斯琴畢力格 王麗芳 丁 赫 劉旺景 連海飛 敖長金*

(1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學動物科學學院，呼和浩特 010018；2.內(nèi)蒙古農(nóng)牧業(yè)科學院，呼和浩特 010031)

飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物對奶牛產(chǎn)奶性能及乳脂中共軛亞油酸含量的影響

斯琴畢力格1王麗芳2*丁 赫1劉旺景1連海飛2敖長金1*

(1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學動物科學學院，呼和浩特 010018；2.內(nèi)蒙古農(nóng)牧業(yè)科學院，呼和浩特 010031)

本文旨在研究飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物對奶牛產(chǎn)奶性能及乳脂中共軛亞油酸(CLA)含量的影響。試驗選取體重(600±29) kg、胎次2～3胎、泌乳期(158±3) d及泌乳量(22.8±1.8) kg/d的泌乳期荷斯坦奶牛15頭，采用完全隨機區(qū)組設計分為3組，每組5頭，進行為期40 d的飼養(yǎng)試驗，其中1～9 d為預試期，10～40 d為正試期。對照組飼喂基礎飼糧，試驗1組和試驗2組分別在基礎飼糧中添加96和160 g/(d·頭)的黃花蒿乙醇提取物。結(jié)果表明：整個試驗期間，2個試驗組的產(chǎn)奶量(第24、31和40天)、乳脂率、乳脂產(chǎn)量、乳蛋白率、乳蛋白產(chǎn)量、非脂固形物含量以及乳脂中的飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸、短鏈脂肪酸、中鏈脂肪酸和長鏈脂肪酸含量與對照組相比均無顯著差異(P>0.05)；2個試驗組的乳脂中CLA含量分別比對照組提高了30.7%和38.6%，其中試驗2組與對照組差異顯著(P<0.05)。由此得出，飼糧中添加適量的黃花蒿乙醇提取物對奶牛產(chǎn)奶性能沒有明顯影響，但可以提高其乳脂中CLA含量，從而優(yōu)化乳脂中脂肪酸的比例。

奶牛；黃花蒿乙醇提取物；產(chǎn)奶性能；乳脂；共軛亞油酸

共軛亞油酸(CLA)是乳脂中一種微量的不飽和脂肪酸，它具有抗癌、抗糖尿病及抗動脈粥樣硬化等功效。CLA主要存在于反芻動物乳、肉中，其中乳脂肪是最豐富的天然CLA來源。因CLA有許多生物保健作用，因此，提高奶牛乳脂中CLA含量、調(diào)控乳脂脂肪酸組成具有重要的意義。Kelly等[1]報道，在奶牛飼糧中分別添加8%的花生油、葵花籽油和亞麻油后，8%的葵花籽油更有利于提高乳脂中CLA含量。梁賢威等[2]研究發(fā)現(xiàn)，泌乳水牛飼糧中添加適量的葵花仔油、茶油或二者的混合油均可提高其乳脂率和乳脂中CLA的含量，其中葵花籽油的效果最為顯著。薛秀恒等[3]的研究也證實，在奶牛精料中添加葵花籽油及葵花籽油與豆油混合油后其乳脂中CLA含量分別達到了21.36和16.92 mg/g。劉仕軍等[4]研究發(fā)現(xiàn)，在奶牛飼糧中添加植物油籽可以改變?nèi)橹舅峤M成，增加CLA含量，與對照組相比，飼糧添加膨化大豆后乳脂中CLA含量提高了83.33%。晏榮等[5]研究表明，用苜蓿青貯替代玉米青貯能有效提高奶牛乳脂中CLA含量。王麗芳[6]在奶山羊飼糧中添加7.26～12.10 g/d的黃花蒿提取物后顯著增加了乳脂中CLA含量，但有關(guān)在飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物對奶牛產(chǎn)奶性能及乳脂中CLA含量影響的研究未見報道。因此，本試驗擬探討飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物對奶牛產(chǎn)奶性能及乳脂中CLA含量的影響，以期為生產(chǎn)功能性乳提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1試驗材料

黃花蒿購置于南京，其成分及比例為：倍半萜類35%、芳香族類29%、脂肪酸類6%、甾體類6%、三萜類6%、脂肪族類4%、生物堿類3%、酚類5%、雜環(huán)類2%、其他4%，黃花蒿乙醇提取物提取工藝條件：乙醇濃度為55%，在95 ℃條件下提取2 h。

1.2試驗設計和飼養(yǎng)管理

選取體重[平均體重(600±29) kg]、胎次(2～3胎)、泌乳期[(158±3) d]及泌乳量[(22.8±1.8) kg/d]相近的荷斯坦奶牛15頭，按照產(chǎn)奶量相近的原則隨機分成3組，每組5頭。對照組飼喂基礎飼糧，試驗1組和試驗2組分別在基礎飼糧中添加96和160 g/(d·頭)的黃花蒿乙醇提取物。1～9 d為預試期，10～40 d為正試期。試驗牛統(tǒng)一管理，自由采食、自由飲水；每天飼喂2次、擠奶2次，由專門的飼養(yǎng)員擠奶。

1.3基礎飼糧

試驗所用精、粗飼料均來自呼和浩特市賽罕區(qū)牧場，基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎)

1.4樣品的采集及指標測定

從預試期開始每周記錄3～4 d產(chǎn)奶量。第1、10、17、24、31、40天采集奶樣進行乳成分分析。每天記錄有刻度擠奶杯上的產(chǎn)奶量，第1、10、17、24、31、40天采集早、晚乳樣，將2次乳樣按1∶1比例混合均勻，取25 mL混合乳樣利用乳成分分析儀(Mickro-FT120,FOSS)分析乳脂率、乳蛋白率、乳總固體含量、非脂乳固體含量及乳糖率；同時，將每次混合乳樣置于-20 ℃冰箱中冷凍保藏，用于后續(xù)乳脂脂肪酸組成的分析。

樣品中脂肪酸的提取方法如下；把冷凍牛奶置于冷水中融化后，取2 mL奶樣加4 mL正己烷/異丙醇溶液，再加硫酸鈉(Na2SO4)溶液2 mL，室溫5 300 r/min離心20 min；然后提取上清液在20 mL水解管中，混合后氮氣吹干。

樣品的甲酯化具體方法如下；在氮氣吹干后的水解管內(nèi)加入2 mL甲醇鈉(NaOCH3)/甲醇，在50 ℃水浴15 min，冷卻后加入2 mL鹽酸/甲醇溶液在80 ℃水浴1.5 h。然后冷卻到室溫，加入3 mL水和6 mL正己烷，振蕩，靜置或離心分層。最后吸取上層液體(盡量吸凈)，定容10 mL，加無水Na2SO4干燥后，于氣相色譜儀測定。氣相色譜儀型號為Agilent 6890N。

1.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計

數(shù)據(jù)用Excel 2007初步分析后，再用SAS 9.2軟件進行單因素方差分析，以P<0.05作為差異顯著的判斷標準。

2 結(jié) 果

2.1飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物對奶牛產(chǎn)奶量的影響

從圖1中可以看出，隨著試驗時間的延長，試驗2組和對照組的產(chǎn)奶量均有所增加，而試驗1組的產(chǎn)奶量呈先增加后降低的趨勢。從表2中可以看出，與對照組相比，試驗結(jié)束時(第40天)，試驗1組的產(chǎn)奶量低于對照組，但差異不顯著(P>0.05)；試驗2組的產(chǎn)奶量高于對照組，差異也不顯著(P>0.05)。隨著試驗時間的延長，對照組和試驗2組(除第24天)的產(chǎn)奶量均高于試驗開始時(第1天)的產(chǎn)奶量，而試驗1組第24、31和40天的產(chǎn)奶量顯著低于試驗開始時的產(chǎn)奶量(P<0.05)。

圖1 飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物對奶牛產(chǎn)奶量的影響

2.2飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物對奶牛乳成分的影響

從表3中可以看出，與對照組相比，試驗1組和試驗2組的乳脂率分別提高了14.7%、22.4%(P>0.05)，乳脂產(chǎn)量也分別提高了4.2%和4.8%(P>0.05)；乳蛋白率分別提高了10.6%和6.1%(P>0.05)，乳蛋白產(chǎn)量也分別提高了3.5%和1.3%(P>0.05)；非脂乳固體含量分別提高了12.2%和6.7%(P>0.05)；試驗1、2組的乳總固體含量有下降的趨勢(P>0.05)；試驗1組的乳糖率有提高的趨勢(P>0.05)，試驗2組的乳糖率有下降的趨勢(P>0.05)。

表2 飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物對奶牛產(chǎn)奶量的影響

同行數(shù)據(jù)肩標不同大寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。同列數(shù)據(jù)肩標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). In the same column, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

表3 飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物對奶牛乳成分的影響

2.3飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物對乳脂脂肪酸組成的影響

從表4中可以看出，與對照組相比，試驗1、2組乳脂中CLA含量都有增加的趨勢，其中試驗2組與對照組差異顯著(P<0.05)，試驗1、2組乳脂中CLA含量比對照組分別提高了30.7%和38.6%。與對照組相比，試驗1、2組乳脂中飽和脂肪酸、不飽和脂肪、單不飽和脂肪酸含量均有下降的趨勢，但是差異不顯著(P>0.05)；試驗1、2組乳脂中多不飽和脂肪酸含量均高于對照組，比對照組分別提高了28.1%和12.0%，但差異不顯著(P>0.05)；試驗1、2組乳脂中長鏈脂肪酸含量有增加趨勢，但差異不顯著(P>0.05)，試驗1、2組乳脂中長鏈脂肪酸含量比對照組分別提高了34.5%和24.5%；試驗1組乳脂中短鏈脂肪酸和中鏈脂肪酸含量均有提高的趨勢，試驗2組的短鏈脂肪酸和中鏈脂肪酸均有降低的趨勢，但差異不顯著(P>0.05)。

表4 飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物對奶牛乳脂脂肪酸組成的影響

短鏈脂肪酸為C4～C12,中鏈脂肪酸為C13～C17,長鏈脂肪酸為C18～C23。

SCFA is C4 to C12, MCFA is C13 to C17 and LCFA is C18 to C23.

3 討 論

3.1飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物對奶牛產(chǎn)奶量的影響

蔣林樹等[7]研究了在全混合日糧(TMR)中加入不同比例(0、1.0、1.7、2.5 kg)的膨化全脂大豆，結(jié)果表明，與對照組相比，膨化全脂大豆添加組產(chǎn)奶量顯著增加。王麗芳等[8]在奶牛飼糧中添加整粒胡麻籽972 g/(d·頭)和整粒棉籽2 169 g/(d·頭)，結(jié)果表明胡麻籽與棉籽的混合物能提高奶牛產(chǎn)奶量。以上試驗均是通過奶牛飼糧中添加植物油或油料籽實來增加乳脂中CLA含量，本試驗主要通過在奶牛飼糧中添加植物提取物來增加乳脂中CLA含量，試驗結(jié)果與以上試驗結(jié)果相似，這也暗示了通過植物提取物調(diào)控乳脂中CLA含量的同時也可以增加奶牛產(chǎn)奶量。試驗1組產(chǎn)奶量低于試驗開始時的產(chǎn)奶量并差異顯著，其原因有待于進一步研究。

3.2飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物對奶牛乳成分的影響

乳脂和乳蛋白是牛乳和乳制品的重要成分之一。研究表明，奶牛飼糧中添加植物油調(diào)控乳脂中CLA含量的同時均可以提高乳脂率，但無論單獨或與葵花油同時使用，乳蛋白均較對照組顯著降低[9]，與本試驗結(jié)果不同，這可能是因為添加不同來源物質(zhì)調(diào)控乳脂中CLA含量的原因；王麗芳[6]研究發(fā)現(xiàn)，在每只奶山羊飼糧中分別添加黃花蒿提取物7.26和12.10 g/d，結(jié)果顯示，對于乳脂產(chǎn)量，2個試驗組均高于對照組，其中試驗2組顯著高于對照組；對于乳蛋白產(chǎn)量，2個試驗組均高于對照組，其中試驗2組顯著高于對照組；對于乳脂率，2個試驗組均高于對照組，其中試驗2組顯著高于對照組；對于乳蛋白率，2個試驗組均高于對照組，但組間差異不顯著；對于乳糖率，2個試驗組也均高于對照組，但組間差異不顯著；對于如非脂固形物含量，也是2個試驗組高于對照組，但組間差異也均不顯著。本試驗結(jié)果表明，與對照組相比，試驗1、2組的乳脂率、乳脂產(chǎn)量、乳蛋白率、乳蛋白產(chǎn)量、非脂乳固體含量等均有提高的趨勢，但是差異不顯著，與王麗芳[6]研究結(jié)果一致。試驗1組的乳糖率有提高的趨勢，試驗2組的乳糖率有下降的趨勢，與王麗芳[6]研究結(jié)果不一樣，原因有待于進一步研究。

3.3飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物對奶牛乳脂脂肪酸組成的影響

補飼脂肪對乳脂脂肪酸組成具有重要的影響。多數(shù)研究表明，奶牛飼糧中補飼植物油或油料籽實均可以調(diào)控乳脂中CLA的含量，如尹福泉等[10]在飼糧中添加葵花籽后乳脂中CLA含量提高了98.28%。本試驗中，在奶牛飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物均提高了乳脂中CLA含量，其中試驗2組顯著增加了乳脂中CLA含量，試驗1、2組比對照組分別提高了30.7%和38.6%。王麗芳[6]研究發(fā)現(xiàn)，在每只奶山羊飼糧中分別添加黃花蒿提取物7.26和12.10 g/d，2個黃花蒿添加組乳脂中CLA含量顯著高于對照組，與本試驗結(jié)果一致。乳脂中CLA生成的作用機制來源于2個方面，一方面是瘤胃中溶纖維丁酸弧菌去飽和反式-11-C18∶1脂肪酸成為CLA，另一方面是乳腺中硬脂酰輔酶A去飽和酶(SCD)去飽和反式-11-C18∶1脂肪酸成為CLA。Wallace[12]研究表明，菊科植物提取物增加乳脂中CLA含量的作用機制是增加了瘤胃中與CLA合成相關(guān)的溶纖維丁酸弧菌含量。本研究采用黃花蒿乙醇提取物調(diào)控乳脂中CLA含量的可能作用機制與之相同，因為黃花蒿屬于菊科植物。

與對照組相比，試驗1、2組乳脂中飽和脂肪酸、不飽和脂肪、單不飽和脂肪酸含量均有下降的趨勢。本試驗在奶牛飼糧中添加黃花蒿乙醇提取物也提高了乳脂中多不飽和脂肪酸含量，尹福泉等[11]在奶牛飼糧中添加不同油料籽實(葵花籽、亞麻籽、菜籽)的外源脂肪，提高了乳脂中多不飽和脂肪酸含量，與本試驗結(jié)果一致。王麗芳[6]研究發(fā)現(xiàn)，在每只奶山羊飼糧中分別添加黃花蒿提取物7.26和12.10 g/d，試驗1組有增加乳脂中中、短鏈脂肪酸含量的趨勢，但差異不顯著；試驗2組有降低乳脂中中、短鏈脂肪酸含量的趨勢，差異也不顯著，與本試驗研究結(jié)果一致。已有的研究證實，幾乎所有的C14∶0以下的脂肪酸和大約1/2的C16∶0脂肪酸是由來自奶牛瘤胃發(fā)酵產(chǎn)生的乙酸、β-羥丁酸在乳腺組織內(nèi)從頭合成的，而乳脂中的長鏈脂肪酸主要來源于血脂，而血脂中的長鏈脂肪酸主要來源于飼糧。本試驗在奶牛糧中添加黃花蒿乙醇提取物，結(jié)果顯示試驗1、2組乳脂中長鏈脂肪酸含量明顯提高。

4 結(jié) 論

① 飼糧中96和160 g/(d·頭)添加黃花蒿乙醇提取物對奶牛產(chǎn)奶性能沒有顯著影響。

② 飼糧中添加160 g/(d·頭)黃花蒿乙醇提取物能顯著提高奶牛乳脂中CLA含量。

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*Corresponding authors: WANG Lifang, associate professor, E-mail: wanglifang100008@163.com; AO Changjin, professor, E-mail: changjinao@aliyun.com

EffectsofDietaryArtemisiaannuaExtractsonMilkPerformanceandConjugatedLinoleicAcidContentinMilkFatofLactatingCows

Siqinbilige1WANG Lifang2*DING He1LIU Wangjing1LIAN Haifei2AO Changjin1*

(1.CollegeofAnimalScience,InnerMongoliaAgriculturalUniversity,Huhhot010018,China; 2.InnerMongoliaAcademyofAgriculturalandAnimalHusbandrySciences,Huhhot010031,China)

This experiment was conducted to study the effects of dietaryArtemisiaannuaextracts on milk performance and conjugated linoleic acid (CLA) content in milk fat of lactating cows. Fifteen Holstein dairy cows were randomly divided into 3 groups with 5 cows according to their body weight [(600±29) kg], milk yield [(22.8±1.8) kg/d], parity (2 to 3 parities) and lactation period [(158±3) d], and feeding trial were 40 days including 1 to 9 days for adaptation and 10 to 40 days for experimental stage. Cows in the control group were fed a basal diet, and the others were fed the basal diet supplemented with 96 (experimental group 1) and 160 g/(d·head)Artemisiaannuaextracts (experimental group 2), respectively. The results showed as follows: during the whole experiment stage, compared with the control group, the milk yield (the 24th, 31stand 40thdays), milk fat percentage, milk fat yield, milk protein percentage, milk protein yield, non-fat milk solid content and contents of saturated fatty acid, monounsaturated fatty acid, polyunsaturated fatty acid, shot chain fatty, medium fatty and long chain fatty acid in milk fat of two experimental group were no significant differences (P>0.05); however, the milk fat CLA content of experimental groups 1 and 2 was increased by 30.7% and 38.6%, respectively, and there was a significant difference between the control group and experimental group 2 (P<0.05). In conclusion, dietary supplemented with moderateArtemisiaannuaextracts has no effect on the milk performance of lactating cows, but can increase the milk fat CLA content, and optimize the proportion of fatty acids in milk fat.[ChineseJournalofAnimalNutrition,2017,29(11)：4137-4142]

lactating cows;Artemisiaannuaextracts; milk performance; milk fat; conjugated linoleic acid

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.11.037

S823

A

1006-267X(2017)11-4137-06

2017-05-09

內(nèi)蒙古自治區(qū)自然科學基金項目(2013MS0418)；內(nèi)蒙古農(nóng)牧業(yè)科學院青年創(chuàng)新基金項目(2014QNJJM02)

斯琴畢力格(1990—)，女，蒙古族,內(nèi)蒙古錫盟人，碩士研究生，研究方向為動物營養(yǎng)與飼料科學。E-mail: siqin727@126.com

*通信作者:王麗芳，副研究員，E-mail: wanglifang100008@163.com；敖長金，教授，博士生導師，E-mail: changjinao@aliyun.com

(責任編輯 武海龍)