紀鳳卿 滕 菁 林麗云 張美雪 陳君穎

福建中醫(yī)藥大學附屬廈門市中醫(yī)院檢驗科，福建廈門 361009

UF-1000i檢測尿液紅細胞的應(yīng)用分析

紀鳳卿 滕 菁 林麗云 張美雪 陳君穎▲

福建中醫(yī)藥大學附屬廈門市中醫(yī)院檢驗科，福建廈門 361009

目的 分析 UF-1000i尿沉渣分析儀檢測尿液紅細胞出現(xiàn)假陽性，假陰性的各種因素,提出相應(yīng)的解決方案。方法 對518例門診及住院尿液標本分別用干化學分析法﹑顯微鏡和 UF-1000i分析儀進行尿液有形成分檢測，并收集尿液紅細胞的檢測數(shù)據(jù)。以尿液干化學法和顯微鏡檢法兩種方法來判定紅細胞檢測真陽性﹑真陰性標準。 結(jié)果 顯微鏡鏡檢法和UF-1000i尿液分析儀法的陽性率分別是36.49%﹑40.15%，兩者比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。以尿液干化學法和鏡檢法檢測紅細胞同時為陽性為真陽性標準，UF-1000i分析儀法假陽性率為3.67%， 以尿液干化學法和鏡檢法檢測紅細胞同時為陰性為真陰性標準，UF-1000i分析儀法假陰性率為3.86%。引起UF-1000i假陽性的因素有孕婦陰道分泌物﹑草酸鈣結(jié)晶﹑細菌﹑其他鹽類結(jié)晶，分別占比例為42.10%﹑21.05%﹑10.53%﹑26.32%。引起UF-1000i假陰性的因素為紅細胞溶解或可能由于熒光染色敏感度下降造成儀器漏檢。結(jié)論 本實驗表明 UF-1000i尿沉渣分析儀檢測尿液紅細胞必須結(jié)合干化學法﹑顯微鏡檢測，以提高結(jié)果的準確性。

UF-1000i尿沉渣分析儀；顯微鏡鏡檢；紅細胞；假陽性；假陰性；鏡檢規(guī)則

準確可靠的尿液檢測結(jié)果才能為臨床疾病診斷提供科學的診斷依據(jù)。UF-1000i尿液分析儀是日本 Sysmex 公司近年推出的最新的尿液有形成分定量分析系統(tǒng)。UF-1000i采用流式細胞儀技術(shù)，區(qū)分尿中各種有形成分，具有操作簡單﹑快速高效﹑重復性好[1]等的特點。其在尿液紅細胞檢測中的廣泛應(yīng)用，有利于泌尿系統(tǒng)疾病的診斷﹑鑒別診斷和預后判斷等。 具有精密度高﹑檢測效率高﹑重復性好等優(yōu)點[2-3]。然而尿液成分比較復雜﹑影響因素多加上儀器本身的局限性,因此在日常的檢測過程中，我們發(fā)現(xiàn)UF-1000i尿沉渣分析儀對尿液紅細胞的檢測存在一定的假陽性﹑假陰性現(xiàn)象。本研究隨機選取本院2017年1～6月518份尿液標本同時采用京都干化學分析儀﹑顯微鏡檢查法與UF-1000i尿沉渣分析儀進行尿液紅細胞分析，統(tǒng)計UF-1000i尿沉渣分析儀檢測尿液紅細胞存在假陽性率﹑假陰性率，并將這兩種檢測方法結(jié)果進行比較分析。以尿液干化學法和顯微鏡檢法兩種方法來判定紅細胞檢測真陽性﹑真陰性標準。同時分析UF-1000i尿液分析儀檢測尿液紅細胞的干擾因素,產(chǎn)生假陽性，假陰性的原因并提出相應(yīng)解決方案。

1 材料與方法

1.1 標本來源

隨機選取本院2017年1～6月份住院及門診尿液標本518例，其中男218例，女300例，年齡3～85歲，平均46歲。

1.2 儀器和試劑

京都干化學分析儀；日本sysmex公司 UF-1000i尿液分析儀，配套試劑及質(zhì)控品，Olympus公司CX-21雙目顯微鏡。 標本處理采用SC2542低速離心機離心。

1.3 檢測方法

按照本科室儀器操作規(guī)程完成室內(nèi)質(zhì)控檢測，確保儀器檢測的準確性。所收集的住院及門診尿液均是中段尿，混勻后倒入一次性尿管約10mL。先用于京都干化學分析儀﹑ UF-1000i分析儀檢測，然后用CX-21顯微鏡檢測。離心鏡檢時按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[4]操作，取10mL新鮮混勻的尿于離心管，離心5min，轉(zhuǎn)速1500r/min，棄去上清液，剩余尿液0.2mL混勻后進行尿液紅細胞鏡檢。

1.4 結(jié)果判斷標準

UF-1000i檢測尿液紅細胞陽性標準： 女性 紅細胞＞15.0 個/μL﹑男性紅細胞＞18個/μL；顯微鏡鏡檢陽性標準：紅細胞＞3 個/HP；干化學法陽性標準：隱血為（±）﹑（+）﹑（2+）﹑（3+）。

1.5 統(tǒng)計學方法

計數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，運用 SPSS18.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理。當P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 顯微鏡檢查法與UF-1000i尿沉渣分析儀兩種方法檢測尿液紅細胞的結(jié)果

運用顯微鏡檢查法與UF-1000i尿沉渣分析儀對518份尿液標本進行尿液檢測，并收集有關(guān)紅細胞檢測數(shù)據(jù)。其中顯微鏡鏡檢法和UF-1000i法的陽性率分別是36.49%﹑40.15%，見表1，兩者比較χ2=1.474,P=0.225,差異無統(tǒng)計學意義（P ＞ 0.05）。以尿液干化學法與鏡檢法檢測紅細胞同時為陽性為真陽性標準， UF-1000i檢測出現(xiàn)假陽性19例，假陽性率為3.67%， 以尿液干化學法和鏡檢法檢測紅細胞同時為陰性為真陰性標準，UF-1000i檢測出現(xiàn)假陰性20例，假陰性率為3.86%，具體見表2。

2.2 UF-1000i檢測518份尿液紅細胞假陽性結(jié)果

標本518份尿液標本經(jīng) UF-1000i檢測尿液紅細胞，出現(xiàn)19例假陽性結(jié)果見表3。各種干擾物（孕婦陰道分泌物﹑草酸鈣結(jié)晶﹑細菌﹑其他鹽類結(jié)晶）所占比例分別為42.10%﹑21.05%﹑10.53%和26.32% 。

表1 UF-1000i和顯微鏡鏡檢法檢測尿液紅細胞結(jié)果[n（%）]

表2 UF-1000i檢測518例尿液紅細胞假陽性﹑假陰性結(jié)果

3 討論

尿液紅細胞及其形態(tài)學的檢測作為尿液有形成分的一項重要檢測項目，有助于泌尿系統(tǒng)疾病的診斷﹑治療﹑監(jiān)測[5]。由表1可知，518份尿液標本分別經(jīng) UF-1000i和顯微鏡鏡檢法檢測其陽性率分別是40.15%﹑36.49%，二者相比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。由表2可知，UF-1000i分析儀檢測尿液紅細胞快速高效﹑靈敏度高﹑重復性好，然而特異度仍不理想，其因素與文獻報道[6]一致。對紅細胞的檢測產(chǎn)生最大影響干擾物屬草酸鈣結(jié)晶和其他鹽類結(jié)晶，占47.35%，與郭志強[7]的報道一致。我們的研究認為是由以下原因?qū)е拢耗蛞褐械母鞣N結(jié)晶如草酸鈣結(jié)晶﹑細菌和酵母菌等干擾物的前向熒光強度﹑前向光散射強度等各項檢測指標與紅細胞存在一定的相似之處,而UF-1000i尿液分析儀是根據(jù)尿液中的各種細胞﹑細菌﹑管型等的大小﹑形狀﹑內(nèi)部結(jié)構(gòu)及結(jié)合熒光染料的不同進行識別檢測，因此極易出現(xiàn)檢測識別錯誤[8]。故當尿液中存在大量上述成分時，尿沉渣儀檢測紅細胞時就出現(xiàn)假陽性結(jié)果[9]，也與宋尉等[10]學者的研究結(jié)果一致。人工顯微鏡鏡檢為離心標本，由檢驗技師主觀判別紅細胞存在與否，檢驗技師人員細胞形態(tài)學水平參差不齊，加上離心吸樣誤差，不免導致紅細胞計數(shù)結(jié)果有一定差異。因此勢必導致UF-1000i儀器法與人工鏡檢紅細胞陽性率性有差異，但是在本研究所設(shè)計的實驗中該差異無統(tǒng)計學差異。這與國內(nèi)諸多學者研究結(jié)論有一定差異，我們認為該差異來源于對于所認定真陽性，真陰性結(jié)果的標準不一致造成。

表3 UF-1000i檢測尿液紅細胞假陽性結(jié)果分析

本研究還發(fā)現(xiàn)在這些假陽性產(chǎn)科的孕婦標本中存在較大比例為42.10%，紅細胞略高于我們的參考值范圍，經(jīng)人工鏡檢發(fā)現(xiàn)均為陰性。我們認為這部分假陽性是受孕婦本身生理影響所致。因孕婦陰道分泌物較多，分泌物顆粒在UF-1000i 儀器檢測的散點圖上與紅細胞形態(tài)﹑大小存在一定交叉分布而導致儀器出現(xiàn)假陽性紅細胞。該結(jié)論與國內(nèi)學者趙琴等，賴元珍等研究一致，及對孕婦尿液有形成分分析常出現(xiàn)一定假陽性﹑假陰性結(jié)果，假陽性率高于普通人群[11-12]。對于此部分的假陽性我們提倡建立產(chǎn)科標本自己獨立的紅細胞參考值，以減少人工鏡檢率，提高檢測工作效率。此外本研究發(fā)現(xiàn)當尿液尿pH＞8.0﹑比重＜1.005或者尿液紅細胞處于低滲透壓時，紅細胞均易破壞，另外尿液出現(xiàn)影細胞或者小紅細胞等高度異形性時，也將引起 UF-1000i檢測出現(xiàn)假陰性紅細胞結(jié)果[13]。本研究 UF-1000i 的假陰性率為3.86%，產(chǎn)生的原因主要可能為熒光染色敏感度下降造成漏檢或者紅細胞溶解[14]。

對于UF-1000i 檢測假陽性，假陰性情況，我們認為有必要建立一套完整嚴格的紅細胞鏡檢規(guī)則以保證尿中紅細胞計數(shù)可靠高效。本科室目前采用只要以下規(guī)則[15]：（1） 干化學紅細胞陰性，UF-1000i尿沉渣分析儀紅細胞陽性，結(jié)晶﹑酵母菌﹑細菌數(shù)超出參考值范圍即鏡檢。（2） 尿京都干化學分析儀﹑尿沉渣分析儀有一種方法檢測 RBC 為陽性，需離心涂片鏡檢。（3）尿京都干化學分析儀﹑尿沉渣分析儀兩者檢測均為陰性，可直接發(fā)出報告。對于尿液結(jié)晶，細菌導致假陽性率，我們認為應(yīng)重視尿液標本檢驗前質(zhì)量，住院尿液嚴格把控尿液送檢﹑檢測時間，應(yīng)控制在2小時以內(nèi)盡快檢測完。門診尿液標本盡快檢測，以減少尿液室溫時間過長導致結(jié)晶析出，細菌產(chǎn)生。不管住院還是門診尿液標本均應(yīng)嚴格留取中段尿，以防UF-1000i尿沉渣分析儀出現(xiàn)細菌計數(shù)增高也可能引起尿液紅細胞檢測的假陽性。因此對于血尿性質(zhì)判斷過程中要注意尿液PH﹑滲透壓﹑尿液放置時間等因素影響。

綜上所述，UF-1000i 尿沉渣分析儀雖是目前測定尿液有形成分的先進儀器，但存在一定的假陽性或假陰性。目前尿液紅細胞檢測包括干化學分析法﹑沉渣分析法﹑顯微鏡鏡檢法三種方法。其中干化學分析法檢測快速﹑簡便，但是在檢測紅細胞方面受尿液維生素C含量影響而容易造成假陰性；人工顯微鏡鏡檢法素來被當作尿液有形成分的“金標準”，但該檢測方法尿液需進行離心處理，費時且精度差，鏡檢結(jié)果容易受檢驗技師水平影響，從而勢必導致無法滿足臨床大樣本檢測需求。因此我們認為三者應(yīng)聯(lián)合運用，相輔相成﹑互相彌補和互相印證。結(jié)合三種檢驗方法，使之組成為一套完整的整體化檢測系統(tǒng)，有助于泌尿系統(tǒng)疾病診斷﹑治療，提供更為準確可靠的依據(jù)。

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Application analysis of UF-1000i in detection of urine red blood cells

JI Fengqing TENG Jing LIN Liyun ZHANG Meixue CHEN Junying
Department of Clinical Laboratory, Xiamen Hospital of Traditional Chinese Medicine Affiliated Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Xiamen 361009, China

Objective To analyze the factors of false positive and false negative of urine red cell detected by UF-1000i urinary sediment analyzer, and to put forward the corresponding solutions． Methods The urine samples of 518 outpatients and inpatients were detected by dry chemical analysis, microscope and UF-1000i analyzer, and urine red blood cell test data were collected. Red blood cell detection of true positive, true negative standard was determined by urine dry chemical method and microscopy. Results The positive rate of microscopy and UF-1000i urine analyzer were 36.49%, 40.15%, there was no significant difference between the two groups (P＞0.05). The urine dry chemical method and the microscopic examination of red blood cells were positive for true positive standard. The false positive rate of UF-1000i analyzer was 3.67%. The urine dry chemical method and the microscopic examination of red blood cells were negative for true negative standard. The false negative rate of UF-1000i analyzer was 3.86%. The factors causing UF-1000i false positive were vaginal secretions, calcium oxalate crystals, bacteria and other salt crystallization, accounting for 42.10%, 21.05%, 10.53%, 26.32%,respectively. The cause of UF-1000i false negative was red cell lysis, or the instrument may be missed because of the decrease of fluorescence staining sensitivity.Conclusion This experiment shows that UF-1000i urine sediment analyzer must be combined with dry chemistry method and microscope to detect urine red blood cells,in order to improve the accuracy of the results.

UF-1000i urinary sediment analyzer; Microscopic examination; Red blood cell; False positive; False negative; Microscopic examination rule

R446.12

A < class="emphasis_bold"> [文章編號]]

] 2095-0616（2017）21-124-04

▲通訊作者

2017-09-14）