劉 娜 孫 良 李丕寶 孫先義

(山東省交通醫(yī)院，山東 濟南 250031)

阿魏酸鈉對老年冠心病患者血管內皮保護作用及對妊娠相關血漿蛋白A水平、核轉錄因子-κB活性的影響

劉 娜 孫 良 李丕寶 孫先義

(山東省交通醫(yī)院，山東 濟南 250031)

目的探討阿魏酸鈉對冠心病患者妊娠相關血漿蛋白(PAPP)-A水平、核因子(NF)-κB活性的影響。方法選擇冠心組患者92例，其中包括不穩(wěn)定型心絞痛患者36例，急性心肌梗死患者29例和穩(wěn)定型心絞痛患者 27例。并選取健康志愿者(健康組)70例。采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測PAPP-A水平及NF-κB活性。結果與健康組相比，冠心病患者PAPP-A水平及(健康組)NF-κB活性明顯增噶高(Plt;0.01)。阿魏酸鈉治療后冠心病患者 PAPP-A 水平及NF-κB活性均明顯下降(Plt;0 .01)。且不穩(wěn)定型心絞痛患者與急性心肌梗死患者PAPP-A 水平與NF-κB活性正相關(Plt;0.01)。結論阿魏酸鈉通過抑制炎癥反應，減少氧化應激反應，而能夠對心血管起到保護作用。

阿魏酸鈉；冠心病；妊娠相關血漿蛋白-A水平；核因子-κB活性

炎癥反應在冠心病發(fā)生、發(fā)展及轉化過程中均發(fā)揮著重要作用〔1，2〕，因此人們將某些炎癥狀態(tài)的急性期蛋白作為評估冠心病的重要評價指標，但單純采用這些急性期蛋白作為冠心病的預測及評估指標存在一定片面性〔3〕。妊娠相關血漿蛋白(PAPP)-A是一種金屬蛋白酶，它具有特異性水解胰島素樣生長因子結合蛋白(IGFBP)的作用，進而通過調節(jié)胰島素樣生長因子(IGF)水平參與血管粥樣硬化形成〔4〕，PAPP-A水平的高低能夠有效反映動脈粥樣硬化病變情況。核轉錄因子(NF)-κB是炎癥反應調節(jié)過程中的核心，通過與相應因子基因特異性結合來促進因子表達。近年報道顯示，參與冠心病形成的相關炎性反應因子中大多為NF-κB的靶基因〔5〕。有報道稱阿魏酸鈉具有防止心肌缺血、防機體氧化損傷的功效〔6〕。本研究探討阿魏酸鈉對于冠心病患者PAPP-A水平及NF-κB活性的影響，評價其對血管內皮的保護作用。

1 資料與方法

1.1研究對象 選取2013年 11月至2014年 11月在山東省交通醫(yī)院就診的冠心病患者92例，男 48例,女 44例，平均年齡(60.5±11.4)歲。入選標準參照1979年 WHO冠心病診斷標準，排除有惡性腫瘤、嚴重血液系統疾病、感染性疾病、心力衰竭及重大手術史患者，包括不穩(wěn)定型心絞痛患者36例，急性心肌梗死患者29例和穩(wěn)定型心絞痛患者 27例。此外招募健康志愿者作為健康組 70例，男 38例,女 32例,平均年齡(58.7±12.6)歲。以上入選者均對本研究知情，并自愿簽署知情同意書。開始實驗前對患者及健康志愿者一般生命體征等進行檢查，保持各組性別、年齡、吸煙情況、血壓情況、血脂水平等(Pgt;0.05)均無統計學差異，具有可比性。

1.2儀器與試劑 37℃恒溫培養(yǎng)箱(上海天呈科技有限公司)；酶標儀(BMG， LABTECH POLARstar Omega)。人NF-κB-p65試劑盒(上?；鶢栴D生物科技有限公司)；阿魏酸鈉(重慶藥友制藥有限責任公司，國藥準字 H5002187)；PAPP-A試劑盒(美國 DSL公司)。

1.3研究方法 在患者入院次日清晨及經阿魏酸鈉治療1個月后抽取其肘靜脈血 5～7 ml,低溫離心15 min后,分離血清，并儲存待測。另取 2 ml靜脈血，置于含抗凝劑試管中，混勻離心后分離血漿，貯存待測。對于血漿中PAPP-A水平的測定步驟嚴格按照ELSIA試劑盒說明書進行。對于NF-κB活性的檢測參照試劑盒說明書。

1.4統計學分析 采用SPSS19.0 軟件進行t檢驗、單因素方差分析、Pearson相關分析及Spearman秩相關檢驗。

2 結 果

2.1各組 PAPP-A水平和NF-κB活性的比較 穩(wěn)定型心絞痛患者PAPP-A水平及NF-κB活性與健康組無統計學差異(Pgt;0.05)，急性心肌梗死患者及不穩(wěn)定型心絞痛患者PAPP-A水平及NF-κB活性與健康組及穩(wěn)定型心絞痛患者有明顯差異(Plt;0.01)。見表1。

2.2阿魏酸鈉治療前后PAPP-A水平和NF-κB活性比較 與治療前比較，不穩(wěn)定型心絞痛患者、急性心肌梗死患者及穩(wěn)定型心絞痛患者PAPP-A水平和NF-κB活性均明顯改善(Plt;0.01)。見表1。

表1 各組PAPPA水平和NF-κB活性比較

與健康組比較：1)Plt;0.01;與穩(wěn)定型心絞痛組比較：2)Plt;0.01

2.3PAPP-A水平和NF-κB活性間的相關性 PAPP-A水平和NF-κB活性在健康組(r=0.286，P=0.286)與穩(wěn)定型心絞痛患者(r=0.178，P=0.084)不存在相關性，不穩(wěn)定型心絞痛患者(r=0.645，P=0.000)及急性心肌梗死患者(r=0.773，P=0.000)則存在正相關。

3 討 論

動脈粥樣斑塊的形成與發(fā)展與各類炎癥反應關系密切，而在這些炎癥反應中PAPP-A和NF-κB是目前研究熱點〔7〕。研究發(fā)現〔8〕，PAPP-A主要進行IGF→PI3K→PDK1→AKT/PKB 通路以及IGF → Ras → Raf → MEK 通路的調控，能夠對血管內膜細胞有增生作用，且可以重構細胞外基質；此外具有不穩(wěn)定斑塊的冠心病患者PAPP-A水平比健康者及具有穩(wěn)定斑塊的冠心病患者表達偏高〔9〕，這點在本研究中也得到進一步證實。本研究發(fā)現不穩(wěn)定型心絞痛患者與急性心肌梗死患者PAPP-A水平明顯高于穩(wěn)定型心絞痛患者及健康者。NF-κB則可將炎癥信號進行放大，從而引起炎癥因子的過表達效應，進而加劇炎癥反應。此外，NF-κB的活性是誘導血管平滑肌細胞(VSMC)增殖(即粥樣斑塊形成)的必要條件。因此，學者們認為，NF-κB的活性在冠心病患者中會出現顯著增強，且與冠脈病變程度及范圍有關[10，11]。本研究中發(fā)現，NF-κB的活性在不穩(wěn)定型心絞痛患者與急性心肌梗死患者體內明顯增強，高于健康者，與文獻報道一致〔12〕。此外，研究中還發(fā)現在不穩(wěn)定斑塊的冠心病患者中PAPP-A水平與NF-κB的活性存在一定的相關性，說明在冠心病發(fā)展過程中NF-κB對PAPP-A具有一定調節(jié)作用，或二者協同促進冠心病的發(fā)展。

阿魏酸鈉是從中藥川芎中提取出的一種具有活血化瘀功效的生物堿，據報道，該藥具有清除體內自由基，抗組織氧化，降低血脂的功效〔13〕。近年來有不少學者將該藥用于心功能障礙、心肌缺血性疾病的治療〔14〕。本研究發(fā)現，采用阿魏酸鈉對冠心病患者進行治療后，患者PAPP-A水平以及NF-κB的活性得到明顯改善，說明阿魏酸鈉可以通過減輕體內的氧化應激，抑制機體的炎癥反應，達到治療冠心病的目的。

本研究雖然發(fā)現了不穩(wěn)定斑塊的冠心病患者中PAPP-A水平與NF-κB的活性存在一定的相關性，但具體兩者在患者體內的調節(jié)因果關系尚不明確，無法闡明兩者是通過反饋調節(jié)還是直接調控的方式構成聯系，需要后續(xù)進一步研究。此外本研究樣本量相對較小，可能造成一些統計偏差，需進一步收集樣本，擴大研究范圍，進一步論證本文結論。

1Montecucco F,Mach F.New evidences for C-reactive protein (CRP) deposits in the arterial intina as a cardiovascular risk factor 〔J〕.Clin Interview Aging,2008；3(2):341-9.

2蔡小婕，蔡華波，魯 端.感染和炎癥反應與冠心病的相關性研究〔J〕. 中華流行病學雜志，2003；24(6)：503-7.

3Olsen MH,Hansen TW,Christensen MK,etal.N-terminal pro-brain natriuretic peptide,but not high sensitivity C-reactive protein,improves cardiovascular risk prediction in the general population 〔J〕. Eur Heart,2007；28(11):1374-81.

4Mason EJ,Grell JA,Wan J,etal. Insulin-like growth factor (IGF)-I and IGF-II contribute differentially to the phenotype of pregnancy associated plasma protein-A knock-out mice〔J〕. Growth Horm IGF Res,2011；21(5):243-7.

5李松南,王 祥,曾秋棠,等.二甲雙胍對兔動脈粥樣硬化NF-kB表達及血清高敏C反應蛋白水平的影響〔J〕.中國病理生理雜志,2008；24(12):2339-43.

6張 軍，杜孝芝．阿魏酸鈉對冠心病患者內皮素及動脈彈性的影響〔J〕.中國臨床研究，2010；23(2):115-6.

7Iunusova NV,Spirina LV,Kondakova LA,etal.Relationship between the expression levels of PAPP-A metalloproteinase and growth and transcriptional factors in endometrial cancer〔J〕.Izv Akad Nauk Ser Biol，2013；(3):284-91.

8Cortes-Sempere M,de Miguel MP,Pernia O,etal.IGFBP-3 methylation-derived deficiency mediates the resistance to cisplatin through the activation of the IGFIR/Akt pathway in non-small cell lung cancer〔J〕.Oncogene,2013；32(10):1274-83.

9Bayes GA,Conover CA,Overgaard MT,etal.Pregnancy-associated plasma protein-A as a marker of acute coronary syndromes〔J〕.N Engl J Med,2001；345 (14) :1022-9.

10Chen TL,Zhu GL,Wang JA,etal.Protective effects of isorhamnetin on apoptosis and inflammation in TNF-α-induced HUVECs injury〔J〕 .Int J Clin Exp Pathol，2015,8(3):2311-20.

11Zatorski H,Saaga M,Zielińska M,etal.Experimental colitis in mice is attenuated by topical administration of chlorogenic acid〔J〕.Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol，2015；388(6):643-51.

12Singh I,Carey AL,Watson N,etal.Oxidative stress-induced insulin resistance in skeletal muscle cells is ameliorated by gamma-tocopherol treatment 〔J〕.Eur J Nutr,2008；47(7):387-92.

13Wang BH,Ou-Yang JP.Pharmacological actions of sodium ferulate in cardiovascular system〔J〕. Cardiovasc Drug Rev,2005；23(2):161-72.

14Maruf AA,Lip H,Wong H,etal.Protective effects of ferulic acid and related polyphenols against glyoxal-or methylglyoxal-induced cytotoxicity and oxidative stress in isolated rat hepatocytes〔J〕.Chem Biol Interact，2015；5(234):96-104.

〔2016-12-29修回〕

(編輯 曹夢園)

R541.4

A

1005-9202(2017)21-5315-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.21.043

劉 娜(1980-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事急危重癥的臨床研究。