來福

(1.北京出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心, 北京 100026;2.上海屹堯儀器科技發(fā)展有限公司，上海 201108)

加速溶劑萃取-凝膠滲透色譜-氣相色譜質(zhì)譜測定茶葉中7種農(nóng)藥殘留

孔維恒1劉鑫1云環(huán)1高峰1劉來福1陳向斌2齊娜2金曉靜2皮娜2

(1.北京出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心, 北京 100026;2.上海屹堯儀器科技發(fā)展有限公司，上海 201108)

建立加速溶劑萃取-凝膠滲透色譜-氣相色譜質(zhì)譜法測定茶葉中7種農(nóng)藥殘留的分析方法。樣品用乙腈-二氯甲烷(V/V，1/1)作為溶劑，利用加速溶劑提取儀提取，提取液經(jīng)過凝膠滲透色譜除去大分子雜質(zhì)后，供GC/MS分析。添加濃度為0.5 μg時(shí)，回收率為79.2%～100.8%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.15%～13.34%，方法具有自動(dòng)化程度高、萃取效率高、凈化效果好、精密度好，分析快速等優(yōu)點(diǎn)，適用于茶葉中農(nóng)藥殘留的日常檢測工作。

加速溶劑萃取 凝膠滲透色譜 GC/MS 農(nóng)藥 茶葉

1 概述

茶葉以其抗癌、抗氧化、消除人體自由基等獨(dú)特的保健功效，深受世人喜愛，已成為僅次于碳酸飲料和飲用水的世界第三大飲料。另一方面，隨著人民生活水平的目益提高，人們對茶葉中農(nóng)藥殘留等質(zhì)量安全問題給予了高度關(guān)注。

加速溶劑萃取(ASE)是近幾年出現(xiàn)的新的萃取技術(shù)。具有溶劑用量少，萃取時(shí)間短，萃取效率高的突出優(yōu)點(diǎn)，是美國EPA的標(biāo)準(zhǔn)方法之一。然而，由于茶葉含有大量的色素、生物堿及酚類化合物等脂溶性物質(zhì)，它們會(huì)在分析中形成干擾，降低分析儀器的靈敏度和使用壽命，從而影響最終分析結(jié)果，因此，樣品萃取后，必須進(jìn)一步進(jìn)行凈化處理。

凝膠滲透色譜(GPC)是利用多孔的凝膠聚合物將化合物按分子空間結(jié)構(gòu)差異(分子量大小)進(jìn)行選擇性分離，不能進(jìn)入凝膠孔隙的分子會(huì)很快隨流動(dòng)相洗脫，而能夠進(jìn)入凝膠孔隙的分子，則需要更長時(shí)間的沖洗時(shí)間才能夠流出固定相，從而實(shí)現(xiàn)對不同組分的分離。利用加速溶劑萃取提取茶葉樣品，提取液經(jīng)過凝膠滲透色譜凈化，利用氣相色譜-質(zhì)譜(GC/MS)進(jìn)行定性定量分析，建立了茶葉中7種農(nóng)藥殘留的分析方法。

2 材料與方法

2.1 樣品

實(shí)驗(yàn)用茶葉樣品經(jīng)粉碎機(jī)粉碎后，混勻，密封，常溫下保存，備用。

2.2 儀器與試劑

儀器：上海屹堯儀器科技發(fā)展有限公司FLEXI 全自動(dòng)凝膠滲透色譜儀(配有400mm×25mm(內(nèi)經(jīng))，內(nèi)裝BIO-Beads S-X3填料的凈化柱)，用于樣品中大分子雜質(zhì)的凈化；氣相色譜-質(zhì)譜儀，配有電子轟擊離子源(EI)；分析天平，感量為0.0001g；離心機(jī)，最大轉(zhuǎn)速為10000 r/min。

試劑：水為GB/T 6682規(guī)定的一級水；環(huán)己烷：色譜純；乙酸乙酯：色譜純；乙腈：色譜純；二氯甲烷：色譜純；正己烷：色譜純；乙酸乙酯+環(huán)己烷(1+1，體積比)；乙腈-二氯甲烷(1+1，v：v)；毒死蜱、殺螟硫磷、三氯殺螨醇、水胺硫磷、三唑磷、氯氰菊酯、溴氰菊酯單個(gè)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液100 mg/L；微孔過濾膜(尼龍)。

2.3 方法建立

稱取5 g磨碎均勻的茶葉樣品，移入加速溶劑萃取的34 mL萃取池中，用乙腈-二氯甲烷作提取溶劑，在10.34 MPa壓力、100℃條件下，加熱5 min，靜態(tài)萃取5 min，循環(huán)1次。然后用池體積60%的乙腈-二氯甲烷沖洗萃取池，氮?dú)獯祾?00 s。萃取完畢，將萃取液轉(zhuǎn)移到100 mL梨形瓶，40℃水浴中減壓濃縮至近干，然后用適量乙酸乙酯+環(huán)己烷(1+1)溶解殘?jiān)筠D(zhuǎn)移至10 mL容量瓶，用乙酸乙酯+環(huán)己烷(1+1)定容至10 mL，溶液高速離心后過0.45 μm濾膜，待凝膠色譜凈化。

凝膠滲透色譜凈化條件，見表1、表2。

表1 全自動(dòng)凝膠凈化方法程序表(進(jìn)樣) 流速：5mL/min

表2 全自動(dòng)凝膠凈化方法程序表(收集)

收集液于40℃水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至約5mL，將濃縮液轉(zhuǎn)移至15mL離心管中，氮吹濃縮至近干，加入1 mL的正己烷溶解殘?jiān)靹?，供氣相色譜-質(zhì)譜測定。

氣相色譜-質(zhì)譜條件：色譜柱：DB-5MS 30m×0.25mm×0.25μm；柱溫(程序升溫)：70℃保持3分鐘，15℃每分鐘升到180℃，保持2min，10℃每分鐘升到280℃，保持10min；進(jìn)樣口溫度：250 ℃；進(jìn)樣口壓力：77 kPa。流速：1.0 mL/min；分流比：不分流；進(jìn)樣量：1.0 μL。

2.4 線性關(guān)系

5 mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：

分別從濃度為100 mg/L的毒死蜱、殺螟硫磷、三氯殺螨醇、水胺硫磷、三唑磷、氯氰菊酯、溴氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液中，各移取0.5 mL于10mL容量瓶中，正己烷定容至刻度，配制成濃度為5mg/L的10種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，避光，0～4℃保存。

基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液配制：

用空白樣品基質(zhì)溶液配制成濃度分別為0.03，0.05，0.1，0.2，0.3mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，用于標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制。具體結(jié)果見表3。

表3 7種農(nóng)藥線性方程

2.5 加標(biāo)回收率

在茶葉樣品中加入0.5 μg的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，重復(fù)進(jìn)樣7次，采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量，檢測數(shù)據(jù)及RSD見表4。

表4 7種農(nóng)藥測定結(jié)果

續(xù)表4

3 結(jié)論

使用國產(chǎn)凝膠凈化系統(tǒng)對茶葉中7中農(nóng)藥殘留進(jìn)行了提取，使用建立了使用凝膠色譜-氣相色譜-質(zhì)譜法檢測茶葉中農(nóng)藥殘留的方法。該方法具有自動(dòng)化程度高，萃取效率高、凈化效果好、精密度好，分析快速等優(yōu)點(diǎn)，適用于茶葉中農(nóng)藥殘留的日常檢測工作。

[1] GPC-SPE凈化/GC-MS測定茶葉中的有機(jī)磷殘留；王耀(東莞市海洋與漁業(yè)環(huán)境監(jiān)測站)

[2] GBT 23376-2009 茶葉中農(nóng)藥多殘留測定 氣相色譜/質(zhì)譜法

DeterminationofsevenpesticideresiduesinteabyGC/MScombinedwithdomesticgelpermeationchromatographcleanup.

KongWeiheng1,LiuXin1,YunHuan1,GaoFeng1,LiuLaifu1ChenXiangbin2,QiNa2,JinXiaojing2,PiNa2

(1.BeijingEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau,Beijing100026,China; 2.PreeKemScientificInstrumentsCo.,Ltd.,Shanghai201108,China;)

Acetonitrile-DCM (V/V,1/1) was employed as the solvent in accelerated solvent extraction. The extraction was purified by gel permeation chromatography (GPC) to remove macromolecular impurities and then followed by GC/MS analysis. The results showed that the recoveries were within 79.2%-100.8% and the RSD results were in the range of 3.15%-13.34% based on 0.5 μg standard addition. The method is fast，accurate，highly automated and applicable in daily tea analysis.

accelerated solvent extraction; gel permeation chromatography, GC/MS; pesticide; tea

國產(chǎn)分析儀器驗(yàn)證與綜合評價(jià)市場化推廣研究與實(shí)踐(Z161100003016006)

10.3969/j.issn.1001-232x.2017.05.032

2017-08-25

孔維恒，北京出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心。

劉來福，北京出入境檢驗(yàn)檢疫局科技處。