(jié)與討論

根據(jù)本試驗結(jié)果，泰山花臉香蘑TSlep.1菌絲體生長的最適碳源為葡萄糖，最適氮源為酵母膏、牛肉膏，適宜生長溫度為20～30 ℃，適宜pH值為5～7，這與周會明[9]、申慧彥[10]等研究結(jié)果一致。菌絲生長的最佳碳氮源組合為葡萄糖1%，麥芽糖0.5%，酵母膏0.2%，牛肉膏0.2%。

表4 正交試驗結(jié)果

泰山花臉香蘑對碳源的利用較為廣泛，單糖、雙糖和多糖均可。此結(jié)果與多篇相關(guān)報道的觀點一致[7]。而單糖相對于雙糖，雙糖相對于多糖更易于吸收。其中，花臉香蘑菌絲對乳糖的利用較差，產(chǎn)生乳糖酶的能力較弱，說明其對不同碳源的利用能力存在差異。在碳源空白培養(yǎng)基上，菌絲生長厚薄不一致，不能延平板鋪展，菌落形狀不規(guī)則，色素形成不一致；而在氮源空白培養(yǎng)基上未出現(xiàn)此現(xiàn)象，說明碳源對花臉香蘑的菌落形態(tài)影響較大，而氮源無明顯影響。

泰山花臉香蘑對氮源的利用雖較廣泛，但對有機(jī)氮的利用優(yōu)于無機(jī)氮，無機(jī)氮中對硝態(tài)氮的利用優(yōu)于銨態(tài)氮，這與其他食用菌品種類似。

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Biological characteristics of Taishan

Cui Xiao Wang Qingwu An Xiurong Tang Lina

（Tai'an Academy of Agricultural Sciences, Tai'an, 271000, China）

The result of the study of biological characteristics on Taishanstrain TSlep.1 showed that the optimum carbon resource was glucose, the optimum nitrogen resources were yeast extract and beef extract, the optimum temperature and pH for mycelia growth were 20～30 ℃ and 5～7 respectively. The suitable carbon-nitrogen source concentration combinations were 1% sucrose, 0.5% glucose, 0.2% yeast extract and 0.3% beef extract.

Taishan; biological characteristics; carbon-nitrogen source concentration combinations

S646

A

2095-0934（2017）06-369-04

國家食用菌產(chǎn)業(yè)體系建設(shè)專項（CARS－24）；山東省食用菌創(chuàng)新團(tuán)隊病蟲害防控崗位（SDAIT-07-04）