劉旭凌 邵周俊 殷 霞 李 季 吳 堅(jiān) 陳建杰

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院感染科，上海 200062)

阿德福韋酯聯(lián)合苦味葉下珠片對(duì)HBV陽(yáng)性肝硬化患者IL-7、病毒載量及巨核細(xì)胞的影響

劉旭凌 邵周俊 殷 霞 李 季 吳 堅(jiān)1陳建杰

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院感染科，上海 200062)

目的探討阿德福韋酯(ADV)聯(lián)合苦味葉下珠片對(duì)乙肝病毒(HBV)陽(yáng)性肝硬化患者白細(xì)胞介素(IL)-7、病毒載量及巨核細(xì)胞的影響。方法100例HBV陽(yáng)性肝硬化患者按隨機(jī)數(shù)表法分為觀察組和對(duì)照組，每組50例，觀察組采用ADV聯(lián)合苦味葉下珠片進(jìn)行治療，對(duì)照組采用ADV進(jìn)行治療，兩組均治療12個(gè)月，對(duì)比兩組治療后血清細(xì)胞因子IL-7、病毒載量及巨核細(xì)胞的水平。結(jié)果治療后12個(gè)月觀察組IL-7水平明顯高于對(duì)照組(Plt;0.05)；觀察組3、6、9個(gè)月的HBV-DNA含量明顯低于對(duì)照組(Plt;0.05)；觀察組12個(gè)月的HBV-DNA陰轉(zhuǎn)率、HBV表面抗原(HBeAg)陰轉(zhuǎn)率、ALT復(fù)常率，均明顯高于對(duì)照組(Plt;0.05)；治療后12個(gè)月觀察組CD41水平明顯高于對(duì)照組(Plt;0.05)。結(jié)論HBV陽(yáng)性肝硬化患者采用ADV聯(lián)合苦味葉下珠片進(jìn)行治療，能有效改善血清細(xì)胞因子IL-7水平失衡，幫助患者恢復(fù)免疫能力，除此以外，還能抑制病毒的復(fù)制，降低患者的病毒載量，防止細(xì)胞受損，降低其對(duì)巨核細(xì)胞的增殖抑制作用。

阿德福韋酯；苦味葉下珠片；乙肝病毒陽(yáng)性肝硬化；病毒載量；巨核細(xì)胞

乙肝病毒(HBV)陽(yáng)性肝硬化是肝臟在慢性的HBV反復(fù)損害下造成的〔1〕。有研究證明〔2〕，乙肝患者的病情轉(zhuǎn)歸主要在于患者自身的機(jī)體免疫力和HBV兩個(gè)方面，它們?cè)贖BV感染發(fā)展成為肝硬化、肝癌中起著關(guān)鍵作用。研究報(bào)道〔3〕，近年來(lái)HBV抗病毒治療較為廣泛的用藥是阿德福韋酯(ADV)，它是核苷酸類似物，能有效抑制病毒復(fù)制，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，對(duì)病情的控制、改善肝組織及預(yù)后十分重要。有學(xué)者認(rèn)為〔4〕，中藥聯(lián)合西藥治療乙肝，在改善癥狀、調(diào)節(jié)免疫方面也有較大的優(yōu)勢(shì)，常見(jiàn)的葉下珠片就是臨床聯(lián)合治療乙肝方案之一〔5〕。本研究擬分析ADV聯(lián)合苦味葉下珠片對(duì)HBV陽(yáng)性肝硬化患者白細(xì)胞介素(IL)-7、病毒載量及巨核細(xì)胞的影響。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年1月至2016年2月上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院接診的HBV陽(yáng)性肝硬化患者100例，按隨機(jī)數(shù)表法均分為觀察組和對(duì)照組各50例，觀察組采用ADV聯(lián)合苦味葉下珠片治療，對(duì)照組單獨(dú)使用ADV治療。其中，觀察組男36例，女14例，年齡42～60〔平均(56.1±5.7)〕歲，病程2～12年，平均(3.6±1.3)年；HBV-DNA載量為(8.09±0.7)copy/ml；對(duì)照組男32例，女18例，年齡42～64〔平均(55.8±5.6)〕歲，病程3～13年，平均(3.2±1.1)年；HBV-DNA載量為(8.12±0.7)copy/ml。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合慢性乙型肝炎防治指南診斷標(biāo)準(zhǔn)；②依從性較好；③HBV-DNA載量gt;107copy/ml、HBV蛋白e抗原(HBeAg)陽(yáng)性和HBsAg陽(yáng)性均gt;6個(gè)月、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)水平是正常水平上限的2～10倍。排除標(biāo)準(zhǔn)：①處于哺乳期或妊娠期的婦女；②合并患有自身免疫性肝病等或病毒感染；③參與研究前接受過(guò)核苷或核苷類藥物抗病毒治療。患者知情同意。兩組一般資料對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)，具有可比性。

1.2方法 藥物使用方法：觀察組采用ADV聯(lián)合苦味葉下珠片治療，ADV(北京雙鷺?biāo)帢I(yè)股份有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H20080497)10 mg/次，1次/d，葉下珠片(大理白族自治州中藥制藥有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字Z20026219)4片/次，3次/d。對(duì)照組使用的ADV用法、劑量均與觀察組相同。

檢測(cè)方法：所有患者在入院治療前和治療后3、6、9和12個(gè)月，清晨空腹取外周靜脈血8 ml，5 h內(nèi)3 000/min離心15 min取上層血清，3 ml放于EP管中，放置在-80℃冰箱中保存用以檢測(cè)血清細(xì)胞因子IL-7水平，其他的用于檢測(cè)HBV-DNA、HBeAg，肝功能指標(biāo)ALT，巨核細(xì)胞CD41。

試劑盒、儀器：IL-7、HBeAg和CD41使用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)方法進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒來(lái)自美國(guó)ADL公司，儀器EPICS-XL型流式細(xì)胞分析購(gòu)自美國(guó)BECKMAN COULTER公司。HBV-DNA使用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒來(lái)自中山醫(yī)科大學(xué)達(dá)安基因診斷中心，儀器ABIPrisa-7000型購(gòu)自美國(guó)MJ Research公司。ALT使用OLYMPUS 全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自日本奧林巴斯公司。試劑盒均按說(shuō)明書(shū)操作步驟進(jìn)行。

1.3觀察指標(biāo) 對(duì)比兩組血清細(xì)胞因子IL-7水平、不同治療時(shí)段HBV-DNA含量、HBV-DNA陰轉(zhuǎn)率、HBeAg陰轉(zhuǎn)率及ALT復(fù)常率對(duì)比兩組治療前后巨核細(xì)胞CD41水平。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0軟件進(jìn)行t、χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清細(xì)胞因子IL-7水平比較 治療前兩組IL-7水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)，治療后12個(gè)月兩組均較治療前顯著升高，且觀察組顯著高于對(duì)照組(均Plt;0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清細(xì)胞因子IL-7水平比較

2.2兩組不同治療時(shí)段HBV-DNA含量比較 治療后3、6、9個(gè)月觀察組HBV-DNA含量明顯低于對(duì)照組(Plt;0.05)，治療后12個(gè)月兩組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)。見(jiàn)表2。

2.3兩組不同治療時(shí)段HBV-DNA陰轉(zhuǎn)率、HBeAg陰轉(zhuǎn)率、ALT復(fù)常率比較 兩組治療后3、6、9個(gè)月HBV-DNA陰轉(zhuǎn)率、HBeAg陰轉(zhuǎn)率、ALT復(fù)常率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)，治療后12個(gè)月，觀察組均明顯高于對(duì)照組(Plt;0.05)。見(jiàn)表3。

2.4兩組巨核細(xì)胞CD41水平比較 治療前兩組CD41水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)，治療后12個(gè)月觀察組顯著高于對(duì)照組(Plt;0.05)。見(jiàn)表4。

表2 兩組不同治療時(shí)段HBV-DNA含量比較

表3 兩組不同治療時(shí)段HBV-DNA陰轉(zhuǎn)率、HBeAg陰轉(zhuǎn)率、ALT復(fù)常率比較〔n(%),n=50〕

表4 兩組巨核細(xì)胞CD41水平比較

3 討 論

據(jù)有關(guān)資料統(tǒng)計(jì)〔6〕，全球有4億左右人攜帶HBV，亞洲約占50%。有文獻(xiàn)報(bào)道，中國(guó)是一個(gè)乙肝患者的大國(guó)，HBV攜帶者大約有1.2億人，每年HBV攜帶者死亡率都較高。流行病學(xué)調(diào)查顯示〔7〕，我國(guó)乙肝患者的HBeAg陽(yáng)性率為7%左右，慢性HBV性肝炎疾病攜帶者的患者較多，這類患者也是疾病的治療、發(fā)病高峰期。HBV陽(yáng)性肝硬化是肝臟在慢性的HBV反復(fù)損害下造成的，會(huì)導(dǎo)致患者發(fā)生肝性腦病、脾功能亢進(jìn)、上消化道出血及腹水等現(xiàn)象。臨床研究顯示〔8〕，HBV陽(yáng)性肝硬化的生存率低，死亡率較高，危害著患者的生命。HBV每次發(fā)作均有部分的肝細(xì)胞壞死和再生，同時(shí)出現(xiàn)纖維結(jié)締組織增生，導(dǎo)致正常的肝小葉結(jié)構(gòu)被破壞，形成假小葉，多次反復(fù)發(fā)作則會(huì)導(dǎo)致肝臟變形，發(fā)生血液循環(huán)障礙，積極地抑制病毒增殖，可以預(yù)防肝細(xì)胞損傷，防止其轉(zhuǎn)變成為肝硬化〔9〕。有學(xué)者稱〔10〕，抗病毒治療能強(qiáng)化機(jī)體清除病毒的能力，是治療HBV感染的關(guān)鍵手段，機(jī)體清除HBV的關(guān)鍵還要有健全的特異性免疫功能。

有研究顯示〔11〕，ADV是核苷類似物，能抑制HBV復(fù)制，改善肝臟組織，促進(jìn)患者血清轉(zhuǎn)氨酶恢復(fù)正常，臨床療效明確，可以調(diào)節(jié)機(jī)體免疫，能干預(yù)HBV-DNA轉(zhuǎn)錄。有研究顯示〔12〕，ADV聯(lián)合中醫(yī)藥治療HBV，在改善癥狀、調(diào)節(jié)免疫方面都有較大的優(yōu)勢(shì)，能降低HBV-DNA載量，降低腎損害的發(fā)生，增加臨床療效，安全性和耐受性較好。有文獻(xiàn)報(bào)道〔13〕，臨床常用的乙肝抗病毒治療藥物有ADV、拉米夫定等，均有病毒變異的風(fēng)險(xiǎn)及藥物的不良反應(yīng)，而中藥治療乙肝，往往具有更多的綜合效應(yīng)，如多途徑、多靶點(diǎn)等，其保肝治療的效果較好。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為〔14〕，葉下珠屬于大戟科葉下珠屬植物，能分離出十幾種化合物，其主要的活性成分是可水解鞣質(zhì)和多酚，有清熱、解毒及平肝等作用。有研究顯示〔154〕，苦味葉下珠提取物能抑制HBV-DNA聚合酶，能抗癌、保肝、抗HBV等，能增加抗病毒效果和機(jī)體免疫功能，加強(qiáng)ADV的抗病毒敏感性，從而達(dá)到延長(zhǎng)病毒持續(xù)應(yīng)答的時(shí)間和長(zhǎng)期抑制。有研究報(bào)道顯示〔16〕，IL-7是免疫調(diào)節(jié)因子之一，已經(jīng)用于免疫缺陷病毒(HIV)感染者的臨床治療，它能通過(guò)影響其他細(xì)胞因子，修復(fù)、調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫應(yīng)答。有研究顯示〔17〕，IL-7在慢性病毒疾病的耐藥、發(fā)病等過(guò)程中起著重要作用，能在機(jī)體收到外界的抗原刺激時(shí)，通過(guò)信號(hào)通路傳遞，作用于樹(shù)突細(xì)胞，促進(jìn)病毒清除，有助于免疫系統(tǒng)的恢復(fù)。有文獻(xiàn)報(bào)道〔18〕，巨核細(xì)胞在不同的發(fā)育階段有著不同的免疫標(biāo)志，CD41是巨核細(xì)胞的獨(dú)特標(biāo)記，檢測(cè)CD41的活性能知道其他復(fù)合物的活性，因此常用來(lái)檢測(cè)巨核細(xì)胞的分化程度。HBV會(huì)抑制巨核細(xì)胞增殖，并且對(duì)巨核細(xì)胞的抑制作用隨著病毒的載量升高而增大，并且HBV還會(huì)隨著病毒載量的增大，加大刺激作用。有學(xué)者認(rèn)為〔19〕，HBV陽(yáng)性肝硬化患者，在經(jīng)過(guò)抗病毒治療后能減小對(duì)巨核細(xì)胞的增殖、抑制作用。

本次研究結(jié)果顯示，HBV陽(yáng)性肝硬化患者采用ADV聯(lián)合苦味葉下珠片進(jìn)行治療，能有效改善血清細(xì)胞因子IL-7水平失衡，幫助患者恢復(fù)免疫能力，除此以外，還能抑制病毒的復(fù)制，降低患者的病毒載量，防止細(xì)胞受損，降低其對(duì)巨核細(xì)胞的增殖抑制作用，臨床效果明顯。

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〔2017-02-19修回〕

(編輯 袁左鳴/滕欣航)

R256.42

A

1005-9202(2017)21-5363-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.21.066

1 上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院SICU

陳建杰(1952-)，男，碩士，主任醫(yī)師，主要從事中西醫(yī)結(jié)合肝病研究。

劉旭凌(1983-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事中西醫(yī)結(jié)合肝病研究。