葉小玲，胡曉敏 ，朱 軍 ，唐偉洲 ，鄭珂媛 ，鄧小梅

（1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 林學(xué)與風(fēng)景園林學(xué)院，廣東省森林植物種質(zhì)創(chuàng)新與應(yīng)用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州510642；2.廣州天適集團(tuán)有限公司，廣東 廣州 510335；3.廣州旺地園林工程有限公司，廣東 廣州510335；4.廣州紅樹林生態(tài)科技有限公司，廣東 廣州 510335）

大島櫻優(yōu)良單株的組織培養(yǎng)與快速繁殖

葉小玲1，2，胡曉敏1，3，朱 軍4，唐偉洲1，鄭珂媛2，鄧小梅1

（1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 林學(xué)與風(fēng)景園林學(xué)院，廣東省森林植物種質(zhì)創(chuàng)新與應(yīng)用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州510642；2.廣州天適集團(tuán)有限公司，廣東 廣州 510335；3.廣州旺地園林工程有限公司，廣東 廣州510335；4.廣州紅樹林生態(tài)科技有限公司，廣東 廣州 510335）

以大島櫻成年優(yōu)良單株‘小喬’櫻的半木質(zhì)化嫩枝為外植體，通過基本培養(yǎng)基設(shè)置、不同激素成份及濃度水平配比優(yōu)化，建立其高效、穩(wěn)定的離體植株再生技術(shù)。結(jié)果表明:最佳腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:改良MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L＋瓊脂6 g/L，腋芽誘導(dǎo)快，誘導(dǎo)率達(dá)100%；較好的增殖培養(yǎng)基為：改良MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L + 蔗糖30 g/L＋瓊脂6 g/L，15 d增殖系數(shù)可達(dá)4.56；最適宜的生根培養(yǎng)基為：改良MS +NAA 1.0 mg/L + 蔗糖15 g/L＋瓊脂6 g/L，15 d生根率達(dá)100%。煉苗后，用混合基質(zhì)（泥炭土∶黃泥∶蛭石=2∶1∶1）移栽，成活率在90%以上，40 d后苗高達(dá)7～8 cm。該技術(shù)各項(xiàng)指標(biāo)已達(dá)苗木快速繁育的要求，可直接應(yīng)用于規(guī)?；a(chǎn)，經(jīng)濟(jì)效益巨大。

大島櫻；組織培養(yǎng)；基本培養(yǎng)基；快速繁殖

大島櫻Cerasus speciosa隸屬薔薇科Rosaceae櫻屬Cerasus，原產(chǎn)日本，主要分布在伊豆半島。大島櫻既是良好的觀賞植物，亦是傳統(tǒng)食材。其葉片具有特殊芳香氣味，是日本人喜愛的傳統(tǒng)食品材料，市場供不應(yīng)求，寄望于通過進(jìn)口櫻葉滿足本國市場需求。鑒于大島櫻的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，廣東佛山市林科所和都江堰市先后從日本引種栽培，用于園林觀賞和收葉加工成半成品返銷日本。由于引種環(huán)境條件、繁殖及栽培技術(shù)等因素的影響，一直制約著其栽植規(guī)模?！獭瘷咽菑拇髰u櫻中選育出的適合廣東地區(qū)種植的優(yōu)良觀賞品種，其花芳香，2～5 朵一束；花瓣白色、邊緣或帶紅暈；花徑3.0～3.8 cm；花期 2月下旬至 3 月中下旬?！獭瘷严矚g微酸性土壤、喜水、喜肥、喜陽光，但忌積水，最適生長溫度為 15～28 ℃，在廣州、深圳、從化、東莞、清遠(yuǎn)、韶關(guān)等地生長良好，花開旺盛，成為華南地區(qū)觀賞櫻花的重要品種，開發(fā)前景廣闊[1]。

‘小喬’櫻可采用種子育苗，但由于結(jié)實(shí)率低，發(fā)芽率低于30%[2]，且實(shí)生苗性狀分化大，不穩(wěn)定。生產(chǎn)上還可通過扦插進(jìn)行繁殖，且嫩枝扦插成活率大大高于硬枝扦插成活率[2-3]，但‘小喬’櫻繁育過程中扦插成活率極低、擴(kuò)繁速度慢，嚴(yán)重制約著其快速推廣。故以‘小喬’櫻為母株進(jìn)行組培規(guī)?；?，實(shí)現(xiàn)良種無性化推廣，是‘小喬’櫻產(chǎn)業(yè)化開發(fā)的重要途徑。

目前，有關(guān)大島櫻的組織培養(yǎng)技術(shù)報(bào)道僅兩篇[4-5]，報(bào)道所述大島櫻的組培技術(shù)相同，主要區(qū)別在于所用母株材料不同，前者為實(shí)生小苗，后者為扦插小苗或一年生組培苗。從以上研究報(bào)道中可見，大島櫻組織培養(yǎng)技術(shù)尚存在以下不足：①組培用的母株材料為實(shí)生小苗、扦插或組培小苗，不是經(jīng)過長期選擇的成年優(yōu)樹；②繼代周期長，需25～30 d；③繼代培養(yǎng)的芽小，僅5～10 mm高，不能直接用于生根培養(yǎng)；④生根培養(yǎng)過程復(fù)雜，效率低，需先將繼代小芽進(jìn)行壯芽培養(yǎng)10～15 d后，再轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，壯苗率低，僅有60%的繼代芽能伸長；⑤繼代芽衰退快，繼代15～16次后，增殖率減小，繼代芽質(zhì)量下降，需重新更換材料。⑥應(yīng)用該技術(shù)進(jìn)行組培快繁，速度慢，成本高，難以實(shí)現(xiàn)規(guī)?；?；⑦幼樹與成年大樹的生理狀態(tài)不同，以幼樹為母株材料的組培方案不一定能適用于成年大樹。經(jīng)驗(yàn)證，利用該組織培養(yǎng)方案對‘小喬’成年優(yōu)樹當(dāng)年生半木質(zhì)化嫩枝進(jìn)行組織培養(yǎng)，增殖培養(yǎng)的芽伸長慢、質(zhì)量差、增殖倍率低，玻璃化現(xiàn)象嚴(yán)重、生根率低，技術(shù)不穩(wěn)定。本文針對‘小喬’櫻現(xiàn)有組織培養(yǎng)技術(shù)存在困難和技術(shù)問題，探索出一套 ‘小喬’櫻的高效離體植株再生方法，解決了培養(yǎng)中出現(xiàn)的問題，為‘小喬’櫻無性快繁工廠化育苗提供了有力的理論與實(shí)踐基礎(chǔ)，通過規(guī)?；邕M(jìn)行無性化推廣，進(jìn)而為廣東乃至華南地區(qū)園林綠化、美化所需優(yōu)質(zhì)櫻花種苗的繁殖提供技術(shù)支撐，經(jīng)濟(jì)效益巨大。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料取自定植于廣州天適集團(tuán)有限公司韶關(guān)湞江基地樹齡10年以上的大島櫻（C.speciosa）優(yōu)株‘小喬’櫻。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 外植體處理及不定芽誘導(dǎo)

采集外植體前，每隔10 d 用百菌清、多菌靈交替噴灑‘小喬’櫻萌枝4～5次，選擇天氣晴朗的上午，剪取當(dāng)年生健壯新梢為外植體，將新梢除葉，用純凈水清洗干凈，在超凈工作臺上將枝條分段，先用無菌水清洗干凈，再用0.5%新吉爾滅溶液浸泡7 min，倒掉后用無菌水沖洗3次，加入70%的酒精水溶液，浸泡30 s，倒掉酒精水溶液用無菌水清洗干凈后，再加入0.1%升汞溶液，視材料幼嫩程度浸泡1～5 min，期間不斷搖動，倒掉升汞溶液后用無菌水沖洗5～6次。將莖段葉柄和受傷部位切除，除去托葉，并切成2 cm帶葉腋莖段接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基（見表1）。每瓶接種一個(gè)外植體，每個(gè)處理100瓶。培養(yǎng)條件：溫度（25±2） ℃，光照強(qiáng)度 60 μmol/(m2·s)，光照時(shí)間12 h/d（下同）。20 d后，觀察不定芽誘導(dǎo)狀況，統(tǒng)計(jì)誘導(dǎo)率： 誘導(dǎo)率=（萌芽外植體數(shù)/接種外植體數(shù)）×100%（污染外植體剔除）。

1.2.2 增殖培養(yǎng)

將誘導(dǎo)出的腋芽截成1.0～1.5 cm的莖段轉(zhuǎn)接入增殖培養(yǎng)基，重復(fù)繼代，不斷增殖。（1）不同基本培養(yǎng)基篩選：采用1/2改良MS 、改良MS、MS、B5和WPM共5種不同的基本培養(yǎng)基，均添加6-BA 1.5 mg/L、NAA 0.1 mg/L。（2）不同細(xì)胞分裂素篩選：以改良MS為基本培養(yǎng)基，通過單因子試驗(yàn)，比較6-BA、ZT、KT這3種細(xì)胞分裂素對‘小喬’櫻增殖的影響，均添加生長素NAA 0.1 mg/L，分裂素各設(shè)4個(gè)水平：（0.1、0.5、1.0、2.0）mg/L共12組處理。以上增殖培養(yǎng)添加蔗糖30 g/L，瓊脂6 g/L。每個(gè)處理10瓶，每瓶6個(gè)芽，重復(fù)3次。15 d后統(tǒng)計(jì)增殖系數(shù)并記錄生長情況。

1.2.3 生根培養(yǎng)

從增殖苗中選取生長健壯的有效芽（芽高≥2 cm）轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，誘導(dǎo)不定根。以1/2改良或改良MS為基本培養(yǎng)基，添加不同濃度的（0.2、0.5、0.7、1.0、1.5 mg/L）NAA、 蔗 糖15 g/L、瓊脂6.0 g/L每個(gè)處理接種5瓶，每瓶接種10株，重復(fù)3次。15 d后統(tǒng)計(jì)生根率和生長情況，生根率=（生根苗數(shù)/接種苗數(shù)）×100%。

1.2.4 煉苗和移栽

將生根瓶苗移至溫室煉苗5～7 d，煉苗后將組培瓶蓋從半開到全開適應(yīng)外界環(huán)境1 d，移栽前將瓶中幼苗小心取出，洗凈根上黏附的培養(yǎng)基，移植到填滿泥炭土∶黃泥∶蛭石=2∶1∶1（體積比）混合基質(zhì)的育苗杯中，每杯種植一株苗，覆土深度剛好蓋住根系，一般不超過1 cm，壓實(shí)基質(zhì)，使苗根和基質(zhì)緊密接觸，移植完成后淋透定根水。前一個(gè)星期覆膜保濕，并加蓋遮陽網(wǎng)，第10 d可移去遮陽網(wǎng)。一個(gè)月后統(tǒng)成活率。

2 結(jié)果與分析

2.1 不定芽誘導(dǎo)

表1和觀察發(fā)現(xiàn)，改良MS培養(yǎng)基上的外植體不定芽誘導(dǎo)效果最好、萌動早，褐化率最低，在6%以下；MS培養(yǎng)基上的外植體萌動最晚，褐化率較嚴(yán)重，高達(dá)29%，部分甚至死亡，可能是培養(yǎng)基中無機(jī)鹽離子濃度過高所致；1/2MS培養(yǎng)基上的外植體褐化較少，前期誘導(dǎo)效果較好，但芽長勢一般，葉色偏黃，頂芽有枯死現(xiàn)象，可能是培養(yǎng)基中某些營養(yǎng)成分不足所致。綜上，改良MS適合作為‘小喬’櫻不定芽誘導(dǎo)的基本培養(yǎng)?；九囵B(yǎng)基只能保證培養(yǎng)目標(biāo)的生存和最低生理活動所需，需要配合適當(dāng)?shù)闹参锷L調(diào)節(jié)劑才能啟動細(xì)胞分裂、形態(tài)建成、器官分化和發(fā)育等。6-BA濃度在1.0～2.0 mg/L之間均能誘導(dǎo)不定芽，但最適宜濃度為1.5 mg/L，此時(shí)芽萌動最早，葉翠綠平展，過高容易導(dǎo)致?；?，過低則不利于芽的誘導(dǎo)。較適宜的NAA濃度為0.1 mg/L，過高易導(dǎo)致愈傷組織的形成。綜上，‘小喬’櫻的最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為改良MS+ 6-BA 1.5 mg/L +NAA 0.1 mg/L，此處理芽萌動最早，芽粗壯，葉翠綠平展（見圖1-a），誘導(dǎo)率高達(dá)100%。

表1 不同基本培養(yǎng)基及激素對不定芽誘導(dǎo)的影響Table 1 Effects of different basic medium and hormone on on adventitious bud inducing

2.2 增殖培養(yǎng)

2.2.1 不同基本培養(yǎng)基的篩選

表2和觀察表明，基本培養(yǎng)基對‘小喬’櫻增殖影響很大，改良MS、MS、B5和WPM增殖系數(shù)差異極顯著。改良MS上‘小喬’櫻增殖效果最好，增殖系數(shù)最大，達(dá)3.13，苗最高，達(dá)3.6 cm；1/2改良MS上增殖系數(shù)較高，但增殖苗葉色偏黃、芽細(xì)弱，可能是培養(yǎng)基中無機(jī)養(yǎng)分過低而致；B5和WPM培養(yǎng)基上增值系數(shù)和芽高居中，但芽長勢差；MS上增殖系數(shù)最低，芽粗壯矮小，芽高度小于1.2 cm（見圖1-c）。綜上，改良MS最適合作為‘廣州’櫻增殖的基本培養(yǎng)。

表2 不同基本培養(yǎng)基對增殖的影響?Table 2 The effect of different basal medium on proliferation

2.2.2 不同細(xì)胞分裂素對增殖的影響

表3和觀察表明，不同細(xì)胞分裂素對‘小喬’櫻的增殖系數(shù)的影響很大。在添加6-BA培養(yǎng)基上，腋芽萌動早，在第3 d左右出現(xiàn)肉眼小芽點(diǎn)，腋芽生長速度快。6-BA濃度在0.1～2.0 mg/L，隨著6-BA濃度的增大，芽數(shù)增多，但增殖系數(shù)則先上升后下降，當(dāng)6-BA濃度為1.0 mg/L時(shí)，‘小喬’櫻的增殖系數(shù)最高達(dá)4.56，芽多、莖粗壯（見圖1-b）。而在添加ZT、KT培養(yǎng)基上的芽相對較小，增殖苗腋芽萌發(fā)性均較差，第7 d才出現(xiàn)一些小芽點(diǎn)，且出芽不整齊，芽生長較慢。在添加ZT和KT的培養(yǎng)基上，‘小喬’櫻的增殖系數(shù)均隨著ZT或KT的濃度的增加先增后減，最適合的ZT和KT濃度均為0.5 mg/L。從增殖系數(shù)來看，6-BA對‘廣州’櫻增殖效果的作用明顯優(yōu)于ZT和KT的作用。綜上，在增殖培養(yǎng)基中使用分裂素6-BA、ZT或KT，有利于‘小喬’櫻不定芽的增殖，最適合的分裂素為6-BA，最適宜濃度為1.0 mg/L。

表3 不同細(xì)胞分裂素及濃度對增殖效果的影響?Table 3 Effects of various cytokinins and levels on proliferation

2.3 生根培養(yǎng)及移栽

由表4可知，同等激素水平下，以改良1/2MS或改良MS作為基本培養(yǎng)，生根率差異不顯著，但以改良MS為基本培養(yǎng)的苗生長表現(xiàn)更好，可見改良MS最適合作為‘小喬’櫻生根的基本培養(yǎng)基。不同NAA濃度對生根率影響極顯著。將芽接種到含不同濃度NAA的生根培養(yǎng)基上，5～6 d都開始生根。NAA濃度為0.2 mg/L時(shí)，根細(xì)長、植株矮??；隨著NAA濃度的升高，根由細(xì)變粗。NAA濃度為1.0 mg/L時(shí)，植株根系發(fā)達(dá)，葉色翠綠，生長狀況好；當(dāng)NAA濃度達(dá)到1.5 mg/L時(shí)，植株葉片出現(xiàn)卷曲，根系粗短，基部愈傷組織較多。綜上，‘小喬’櫻最佳生根培養(yǎng)基為改良MS+NAA 1.0 mg/L，生根率可達(dá)100%，植株健壯，苗生長快，葉翠綠平展，根系發(fā)達(dá)（見圖1-d、e）。

‘小喬’櫻組培生根苗煉苗5～7 d后移栽到裝有消毒好混合基質(zhì)的育苗袋中，移栽后4～5 d新根萌發(fā)，7 d左右新葉萌發(fā)，40 d后苗高達(dá)7～8 cm （見圖1-f），移栽成活率高于90%。

表4 不同基本培養(yǎng)基及NAA濃度對生根的影響?Table 4 Effects of different basic medium and NAA concentration on rooting

圖1 ‘小喬’櫻組培快繁體系的建立Fig.1 Establishment of tissue culture and rapid micropropagation system of C. speciosa ‘Xiaoqiao’

3 結(jié)論與討論

脫毒是植物組織組織培養(yǎng)關(guān)鍵環(huán)節(jié)，隨著植物材料年齡的增長，誘導(dǎo)過程污染會更加嚴(yán)重[6]?！獭瘷褬潺g10年以上，且長期定植于戶外，外植體帶菌多，脫毒是其組織培養(yǎng)的關(guān)鍵所在。本研究通過外植體采集前多次噴灑殺菌劑結(jié)合三重消毒（0.5%新吉爾7 min+70%的酒精30 s+0.1%升汞1～5 min）將污染率控制在15%以內(nèi)。這與劉頌頌等和周志堅(jiān)等研究結(jié)果一致。通過兩重或多重消毒消毒降低污染率，這在很多植物組織培養(yǎng)中都有報(bào)道，如：‘紅葉櫻花’[7]、福建山櫻花[8]、凹葉厚樸[9]、油茶[10]等。

MS是櫻花組培最常見的基本培養(yǎng)基[11-14]，也是大島櫻組培中的最適基本培養(yǎng)基[4-5]。本研究表明，MS并不適合大島櫻優(yōu)株‘小喬’櫻的組織培養(yǎng)，這可能是基因型不同所致，這與Anna Kalinina等觀點(diǎn)一致[15]。MS可能因其無機(jī)鹽濃度過高，導(dǎo)致‘小喬’櫻誘導(dǎo)中的褐變甚至死亡，影響了增殖過程中增殖芽的生長分化。本研究通過改良MS有效的解決了組培過程中褐化和增殖慢等問題，外植體的腋芽誘導(dǎo)速度快，誘導(dǎo)率高達(dá)100%。增殖芽生長快且穩(wěn)定，15 d芽高達(dá)3～4 cm，增殖系數(shù)達(dá)4.56以上。

細(xì)胞分裂素在‘小喬’櫻的誘導(dǎo)和繼代培養(yǎng)中具有重要作用。常見細(xì)胞分裂素中6-BA較KT、ZT更適合于‘小喬’櫻的增殖培養(yǎng)，這與大島櫻增殖培養(yǎng)適用分裂素KT不同[4-5]?！獭瘷牙^代中，芽數(shù)隨著6-BA（0.1～2.0 mg/L）濃度升高而增多，而增殖系數(shù)卻先增后減，最適宜6-BA濃度為1.0 mg/L，6-BA濃度不宜過大，當(dāng)6-BA濃度超過2 mg/L時(shí)，繼代苗容易發(fā)生玻璃化。

‘小喬’櫻不定根誘導(dǎo)適用NAA，這與劉頌頌等和周志堅(jiān)等在大島櫻生根培養(yǎng)中適用IBA的研究結(jié)果不同?！獭瘷焉囵B(yǎng)中單獨(dú)使用NAA生根效果好（15 d生根率達(dá)100%，根系粗壯，苗健壯），無需配合IBA，這與大多數(shù)櫻花組培中不同[8，13，16]。

綜上所述，本研究解決了‘小喬’櫻組織培養(yǎng)中存在的困難和技術(shù)問題，探索出一套‘小喬’櫻的高效離體植株再生方法，為其工廠化育苗提供了有力的理論與實(shí)踐基礎(chǔ)，也為其它櫻屬植物開發(fā)利用、工廠化育苗和種質(zhì)試管保存提供理論依據(jù)。組培苗的移栽及管理技術(shù)也是植物組織培養(yǎng)過程中一個(gè)關(guān)鍵所在，直接關(guān)系到組培育苗的成活率和組培苗的質(zhì)量。組培苗的移栽涉及很多方面，本項(xiàng)試驗(yàn)僅就移栽基質(zhì)開展了相關(guān)研究，今后還將在移栽時(shí)期、各階段肥水需求、環(huán)境控制等方面進(jìn)行更加深入細(xì)致研究。櫻花的不同種（品種）、不同品系，甚至不同基因型個(gè)體之間生理狀態(tài)不同，組培效果表現(xiàn)不一。今后還將通過對其不定根再生過程的細(xì)胞學(xué)、解剖學(xué)觀察，與生根有關(guān)的POD、IAAO、PPO等酶活性的動態(tài)變化測定，與不定根發(fā)生相關(guān)的內(nèi)源IAA、ABA、ZT等激素含量變化測定等，探討櫻花組培苗不定根發(fā)生及其調(diào)控機(jī)理，為櫻花組培奠定理論基礎(chǔ)。

[1]葉超宏,陳家艷,胡曉敏,等.廣東適生櫻花及其園林應(yīng)用[J].廣東園林,2014,36(5):59-61.

[2]左文霞.大島櫻引種和扦插繁殖生產(chǎn)試驗(yàn)研究[J].湖北林業(yè)科技,1998(106):21-23.

[3]張華通,林曉萍,周麗華,等.大島櫻組培苗嫩枝扦插育苗技術(shù)[J].廣東林業(yè)科技,2001,17(2):25-28.

[4]劉頌頌,招曉東,葉永昌,等.大島櫻的工廠化育苗技術(shù)[J].廣東林業(yè)科學(xué),1996,12(4): 40-44.

[5]周志堅(jiān),翟應(yīng)昌,周麗華,等.大島櫻的組織培養(yǎng)與繁殖[J].廣東林業(yè)科技,1994(1):1-6.

[6]Enjalric F, Carron MP, Lardet L. Contamination of primary cultures in tropical areas: the case of Hevea brasiliensis[J].Acta Hortic, 1988, 225: 57-66.

[7]李艷敏,孟月娥,趙秀山,等.‘紅葉櫻花’的組織培養(yǎng)和快速繁殖[J].植物生理學(xué)通訊,2008,44(6):1163-1164.

[8]呂月良,陳 璋,施季森,等.福建山櫻花不定芽誘導(dǎo)和植株再生規(guī)模化繁殖試驗(yàn)[J].南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2006, 30(3):105-108.

[9]宋 榮, 馬英姿, 張 慧, 等. 凹葉厚樸離體培養(yǎng)研究[J]. 中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報(bào), 2011, 31 (7): 179-182.

[10]王 瑞,陳永忠,王湘南,等.油茶組培苗高效增殖體系的建立[J].中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報(bào),2015,35(10): 40-43.

[11]黃守印,池井存,蘇淑欣,等.霧靈山地區(qū)野生櫻花的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J].植物生理學(xué)通訊,2003,39(3): 228.

[12]王賢榮,榮冬青.鐘花櫻組織培養(yǎng)中多因子正交實(shí)驗(yàn)研究[J].安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2008,35(2):169-173.

[13]榮冬青,王賢榮.垂枝早櫻‘紅枝垂’組培快繁試驗(yàn)[J].林業(yè)科技開發(fā),2008,22(5):72-75.

[14]陳志偉,汪小飛,伊賢貴,等.微毛櫻離體快繁初步研究[J].福建林學(xué)院學(xué)報(bào),2011,31(4):349-353.

[15]Anna Kalinina, Daniel CW Brown. Micropropagation of ornamentalPrunusspp. and GF305 peach, a Prunus viral indicator[J]. Plant Cell Reports, 2007, 26(7): 927-935.

[16]朱育端.東京櫻花組培快繁技術(shù)研究[J].林業(yè)勘察設(shè)計(jì),2012(1): 158-160.

Tissue culture and rapid micropropagation of superior individual ofCerasus speciosa

YE Xiaoling1,2, HU Xiaomin1,3, ZHU Jun4, TANG Weizhou1, ZHENG Keyuan2, DENG Xiaomei1
(1.College of Forestry and Landscape Architecture, Guangdong Key Laboratory for Innovative Development and Utilization of Forest Plant Germplasm, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China; 2. Tianshi Group CO.,LTD., Guangzhou 510335, Guangdong, China; 3. Wangdi Landscape Architecture CO., LTD., Guangzhou 510335, Guangdong,China; 4. Mangrove Ecological Technology CO., LTD., Guangzhou 510335, Guangdong, China)

Study on tissue culture ofC. speciosa‘Xiaoqiao’ was carried out by using the late and half lignificational stems as explants. A high effective and stable plant regeneration technology ofC. speciosa‘Xiaoqiao’ was established through the optimization of basic medium setting, different hormone levels and composition ratio. The results showed that the optimal inducing medium was modi fi ed MS+ 6-BA 1.5 mg/L +NAA 0.1 mg/L+ sucrose 30 g/L+ Gelatin 6g/L; The optimal multiplication medium was modi fi ed MS+6-BA1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L+ sucrose 30 g/L+ Gelatin 6 g/L, the multiplication rate is 4.56 after 15 d; The optimal rooting medium was modi fi ed MS +NAA 1.0 mg/L + sucrose 15 g/L+Gelatin 6 g/L, rooting rate can reach 100% within 15 d. The transplanting matrix were peat, yellow mud and vermiculite (2:1:1), and the corresponding transplanting survival rate was over 90%, the height of seedlings was up to 7-8 cm 40 days after transplanting. All the indicators of this technology have reached the requirements of rapid propagation, it can be directly applied to large-scale production and will have enormous economic bene fi ts

Cerasus speciosa; tissue culture; basal medium; rapid propagation

S723.1+32

A

1673-923X(2017)11-0051-05

10.14067/j.cnki.1673-923x.2017.11.009

2016-04-02

廣州市珠江科技新星專項(xiàng)（201710010175）；廣州市中小型企業(yè)創(chuàng)新專項(xiàng)（2017010160431）

葉小玲，工程師，碩士

鄧小梅，教授，博士；E-mail：dxmei2006@scau.edu.cn

葉小玲，胡曉敏，朱 軍，等.大島櫻優(yōu)良單株的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J].中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2017, 37(11): 51-55.

[本文編校：吳 毅]