孫立峰，張寶英，孟劍鋒，李 亮，彭 輝

（邢臺市人民醫(yī)院心臟外科，河北 邢臺 054001）

銀杏內(nèi)酯B對缺氧復氧損傷心肌細胞保護作用研究

孫立峰，張寶英，孟劍鋒，李 亮，彭 輝

（邢臺市人民醫(yī)院心臟外科，河北 邢臺 054001）

目的 研究和分析銀杏內(nèi)酯B對缺氧復氧損傷心肌細胞保護作用。方法 對乳鼠的心肌細胞進行分離和培養(yǎng)，建立空白對照組，缺氧復氧組，銀杏內(nèi)酯B組，每組中設(shè)立10個復孔，在實施6小時的干預(yù)之后，使用倒置光學纖維鏡對細胞的形態(tài)進行觀察。結(jié)果 銀杏內(nèi)酯B組的心肌細胞的生存狀態(tài)與形態(tài)與缺氧復氧組相比有明顯的改善，銀杏內(nèi)酯B組的存活率高于缺氧復氧組，組間的數(shù)據(jù)對比，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計學意義。結(jié)論 銀杏內(nèi)酯B能夠?qū)θ毖鯊脱鯎p傷心肌細胞起到一定的保護作用，提高了存活率，減少細胞凋亡的現(xiàn)象，從而降低凋亡率。

銀杏內(nèi)酯B；缺氧復氧；保護作用；心肌細胞

銀杏屬于較為古老的植物，而銀杏內(nèi)酯B則是在銀杏葉中提取的藥物。銀杏內(nèi)酯B能夠?qū)ι窠?jīng)系統(tǒng)起到較大程度上的保護作用，具有很強的抗氧化和抗炎的作用[1]。同時銀杏內(nèi)酯B對細胞損傷還可以起到一定的抑制作用，保護細胞。本文將會分析銀杏內(nèi)酯B對缺氧復氧損傷心肌細胞保護作用，詳細報告匯總?cè)缦隆?/p>

1 資料與方法

1.1 一般資料

實驗藥物主要包括銀杏內(nèi)酯B、小牛血清、DMEM培養(yǎng)基與細胞凋亡檢測試劑盒。實驗對象選擇1到3天的乳鼠。

1.2 方法

首先對乳鼠的心肌細胞進行分離和培養(yǎng)，然后建立空白對照組、缺氧復氧組以及銀杏內(nèi)酯B組，每組中可以設(shè)立10個復孔，在實施6小時的干預(yù)之后，使用倒置光學纖維鏡對細胞的形態(tài)進行觀察。實驗操作的具體操作方法為：在無菌的條件下對乳鼠進行開胸，并取出心臟，并對心室組織進行剪取，對乳鼠的心肌細胞進行消化制備，并對其進行100%濕度培養(yǎng)，培養(yǎng)環(huán)境注意溫度控制在37攝氏度，濃度為5%的二氧化碳，培養(yǎng)時間為72小時。之后將培養(yǎng)基丟棄掉，在每個孔中加入2 mL的無糖臺氏液；在等待15 min之后，將出氣管與進氣管夾閉，使此時的狀態(tài)為缺氧狀態(tài)。在2小時之后將缺氧盒打開，再將培養(yǎng)皿取出，此情況則為復氧。之后再對細胞形態(tài)進行詳細的觀察，使用PBS溶液對其進行沖洗，一直到細胞間隙能夠在顯微鏡下清晰顯示，再將其放置在通風處，等待其晾干之后再使用顯微鏡對細胞的形態(tài)進行全面詳細的觀察，并做相應(yīng)的記錄。

1.3 判定指標

使用MTT對OD值進行測定，并計算細胞的存活率，細胞的存活率為實驗組的OD值與對照組OD的比例。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件對所收集數(shù)據(jù)進行分析，計量資料以“±s”表示，采用t檢驗；計數(shù)資料以百分數(shù)（%），例（n）表示，采用x2檢驗；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

銀杏內(nèi)酯B組的心肌細胞的生存狀態(tài)與形態(tài)與缺氧復氧組相比有明顯的改善，銀杏內(nèi)酯B組、缺氧復氧組與空白對照組的存活率分別為（87.33±5.31）%、（45.42±2.35）%、（96.52±3.56）%，銀杏內(nèi)酯B組的存活率高于缺氧復氧組，組間的數(shù)據(jù)對比，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 三組心肌細胞存活率比較（±s）

表1 三組心肌細胞存活率比較（±s）

銀杏內(nèi)酯B組 87.33±5.31 ＜0.05缺氧復氧組 45.42±2.35 ＜0.05空白對照組 96.52±3.56 ＜0.05

3 討 論

灌注損傷術(shù)與梗塞再通之后最容易出現(xiàn)的并發(fā)癥就是缺血，具有相當復雜的病理機制，目前臨床醫(yī)學方面對此還尚未得到明確[2]。

銀杏內(nèi)酯B屬于從中藥銀杏葉中提取的活性成分，是一種血小板活化因子拮抗劑，有抗炎與抗氧化等一系列的作用[3]。銀杏內(nèi)酯B能夠提高細胞的存活率，通過抑制細胞的損傷來達到保護缺氧復氧損傷心肌細胞的作用，同時對神經(jīng)系統(tǒng)也能夠起到一定的保護作用。此外銀杏內(nèi)酯B能夠?qū)ρ趸偷兔芏弱サ鞍滓鸬囊幌盗醒装Y反應(yīng)起到一定的抑制作用，起到防止心肌細胞損傷的作用[4]。

此次研究結(jié)果顯示，銀杏內(nèi)酯B組、缺氧復氧組與空白對照組的存活率分別為（87.33±5.31）%、（45.42±2.35）%、（96.52±3.56）%，空白對照組的存活率最高，同時銀杏內(nèi)酯B組的存活率高于缺氧復氧組，組間的數(shù)據(jù)相對比，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）?？梢钥闯鲢y杏內(nèi)酯B組的心肌細胞的生存狀態(tài)與形態(tài)與缺氧復氧組相比有明顯的改善，銀杏內(nèi)酯B組的存活率高于缺氧復氧組。

綜上所述，銀杏內(nèi)酯B能夠?qū)θ毖鯊脱鯎p傷心肌細胞起到一定的保護作用，提高了存活率，減少細胞凋亡的現(xiàn)象，從而降低凋亡率，具有很高的應(yīng)用價值，值得推廣應(yīng)用。

[1] 程 怡.α7煙堿型乙酰膽堿受體激動劑后處理對大鼠離體心肌細胞缺氧—復氧損傷的保護作用及其機制的實驗研究[D].北京協(xié)和醫(yī)學院,2014.12(32):157-160.

[2] 龔 婉,肖 揚,張 萌,等.丹參總酚酸及三七總皂苷配伍對缺氧復氧損傷心肌細胞的保護作用研究[J].中國中藥雜志,2013,23(07):1046-1051.

[3] 閔 清,白育庭,余 薇,等.黃芪多糖對乳鼠心肌細胞缺氧/復氧損傷的保護作用[J].中國藥理學通報,2010,30(12):1661-1664.

[4] 馬永潔,朱 丹,鐘芝茵,等.人參皂苷Rg1和丹參酮ⅡA配伍對缺氧-復氧損傷心肌細胞的保護作用[J].軍事醫(yī)學科學院院刊,2010,26(03):243-246.

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ISSN.2095-6681.2017.25.44.02

銀杏內(nèi)酯B對缺氧復氧損傷肌細胞保護作用的研究

本文編輯：李 豆