來福*

(1.北京出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心, 北京 100026；2.上海屹堯儀器科技發(fā)展有限公司，上海 201108)

GPC-LC-MS/MS法測定大米中8種農(nóng)藥殘留

劉螢高峰1范斐1劉來福1*金曉靜2陳向斌2齊娜2皮娜2

(1.北京出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心, 北京 100026；2.上海屹堯儀器科技發(fā)展有限公司，上海 201108)

建立了凝膠滲透色譜(GPC)-液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)法測定大米中8種農(nóng)藥殘留的分析方法。樣品用乙腈超聲提取，提取液經(jīng)過凝膠滲透色譜除去大分子雜質(zhì)后，供LC-MS/MS分析；添加濃度為0.2 μg時，回收率為71.3%～111.1%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.64%～12.76%，方法具有自動化程度高、凈化效果好、精密度好，分析快速等優(yōu)點(diǎn)，適用于大米中多農(nóng)藥殘留的日常檢測工作。

凝膠滲透色譜 LC-MS/MS 農(nóng)藥 大米

1 概述

大米是人類的主食來源，也是主要的營養(yǎng)來源，盡管農(nóng)藥的使用可以大幅提高農(nóng)作物產(chǎn)量，但是也對環(huán)境(如水、土壤、空氣)和人類的身體健康帶來了不同程度的影響。所以近年來，各國政府管理部門對農(nóng)藥殘留量最大限量在不斷修改和降低，要求越來越嚴(yán)格，這就對農(nóng)藥殘留分析提出更高的技術(shù)要求和更迫切的社會需要。

近年來，樣品的前處理技術(shù)由傳統(tǒng)的液液萃取轉(zhuǎn)變?yōu)榭焖偃軇┹腿?ASE)提取、微波提取、凝膠滲透色譜(GPC)凈化、固相萃取凈化等技術(shù)。而對于農(nóng)藥多殘留的檢測技術(shù)，也逐漸以色譜-質(zhì)譜檢測技術(shù)為主導(dǎo)。由于農(nóng)藥種類繁多，極性差異大，有的農(nóng)藥不適合用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測，而液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜具有適用性廣，檢出限低，定性準(zhǔn)確的特點(diǎn)；可滿足各類農(nóng)藥的測定。本實(shí)驗(yàn)建立了利用GPC凈化、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測定大米中多農(nóng)藥殘留的方法。

2 材料與方法

2.1 樣品

實(shí)驗(yàn)用大米樣品經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，過20目篩，混勻，密封，常溫下保存，備用。

2.2 儀器與試劑

儀器型號：上海屹堯儀器科技發(fā)展有限公司FLEXI 全自動凝膠滲透色譜儀(配有400mm×25mm(內(nèi)徑)，內(nèi)裝BIO-Beads S-X3填料的凈化柱)，用于樣品中大分子雜質(zhì)的凈化；液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀；分析天平，感量為0.0001g；離心機(jī)，最大轉(zhuǎn)速為10000 r/min；水為GB/T 6682規(guī)定的一級水。乙腈：色譜純；環(huán)己烷：色譜純；乙酸乙酯：色譜純；乙腈+水(3+2，體積比)；乙酸乙酯+環(huán)己烷(1+1，體積比)；多菌靈、啶蟲脒、辛硫磷、吡蟲啉、嘧霉胺、咪鮮胺、烯酰嗎啉、噻蟲嗪單個標(biāo)準(zhǔn)儲備液100mg/L；無水硫酸鈉：分析純(用前在650℃灼燒4h，貯存于干燥器中，冷卻后備用)；微孔過濾膜(尼龍)。

2.3 方法建立

取10 g大米試樣(精確至0.01g)，放入盛有15 g無水硫酸鈉的具塞離心管中，加35 mL乙腈，超聲提取5min，3800 r/min離心5 min，上清液通過裝有無水硫酸鈉的漏斗，收集于梨形瓶中，殘?jiān)偌尤?0mL乙腈提取1次，合并提取液，提取液40℃條件下，水浴加熱蒸發(fā)濃縮至0.5 mL，加入5 mL乙酸乙酯+環(huán)己烷(1+1，體積比)進(jìn)行溶劑交換，重復(fù)兩次，最后使樣液體積蒸發(fā)至約5 mL，將上述提取液轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中，用5 mL乙酸乙酯+環(huán)己烷(1+1)分兩次洗滌梨形瓶，并轉(zhuǎn)移至上述10 mL容量瓶中，定容至刻度，搖勻。將樣液過0.45 μm微孔濾膜濾入10 mL試管，供凝膠色譜儀凈化。

凝膠滲透色譜凈化條件，見表1、表2。

表1 全自動凝膠凈化方法進(jìn)樣程序表

流速：5mL/min

表2 全自動凝膠凈化方法收集程序表

收集液于40℃水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至約5mL，將濃縮液置于氮吹儀上吹干，加入1 mL的乙腈+水(3+2，體積比)溶解殘?jiān)靹?，?jīng)0.2 μm濾膜過濾，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定。

2.4 線性關(guān)系

5 mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液配制如下：

分別從濃度為100mg/L的多菌靈、噻蟲嗪、吡蟲啉、啶蟲咪、嘧霉胺、烯酰嗎啉、咪酰胺、辛硫磷標(biāo)準(zhǔn)儲備液中，各移取0.5mL標(biāo)準(zhǔn)液于10mL容量瓶中，使用正己烷定容至刻度，配制成濃度為5mg/L的10種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，避光，0～4℃保存。

基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液配制如下：

用空白樣品基質(zhì)溶液配制成濃度分別為0.05，0.1，0.2，0.4，0.5mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，用于標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制(表3)。

2.5 加標(biāo)回收率

在大米樣品中加入0.2 μg的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，重復(fù)進(jìn)樣7次，采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量，檢測數(shù)據(jù)及RSD見表4。

表3 8種農(nóng)藥線性方程

表4 7種農(nóng)藥測定結(jié)果

3 結(jié)論

建立了凝膠凈化-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測大米中農(nóng)藥殘留的方法。該方法具有自動化程度高，萃取效率高、凈化效果好、精密度好，分析快速等優(yōu)點(diǎn)，適用于大米中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的日常檢測工作。

[1]陳溪 ， 崔晗 ， 董振霖 ， 劉佳成 ， 尚寶玉等. 大米中193種農(nóng)藥多殘留檢測方法的研究[J].沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) , 2015 , 46 (5) :603-607.

[2]國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會. GB/T 20770-2008 糧谷中486種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[S]：1-84.

2017-10-04

劉螢，高級工程師，liuy@bjciq.gov.cn。

信息簡訊

中科院自動化所實(shí)現(xiàn)大口徑光學(xué)元件表面微粒在線檢測

近日，中國科學(xué)院自動化研究所精密感知與控制中心研究員徐德、張正濤在IJAC第4期發(fā)表了研究論文An Effective On-line Surface Particles Inspection Instrument for Large Aperture Optical Element。文章介紹了最新設(shè)計(jì)的一款新型緊湊檢測儀，可用于快速檢測LAOE表面的微粒污染，該儀器攜帶方便，實(shí)現(xiàn)在線檢測。

當(dāng)前，對于光學(xué)元件表面微粒的檢測最基本的方法是肉眼觀察，這全憑工人的經(jīng)驗(yàn)來判斷微粒數(shù)量和大小，最后的結(jié)果往往受很多主觀因素影響?，F(xiàn)在，還有一些專業(yè)的檢測儀器，如：激光剪切散斑干涉技術(shù)檢測薄片上的細(xì)小缺陷；投射測定法使用THz光譜儀追蹤THz脈沖延遲，并得出元件表面狀況的量化數(shù)據(jù)；C-CT，即原子力顯微鏡，也稱掃描電子顯微鏡，檢測光學(xué)元件表面的微粒污染。雖然通過這些儀器測出的結(jié)果精度高，但不適用于在線檢測幾百微米級大小的微粒。

現(xiàn)階段，研究者們設(shè)計(jì)出了兩種可滿足美國國家點(diǎn)火裝置(NIF)損傷檢測要求的系統(tǒng)：激光光學(xué)元件損傷檢測系統(tǒng)(LODI) 用于檢測傳輸光學(xué)元件及靶室真空窗的損傷情況；終端光學(xué)元件損傷檢測系統(tǒng)(FODI)用于檢測終端光學(xué)元件的損傷情況。兩系統(tǒng)均采用暗場成像技術(shù)來增加損傷圖像間的對比度。FODI系統(tǒng)可檢測大小超過50微米的裂縫，置信度達(dá)99%，檢測192束光大約需要2小時。但上述系統(tǒng)操作復(fù)雜，造價高昂，不易攜帶，應(yīng)用于實(shí)際時困難重重。

該論文設(shè)計(jì)的用于檢測大口徑光學(xué)儀器表面微粒的設(shè)備，基于暗場成像系統(tǒng)，可在遠(yuǎn)工作距離的條件下，得到LAOEs表面的高清圖像。通過步進(jìn)電機(jī)調(diào)整鏡頭的放大倍率，而后自動對焦。設(shè)備易于安裝，方便攜帶，可在線檢測。攝像機(jī)內(nèi)部參數(shù)和鏡頭畸變參數(shù)離線校正。當(dāng)前圖像和理想圖像間的單應(yīng)矩陣在線校正。當(dāng)前的變形圖像可通過單應(yīng)矩陣和圖像校正算法進(jìn)行校正。借助自適應(yīng)閾值算法和SSE2算法可得到帶背景且抽取了微粒的二值圖像。通過分別計(jì)算子區(qū)域的微粒數(shù)，可得到微粒分布情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該緊湊型設(shè)備可滿足大口徑光學(xué)元件的檢測要求，過程高效，結(jié)果準(zhǔn)確。(中科院自動化所)

Determinationofeightpesticideresiduesinricebygelpermeationchromatography(GPC)combinedwithliquidchromatography-tandemmass(LC-MS/MS).

LiuYing1,GaoFeng1,FanFei1,LiuLaifu1*,JinXiaojing2,ChenXiangbin2,QiNa2,PiNa2

(1.BeijingEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau,Beijing100026,China;2.PreeKemScientificInstrumentsCo.,Ltd.,Shanghai201108,China)

The rice samples were extracted by acetonitrile under ultrasonic, and the extract was purified by GPC to remove macromolecular impurities, then followed by LC-MS/MS analysis. The result showed that the recovery was 71.3%-111.1% with relative standard deviation of 3.64%-12.76% with spiked level of 0.2 μg. The method was simple and accurate with high automation and extraction efficiency. It was suitable for routine detection of the pesticide residues in rice.

gel permeation chromatography; LC-MS/MS; pesticide residues; rice

北京市科技計(jì)劃課題《國產(chǎn)分析儀器驗(yàn)證與綜合評價市場化推廣研究與實(shí)踐》(Z161100003016006)資助。

10.3969/j.issn.1001-232x.2017.06.030