孫冬月+王曉婷+王馨雅+高慧

摘要：目的 通過香薷?jìng)鹘y(tǒng)切制與產(chǎn)地加工炮制一體化工藝的對(duì)比，為香薷產(chǎn)地加工炮制一體化技術(shù)實(shí)施提供可行性依據(jù)。方法 以軟化時(shí)間、切制段長(zhǎng)、烘干溫度作為傳統(tǒng)切制工藝的考察因素，以切制段長(zhǎng)、烘干溫度、烘干時(shí)間作為產(chǎn)地加工炮制一體化工藝的考察因素，采用L9（34）正交試驗(yàn)，以香荊芥酚、麝香草酚、揮發(fā)油含量為綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)，分別優(yōu)化傳統(tǒng)切制和產(chǎn)地加工炮制一體化工藝，并對(duì)2個(gè)優(yōu)選出的工藝進(jìn)行對(duì)比研究。采用Agilent 1200型高效液相色譜儀、ECOSIL-C18色譜柱測(cè)定香荊芥酚和麝香草酚含量，以乙腈-0.2%醋酸水溶液為流動(dòng)相，梯度洗脫，波長(zhǎng)274 nm，流速1.0 mL/min，進(jìn)樣量20 ?L。按照2015年版《中華人民共和國(guó)藥典》揮發(fā)油測(cè)定法甲法測(cè)定揮發(fā)油含量。結(jié)果 優(yōu)化的香薷?jìng)鹘y(tǒng)切制工藝為：3倍量水淋潤(rùn)軟化1 h，切制1.0 cm，50～60 ℃烘干；優(yōu)化的香薷產(chǎn)地加工炮制一體化工藝為：趁鮮切制1.0 cm，50～60 ℃干燥36 h。香薷產(chǎn)地加工炮制一體化最佳工藝條件下測(cè)得的香荊芥酚、麝香草酚、揮發(fā)油含量均高于傳統(tǒng)切制工藝。結(jié)論 產(chǎn)地加工炮制一體化技術(shù)簡(jiǎn)單方便，能彌補(bǔ)傳統(tǒng)切制工藝繁瑣、有效成分易流失等不足，切實(shí)可行。

關(guān)鍵詞：香薷；產(chǎn)地加工炮制一體化；香荊芥酚；麝香草酚；揮發(fā)油

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2017.12.018

中圖分類號(hào)：R283.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1005-5304（2017）12-0072-05

Comparative Study on Traditional Cutting Processing and Integration Processing of Origin of Moslae Herba SUN Dong-yue， WANG Xiao-ting， WANG Xin-ya， GAO Hui （College of Pharmacy， Liaoning University of Traditional Chinese Medicine， Dalian 116600， China）

Abstract： Objective To provide the feasible basis for the implementation of integration processing technology of origin of Moslae Herba by comparing the traditional cutting processing and integration processing of origin of Moslae Herba. Methods Taking the softening time， the length of cutting section and the drying temperature as the investigation factors of the traditional cutting processing， and the cutting length， drying temperature and drying time as the investigation factors of the integration processing of origin， L9（34） orthogonal test was used. Carvacrol， thymol， volatile oil content were setting as the evaluation indexes， the traditional cutting processing and the integration processing of origin were optimized， and the two selected process were compared. The contents of carvacrol and thymol were deterrmined by Agilent 1200 high performance liquid chromatography and ECOSIL-C18 column. The mobile phase was acetonitrile-0.2% acetic acid， gradient elution， with wavelength of 274 nm， flow rate of 1.0 mL/min， sample volume of 20 μL. The extraction of the volatile oil was in accordance with the volatile oil determination method in Chinese Pharmacopoeia 2015 edition. Results The optimized traditional cutting processing： softening 1 h with 3 times amount of water， cutting to 1.0 cm， drying at 50–60 ℃. The optimized integration processing of origin： cutting to 1.0 cm in fresh， drying at 50–60 ℃， drying to 36 h. The contents of carvacrol， thymol， and volatile oil in the optimum integration processing of origin were all higher than the traditional cutting processing. Conclusion The technology of integration processing of origin is simple and convenient， which can make up the defects of the complicated traditional cutting processing and the lessen of effective components， and is feasible.endprint

Key words： Moslae Herba； integration processing of origin； carvacrol； thymol； volatile oil

中藥材產(chǎn)地加工和中藥炮制是中藥生產(chǎn)加工產(chǎn)業(yè)鏈中2個(gè)密切相連的環(huán)節(jié)，在某些中藥材生產(chǎn)中無(wú)法明確劃分，使有些中藥產(chǎn)地加工與炮制生產(chǎn)環(huán)節(jié)交叉重復(fù)，加工操作繁瑣，且易導(dǎo)致中藥飲片有效成分流失 [1]。本研究以香薷為研究對(duì)象，對(duì)全草類的產(chǎn)地加工炮制一體化技術(shù)應(yīng)用進(jìn)行探索。

香薷為唇形科植物石香薷Mosla chinensis Maxim.或江香薷Mosla chinensis‘Jiangxiangru的干燥地上部分，前者習(xí)稱“青香薷”，后者習(xí)稱“江香薷”。其味辛、性微溫，歸肺、胃經(jīng)，具有發(fā)汗解表、化濕和中、利水消腫功效[2]。作為一種藥食兩用的傳統(tǒng)中藥，早在《本草綱目》就記載有“香薷乃夏月解表之藥，如冬月之麻黃”，具有良好藥用價(jià)值。香薷?jìng)鹘y(tǒng)切制法為：產(chǎn)地除根、凈制、陰干，至飲片廠后，加水淋潤(rùn)軟化、切制、再陰干，工藝繁瑣，有效成分易流失，且加水量和軟化時(shí)間均較模糊，缺少量化可控的技術(shù)參數(shù)。為此，本課題將香薷產(chǎn)地加工與炮制生產(chǎn)相關(guān)工序進(jìn)行有機(jī)整和，即產(chǎn)地凈制后趁鮮切制、干燥，為建立香薷產(chǎn)地加工與炮制一體化規(guī)范提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

KQ-250DB型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；WGL-125B電熱鼓風(fēng)干燥箱（天津市泰斯特儀器有限公司）；RO-2640P超純水器；Mettler AE240型十萬(wàn)分之一分析天平（瑞士METTLER）；FA1004B電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；Agilent 1200型高效液相色譜儀，包括四元梯度泵、在線脫氣機(jī)、柱溫箱、VWD檢測(cè)器、Chem-Station控制系統(tǒng)；ECOSIL-C18色譜柱（150 mm×4.6 mm，5 ?m）。

香薷藥材，2016年10月由本文第一作者采于江西吉安，經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)翟延君教授鑒定為唇形科植物石香薷Mosla chinensis Maxim.的干燥地上部分，香薷?jìng)鹘y(tǒng)切制樣品與產(chǎn)地加工炮制一體化樣品均為自制。香荊芥酚（批號(hào)111691-201103）、麝香草酚（批號(hào)100508-200902），中國(guó)食品藥品檢定研究院。乙腈為色譜純，其余試劑為分析純，水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 香荊芥酚、麝香草酚含量測(cè)定

2.1.1 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn) ECOSIL-C18色譜柱（150 mm×4.6 mm，5 ?m）；流動(dòng)相為乙腈-0.2%醋酸水溶液，梯度洗脫（見表1）；檢測(cè)波長(zhǎng)：274 nm；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：20 ?L。色譜圖見圖1。

2.1.2 對(duì)照品溶液的制備 分別精密稱定香荊芥酚和麝香草酚對(duì)照品適量，用甲醇溶解配成1 mg/mL的對(duì)照品貯備液，再配成香荊芥酚和麝香草酚分別為0.065 9 mg/mL和0.308 2 mg/mL的混合對(duì)照品溶液。

2.1.3 供試品溶液的制備 精密稱取各香薷飲片3.0 g置于250 ml錐形瓶中，加入200 mL甲醇，密塞，稱定質(zhì)量，振搖5 min，浸漬過夜，超聲處理（功率100 W，溫度35 ℃）40 min，放至室溫，再次稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，過濾，濃縮至20 mL，取適量，0.45 ?m微孔濾膜過濾，即得[3]。

2.1.4 方法學(xué)考察

2.1.4.1 線性范圍考察 分別精密吸取香荊芥酚（0.065 9 mg/mL）、麝香草酚（0.308 2 mg/mL）對(duì)照品溶液0.5、1、5、10、15、20、25 ?L，按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以對(duì)照品進(jìn)樣量（?g）為橫坐標(biāo)，色譜峰面積積分值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得香荊芥酚回歸方程Y=2491.7X+19.234，r=0.999 9，麝香草酚回歸方程Y=533.42X+19.234，r=0.999 9。結(jié)果表明香荊芥酚、麝香草酚分別在0.032 0～1.647 0 ?g、0.154 1～7.705 0 ?g范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.1.4.2 精密度試驗(yàn) 精密吸取混合對(duì)照品溶液，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積，計(jì)算香荊芥酚和麝香草酚峰面積積分值的RSD分別為1.30%、1.03%，結(jié)果表明儀器精密度良好。

2.1.4.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密稱取香薷樣品，按“2.1.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件，分別于0、3、6、12、18、24 h進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，計(jì)算香荊芥酚和麝香草酚峰面積的RSD分別為1.36%、1.48%，結(jié)果表明供試品溶液在24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.1.4.4 重復(fù)性試驗(yàn) 取香薷同一批樣品各6份，按“2.1.3”項(xiàng)下方法分別制備供試品溶液，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定并計(jì)算。傳統(tǒng)切制樣品中香荊芥酚和麝香草酚平均含量分別為0.205、0.347 mg/g，RSD分別為1.43%、1.52%；產(chǎn)地加工炮制一體化樣品中香荊芥酚和麝香草酚的平均含量分別為0.272、0.459 mg/g，RSD分別為1.29%、1.37%，表明本方法重復(fù)性良好。

2.1.4.5 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取含量已知的樣品6份，每份0.3 g，分別精密加入0.1 mL香荊芥酚（0.2 mg/mL）和麝香草酚（0.3 mg/mL）對(duì)照品溶液，按“2.1.3”項(xiàng)下方法分別制備供試品溶液，測(cè)定含量，計(jì)算回收率，結(jié)果見表2。

2.1.5 樣品含量測(cè)定 取香薷飲片，按“2.1.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，測(cè)定其峰面積，代入線性回歸方程，計(jì)算香荊芥酚和麝香草酚含量。

2.2 揮發(fā)油含量測(cè)定endprint

取香薷飲片60 g，精密稱量（準(zhǔn)確至0.01 g），置圓底燒瓶中，加水600 mL，按2015年版《中華人民共和國(guó)藥典》揮發(fā)油測(cè)定法甲法提取揮發(fā)油，并計(jì)算各供試品中揮發(fā)油的含量。

2.3 傳統(tǒng)切制工藝優(yōu)化

以軟化時(shí)間、切制段長(zhǎng)、干燥溫度為考察因素，每因素設(shè)定3個(gè)水平，采用L9（34）正交試驗(yàn)，優(yōu)化香薷?jìng)鹘y(tǒng)切制工藝，因素水平見表3。按“2.1.3”項(xiàng)下方法制備傳統(tǒng)切制供試品溶液，以香荊芥酚、麝香草酚、揮發(fā)油含量為綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)，進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果見表4，方差分析見表5。結(jié)果顯示，A、B、C因素對(duì)綜合評(píng)分的結(jié)果均有顯著影響。其中，C因素對(duì)綜合評(píng)分影響最大，由統(tǒng)計(jì)量K值確立為2水平。極差分析顯示，因素A和因素B相差不大，考慮因素C與其他二因素間的交互作用及實(shí)際情況，為了節(jié)省軟化時(shí)間，節(jié)約人力物力，確保飲片質(zhì)量良好，將A因素定為1水平。綜合分析確定香薷?jìng)鹘y(tǒng)切制最佳工藝條件為A1B2C2，即淋潤(rùn)軟化1 h，切制1.0 cm，50～60 ℃烘干。

2.4 產(chǎn)地加工炮制一體化工藝優(yōu)化

以切制段長(zhǎng)、干燥溫度、干燥時(shí)間為考察因素，每因素設(shè)定3個(gè)水平，采用L9（34）正交試驗(yàn)，優(yōu)化香薷產(chǎn)地加工炮制一體化工藝，因素水平見表6。按“2.1.3”項(xiàng)下方法制備產(chǎn)地加工炮制一體化供試品溶液，以香荊芥酚、麝香草酚、揮發(fā)油含量為綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)，進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果見表7，方差分析見表8。結(jié)果顯示，因素A、B對(duì)綜合評(píng)分的結(jié)果有顯著影響，因素C對(duì)綜合評(píng)分的結(jié)果無(wú)顯著影響。極差分析顯示，各影響因素的主次順序是A（切制段長(zhǎng)）>B（干燥溫度）>C（干燥時(shí)間）。對(duì)于因素A和B，考慮其與其他二因素間的交互作用及實(shí)際情況，均確定為2水平。由于因素C對(duì)結(jié)果無(wú)顯著影響，綜合分析確定香薷產(chǎn)地加工炮制一體化最佳工藝條件為A2B2C3，即趁鮮切制1.0 cm，50～60 ℃干燥36 h。

2.5 傳統(tǒng)切制工藝與產(chǎn)地加工炮制一體化工藝比較

凈選香薷藥材各3份，每份500 g，分別按“2.3”和“2.4”項(xiàng)下優(yōu)化出的最佳工藝制備供試品溶液（傳統(tǒng)切制工藝為A1B2C2，即軟化1 h，切制1.0 cm，50～60 ℃烘干；最佳產(chǎn)地加工炮制一體化工藝為A2B2C3，即趁鮮切制1.0 cm，50～60 ℃干燥36 h）。按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，結(jié)果見表9，表明香薷產(chǎn)地加工炮制一體化工藝中3個(gè)指標(biāo)的含量均高于傳統(tǒng)切制工藝，且香荊芥酚含量有顯著差異（P<0.05）。說(shuō)明香薷產(chǎn)地加工炮制一體化工藝穩(wěn)定可行。

3 討論

由于香薷為全草類中藥，藥材植株蓬松，傳統(tǒng)切制工藝繁瑣，浪費(fèi)資源，又易導(dǎo)致酸敗發(fā)霉等化學(xué)成分改變，不但降低生產(chǎn)效率，且增加了生產(chǎn)成本。產(chǎn)地加工炮制一體化能減少中間儲(chǔ)藏環(huán)節(jié)，避免由于貯藏造成的中藥材質(zhì)量下降和損耗[4]。同時(shí)也能減少中間加工環(huán)節(jié)，省去廠房、設(shè)備等方面的投入，減少人力資源和能源的消耗，增加企業(yè)效益[5-6]。

由于傳統(tǒng)切制工藝缺少量化可行的標(biāo)準(zhǔn)，故本試驗(yàn)對(duì)藥材加水量進(jìn)行了考察，分別以1、3、5、7、10倍量水進(jìn)行軟化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)1倍量水藥材無(wú)法浸透，3倍量水可達(dá)到藥透湯盡，5倍量水藥透有部分余湯，7、10倍量有大量余湯，且伴有酸敗味，綜合考察，為節(jié)省水資源和充分軟化藥材，保證藥材質(zhì)量，防止有效成分流失和化學(xué)成分改變，淋潤(rùn)軟化的加水量確定為3倍量。在試驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，由于香荊芥酚和麝香草酚是同分異構(gòu)體，較難分離，故對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行考察，篩選了乙腈與0.1%、0.2%磷酸水溶液的不同比例，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在乙腈-0.2%磷酸水溶液梯度洗脫、柱溫25 ℃、檢測(cè)波長(zhǎng)274 nm、流速1 mL/min時(shí)，保留時(shí)間較短，色譜峰分離效果好且節(jié)省分析時(shí)間。在溫度指標(biāo)的選擇中，通過前期預(yù)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)溫度高于60 ℃時(shí)，指標(biāo)性成分含量顯著降低，推測(cè)其與揮發(fā)性成分的熱穩(wěn)定性有關(guān)，故本試驗(yàn)在溫度選擇中以60 ℃為考察中點(diǎn)，分別考察20～30 ℃、50～60 ℃、80～90 ℃條件下傳統(tǒng)切制與產(chǎn)地加工炮制一體化工藝指標(biāo)成分的等量性。

本試驗(yàn)的最佳工藝組合是以香荊芥酚、麝香草酚和揮發(fā)油含量3個(gè)指標(biāo)綜合加權(quán)評(píng)分，經(jīng)過統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)處理所得，結(jié)果香薷產(chǎn)地加工炮制一體化最佳工藝條件下香荊芥酚、麝香草酚和揮發(fā)油含量均高于傳統(tǒng)切制，且香荊芥酚含量有顯著差異（P<0.05）。因此，無(wú)論從統(tǒng)計(jì)結(jié)果還是實(shí)際情況考慮，香薷產(chǎn)地加工炮制一體化工藝都切實(shí)可行，具有推廣意義，這與近年來(lái)植物中藥應(yīng)于產(chǎn)地加工炮制的倡導(dǎo)相符，為香薷產(chǎn)地加工炮制一體化規(guī)范的確立提供了依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 楊俊杰，李林，季德，等.中藥材產(chǎn)地加工與炮制一體化的歷史沿革與現(xiàn)代研究探討[J].中草藥，2016，47（15）：2751-2757.

[2] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：一部[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：126.

[3] 李鵬，陳根順，徐麗芳，等.HPLC法測(cè)定香薷中4種成分的含量[J].中藥材，2009，32（8）：1236-1237.

[4] 楊俊杰，張振凌.藥用植物產(chǎn)區(qū)加工的目的和意義[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥， 2005，16（4）：323-324.

[5] 楊俊杰，張振凌.中藥材產(chǎn)區(qū)加工與中藥飲片炮制一體化的探討[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2005，16（9）：817-818.

[6] 康輝，張振凌.重視中藥材產(chǎn)地加工研究與管理[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2010，19（3）：24，26.

（收稿日期：2017-04-18）

（修回日期：2017-06-14；編輯：陳靜）endprint