靳二輝，周金星，任 曼，胡倩倩，金光明，李升和

(安徽科技學(xué)院 動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，安徽 鳳陽(yáng) 233100)

酵母硒和硼聯(lián)合添加對(duì)肉雞免疫器官組織結(jié)構(gòu)及免疫功能的影響

靳二輝，周金星，任 曼，胡倩倩，金光明，李升和*

(安徽科技學(xué)院 動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，安徽 鳳陽(yáng) 233100)

為研究酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)肉雞免疫器官發(fā)育和免疫功能的影響，試驗(yàn)選用健康1日齡AA肉雞1 200羽，隨機(jī)分成對(duì)照組和處理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)40羽。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，處理Ⅰ～Ⅳ組在基礎(chǔ)飼糧中添加0.3 mg·kg-1的酵母硒和硼(添加量分別為0、5、10、15 mg·kg-1)，試驗(yàn)期42 d。結(jié)果顯示：1)在21日齡，與對(duì)照組相比，處理Ⅱ和Ⅲ組肉雞法氏囊器官指數(shù)，脾小結(jié)、動(dòng)脈周圍淋巴鞘和法氏囊小結(jié)面積及胸腺皮質(zhì)厚度均顯著(P<0.05)升高；處理Ⅱ組肉雞血清新城疫病毒(NDV)抗體和干擾素-γ(INF-γ)水平，處理Ⅲ組肉雞血清白細(xì)胞介素-2(IL-2)水平也均顯著(P<0.05)升高。2)在42日齡，與對(duì)照組相比，處理Ⅱ和Ⅲ組肉雞胸腺和法氏囊器官指數(shù)，脾小結(jié)、動(dòng)脈周圍淋巴鞘和法氏囊小結(jié)面積，胸腺皮質(zhì)厚度以及血清NDV抗體和IL-2水平均顯著(P<0.05)升高；處理Ⅱ組血清IgG和IFN-γ水平也顯著(P<0.05)升高；處理Ⅰ組肉雞胸腺和法氏囊器官指數(shù)及血清IgG水平顯著(P<0.05)升高。顯微觀測(cè)可見(jiàn)，處理Ⅱ和Ⅲ組21 d和42 d肉雞免疫器官組織結(jié)構(gòu)均明顯改善，脾臟白髓和紅髓結(jié)構(gòu)清晰，胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)分界明顯，法氏囊小葉數(shù)量增多，排列緊密，且處理Ⅰ組肉雞法氏囊小葉體積也明顯增大。結(jié)果表明，酵母硒單獨(dú)補(bǔ)充或與不同劑量的硼聯(lián)合應(yīng)用均可在一定程度上促進(jìn)肉雞免疫器官的發(fā)育，改善其組織結(jié)構(gòu)，增加機(jī)體免疫功能，0.3 mg·kg-1酵母硒與5～10 mg·kg-1硼聯(lián)用促進(jìn)效果更為明顯。

酵母硒；硼；肉雞；免疫器官；組織結(jié)構(gòu)；免疫功能

微量元素在動(dòng)物機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育及正常生理功能維持中起著非常重要的作用，攝入量不足或者缺乏可對(duì)動(dòng)物的生產(chǎn)性能、免疫功能、繁殖性能等產(chǎn)生不同程度損害，而在一定的范圍內(nèi)適量補(bǔ)充微量元素則對(duì)動(dòng)物機(jī)體諸多生理功能具有明顯有益作用[1]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，微量元素的營(yíng)養(yǎng)狀況對(duì)于動(dòng)物機(jī)體免疫功能的完整性以及營(yíng)養(yǎng)、感染和健康之間的相互作用至關(guān)重要。微量元素(如硒、鋅、鐵)的缺乏可對(duì)動(dòng)物機(jī)體的免疫活性產(chǎn)生負(fù)面影響，進(jìn)而降低機(jī)體抗感染能力，而適量的補(bǔ)充某一種微量元素或者補(bǔ)充具有協(xié)同作用的多種微量元素，則能夠增強(qiáng)皮膚的免疫屏障功能、免疫細(xì)胞的保護(hù)功能及B細(xì)胞的抗體分泌功能，進(jìn)而提高動(dòng)物機(jī)體免疫水平及抗病能力[2]。微量元素尤其是有機(jī)微量元素對(duì)動(dòng)物機(jī)體的諸多有益作用為其在動(dòng)物養(yǎng)殖生產(chǎn)中的廣泛使用及綠色功能性畜禽產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)提供了基礎(chǔ)，并逐漸引起人們的廣泛關(guān)注。

硒是動(dòng)物機(jī)體必需的微量元素之一，作為谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)的重要組成部分，參與調(diào)節(jié)機(jī)體多種生理功能[3]。適量的補(bǔ)充硒能夠增強(qiáng)機(jī)體抗氧化功能和免疫功能[4]，提高畜禽生產(chǎn)性能和屠宰性能[5]，改善肌肉品質(zhì)[6]。目前，用于飼料添加的硒源包括無(wú)機(jī)硒和有機(jī)硒2種，其中無(wú)機(jī)硒毒性較大，且不易被機(jī)體吸收，而有機(jī)硒則具有較高的生物安全性、易吸收性和生物利用效率。酵母硒是一種較好的有機(jī)硒產(chǎn)品，在畜牧業(yè)生產(chǎn)中被廣泛應(yīng)用。例如，李曉麗等[7]研究發(fā)現(xiàn)，日糧中補(bǔ)充0.3～0.4 mg·kg-1酵母硒可顯著提高蛋雞產(chǎn)蛋率和平均蛋重，降低料蛋比。羅霄等[8]研究顯示，日糧添加0.3、0.6 mg·kg-1的酵母硒可提高斷奶仔豬血清GSH-Px和超氧化物歧化酶(SOD)的活性，降低丙二醛(MDA)含量，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化功能。于楓等[9]對(duì)熱應(yīng)激的研究表明，適量添加酵母硒可改善熱應(yīng)激奶牛血液生理指標(biāo)，減弱熱應(yīng)激對(duì)奶牛產(chǎn)量的影響。王巧莉等[10]對(duì)肉鵝的研究顯示，日糧中添加酵母硒可升高淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和鵝副粘病毒抗體效價(jià)，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能。以上研究表明，日糧添加適量的酵母硒可提高畜禽生產(chǎn)性能、抗氧化功能和免疫功能。

硼是動(dòng)物機(jī)體可能的必需微量元素之一，通過(guò)影響多種酶的活性及能量底物的利用，進(jìn)而調(diào)節(jié)機(jī)體多種生理功能。許多研究發(fā)現(xiàn)，適量的補(bǔ)充硼可影響動(dòng)物機(jī)體礦物質(zhì)代謝，促進(jìn)骨骼生長(zhǎng)發(fā)育[11]，影響畜禽生長(zhǎng)速度和飼料利用率，提高生產(chǎn)性能[12]，影響血漿激素水平，調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)分泌功能[13]，影響機(jī)體抗氧化酶活性和細(xì)胞因子的分泌，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化功能和免疫功能[14]。以上研究充分表明，單獨(dú)適量補(bǔ)充酵母硒或硼對(duì)動(dòng)物機(jī)體多種生理功能均可產(chǎn)生有益影響。然而，Stanley等[15]研究發(fā)現(xiàn)，日糧中同時(shí)添加高劑量的硒和硼能夠加重對(duì)綠頭鴨繁殖性能和幼鴨生長(zhǎng)發(fā)育的損傷，導(dǎo)致體重下降，孵化成功率和幼鴨體重降低，表明硼和硒之間存在一定的相互作用，兩者高劑量的聯(lián)合添加可對(duì)機(jī)體產(chǎn)生一定的協(xié)同損傷作用。但是，適量的酵母硒和硼聯(lián)合添加是否會(huì)對(duì)動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生更好的有益促進(jìn)效果卻未見(jiàn)報(bào)道。為此，本試驗(yàn)以酵母硒與不同劑量的硼聯(lián)合使用，研究其對(duì)肉雞免疫器官發(fā)育、血清抗體水平和細(xì)胞因子分泌的影響， 旨在從免疫學(xué)角度為酵母硒和硼在肉雞生產(chǎn)中的聯(lián)合應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物飼養(yǎng)與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選用健康1日齡愛(ài)拔益加(AA)肉雞1 200羽(購(gòu)自安徽萬(wàn)嘉禽業(yè)科技發(fā)展有限公司)，按照單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)分為對(duì)照組和處理Ⅰ至Ⅳ組，每組240羽，設(shè)6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)40羽。對(duì)照組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)日糧中硼和硒的含量經(jīng)某公司檢測(cè)后分別為2.657 mg·kg-1和0.157 4 mg·kg-1；處理Ⅰ至Ⅳ組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0.3 mg·kg-1酵母硒和不同劑量的硼(0、5、10、15 mg·kg-1)，試驗(yàn)期42 d。肉雞采用網(wǎng)上平養(yǎng)，自由采食和飲水，飼養(yǎng)管理參考肉雞飼養(yǎng)管理要求進(jìn)行，常規(guī)免疫程序接種疫苗。

1.2 基礎(chǔ)日糧

基礎(chǔ)日糧是根據(jù)NRC(1994)推薦的肉仔雞營(yíng)養(yǎng)需要配制玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.3 酵母硒和硼

肉雞飼料和酵母硒由合肥東升牧業(yè)有限公司提供，酵母硒中總硒含量經(jīng)安徽省中醫(yī)學(xué)院測(cè)定為670 mg·kg-1，其中有機(jī)硒含量在90%以上。硼酸(H3BO3)為分析純，純度≥99. 5%，其中硼含量≥17. 4%，購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.4 樣品采集與處理

分別于試驗(yàn)第21天和42天每組隨機(jī)選取肉雞60羽(每個(gè)重復(fù)10羽)，禁食不禁水12 h，采用一次性真空采血促凝管(SEKISUI MEDICAL(CHINA) CO.，LTD)進(jìn)行翅靜脈采血，頸靜脈放血致死，迅速解剖取胸腺、脾臟、法氏囊，萬(wàn)分之一分析天平稱重。血液樣品室溫靜置2 h后，于4 ℃條件下948g離心15 min，分離血清，-70 ℃保存待用。

表1基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

Table1Composition and nutrient levels of basal diet (air-dry basis)

原料Ingredients含量Content/%1～3周1-3weeks4～6周4-6weeks營(yíng)養(yǎng)水平Nutrientlevels含量Content1～3周1-3weeks4～6周4-6weeks玉米Corn58.0062.00粗蛋白質(zhì)CP/%21.4619.08豆粕Soybeanmeal32.0027.50賴氨酸Lys/%1.211.04魚(yú)粉Fishmeal3.002.00蛋氨酸Met/%0.350.31大豆油Soybeanoil2.003.50代謝能ME/(MJ·kg-1)12.2612.73預(yù)混料Premix1)5.005.00鈣Ca/%1.101.02合計(jì)Total100100總磷TP/%0.590.44

1)每千克預(yù)混料(1～3周)提供：VA 240 000 IU，VD354 000 IU，VE 560 IU，VK356 mg，VB116 mg，VB2108 mg，VB618 mg，VB120.25 mg，煙酸 650 mg，泛酸 240 mg，葉酸 12 mg，氯化膽堿 10 g，Cu 100～200 mg，F(xiàn)e 400 mg，Zn 960～1 200 mg，Mn 960 mg，I 10 mg，Se 5～20 mg; Ca 14%～18%，總P 2.5%，食鹽 4%～8%，水分 12% 。每千克預(yù)混料(4～6周)提供：VA 200 000 IU，VD350 000 IU，VE 480 IU，VK350 mg，VB116 mg，VB290 mg，VB618 mg，VB120.12 mg，煙酸600 mg，泛酸 240 mg，葉酸 8 mg，氯化膽堿 10 g，Cu 100～200 mg，F(xiàn)e 400 mg，Zn 960～1200 mg，Mn 960 mg，I 10 mg，Se 5～20 mg，Ca 14%～18%，總 P 2.3%，食鹽 4%～8%，水分 12%。

Notes:1)The per kg premix (1-3 weeks) provided the following: VA 240 000 IU， VD354 000 IU， VE 560 IU， VK356 mg， VB116 mg， VB2108 mg， VB618mg， VB120.25 mg， Nicotinic acid 650 mg， Pantothenic acid 240 mg， Folic acid 12 mg， Choline chloride 10 g， Cu 100-200 mg， Fe 400 mg， Zn 720-3 600 mg， Mn 960 mg， I 10 mg， Se 5-20 mg; Ca 14%-18%， total phosphorus 2.5%， sodium chloride 4%-8%， water 12%. The per kg premix (4-6 weeks) provided the following: VA 200 000 IU， VD350 000 IU， VE 480 IU， VK350 mg， VB116 mg， VB290 mg， VB618 mg， VB120.12 mg， Nicotinic acid 600 mg， Pantothenic acid 240 mg， Folic acid 8 mg， Choline chloride 10g， Cu 100-200 mg， Fe 400 mg， Zn 720-3 600 mg， Mn 960 mg， I 10 mg， Se 5-20 mg; Ca 14%-18%， total phosphorus 2.3%， sodium chloride 4%-8%， water 12%.

1.5 免疫器官指數(shù)測(cè)定

分別于試驗(yàn)第21天和42天每組隨機(jī)選取肉雞12羽(每個(gè)重復(fù)2羽)，頸靜脈放血致死，拔除羽毛后測(cè)定屠體重(精確到0.01 g)，迅速分離胸腺、脾臟和法氏囊等免疫器官，吸干器官表面水分，剝離脂肪和無(wú)關(guān)組織，采用萬(wàn)分之一電子分析天平稱重(精確到0.000 1 g)(ME-T，瑞士Mettler-Toledo公司)，記錄免疫器官質(zhì)量，并計(jì)算免疫器官指數(shù)，器官指數(shù)=(器官質(zhì)量/屠體質(zhì)量)×100%。

1.6 石蠟切片與HE染色

肉雞免疫器官固定后，經(jīng)梯度乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，石蠟輪轉(zhuǎn)切片機(jī)(RM2235，Leica儀器有限公司，德國(guó))連續(xù)橫向切片，厚6 μm，每隔30張取2張切片用于HE染色，二甲苯透明，中性樹(shù)膠封片。每羽肉雞每個(gè)免疫器官分別取20張切片，用麥克奧迪BA410正置顯微攝影系統(tǒng)(麥克奧迪廈門醫(yī)療診斷系統(tǒng)有限公司)觀察，然后每張切片均勻選取5個(gè)視野拍照，顯微圖像分析軟件(Image-Pro Plus 6.0)測(cè)量每個(gè)視野內(nèi)免疫器官的不同組織學(xué)參數(shù)。

1.7 血清免疫球蛋白含量測(cè)定

肉雞血清經(jīng)室溫融化后，采用ZY-360全自動(dòng)血清生化分析儀(上海科華生物工程股份有限公司)測(cè)量血清IgA、IgM、IgG含量。

1.8 血清抗體水平和細(xì)胞因子含量測(cè)定

肉雞血清經(jīng)室溫融化后，采用ELISA檢測(cè)試劑盒(美國(guó)R&D Systems Inc)測(cè)定肉雞血清新城疫病毒(NDV)抗體水平及白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-4(IL-4)和干擾素-γ(INF-γ)含量。

1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

2 結(jié)果與分析

2.1酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)AA肉雞免疫器官發(fā)育的影響

由表2可知，21日齡時(shí)，各處理組脾臟和胸腺指數(shù)與對(duì)照組相比均有所升高，但無(wú)顯著性差異(P>0.05)，且不同處理組之間相比也無(wú)顯著變化(P>0.05)；處理Ⅱ和Ⅲ組法氏囊指數(shù)與對(duì)照組相比分別升高124.33% 和143.10%(P<0.05)，與處理Ⅰ組相比也分別升高89.94%和103.66%(P<0.05)，與處理Ⅳ組相比也分別升高65.71% 和79.74%(P<0.05)，但處理Ⅱ和Ⅲ組法氏囊指數(shù)相比無(wú)顯著差異(P>0.05)。42日齡時(shí)，與對(duì)照組相比，處理Ⅱ組脾臟指數(shù)升高67.59%(P<0.05)，而Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ組脾臟指數(shù)無(wú)顯著變化(P>0.05)；處理Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組胸腺指數(shù)分別升高21.99%、35.92% 和26.91%(P<0.05)，而處理Ⅳ組胸腺指數(shù)較處理Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組相比分別降低16.69%、30.00% 和21.39%(P<0.05)；處理Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組法氏囊指數(shù)分別升高36.38%、91.47%和53.53%(P<0.05)，且處理Ⅱ組法氏囊指數(shù)較處理Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ組也分別升高40.40%、24.71%和62.58%(P<0.05)，但處理Ⅳ組法氏囊指數(shù)較處理Ⅲ組降低30.36%(P<0.05)。

表2酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)AA肉雞免疫器官指數(shù)的影響

Table2Combined effects of yeast selenium and boron on immune organs index of AA broilers 10-2

日齡Age/d免疫器官Immuneorgans組別Groups對(duì)照組Controlgroup處理Ⅰ組Exp.Ⅰ處理Ⅱ組Exp.Ⅱ處理Ⅲ組Exp.Ⅲ處理Ⅳ組Exp.Ⅳ21脾臟Spleen9.17±0.3711.31±4.2912.36±3.6811.77±2.710.82±2.69胸腺Thymus35.87±8.4638.12±1.5942.95±3.1539.99±9.2837.17±4.32法氏囊BursaofFabricius10.07±0.061b12.02±1.72b22.59±6.04a24.48±1.23a13.62±0.29b42脾臟Spleen9.07±2.03b12.01±2.29ab15.21±0.98a12.33±0.20ab10.23±0.99b胸腺Thymus24.64±0.059b30.06±2.57a33.49±1.68a31.27±1.38a25.76±0.21b法氏囊BursaofFabricius9.62±0.13d13.12±0.61bc18.42±1.55a14.77±0.60b11.33±0.83cd

同行無(wú)字母或有相同小寫(xiě)字母表示數(shù)據(jù)間差異不顯著(P>0.05)，無(wú)相同小寫(xiě)字母表示數(shù)據(jù)間差異顯著(P<0.05)。下表同。

In the same row， the values with no letter or the same letter mean no significant difference (P>0.05)， while the values without the same lowercase letter means significant difference (P<0.05). The same as below.

2.2酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)AA肉雞免疫器官組織結(jié)構(gòu)的影響

由圖1和表3可見(jiàn)，21日齡時(shí)，對(duì)照組肉雞脾臟組織結(jié)構(gòu)正常，脾小結(jié)和動(dòng)脈周圍淋巴鞘結(jié)構(gòu)清晰，大小適中(圖1-A)；胸腺小葉結(jié)構(gòu)清晰，皮質(zhì)厚度和髓質(zhì)面積適中，皮質(zhì)內(nèi)淋巴細(xì)胞密集，髓質(zhì)內(nèi)淋巴細(xì)胞疏松，可見(jiàn)許多胸腺小體(圖1-B)；法氏囊組織結(jié)構(gòu)正常，法氏囊小葉較大，法氏囊小結(jié)也較大，排列疏松(圖1-C)。與對(duì)照組相比，處理Ⅰ組肉雞脾臟淋巴細(xì)胞增多，排列緊密，脾小結(jié)輪廓清晰，脾動(dòng)脈周圍淋巴鞘和脾小結(jié)面積分別增大22.40%和8.06%，但差異不顯著(P>0.05)；脾索和脾竇變化不大(圖1-D)；胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)分界明顯，皮質(zhì)厚度增加12.93%(P>0.05)，邊緣淋巴細(xì)胞排列密集(圖1-E)；法氏囊小葉大小無(wú)明顯變化，但法氏囊小結(jié)面積顯著增大13.04%(P<0.05)(圖1-F)。處理Ⅱ和Ⅲ組肉雞脾臟白髓結(jié)構(gòu)更加清晰，脾小結(jié)數(shù)量增多，脾動(dòng)脈周圍淋巴鞘面積分別增大26.95%和25.00%(P<0.05)，脾小結(jié)面積也分別增大18.21%和22.39%(P<0.05)，脾索增粗，脾竇變窄(圖1-G和J)；胸腺皮質(zhì)明顯增厚，厚度分別增加34.33%和23.75%(P<0.05)，髓質(zhì)面積減小，其內(nèi)胸腺小體較少(圖1-H和K)；法氏囊小葉增大，法氏囊小結(jié)面積也分別增大45.16%和30.57%(P<0.05)，數(shù)量明顯增多，皮質(zhì)和髓質(zhì)分界明顯，淋巴細(xì)胞排列緊密(圖1-I和L)。處理Ⅳ組脾臟組織結(jié)構(gòu)變化不大，脾動(dòng)脈周圍淋巴鞘和脾小結(jié)均有所增大(P>0.05)，中央動(dòng)脈增厚，脾竇變寬(圖1-M)；胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)結(jié)構(gòu)清晰，皮質(zhì)厚度增加11.31%(P<0.05)，淋巴細(xì)胞排列疏松(圖1-N)；法氏囊小葉較小，但法氏囊小結(jié)數(shù)量較多，排列緊密，皮質(zhì)和髓質(zhì)分界明顯(圖1-O)。

A-C，對(duì)照組；D-F，處理Ⅰ組；G-I，處理Ⅱ組；J-L，處理Ⅲ組；M-O，處理Ⅳ組；A、D、G、J、M，脾臟(40×)；B、E、H、K、N，胸腺(10×)；C、F、I、L、O，法氏囊(4×)。圖2同A-C， Control group; D-F， Exp. Ⅰ; G-I， Exp. Ⅱ; J-L， Exp. Ⅲ; M-O， Exp. Ⅳ; A， D， G， J and M， Spleen (40×); B， E， H， K and N， Thymus (10×); C， F， I， L and O， Bursa of Fabricius (4×). Fig. 2 is the same圖1 酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)21 d肉雞免疫器官組織結(jié)構(gòu)的影響Fig.1 Combined effects of yeast selenium and boron on immune organ microstructure of 21-day-old broilers

由圖2和表3可見(jiàn)，42日齡時(shí)，對(duì)照組肉雞脾臟、胸腺和法氏囊組織結(jié)構(gòu)正常，但與21日齡相比脾小結(jié)和動(dòng)脈周圍淋巴鞘明顯增大，胸腺皮質(zhì)增厚，法氏囊小葉和法氏囊小結(jié)也明顯增大(圖2-A、B和C)。與對(duì)照組相比，處理Ⅰ組肉雞脾臟、胸腺和法氏囊組織結(jié)構(gòu)變化不大，脾動(dòng)脈周圍淋巴鞘有所增大，但差異不顯著(P>0.05)，其內(nèi)淋巴細(xì)胞排列疏松(圖2-D)，胸腺皮質(zhì)厚度變薄，但差異也不顯著(P>0.05)(圖2-E)，法氏囊小結(jié)明顯增大21.04%(P<0.05)，排列緊密(圖2-F)。處理Ⅱ和Ⅲ組肉雞免疫器官組織結(jié)構(gòu)明顯改善，脾臟白髓和紅髓結(jié)構(gòu)更加清晰，脾小結(jié)增多，面積分別增大19.64%和22.62%(P<0.05)，脾動(dòng)脈周圍淋巴鞘面積也分別增大42.37%和27.56%(P<0.05)，其內(nèi)淋巴細(xì)胞排列緊密，脾索增粗，脾竇明顯變窄(圖2-G和J)；處理Ⅲ組胸腺小葉增大，皮質(zhì)厚度明顯增加20.40%(P<0.05)，髓質(zhì)內(nèi)淋巴細(xì)胞增多(圖2-H和K)；法氏囊小葉增大，法氏囊小結(jié)數(shù)量增多，排列緊密，面積分別增大39.08%和36.55%(P<0.05)(圖2-I和L)。處理Ⅳ組肉雞脾臟和法氏囊組織結(jié)構(gòu)無(wú)明顯變化(圖2-M和N)，但胸腺皮質(zhì)厚度有所減小(P>0.05)，髓質(zhì)內(nèi)淋巴細(xì)胞排列疏松，胸腺小體較多(圖2-O)。

2.3酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)AA肉雞血清免疫球蛋白含量的影響

由表4可知，21日齡時(shí)，對(duì)照組與各處理血清IgA和IgM含量相比均無(wú)顯著變化(P>0.05)；各處理組血清IgG含量較對(duì)照組均有所升高，但仍無(wú)顯著差異(P>0.05)。42日齡時(shí)，與對(duì)照組相比較，處理Ⅲ組血清IgA含量升高14.29%(P<0.05)，且處理Ⅲ組血清IgA含量較處理Ⅰ和Ⅱ也分別升高14.29% 和14.29%(P<0.05)；處理Ⅱ和Ⅳ組血清IgG含量分別升高41.12% 和35.51%(P<0.05)，但各處理組之間相比無(wú)顯著差異(P>0.05)；各處理組血清IgM含量均有所升高，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.4酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)AA肉雞血清NDV抗體水平的影響

由表5可知，21日齡時(shí)，處理Ⅱ組血清NDV抗體水平與對(duì)照組和處理Ⅳ組相比分別顯著升高22.68% 和20.08%(P<0.05)，但與處理Ⅰ和Ⅲ組相比無(wú)顯著變化(P>0.05)。42日齡時(shí)，處理Ⅱ和Ⅲ組血清NDV抗體水平與對(duì)照組相比分別升高121.69% 和73.31%(P<0.05)，且處理Ⅱ組與處理Ⅰ和Ⅳ組相比較也分別升高63.04% 和47.02%(P<0.05)，但處理Ⅱ組與處理Ⅲ組相比較，血清NDV抗體水平無(wú)顯著變化(P>0.05)。

2.5酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)AA肉雞血清細(xì)胞因子含量的影響

由表6可知，21日齡時(shí)，處理Ⅲ和Ⅳ組肉雞血清IL-2水平與對(duì)照組相比較分別升高66.92%和38.42%(P<0.05)，與處理Ⅱ組相比較分別升高63.25% 和35.37%(P<0.05)，且處理Ⅲ組血清IL-2水平與處理Ⅰ相比較也升高39.45%(P<0.05)，但處理Ⅰ和Ⅱ組血清IL-2水平與對(duì)照組相比較均無(wú)顯著差異(P>0.05)；各處理組肉雞血清IL-4水平與對(duì)照組相比較以及各處理組之間相比較均無(wú)顯著變化(P>0.05)；處理Ⅱ組肉雞血清INF-γ水平與處理Ⅰ組相比較升高26.88%(P<0.05)，但處理Ⅰ組血清INF-γ水平與對(duì)照組和處理Ⅲ組相比均無(wú)顯著差異(P>0.05)。42日齡時(shí)，處理Ⅱ和Ⅲ組肉雞血清IL-2水平與對(duì)照組相比較分別升高26.36% 和38.81%(P<0.05)，與處理Ⅰ組相比較分別升高26.84% 和39.34%(P<0.05)，但是處理Ⅰ組血清IL-2水平與對(duì)照組和處理Ⅳ組相比較均無(wú)顯著差異(P>0.05)；各處理組肉雞血清IL-4水平與對(duì)照組相比較以及各處理組之間相比較仍均無(wú)顯著變化(P>0.05)；處理Ⅱ組肉雞血清INF-γ水平與對(duì)照組相比較升高19.98%(P<0.05)，與處理Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ組相比較分別升高17.54%、27.82% 和29.58%(P<0.05)，但對(duì)照組血清INF-γ水平處理Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ組相比較均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

圖2 酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)42 d肉雞免疫器官組織結(jié)構(gòu)的影響Fig.2 Combined effect of yeast selenium and boron on immune organ microstructure of 42-day-old broilers

表3酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)AA肉雞免疫器官組織學(xué)參數(shù)的影響

Table3Combined effects of yeast selenium and boron on histological parameters of immune organs of AA broilers

日齡Age/d項(xiàng)目Items對(duì)照組Controlgroup處理Ⅰ組Exp.Ⅰ處理Ⅱ組Exp.Ⅱ處理Ⅲ組Exp.Ⅲ處理Ⅳ組Exp.Ⅳ21脾小結(jié)面積Splenicnodearea/(103μm2)3.35±0.58c3.62±0.64bc3.96±0.81ab4.10±0.80a3.46±0.67c脾動(dòng)脈周圍淋巴鞘面積Periarteriallymphaticsheatharea/(103μm2)3.08±0.48b3.77±0.37ab3.91±0.70a3.85±0.52a3.62±0.76ab胸腺皮質(zhì)厚度Thymiccorticalthickness/μm296.41±44.09c334.73±55.56bc398.18±59.35a366.82±46.19ab329.92±41.57b法氏囊小結(jié)面積BursaofFabriciusnodearea/(103μm2)41.19±5.93c46.56±9.65b59.79±9.18a53.78±9.25a44.65±6.80bc42脾小結(jié)面積Splenicnodearea/(103μm2)5.04±1.24b5.68±1.02ab6.03±1.14a6.18±1.48a5.38±1.00b脾動(dòng)脈周圍淋巴鞘面積Periarteriallymphaticsheatharea/(103μm2)4.39±0.70b4.61±0.93b6.25±1.04a5.60±1.09a4.65±0.94b胸腺皮質(zhì)厚度Thymiccorticalthickness/μm370.05±37.81bc348.09±43.83c386.87±46.37b445.54±66.42a337.04±36.15c法氏囊小結(jié)面積BursaofFabriciusnodearea/(103μm2)120.89±22.00c146.33±22.41b168.13±14.69a165.07±23.63a124.82±21.88c

表4酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)AA肉雞血清IgA、IgG和IgM含量的影響

Table4Combined effects of yeast selenium and boron on IgA， IgG and IgM in serum of AA broilers g·L-1

日齡Age/d項(xiàng)目Items對(duì)照組Controlgroup處理Ⅰ組Exp.Ⅰ處理Ⅱ組Exp.Ⅱ處理Ⅲ組Exp.Ⅲ處理Ⅳ組Exp.Ⅳ21IgA0.036±0.0030.034±0.0020.036±0.0020.035±0.0010.035±0.001IgG0.077±0.0130.083±0.0010.084±0.0040.083±0.0070.081±0.002IgM0.030±0.0020.027±0.0010.028±0.0010.028±0.0010.027±0.00442IgA0.035±0.002b0.035±0.002b0.035±0.000b0.040±0.005a0.037±0.001abIgG0.107±0.031b0.136±0.030ab0.151±0.006a0.140±0.000ab0.145±0.010aIgM0.029±0.0010.030±0.0010.029±0.0010.031±0.0020.031±0.003

表5酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)AA肉雞血清NDV抗體水平的影響

Table5Combined effects of yeast selenium and boron on serum NDV level of AA broilers pg·mL-1

日齡Age/d對(duì)照組Controlgroup處理Ⅰ組Exp.Ⅰ處理Ⅱ組Exp.Ⅱ處理Ⅲ組Exp.Ⅲ處理Ⅳ組Exp.Ⅳ21423.33±40.07b450.00±7.07ab547.50±64.82a473.75±21.8ab441.25±37.12b42236.25±79.55c321.25±7.66bc523.75±81.91a409.44±62.97ab356.25±13.55bc

表6酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)AA肉雞血清細(xì)胞因子含量的影響

Table6Combined effects of yeast selenium and boron on cytokines level in serum of AA broilers ng·L-1

日齡Age/d項(xiàng)目Items對(duì)照組Controlgroup處理Ⅰ組Exp.Ⅰ處理Ⅱ組Exp.Ⅱ處理Ⅲ組Exp.Ⅲ處理Ⅳ組Exp.Ⅳ21IL-246.70±5.83c55.90±5.36bc47.75±4.35c77.95±7.84a64.64±5.01abIL-454.70±4.0352.61±3.3056.23±3.5453.02±3.5460.36±0.56INF-γ31.00±2.78ab29.76±2.61b37.76±1.03a34.41±1.84ab34.98±0.29ab42IL-252.54±4.79b52.34±4.47b66.39±2.67a72.93±4.15a62.01±9.45abIL-472.58±2.8771.17±6.1574.09±3.4774.91±0.2471.32±1.22INF-γ39.29±1.96b40.13±1.81b47.14±1.21a36.88±1.71b36.38±3.76b

3 討論

3.1酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)肉雞免疫器官發(fā)育的影響

家禽的免疫器官主要包括胸腺、脾臟和法氏囊，其中胸腺和法氏囊屬于中樞免疫器官，其主要功能是培育產(chǎn)生T和B淋巴細(xì)胞，兩者生長(zhǎng)發(fā)育的正常對(duì)于T和B淋巴細(xì)胞的增殖、分化以及細(xì)胞和體液免疫功能的維持至關(guān)重要。脾臟為機(jī)體最重要的外周免疫器官，是機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的場(chǎng)所，其生長(zhǎng)發(fā)育的正常對(duì)于維持機(jī)體免疫反應(yīng)對(duì)抗體內(nèi)外病原入侵至關(guān)重要。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，適量的補(bǔ)充酵母硒或硼可對(duì)動(dòng)物機(jī)體免疫器官的發(fā)育產(chǎn)生促進(jìn)作用。日糧中添加0.3 mg·kg-1的酵母硒能夠顯著增加28 d和63 d肉鵝胸腺、脾臟和法氏囊的器官指數(shù)，促進(jìn)中樞和外周免疫器官的生長(zhǎng)發(fā)育[16]。飲水補(bǔ)充100 mg·L-1的硼可提高6周齡固始雞脾臟和法氏囊質(zhì)量及器官指數(shù)，顯著增加3-6周齡固始雞胸腺質(zhì)量和器官指數(shù)，并改善胸腺的組織結(jié)構(gòu)[17]。免疫器官質(zhì)量和指數(shù)是其生長(zhǎng)發(fā)育情況的反映，也可用于評(píng)價(jià)機(jī)體的免疫功能狀態(tài)[18]。本研究發(fā)現(xiàn)，日糧中單獨(dú)添加酵母硒或酵母硒與5、10 mg·kg-1硼聯(lián)用均可顯著增加42 d肉雞胸腺、脾臟和法氏囊的器官指數(shù)，且酵母硒與5、10 mg·kg-1硼聯(lián)用還能顯著增加21 d肉雞法氏囊器官指數(shù)。這表明酵母硒單獨(dú)使用或與硼聯(lián)用均可促進(jìn)免疫器官的發(fā)育，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，但酵母硒與適量的硼聯(lián)用效果更為明顯，暗示硒和硼對(duì)免疫器官的生長(zhǎng)發(fā)育可產(chǎn)生一定的協(xié)同作用，其主要原因是酵母硒能夠改善腸道菌群，提高腸道消化酶的活性，而硼能夠促進(jìn)小腸發(fā)育，改善小腸的組織結(jié)構(gòu)，進(jìn)而增加小腸的吸收功能[19-21]，兩者聯(lián)合使用后，硼通過(guò)改善腸道的形態(tài)結(jié)構(gòu)，為腸道菌群的生長(zhǎng)及平衡提供良好的環(huán)境，硒又進(jìn)一步通過(guò)調(diào)節(jié)腸道微生物菌群平衡，增強(qiáng)腸道的吸收能力，這比單獨(dú)添加酵母硒更加有利于腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，為免疫器官的生長(zhǎng)發(fā)育提供充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，最終對(duì)免疫器官的生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生更好的促進(jìn)作用。另外，硼的補(bǔ)充對(duì)硒的生物學(xué)功能也能夠產(chǎn)生一定的影響。Hoffman等[22]研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加相同劑量的硼與不同劑量的硒，對(duì)野鴨的生長(zhǎng)、血清生化指標(biāo)和低蛋白飲食的存活率產(chǎn)生了并不一致的影響，這表明硼與硒之間存在明顯的相互作用。但Xu等[23]研究顯示，飲食中補(bǔ)充不同劑量的硒對(duì)大骨節(jié)病患者毛發(fā)中硼的水平?jīng)]有產(chǎn)生影響，暗示補(bǔ)充硒對(duì)動(dòng)物機(jī)體吸收和利用硼的影響不明顯，這與Hoffman等的研究結(jié)果明顯有所不同，其原因?yàn)楹涡枰M(jìn)一步研究證實(shí)。同時(shí)，本研究還發(fā)現(xiàn)，酵母硒與15 mg·kg-1硼聯(lián)用則僅僅顯著增加42 d肉雞法氏囊器官指數(shù)，對(duì)胸腺和脾臟器官指數(shù)的增加不明顯，這表明隨著硼補(bǔ)充量的增加，酵母硒與硼聯(lián)用效果有所減弱，其主要原因可能是：一方面硼的攝入增加逐漸影響了機(jī)體對(duì)飼料中其他微量元素的吸收利用[24]，另一方面硼的添加量已經(jīng)超過(guò)動(dòng)物的最低營(yíng)養(yǎng)需要量，但還未達(dá)到硼對(duì)動(dòng)物的最低毒性劑量[25]，這使得機(jī)體逐漸對(duì)攝入的硼不能完全利用，進(jìn)而造成硼對(duì)肉雞胃腸功能的有益作用逐漸減弱。

3.2酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)肉雞免疫器官組織結(jié)構(gòu)的影響

器官的生理功能是由相應(yīng)的組織結(jié)構(gòu)所決定，而組織結(jié)構(gòu)是評(píng)價(jià)器官發(fā)育狀況的又一重要指標(biāo)。在不同器官中，執(zhí)行功能的組織結(jié)構(gòu)變化可以直接反映該器官的發(fā)育狀況和功能情況。為此，本研究通過(guò)觀察肉雞免疫器官中執(zhí)行功能的組織結(jié)構(gòu)變化，進(jìn)一步分析酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)免疫器官生長(zhǎng)發(fā)育和免疫功能的影響。研究發(fā)現(xiàn)，酵母硒或硼的適量添加均能夠改善動(dòng)物免疫器官的組織結(jié)構(gòu)。王海娜[26]對(duì)小鼠的研究發(fā)現(xiàn)，飼料中缺硒可導(dǎo)致小鼠發(fā)育遲緩，生殖器官損傷，曲細(xì)精管管壁變薄，生精細(xì)胞數(shù)量減少，而適量的補(bǔ)充酵母硒可明顯改善小鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)，曲細(xì)精管增大，生精細(xì)胞增多，排列整齊。陳大偉等[27]研究顯示，日糧中補(bǔ)充適量的酵母硒，能夠在一定程度上減弱鉛中毒對(duì)蛋雞腎臟組織結(jié)構(gòu)的損傷，改善腎臟的病理變化。王玨等[28]對(duì)肉雞的研究也發(fā)現(xiàn)，適量的補(bǔ)充中草藥酵母硒能夠增加胸腺和法氏囊的器官指數(shù)，增大胸腺小葉面積和皮質(zhì)增厚，減少胸腺小體數(shù)量，使法氏囊小結(jié)體積增大，退化延遲。另外，李升和等[29-30]研究表明，飲水補(bǔ)充適量的硼能夠促進(jìn)3～6周齡固始雞免疫器官的生長(zhǎng)發(fā)育，改善組織結(jié)構(gòu)，使脾小結(jié)數(shù)量增多，體積增大，動(dòng)脈周圍淋巴鞘顯著增厚，胸腺小葉增大，皮質(zhì)增厚，法氏囊皺襞變大，淋巴濾泡增多。本研究也發(fā)現(xiàn)，日糧中單獨(dú)添加0.3 mg·kg-1的酵母硒能夠使21 d和42 d肉雞法氏囊小結(jié)明顯增大，數(shù)量增多，脾小結(jié)和動(dòng)脈周圍淋巴鞘面積也有所增大。而0.3 mg·kg-1的酵母硒分別與5、10 mg·kg-1的硼聯(lián)合補(bǔ)充，則能夠顯著增加21 d和42 d肉雞脾小結(jié)、脾動(dòng)脈周圍淋巴鞘和法氏囊小結(jié)面積及胸腺皮質(zhì)厚度，使脾小結(jié)和法氏囊小結(jié)數(shù)量增多，脾索增粗，胸腺小葉內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量增加，這表明酵母硒和硼的聯(lián)合使用能夠更為明顯的改善肉雞免疫器官組織結(jié)構(gòu)，促進(jìn)其生長(zhǎng)發(fā)育。其主要原因可能是，適量的補(bǔ)充硼能夠改善胃的組織結(jié)構(gòu)，促進(jìn)胃的發(fā)育，有利于飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化[31]，且經(jīng)胃吸收的硼還可以調(diào)節(jié)多種酶的活性，進(jìn)而影響蛋白質(zhì)、脂類、碳水化合物和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝，這進(jìn)一步提高了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的易消化性[32]。另外，酵母硒和硼均能夠增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化功能，進(jìn)而減少體內(nèi)外因素誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞凋亡[10，33]，這也為淋巴細(xì)胞的增殖發(fā)育提供了良好的保護(hù)，最終使免疫器官組織結(jié)構(gòu)明顯改善。

3.3酵母硒和硼聯(lián)用對(duì)肉雞免疫功能的影響

動(dòng)物機(jī)體的免疫功能包括特異性免疫和非特異性免疫，特異性免疫反應(yīng)又包括體液免疫和細(xì)胞免疫，體液免疫主要由B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體來(lái)介導(dǎo)，細(xì)胞免疫主要由T淋巴細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子來(lái)介導(dǎo)。T淋巴細(xì)胞根據(jù)功能不同，可分為輔助性T細(xì)胞(CD4+T細(xì)胞)、細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CD8+T細(xì)胞)、效應(yīng)T細(xì)胞、抑制性T細(xì)胞、記憶性T細(xì)胞、遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)T細(xì)胞等[34]，其中，CD4+T細(xì)胞具有協(xié)助體液免疫和細(xì)胞免疫的功能。CD4+T細(xì)胞根據(jù)分泌細(xì)胞因子的類型不同又分為Th1和Th2亞型，Th1型細(xì)胞主要分泌IL-2、IFN-γ等細(xì)胞因子，能夠輔助抗體產(chǎn)生，參與細(xì)胞免疫和遲發(fā)型超敏性炎癥反應(yīng)。Th2型細(xì)胞主要分泌IL-4、白細(xì)胞介素-6(IL-6)等細(xì)胞因子，能夠刺激B淋巴細(xì)胞增殖并分泌抗體，參與體液免疫[35]。因此，通過(guò)檢測(cè)血清中免疫球蛋白含量、特異性抗體以及Th1和Th2型細(xì)胞因子的水平可以直接反映動(dòng)物機(jī)體的免疫功能狀態(tài)。研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加適量的酵母硒可顯著增加馬血漿狂犬病毒抗體水平以及細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-1(IL-1)、白細(xì)胞介素-5(IL-5)和白細(xì)胞介素-8(IL-8)的水平[36]，提高淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能[16]。同樣，日糧中適量添加硼，可明顯提高豬血清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和INF-γ的水平[37]，增加血液白細(xì)胞的數(shù)量和分葉核嗜中性粒細(xì)胞的比例，提高抗病能力[38]。本研究也發(fā)現(xiàn)，單獨(dú)添加酵母硒或酵母硒與硼聯(lián)用均可不同程度增加21 d和42 d肉雞血清IgA、IgG和IgM含量以及NDV抗體和細(xì)胞因子IL-2、INF-γ的水平，其中酵母硒與5 mg·kg-1硼聯(lián)用可顯著升高21日齡肉雞血清NDV抗體以及42日齡肉雞血清IgG、NDV抗體、IL-2和INF-γ水平，酵母硒與10 mg·kg-1硼聯(lián)用可顯著升高21d肉雞血清IL-2以及42d肉雞血清IgA、NDV抗體和IL-2水平，這表明酵母硒與硼聯(lián)用對(duì)機(jī)體免疫功能可產(chǎn)生更好的促進(jìn)作用，這與Fairbrother等[39]的研究結(jié)果相一致。Fairbrother等[39]研究發(fā)現(xiàn)，增加硒和硼的攝入量可促進(jìn)反嘴鷸的生長(zhǎng)，增加血液和中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的比例以及淋巴細(xì)胞對(duì)刀豆A的增殖活性，進(jìn)而增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，這表明硼與酵母硒聯(lián)用對(duì)機(jī)體免疫功能具有明顯的協(xié)同促進(jìn)作用。其可能原因是，一方面硼通過(guò)影響機(jī)體多種代謝酶的活性促進(jìn)了硒的利用及硒蛋白的合成，進(jìn)而提高機(jī)體抗氧化酶SOD和GASH-Px的活性，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化功能，及時(shí)清除免疫器官內(nèi)的氧自由基，減弱脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖分化[40-41]。另一方面，硼還參與能量底物的代謝，其與煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)或環(huán)腺苷二磷酸(cADP)核糖結(jié)合抑制細(xì)胞Ca2+釋放，進(jìn)而影響淋巴細(xì)胞增殖分化[32]。

4 結(jié)論

研究結(jié)果表明，酵母硒與適量的硼聯(lián)用對(duì)AA肉雞的免疫器官發(fā)育和免疫功能有明顯促進(jìn)作用，可不同程度增加免疫器官指數(shù)、血清IgA和IgG含量、血清NDV抗體以及細(xì)胞因子IL-2和INF-γ水平，改善免疫器官組織結(jié)構(gòu)，促進(jìn)其生長(zhǎng)發(fā)育，并以0.3 mg·kg-1酵母硒和5～10 mg·kg-1硼的聯(lián)用效果較好。

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(責(zé)任編輯盧福莊)

Combinedeffectsofyeastseleniumandborononstructureofimmuneorgansandimmunefunctionofbroilers

JIN Erhui， ZHOU Jinxing， REN Man， Hu Qianqian， JIN Guangming， LI Shenghe*

(CollegeofAnimalScience，AnhuiScienceandTechnologyUniversity，F(xiàn)engyang233100，China)

In order to study the combined effects of yeast selenium and boron on development of immune organ and immune function of broilers， a total of 1 200 one-day-old AA broilers were randomly divided into five groups， the control group and the experimental groups Ⅰ， Ⅱ， Ⅲ and Ⅳ. Each group included 6 pens and 40 birds per pen. The control group was given a basic diet， while experimental groups Ⅰ， Ⅱ， Ⅲ and Ⅳ were given basic diets supplemented with 0.3 mg·kg-1yeast selenium and different doses of boron (0， 5， 10， 15 mg·kg-1) for 42 days， respectively. The results showed as follows: 1) Compared with the control group at 21 days of age， the indexes of bursa of Fabricius and the areas of splenic node， periarterial lymphatic sheath and bursa nodule of Fabricius of broilers in experimental group Ⅱ and Ⅲ were significantly (P<0.05) increased; SerumNewcastlediseasevirus(NDV) antibody and interferon-γ (INF-γ) levels of broilers in experimental group Ⅱ and the serum interleukin-2 (IL-2) contents of broilers in experimental group Ⅲ were also significantly (P<0.05) increased. 2) Compared with the control group at 42 days of age， the indexes of thymus and bursa of Fabricius， and the levels of serum NDV antibody and IL-2， and the areas of splenic node， periarterial lymphatic sheath and bursa nodule of Fabricius of broilers in experimental group Ⅱ and Ⅲ were significantly (P<0.05) increased; the serum IgG and IFN-γ levels of broilers in experimental group Ⅱ were also significantly (P<0.05) increased; The indexes of thymus and bursa of Fabricius and serum IgG levels of broilers in experimental group Ⅰ were significantly (P<0.05) increased. Microscopic observation also showed that at 21 and 42 days of age， the microstructure of immune organs were improved in broilers of experimental group Ⅱ and Ⅲ， such as the structure of white pulp and red pulp of the spleen were clear， the boundary of thymus cortex and medulla was obvious， the node number of bursa of Fabricius were increased and the arrangement was compacted， and the size of bursa of Fabricius lobule also significantly (P<0.05) increased in experimental group Ⅰ. In conclusion， either the alone supplementation of yeast selenium or combined supplementation of yeast selenium and different doses of boron could promote the development of immune organs， improve microstructure and enhance the immune function of broiler to a certain extent， and combined supplementation of 0.3 mg·kg-1yeast selenium and 5-10 mg·kg-1boron had more obvious beneficial effects.

yeas selenium; boron; broiler; immune organ; tissue structure; immune function

靳二輝，周金星，任曼，等. 酵母硒和硼聯(lián)合添加對(duì)肉雞免疫器官組織結(jié)構(gòu)及免疫功能的影響[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2017，29(11): 1783-1795.

10.3969/j.issn.1004-1524.2017.11.03

2017-04-11

國(guó)家自然科學(xué)基金(31402154，31502137，31672502)；國(guó)家星火計(jì)劃項(xiàng)目(2015GA710015)；安徽省教育廳重點(diǎn)項(xiàng)目(KJ2017A505，KJ2016A823)；安徽省農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化項(xiàng)目(1504032001)；安徽科技學(xué)院科研基金重點(diǎn)項(xiàng)目(ZRC2016476，ZRC2013354)；安徽省第七批“115”產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(皖人才[2014] 4號(hào))；安徽科技學(xué)院重點(diǎn)建設(shè)學(xué)科項(xiàng)目(AKZDXK2015A04)

靳二輝(1976—)，男，河南汝州人，博士，副教授，主要從事動(dòng)物解剖與組織學(xué)研究。E-mail: jineh@ahstu.edu.cn

*通信作者，李升和，E-mail: lishhe2005@163.com

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1004-1524(2017)11-1783-13