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        重組禽流感病毒H5亞型三價(jià)滅活疫苗(Re-6株+Re-7株+ Re-8株)免疫抗體監(jiān)測(cè)與分析

        2017-11-17 03:36:11徐小艷徐正軍王相子陳昌海
        獸醫(yī)導(dǎo)刊 2017年12期
        關(guān)鍵詞:免疫抗體活疫苗致病性

        周 偉 徐小艷 徐正軍 王相子 開(kāi) 妍 陳昌海

        (溧水區(qū)農(nóng)業(yè)局,江蘇溧水 211200)

        重組禽流感病毒H5亞型三價(jià)滅活疫苗(Re-6株+Re-7株+ Re-8株)免疫抗體監(jiān)測(cè)與分析

        周 偉 徐小艷 徐正軍 王相子 開(kāi) 妍 陳昌海

        (溧水區(qū)農(nóng)業(yè)局,江蘇溧水 211200)

        為評(píng)估我省使用重組禽流感病毒H5亞型三價(jià)滅活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株)以來(lái)的雞群免疫效果,筆者對(duì)2016年全省春防、秋防、定點(diǎn)監(jiān)測(cè)及日常監(jiān)測(cè)所采集的規(guī)模養(yǎng)雞場(chǎng)及散養(yǎng)戶(hù)樣品進(jìn)行了免疫抗體檢測(cè)與分析。檢測(cè)結(jié)果表明,江蘇省H5亞型高致病性禽流感Re-6株平均免疫抗體合格率為96.39%;Re-7株平均免疫抗體合格率為95.75%;Re-8株平均免疫抗體合格率為95.56%,均超過(guò)國(guó)家和我省規(guī)定的免疫要求。大部分地區(qū)的免疫抗體合格率呈現(xiàn)較高的一致性。在種雞場(chǎng)、商品代飼養(yǎng)場(chǎng)(戶(hù))、散養(yǎng)戶(hù)中,種雞場(chǎng)的免疫效果最好。

        高致病性禽流感;血凝抑制試驗(yàn);免疫抗體合格率

        禽流感是由A型流感病毒引起的以呼吸系統(tǒng)癥狀為主要表現(xiàn)的禽類(lèi)傳染性疾病綜合征。根據(jù)禽流感病毒致病性的不同,可以將禽流感分為高致病性、低致病性、無(wú)致病性禽流感,H5亞型毒株所引起的疾病稱(chēng)為高致病性禽流感(High Pathogenic Avian Influenza,HPAI),它不僅導(dǎo)致禽類(lèi)發(fā)病死亡,而且可以感染人,使人發(fā)病死亡,因而是一種需要嚴(yán)格控制的人畜共患病[1-2]。

        當(dāng)前我國(guó)H5亞型AIV主要流行譜系為第2.3.4.4分支、第2.3.2.1c分支和第7.2分支,其對(duì)應(yīng)的疫苗分別為Re-8、Re-6和Re-7。其中,第2.3.4.4分支又可細(xì)分為第2.3.4.4a、2.3.4.4b、2.3.4.4c、2.3.4.4d四個(gè)小分支,Re-8疫苗株屬于第2.3.4.4d分支[3]。H5亞型高致病性禽流感病毒具有高度變異性,為提高疫苗與現(xiàn)流行毒株的匹配性,2014年底,農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)了針對(duì)該分支病毒的Re-8疫苗,我省2016年將對(duì)雞群使用的重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗(Re-6株+Re-7株)替換為重組禽流感病毒H5亞型三價(jià)滅活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株)。為評(píng)估我省使用該疫苗后的雞群免疫效果,更好地開(kāi)展禽流感防控工作,筆者對(duì)2016年更換疫苗后全省春防、秋防、定點(diǎn)監(jiān)測(cè)及日常監(jiān)測(cè)所采集的規(guī)模養(yǎng)雞場(chǎng)及散養(yǎng)戶(hù)樣品進(jìn)行了免疫抗體檢測(cè)與分析[4]。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        樣品來(lái)源:2016年江蘇省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心在開(kāi)展重大動(dòng)物疫病春防、秋防、定點(diǎn)監(jiān)測(cè)、日常監(jiān)測(cè)等工作中,隨機(jī)抽檢的雞血清樣品942份,所檢雞群均免疫了重組禽流感病毒H5亞型三價(jià)滅活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株),免疫密度達(dá)100%。樣品來(lái)自全省13個(gè)市25個(gè)縣(市、區(qū))49個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的174個(gè)養(yǎng)雞場(chǎng)(戶(hù))。

        檢測(cè)試劑:禽流感病毒H5亞型(Re-6株)血凝抑制試驗(yàn)抗原、陽(yáng)性血清、陰性血清;禽流感病毒H5亞型(Re-7株)血凝抑制試驗(yàn)抗原、陽(yáng)性血清、陰性血清;禽流感病毒H5亞型(Re-8株)血凝抑制試驗(yàn)抗原、陽(yáng)性血清、陰性血清,均由哈爾濱維科生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司提供,自配1%雞紅細(xì)胞。

        1.2 方法

        參照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》GB/T 18936-2003中規(guī)定的血凝(HA)和血凝抑制(HI)試驗(yàn)技術(shù),首先采用血凝試驗(yàn)(HA)對(duì)禽流感病毒H5亞型Re-6株、Re-7株、Re-8株進(jìn)行血凝價(jià)測(cè)定,再通過(guò)血凝試驗(yàn)結(jié)果配制4HAU的病毒抗原,最后采用血凝抑制試驗(yàn)(HI)檢測(cè)樣品中禽流感病毒H5亞型Re-6株、Re-7株、Re-8株免疫抗體。

        1.3 結(jié)果判定

        以完全抑制4個(gè)HAU抗原的血清最高稀釋倍數(shù)作為HI滴度,即血清效價(jià)。雞免疫21d后,抗體效價(jià)≥24判為免疫合格;抽檢雞群免疫抗體合格率≥80%判為合格。

        2 檢測(cè)結(jié)果

        2.1 各地區(qū)的疫苗免疫抗體合格率

        對(duì)13個(gè)市的試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行比較后可見(jiàn):13個(gè)市的高致病性禽流感免疫抗體合格率均高于農(nóng)業(yè)部規(guī)定的70%和我省規(guī)定的80%的標(biāo)準(zhǔn)。其中3市、4市、9市、10市等4個(gè)市H5亞型高致病性禽流感Re-6株、Re-7株、Re-8株免疫抗體合格率均達(dá)到100%。詳見(jiàn)表1。

        表1 各市免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

        2.2 不同類(lèi)別雞群的免疫抗體合格率

        2016年,共檢測(cè)各類(lèi)養(yǎng)殖場(chǎng)戶(hù)174個(gè)。檢測(cè)種雞場(chǎng)3個(gè),Re-6株檢測(cè)樣品45份,合格44份,合格率97.78%;Re-7株檢測(cè)樣品45份,合格45份,合格率100%;Re-8株檢測(cè)樣品45份,合格45份,合格率100%。檢測(cè)商品代飼養(yǎng)場(chǎng)(戶(hù))25個(gè),Re-6株檢測(cè)樣品354份,合格340份,合格率96.05%;Re-7株檢測(cè)樣品356份,合格345份,合格率96.91%;Re-8株檢測(cè)樣品349份,合格333份,合格率95.42%。檢測(cè)散養(yǎng)戶(hù)146個(gè),Re-6株檢測(cè)樣品542份,合格523份,合格率96.49%;Re-7株檢測(cè)樣品541份,合格512份,合格率94.64%;Re-8株檢測(cè)樣品530份,合格505份,合格率95.28%。詳見(jiàn)表2。

        2.3 不同時(shí)間段的免疫抗體合格率

        2016年上半年全省H5亞型高致病性禽流感Re-6株共檢測(cè)樣品121份,合格117份,合格率為96.69%,Re-7株共檢測(cè)樣品121份,合格113份,合格率93.39%,Re-8株共檢測(cè)樣品119份,合格107份,合格率89.92%;2016年下半年H5亞型高致病性禽流感Re-6株共檢測(cè)樣品820份,合格790份,合格率96.34%,Re-7株共檢測(cè)樣品821份,合格789份,合格率96.10%,Re-8株共檢測(cè)樣品805份,合格776份,合格率96.40%。詳見(jiàn)表3。

        共檢測(cè)雞血清樣品2807份,合格2692份,合格率95.90%。其中H5亞型高致病性禽流感Re-6株共檢測(cè)樣品941份,合格907份,合格率96.39%,Re-7株共檢測(cè)樣品942份,合格902份,合格率95.75%,Re-8株共檢測(cè)樣品924份,合格883份,合格率95.56%。

        3 討論

        從2016年江蘇省13個(gè)市的H5亞型高致病性禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果看,Re-6株、Re-7株、Re-8株免疫抗體合格率均超過(guò)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(70%)和我省標(biāo)準(zhǔn)(80%),且免疫抗體整體水平較高,說(shuō)明我省自推廣使用重組禽流感病毒H5亞型三價(jià)滅活苗(Re-6株+ Re-7株+ Re-8株)以來(lái),H5亞型高致病性禽流感整體免疫情況良好。

        具體對(duì)比各市檢測(cè)結(jié)果,13個(gè)市H5亞型Re-6株平均免疫抗體合格率為96.39%,其中最高的市為100.00%,最低的市為85.25%; Re-7株平均免疫抗體合格率為95.75%,其中最高的市為100.00%,最低的市為87.10%; Re-8株平均免疫抗體合格率為95.56%,其中最高的市為100.00%,最低的市為85.00%。13個(gè)市H5亞型高致病性禽流感Re-6株、Re-7株、Re-8株免疫抗體合格率離散程度較小,合格率低于90%的只有1個(gè)市,說(shuō)明我省絕大多數(shù)地區(qū)均按照合理的免疫程序、正確的接種方法開(kāi)展免疫,免疫效果良好。從圖1可見(jiàn),絕大多數(shù)市Re-6株、Re-7株、Re-8株免疫抗體合格率較整齊,但1市、7市Re-6株、Re-7株、Re-8株免疫抗體合格率差異較大,導(dǎo)致這一結(jié)果的原因可能是這些地區(qū)的某些雞群由于品種、健康狀況等因素,對(duì)同一疫苗不同疫苗株的免疫反應(yīng)強(qiáng)弱不一致,或是受到之前接種的禽流感二價(jià)苗(Re-6株+ Re-7株)干擾,影響對(duì)三價(jià)苗(Re-6株+ Re-7株+ Re-8株)的反應(yīng),對(duì)于這一類(lèi)場(chǎng)點(diǎn),應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)養(yǎng)殖管理,加大日常監(jiān)測(cè),及時(shí)補(bǔ)免,降低疫情隱患。

        表2 不同類(lèi)別雞群的免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

        表3 不同時(shí)間段免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

        圖1 13個(gè)市重組禽流感三價(jià)苗免疫抗體合格率分布

        2016年共檢測(cè)174個(gè)養(yǎng)雞場(chǎng)(戶(hù))的樣品,其中種雞場(chǎng)3個(gè),Re-6株平均免疫抗體合格率為97.78%,Re-7株平均免疫抗體合格率為100%,Re-8株平均免疫抗體合格率為100%,3個(gè)種雞場(chǎng)各株型免疫抗體合格率均高于80%;商品代飼養(yǎng)場(chǎng)(戶(hù))25個(gè),Re-6株平均免疫抗體合格率為96.05%,平均免疫抗體合格率高于80%的場(chǎng)有23個(gè),占92%,Re-7株平均免疫抗體合格率為96.91%,平均免疫抗體合格率高于80%的場(chǎng)有24個(gè),占96%,Re-8株平均免疫抗體合格率為95.42%,平均免疫抗體合格率高于80%的場(chǎng)有22個(gè),占88%;散養(yǎng)戶(hù)146個(gè),Re-6株平均免疫抗體合格率為96.49%,平均免疫抗體合格率高于80%的場(chǎng)有136個(gè),占93.15%,Re-7株平均免疫抗體合格率為94.64%,平均免疫抗體合格率高于80%的場(chǎng)有128個(gè),占87.67%,Re-8株平均免疫抗體合格率為95.28%,平均免疫抗體合格率高于80%的場(chǎng)有132個(gè),占90.41%。從圖2可見(jiàn):1.各類(lèi)型場(chǎng)點(diǎn)雞群Re-6株、Re-7株、Re-8株免疫抗體合格率均處于高位,種雞場(chǎng)、存欄量大于1萬(wàn)只的商品代養(yǎng)殖場(chǎng)(戶(hù))的H5亞型禽流感疫苗整體免疫效果較存欄量小于1萬(wàn)只的商品代飼養(yǎng)場(chǎng)(戶(hù))、散養(yǎng)戶(hù)好。2.各類(lèi)型場(chǎng)點(diǎn)群體合格率(免疫抗體合格率≥80%的場(chǎng)點(diǎn)數(shù)/監(jiān)測(cè)場(chǎng)點(diǎn)數(shù)×100%)均處于高位,種雞場(chǎng)、存欄量大于1萬(wàn)只的商品代養(yǎng)殖場(chǎng)(戶(hù))群體合格率較存欄量小于1萬(wàn)只的商品代養(yǎng)殖場(chǎng)(戶(hù))、散養(yǎng)戶(hù)高。分析原因,可能有以下幾方面:(1)種雞場(chǎng)和大、中型商品代養(yǎng)殖場(chǎng)(戶(hù))對(duì)疫病防控的意識(shí)較強(qiáng),多按合理程序免疫;而部分小型商品代養(yǎng)殖場(chǎng)(戶(hù))、散養(yǎng)戶(hù)缺乏對(duì)雞群日齡、健康狀況、免疫檔案的管理,免疫程序不規(guī)范或通過(guò)春、秋季開(kāi)展的集中免疫行動(dòng)進(jìn)行免疫,造成漏免或補(bǔ)免不及時(shí)。(2)種雞場(chǎng)和大、中型商品代養(yǎng)殖場(chǎng)(戶(hù))養(yǎng)殖環(huán)境優(yōu)、養(yǎng)殖管理嚴(yán)格、動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)好、健康少病,免疫應(yīng)激小,抗體產(chǎn)生早且維持時(shí)間長(zhǎng);而部分小型商品代養(yǎng)殖場(chǎng)(戶(hù))、散養(yǎng)戶(hù)養(yǎng)殖環(huán)境、養(yǎng)殖管理、動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)、健康狀況相對(duì)較差,免疫應(yīng)激大,影響免疫效果。(3)種雞場(chǎng)和大、中型商品代養(yǎng)殖場(chǎng)(戶(hù))疫苗保存和接種方法得當(dāng),免疫效果好;而部分小型商品代養(yǎng)殖場(chǎng)(戶(hù))、散養(yǎng)戶(hù)疫苗保存不符合要求或在注射疫苗時(shí)稀釋方法不當(dāng)、稀釋后未及時(shí)使用等導(dǎo)致免疫失敗或效果不好。綜上所述,規(guī)范的養(yǎng)殖管理、規(guī)范的免疫程序、及時(shí)的免疫監(jiān)測(cè)、妥善的疫苗保存、正確的接種方法都可以提高免疫效果,多方并舉對(duì)有效控制高致病性禽流感更為有利。

        圖2 不同類(lèi)型場(chǎng)點(diǎn)抗體合格率、群體合格率分布圖

        2016年上半年,H5亞型Re-6株免疫抗體合格率為96.09%,Re-7株免疫抗體合格率為93.39%,Re-8株免疫抗體合格率為89.92%;2016年下半年,H5亞型Re-6株免疫抗體合格率為96.34%,Re-7株免疫抗體合格率為96.10%,Re-8株免疫抗體合格率為96.40%。比較發(fā)現(xiàn),重組禽流感病毒H5亞型三價(jià)滅活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株)的持續(xù)使用對(duì)抗體水平產(chǎn)生了以下影響:1.三種毒株免疫抗體合格率均有所提高,特別是Re-8株,合格率提高了6.48個(gè)百分點(diǎn)。2.三種毒株免疫抗體合格率之間的差異顯著縮小。表明重組禽流感病毒H5亞型三價(jià)滅活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株)替換并持續(xù)使用后,H5亞型二價(jià)滅活疫苗(Re-6株+Re-7株)對(duì)Re-6株、Re-7株平均免疫抗體合格率的影響逐漸減小,Re-8株免疫抗體水平不斷提高,推動(dòng)我省高致病性禽流感免疫抗體水平持續(xù)向好。

        [1] 蘭德增.高致病性禽流感[J].生命科學(xué),2005,17(1):60-63.

        [2] 徐小艷.重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗免疫抗體監(jiān)測(cè)與分析[J].畜牧與獸醫(yī),2011,43(6):50-52.

        [3] 蔣文明.H5亞型高致病性禽流感病毒抗原性變異分析[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫,2016,33(9):27-32.

        [4] 王相子.重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗(Re-6株+Re-7株)免疫抗體監(jiān)測(cè)分析[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊,2017,264(1):198-199.

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