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        動(dòng)物亞硝酸鹽中毒透析法檢驗(yàn)

        2017-11-27 22:05:26常倫勝李向軍王強(qiáng)陳亞茹
        湖北畜牧獸醫(yī) 2017年11期

        常倫勝+李向軍+王強(qiáng)+陳亞茹

        摘要:在自然條件下,很多青飼料如白菜、甜菜等在硝化細(xì)菌的作用下極易還原為亞硝酸鹽,造成牛、羊、豬等家畜中毒。對(duì)中毒動(dòng)物胃腸內(nèi)容物提取常采用水浸法,當(dāng)檢材色素較嚴(yán)重或黏稠時(shí),用水浸法不理想,可用透析法提取,透析法所得被檢液是澄清的。透析法是利用低分子化合物的細(xì)小分子或離子在溶液中可以自由通過(guò)半透膜,而一些大分子、結(jié)構(gòu)龐大的化合物如脂肪、蛋白質(zhì)等不能通過(guò)而得以分離。

        關(guān)鍵詞:亞硝酸鹽;中毒;透析法

        中圖分類號(hào):S859.81 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B 文章編號(hào):1007-273X(2017)11-0020-01

        在自然條件下,亞硝酸鹽是硝酸鹽在硝化細(xì)菌的作用下還原為氨過(guò)程中的中間產(chǎn)物,故亞硝酸鹽的產(chǎn)生取決于硝酸鹽的數(shù)量與硝化菌的活躍程度這兩個(gè)條件。很多青飼料如白菜、青菜、圓白菜、甜菜及其葉含硝酸鹽,甜菜的干物質(zhì)中含硝酸鉀1.32%~3.13%,施用硝化鹽化肥或2,4-D除草劑的甜菜含量最高。這些蔬菜在大量使用氮肥及除草劑時(shí)其硝酸鹽含量更高,造成牛、羊、豬等家畜中毒。對(duì)中毒動(dòng)物胃腸內(nèi)容物提取常采用水浸法,當(dāng)檢材色素較嚴(yán)重或黏稠時(shí),用水浸法不理想,可用透析法提取,透析法所得被檢液是澄清的。透析法是利用低分子化合物的細(xì)小分子或離子在溶液中可以自由通過(guò)半透膜,而一些大分子、結(jié)構(gòu)龐大的化合物如脂肪、蛋白質(zhì)等不能通過(guò)而得以分離?,F(xiàn)對(duì)透析法的材料及方法介紹如下,供參考。

        1 半透膜制作

        取火棉膠數(shù)毫升,倒入潔凈干燥的小燒杯中,迅速轉(zhuǎn)動(dòng)燒杯,使火棉膠均勻地分布在燒杯內(nèi)壁上,形成一層薄膜,待薄膜干燥后,輕輕用刀尖將邊緣剝離,向薄膜與內(nèi)壁間輕輕吹氣,注入冷水,即可完整的取下,檢查是否完整無(wú)損。

        2 檢材提取步驟

        (1)將檢材切細(xì),輕輕裝入已做好的半透膜中,用線將膜口系在玻管的一端。

        (2)把盛有檢材的半透膜浸入較大的燒杯中,浸入深度應(yīng)使檢材與蒸餾水保持在同一水平線上。

        (3)用滴管在玻璃管上口向半透膜內(nèi)滴加蒸餾水,使成粥狀。

        (4)透析1 h左右,取出膜外透析液進(jìn)行檢驗(yàn)。

        3 格林試劑配制

        對(duì)氨基苯磺酸1.0 g,甲萘胺(α-萘胺)0.1 g,酒石酸8.9 g,混合研磨均勻,儲(chǔ)于棕色廣口瓶?jī)?nèi),避光保存,備用。

        4 亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)紙片的制備

        取濾紙剪成1 cm2大小。取亞硝酸鈉(鉀)溶液,其含量為600 mg/mL。用0.25 mL移液器往每張濾紙片上各滴0.005 mL亞硝酸鹽溶液(0.005 mL中含3 μg亞硝酸鹽),使之自然干燥、備用。

        從制成的紙片中任選10片分別置于10支試管中,分別取亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.25、0.50、1.00、2.00 mL于另外5支試管中(作為標(biāo)準(zhǔn)比色列)。以上各管均加水至5 mL,再加格林試劑0.1 g,混勻,放置5~10 min,然后比色,若有半數(shù)未達(dá)到2.5~5.0 μg(即未達(dá)到比色列的第2至3管的顏色深度),則所做紙片全部不能用,應(yīng)另做。若達(dá)到標(biāo)準(zhǔn),則將紙片裝入棕色廣口瓶中備用。

        5 樣品檢測(cè)方法

        取小試管3支,一管加被檢液2.5 mL為樣品管,一管加亞硝酸鹽紙片1片,為標(biāo)準(zhǔn)管,另一管為空白管。3管分別加水至5 mL。各管加格林試劑0.1 g,混勻,放置5~10 min。

        結(jié)果判定:若樣品管與標(biāo)準(zhǔn)管顏色相近或深于標(biāo)準(zhǔn)管,則有亞硝酸鹽中毒的可能;若樣品管的顏色淺于標(biāo)準(zhǔn)管,則亞硝酸鹽中毒的可能性不大;若樣品管顏色很深或呈磚紅色并產(chǎn)生沉淀,說(shuō)明亞硝酸鹽的含量很高。

        此法便于現(xiàn)場(chǎng)檢查,但要求標(biāo)準(zhǔn)試紙精確可靠。endprint

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