劉 娜 孫 良 李丕寶 孫先義

(山東省交通醫(yī)院，山東 濟(jì)南 250031)

阿魏酸鈉對老年冠心病患者血管內(nèi)皮保護(hù)作用及對妊娠相關(guān)血漿蛋白A水平、核轉(zhuǎn)錄因子-κB活性的影響

劉 娜 孫 良 李丕寶 孫先義

(山東省交通醫(yī)院，山東 濟(jì)南 250031)

目的探討阿魏酸鈉對冠心病患者妊娠相關(guān)血漿蛋白(PAPP)-A水平、核因子(NF)-κB活性的影響。方法選擇冠心組患者92例，其中包括不穩(wěn)定型心絞痛患者36例，急性心肌梗死患者29例和穩(wěn)定型心絞痛患者 27例。并選取健康志愿者(健康組)70例。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測PAPP-A水平及NF-κB活性。結(jié)果與健康組相比，冠心病患者PAPP-A水平及(健康組)NF-κB活性明顯增噶高(Plt;0.01)。阿魏酸鈉治療后冠心病患者 PAPP-A 水平及NF-κB活性均明顯下降(Plt;0 .01)。且不穩(wěn)定型心絞痛患者與急性心肌梗死患者PAPP-A 水平與NF-κB活性正相關(guān)(Plt;0.01)。結(jié)論阿魏酸鈉通過抑制炎癥反應(yīng)，減少氧化應(yīng)激反應(yīng)，而能夠?qū)π难芷鸬奖Ｗo(hù)作用。

阿魏酸鈉；冠心?。蝗焉锵嚓P(guān)血漿蛋白-A水平；核因子-κB活性

炎癥反應(yīng)在冠心病發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)化過程中均發(fā)揮著重要作用〔1，2〕，因此人們將某些炎癥狀態(tài)的急性期蛋白作為評估冠心病的重要評價指標(biāo)，但單純采用這些急性期蛋白作為冠心病的預(yù)測及評估指標(biāo)存在一定片面性〔3〕。妊娠相關(guān)血漿蛋白(PAPP)-A是一種金屬蛋白酶，它具有特異性水解胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白(IGFBP)的作用，進(jìn)而通過調(diào)節(jié)胰島素樣生長因子(IGF)水平參與血管粥樣硬化形成〔4〕，PAPP-A水平的高低能夠有效反映動脈粥樣硬化病變情況。核轉(zhuǎn)錄因子(NF)-κB是炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)過程中的核心，通過與相應(yīng)因子基因特異性結(jié)合來促進(jìn)因子表達(dá)。近年報道顯示，參與冠心病形成的相關(guān)炎性反應(yīng)因子中大多為NF-κB的靶基因〔5〕。有報道稱阿魏酸鈉具有防止心肌缺血、防機(jī)體氧化損傷的功效〔6〕。本研究探討阿魏酸鈉對于冠心病患者PAPP-A水平及NF-κB活性的影響，評價其對血管內(nèi)皮的保護(hù)作用。

1 資料與方法

1.1研究對象 選取2013年 11月至2014年 11月在山東省交通醫(yī)院就診的冠心病患者92例，男 48例,女 44例，平均年齡(60.5±11.4)歲。入選標(biāo)準(zhǔn)參照1979年 WHO冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)，排除有惡性腫瘤、嚴(yán)重血液系統(tǒng)疾病、感染性疾病、心力衰竭及重大手術(shù)史患者，包括不穩(wěn)定型心絞痛患者36例，急性心肌梗死患者29例和穩(wěn)定型心絞痛患者 27例。此外招募健康志愿者作為健康組 70例，男 38例,女 32例,平均年齡(58.7±12.6)歲。以上入選者均對本研究知情，并自愿簽署知情同意書。開始實(shí)驗(yàn)前對患者及健康志愿者一般生命體征等進(jìn)行檢查，保持各組性別、年齡、吸煙情況、血壓情況、血脂水平等(Pgt;0.05)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，具有可比性。

1.2儀器與試劑 37℃恒溫培養(yǎng)箱(上海天呈科技有限公司)；酶標(biāo)儀(BMG， LABTECH POLARstar Omega)。人NF-κB-p65試劑盒(上?；鶢栴D生物科技有限公司)；阿魏酸鈉(重慶藥友制藥有限責(zé)任公司，國藥準(zhǔn)字 H5002187)；PAPP-A試劑盒(美國 DSL公司)。

1.3研究方法 在患者入院次日清晨及經(jīng)阿魏酸鈉治療1個月后抽取其肘靜脈血 5～7 ml,低溫離心15 min后,分離血清，并儲存待測。另取 2 ml靜脈血，置于含抗凝劑試管中，混勻離心后分離血漿，貯存待測。對于血漿中PAPP-A水平的測定步驟嚴(yán)格按照ELSIA試劑盒說明書進(jìn)行。對于NF-κB活性的檢測參照試劑盒說明書。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS19.0 軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、單因素方差分析、Pearson相關(guān)分析及Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1各組 PAPP-A水平和NF-κB活性的比較 穩(wěn)定型心絞痛患者PAPP-A水平及NF-κB活性與健康組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(Pgt;0.05)，急性心肌梗死患者及不穩(wěn)定型心絞痛患者PAPP-A水平及NF-κB活性與健康組及穩(wěn)定型心絞痛患者有明顯差異(Plt;0.01)。見表1。

2.2阿魏酸鈉治療前后PAPP-A水平和NF-κB活性比較 與治療前比較，不穩(wěn)定型心絞痛患者、急性心肌梗死患者及穩(wěn)定型心絞痛患者PAPP-A水平和NF-κB活性均明顯改善(Plt;0.01)。見表1。

表1 各組PAPPA水平和NF-κB活性比較

與健康組比較：1)Plt;0.01;與穩(wěn)定型心絞痛組比較：2)Plt;0.01

2.3PAPP-A水平和NF-κB活性間的相關(guān)性 PAPP-A水平和NF-κB活性在健康組(r=0.286，P=0.286)與穩(wěn)定型心絞痛患者(r=0.178，P=0.084)不存在相關(guān)性，不穩(wěn)定型心絞痛患者(r=0.645，P=0.000)及急性心肌梗死患者(r=0.773，P=0.000)則存在正相關(guān)。

3 討 論

動脈粥樣斑塊的形成與發(fā)展與各類炎癥反應(yīng)關(guān)系密切，而在這些炎癥反應(yīng)中PAPP-A和NF-κB是目前研究熱點(diǎn)〔7〕。研究發(fā)現(xiàn)〔8〕，PAPP-A主要進(jìn)行IGF→PI3K→PDK1→AKT/PKB 通路以及IGF → Ras → Raf → MEK 通路的調(diào)控，能夠?qū)ρ軆?nèi)膜細(xì)胞有增生作用，且可以重構(gòu)細(xì)胞外基質(zhì)；此外具有不穩(wěn)定斑塊的冠心病患者PAPP-A水平比健康者及具有穩(wěn)定斑塊的冠心病患者表達(dá)偏高〔9〕，這點(diǎn)在本研究中也得到進(jìn)一步證實(shí)。本研究發(fā)現(xiàn)不穩(wěn)定型心絞痛患者與急性心肌梗死患者PAPP-A水平明顯高于穩(wěn)定型心絞痛患者及健康者。NF-κB則可將炎癥信號進(jìn)行放大，從而引起炎癥因子的過表達(dá)效應(yīng)，進(jìn)而加劇炎癥反應(yīng)。此外，NF-κB的活性是誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)增殖(即粥樣斑塊形成)的必要條件。因此，學(xué)者們認(rèn)為，NF-κB的活性在冠心病患者中會出現(xiàn)顯著增強(qiáng)，且與冠脈病變程度及范圍有關(guān)[10，11]。本研究中發(fā)現(xiàn)，NF-κB的活性在不穩(wěn)定型心絞痛患者與急性心肌梗死患者體內(nèi)明顯增強(qiáng)，高于健康者，與文獻(xiàn)報道一致〔12〕。此外，研究中還發(fā)現(xiàn)在不穩(wěn)定斑塊的冠心病患者中PAPP-A水平與NF-κB的活性存在一定的相關(guān)性，說明在冠心病發(fā)展過程中NF-κB對PAPP-A具有一定調(diào)節(jié)作用，或二者協(xié)同促進(jìn)冠心病的發(fā)展。

阿魏酸鈉是從中藥川芎中提取出的一種具有活血化瘀功效的生物堿，據(jù)報道，該藥具有清除體內(nèi)自由基，抗組織氧化，降低血脂的功效〔13〕。近年來有不少學(xué)者將該藥用于心功能障礙、心肌缺血性疾病的治療〔14〕。本研究發(fā)現(xiàn)，采用阿魏酸鈉對冠心病患者進(jìn)行治療后，患者PAPP-A水平以及NF-κB的活性得到明顯改善，說明阿魏酸鈉可以通過減輕體內(nèi)的氧化應(yīng)激，抑制機(jī)體的炎癥反應(yīng)，達(dá)到治療冠心病的目的。

本研究雖然發(fā)現(xiàn)了不穩(wěn)定斑塊的冠心病患者中PAPP-A水平與NF-κB的活性存在一定的相關(guān)性，但具體兩者在患者體內(nèi)的調(diào)節(jié)因果關(guān)系尚不明確，無法闡明兩者是通過反饋調(diào)節(jié)還是直接調(diào)控的方式構(gòu)成聯(lián)系，需要后續(xù)進(jìn)一步研究。此外本研究樣本量相對較小，可能造成一些統(tǒng)計(jì)偏差，需進(jìn)一步收集樣本，擴(kuò)大研究范圍，進(jìn)一步論證本文結(jié)論。

1Montecucco F,Mach F.New evidences for C-reactive protein (CRP) deposits in the arterial intina as a cardiovascular risk factor 〔J〕.Clin Interview Aging,2008；3(2):341-9.

2蔡小婕，蔡華波，魯 端.感染和炎癥反應(yīng)與冠心病的相關(guān)性研究〔J〕. 中華流行病學(xué)雜志，2003；24(6)：503-7.

3Olsen MH,Hansen TW,Christensen MK,etal.N-terminal pro-brain natriuretic peptide,but not high sensitivity C-reactive protein,improves cardiovascular risk prediction in the general population 〔J〕. Eur Heart,2007；28(11):1374-81.

4Mason EJ,Grell JA,Wan J,etal. Insulin-like growth factor (IGF)-I and IGF-II contribute differentially to the phenotype of pregnancy associated plasma protein-A knock-out mice〔J〕. Growth Horm IGF Res,2011；21(5):243-7.

5李松南,王 祥,曾秋棠,等.二甲雙胍對兔動脈粥樣硬化NF-kB表達(dá)及血清高敏C反應(yīng)蛋白水平的影響〔J〕.中國病理生理雜志,2008；24(12):2339-43.

6張 軍，杜孝芝．阿魏酸鈉對冠心病患者內(nèi)皮素及動脈彈性的影響〔J〕.中國臨床研究，2010；23(2):115-6.

7Iunusova NV,Spirina LV,Kondakova LA,etal.Relationship between the expression levels of PAPP-A metalloproteinase and growth and transcriptional factors in endometrial cancer〔J〕.Izv Akad Nauk Ser Biol，2013；(3):284-91.

8Cortes-Sempere M,de Miguel MP,Pernia O,etal.IGFBP-3 methylation-derived deficiency mediates the resistance to cisplatin through the activation of the IGFIR/Akt pathway in non-small cell lung cancer〔J〕.Oncogene,2013；32(10):1274-83.

9Bayes GA,Conover CA,Overgaard MT,etal.Pregnancy-associated plasma protein-A as a marker of acute coronary syndromes〔J〕.N Engl J Med,2001；345 (14) :1022-9.

10Chen TL,Zhu GL,Wang JA,etal.Protective effects of isorhamnetin on apoptosis and inflammation in TNF-α-induced HUVECs injury〔J〕 .Int J Clin Exp Pathol，2015,8(3):2311-20.

11Zatorski H,Saaga M,Zielińska M,etal.Experimental colitis in mice is attenuated by topical administration of chlorogenic acid〔J〕.Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol，2015；388(6):643-51.

12Singh I,Carey AL,Watson N,etal.Oxidative stress-induced insulin resistance in skeletal muscle cells is ameliorated by gamma-tocopherol treatment 〔J〕.Eur J Nutr,2008；47(7):387-92.

13Wang BH,Ou-Yang JP.Pharmacological actions of sodium ferulate in cardiovascular system〔J〕. Cardiovasc Drug Rev,2005；23(2):161-72.

14Maruf AA,Lip H,Wong H,etal.Protective effects of ferulic acid and related polyphenols against glyoxal-or methylglyoxal-induced cytotoxicity and oxidative stress in isolated rat hepatocytes〔J〕.Chem Biol Interact，2015；5(234):96-104.

〔2016-12-29修回〕

(編輯 曹夢園)

R541.4

A

1005-9202(2017)21-5315-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.21.043

劉 娜(1980-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事急危重癥的臨床研究。