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(沈陽藥科大學(xué) 中藥學(xué)院, 遼寧 沈陽 110016)
顛茄種子萌發(fā)特性研究
范雪,王晶,路金才,李敬,賈凌云
(沈陽藥科大學(xué) 中藥學(xué)院, 遼寧 沈陽 110016)
為探討顛茄種子的最佳發(fā)芽條件及明確影響顛茄種子發(fā)芽率的因素,研究了不同年限(2012、2013、2014、2015年)、不同溫度(包括15,20,25,30 ℃4個恒溫)和不同濃度的赤霉素(GA3)、萘乙酸(NAA)對顛茄種子萌發(fā)的影響。結(jié)果表明,2013年的顛茄種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)均為最高,2014年的最低;顛茄種子的最適發(fā)芽溫度為恒溫30 ℃;GA3和NAA對提高顛茄種子發(fā)芽率均有明顯的促進(jìn)作用,并且在濃度分別為100 mg/L和10-4mg/L時對提高顛茄種子發(fā)芽率的作用最明顯。
顛茄種子; 發(fā)芽率; 年限; 溫度; 赤霉素; 萘乙酸
顛茄(AtropabelladonnaL.) 俗名“野山茄”,別名美女草、別拉多娜草,顛茄草,屬于茄科顛茄屬,為多年生有毒草本植物,全草入藥[1-3]。原產(chǎn)于歐洲中、南部及小亞細(xì)亞,20世紀(jì)30年代引入中國[4]。顛茄是《中華人民共和國藥典》(2005年版)[5]收載的中藥顛茄酊、顛茄浸膏、顛茄流浸膏的原植物,其主要成分為莨菪堿[6]。近年來,由于顛茄的需求量激增,而國內(nèi)顛茄資源不能滿足市場需求,需擴(kuò)大種植規(guī)模以滿足市場需要[7-9]。但是由于顛茄種子內(nèi)含有抑芽物質(zhì),所以發(fā)芽率低,成苗率低[10]。
前人對顛茄栽培技術(shù)[7-8]、組織培養(yǎng)與快速繁殖[4,9]、病蟲害防治[11-12]等都有所研究,但對如何打破顛茄種子休眠,提高其發(fā)芽率尚未見報道。本實驗通過對顛茄種子進(jìn)行不同的處理,探討了提高顛茄種子發(fā)芽率的最適條件,旨在為顛茄規(guī)?;a(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。
1.1 材 料
2012、2013、2014、2015年顛茄種子均采自沈陽藥科大學(xué)藥草園。
1.2 儀 器
智能人工氣候培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿、電子天平(精確0.000 1)等。
1.3 方 法
1.3.1 顛茄種子千粒重測定
分別隨機(jī)選取不同年限的顛茄種子500粒,重復(fù)2次,分別稱重(g),取平均值,折算成千粒重,精確到0.01 g。千粒重結(jié)果如表1所示。
表1 不同年限顛茄種子的千粒重
2012年2013年2014年2015年千粒重(g)0.40±0.0140.46±0.0140.50±0.0070.45±0.007
1.3.2 不同年限對顛茄種子萌發(fā)的影響
年限設(shè)2012、2013、2014、2015年4個水平,每個水平供試種子數(shù)為50粒,重復(fù)2次。其中只有2013年的種子在冰箱內(nèi)低溫儲藏,其余年限的種子均在室溫干燥條件下保存。
1.3.3 不同溫度對2014年顛茄種子萌發(fā)的影響
溫度設(shè)為15,20,25,30 ℃共4個恒溫水平,每天恒溫12 h。每個水平供試種子數(shù)為50粒,重復(fù)2次。
1.3.4 不同激素對2014年顛茄種子萌發(fā)的影響
分別用不同濃度的GA3和NAA對2014年顛茄種子進(jìn)行處理。GA3濃度分別為0,50,100,200,400 mg/L,NAA的濃度分別為0,10-4,10-3,10-2,10-1,1 mg/L。每個處理浸種48 h,供試種子50粒,重復(fù)2次。
1.4 測定指標(biāo)
測定指標(biāo)主要包括:發(fā)芽率(%)=發(fā)芽種子數(shù)/供試種子總數(shù)×100%;發(fā)芽勢(%)=發(fā)芽3 d后的發(fā)芽種子數(shù)/供試種子總數(shù)×100%;發(fā)芽指數(shù)=∑Gt/Dt(式中:Gt為t日的發(fā)芽數(shù),Dt為相應(yīng)的發(fā)芽天數(shù))[13]。發(fā)芽試驗開始后每天觀察種子的發(fā)芽情況,并在發(fā)芽后第3天統(tǒng)計發(fā)芽勢,第20天統(tǒng)計發(fā)芽率,計算13 d內(nèi)的發(fā)芽指數(shù)并在發(fā)芽最后1 d隨機(jī)選取10個發(fā)芽正常的幼苗,測量種子的芽長與根長,取其平均值。
2.1 不同年限對顛茄種子萌發(fā)的影響
從表2可以看出,不同年限顛茄種子的發(fā)芽率情況差異較大,且顛茄幼苗的生長情況隨著儲藏時間的延長而呈微弱的下降趨勢。
2.2 不同溫度對2014年顛茄種子萌發(fā)的影響
從表3可以看出,不同溫度條件下,2014年顛茄種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢及發(fā)芽指數(shù)均有顯著性差異。在低溫(15 ℃)條件下,顛茄種子處于休眠狀態(tài),基本不發(fā)芽,隨著溫度的升高,顛茄種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢及發(fā)芽指數(shù)均呈現(xiàn)上升趨勢。在30 ℃時達(dá)到最大值。說明30 ℃恒溫是顛茄種子發(fā)芽的最適溫度,而顛茄幼苗的生長情況隨溫度的升高呈微弱的下降趨勢。
2.3 不同激素對2014年顛茄種子萌發(fā)的影響
從表4可以看出,一定濃度的GA3對提高2014年顛茄種子的發(fā)芽率具有明顯的促進(jìn)作用,發(fā)芽率提高了至少20%。當(dāng)濃度高于200 mg/L時,種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)開始呈下降趨勢。說明高濃度的GA3對2014年顛茄種子發(fā)芽具有抑制作用。并且顛茄幼苗的生長情況隨GA3濃度的升高呈下降趨勢,說明GA3的濃度過高,對顛茄幼苗的生長起抑制作用。
從表5可以看出,一定濃度的NAA對提高2014年顛茄種子的發(fā)芽率具有明顯的促進(jìn)作用。NAA濃度在10-4mg/L時,2014年顛茄種子發(fā)芽率最高,為95.00%。隨著NAA濃度的升高,促進(jìn)作用逐漸減小。說明低濃度的NAA能促進(jìn)顛茄種子發(fā)芽,而高濃度的NAA會抑制顛茄種子發(fā)芽。并且顛茄幼苗的生長情況也隨著NAA濃度的升高而呈下降趨勢,說明低濃度的NAA對顛茄幼苗生長具有促進(jìn)作用,而高濃度NAA會抑制其生長。
3.12013年與2015年顛茄種子發(fā)芽率均比2012年的高,說明顛茄種子儲藏時間越長,發(fā)芽率越低。其中,2013年的顛茄種子因為在冰箱內(nèi)低溫冷藏,所以其發(fā)芽率、發(fā)芽勢最高,分別為40.00%和9.00%,推測低溫冷藏有助于提高顛茄種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢,說明顛茄種子可以低溫冷藏保存。2014年的顛茄種子發(fā)芽率及發(fā)芽勢最低,分別為9.00%和1.00%,可能是由于當(dāng)年氣候或生長環(huán)境惡劣導(dǎo)致(或者是因為2014年顛茄種子儲藏在塑料袋中,有少量發(fā)生霉變導(dǎo)致),所以在后續(xù)的實驗中探討了溫度和激素對2014年顛茄種子發(fā)芽率的影響。
表2 不同年限對顛茄種子萌發(fā)的影響
年限發(fā)芽率(%)發(fā)芽勢(%)發(fā)芽指數(shù)(%)芽長(mm)根長(mm)201229.00±9.905.00±1.416.01±0.359.45±2.4717.30±1.41201340.00±8.499.00±1.4111.52±2.2012.80±0.2815.05±0.2120149.00±1.411.00±1.411.97±0.1513.20±1.2724.30±1.41201535.00±1.414.00±0.005.79±1.2014.65±0.0719.85±1.06
表3 不同溫度對2014年顛茄種子萌發(fā)的影響
溫度(℃)發(fā)芽率(%)發(fā)芽勢(%)發(fā)芽指數(shù)(%)芽長(mm)根長(mm)150.000.000.000.000.00207.00±1.410.001.41±0.3713.89±0.4324.33±1.86259.00±1.411.00±1.411.98±0.1513.20±1.2724.30±1.413098.00±0.0053.00±15.5646.15±2.379.20±0.6423.75±1.31
表4 GA3對2014年顛茄種子萌發(fā)的影響
GA3濃度(mg/L)發(fā)芽率(%)發(fā)芽勢(%)發(fā)芽指數(shù)(%)芽長(mm)根長(mm)0(ck)9.10±0.081.00±0.002.01±0.00514.01±1.1724.20±1.315046.00±5.6613.00±1.4115.08±2.1310.35±0.4224.00±0.5310047.00±4.2414.00±2.8317.05±0.089.60±0.5323.39±0.0620033.00±1.4112.00±2.8313.61±0.228.11±1.1720.50±0.7040031.50±0.7117.00±1.4114.06±0.277.20±1.0521.22±0.88
表5 NAA對2014年顛茄種子萌發(fā)的影響
NAA濃度(mg/L)發(fā)芽率(%)發(fā)芽勢(%)發(fā)芽指數(shù)(%)芽長(mm)根長(mm)0(ck)37.66±6.1326.00±5.6626.91±3.9713.88±0.6724.22±1.7610-495.00±1.4129.00±4.2444.75±1.6115.01±1.4127.89±0.4310-387.00±15.5623.00±1.4135.84±4.4114.72±0.8827.23±0.5810-269.00±4.2435.00±1.4142.36±1.8214.56±0.2326.47±1.7710-170.00±2.8326.00±5.6635.36±2.6414.27±2.2125.55±0.98162.49±19.1119.00±7.0727.59±11.6114.04±5.3324.30±1.48
3.2溫度對顛茄種子發(fā)芽率具有促進(jìn)作用,適宜的發(fā)芽溫度為25~30 ℃,其中30 ℃為最適發(fā)芽溫度,表明顛茄種子屬于高溫萌發(fā)型種子。
其次,介紹區(qū)域分解技術(shù)。首先,將研究區(qū)域分解成k個子區(qū)域D1, D2, …,Dk,然后延拓每一個子區(qū)域得到Ωi,使得Di??Ωi?Ω。每個處理器分配一個區(qū)域Ωi,并生成獨立的復(fù)合網(wǎng)格,在子區(qū)域Ωi附近用細(xì)網(wǎng)格h剖分,遠(yuǎn)離子區(qū)域的區(qū)域用粗網(wǎng)格H剖分。
3.3一定濃度的GA3處理顛茄種子后能夠提高其發(fā)芽率、發(fā)芽勢及發(fā)芽指數(shù)。但對于顛茄幼苗來說,GA3的濃度過高,沒有起到生長調(diào)節(jié)劑的作用,反而抑制了其生長。一定濃度的NAA處理顛茄種子后,對提高其發(fā)芽率具有明顯的促進(jìn)作用,而發(fā)芽率及幼苗生長情況隨NAA濃度的升高呈下降趨勢。說明低濃度NAA能促進(jìn)而高濃度會抑制顛茄種子發(fā)芽及幼苗的生長。
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然而,試驗過程中發(fā)現(xiàn),雖然種子于第1年發(fā)芽,但發(fā)芽數(shù)量極少,主要集中于第2年萌發(fā)(表2至表4)。筆者于第2年2月份觀察發(fā)現(xiàn),有少量種子開始萌發(fā),檢查部分未發(fā)芽的穴盤,發(fā)現(xiàn)種子依然存活,并開始長出胚根。因此,筆者于2月份開始繼續(xù)定期統(tǒng)計種子發(fā)芽率,直到5月份結(jié)束??梢?,榕葉冬青種子還是表現(xiàn)出一定的隔年萌發(fā)的特性。這與毛冬青、三花冬青等存在非常大的差異。
2) 研究表明,冬青屬植物種子萌發(fā)率普遍較低,如大葉冬青(I.latifolia)(30.0%)[13]、大果冬青(I.macrocarpa)(17.1%)[14]、小果冬青(12%)等。本試驗結(jié)果表明,通過低溫層積、赤霉素浸泡及微波輻射處理,榕葉冬青種子發(fā)芽率最高達(dá)74%,顯著高于以上幾種同屬植物。這為榕葉冬青今后的生產(chǎn)與利用提供了可靠的理論依據(jù)。
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Study on Seeds Germination Characteristics ofAtropabelladonnaL.
FANXue,WANGJing,LUJincai,LIJing,JIALingyun
2016-10-20
范 雪(1993—),女(蒙古族),河北省隆化縣人;在讀碩士研究生,研究方向:中藥分析方向。
賈凌云(1974—),女,遼寧大石橋人;博士研究生,副教授,研究方向:中藥質(zhì)量評價及中藥資源的開發(fā)利用; E-mail:jialingyun2003@126.com。
10.16590/j.cnki.1001-4705.2017.03.097
S 567
A
1001-4705(2017)03-0097-03