孫 艷 王海蘭 史春麗 孫 艷* 劉繼鑫

（齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 齊齊哈爾 161006）

中藥揮發(fā)油混合物體外抑殺人體蠕形螨活性的研究

孫 艷 王海蘭 史春麗 孫 艷* 劉繼鑫

（齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 齊齊哈爾 161006）

目的觀察中藥揮發(fā)油混合物體外抑殺人體蠕形螨效果。方法采用擠壓黏貼法獲取人體蠕形螨，室溫鏡下觀察中藥揮發(fā)油混合物對兩種人體蠕形螨的體外抑殺作用。結(jié)果中藥揮發(fā)油混合物對兩種人體蠕形螨均有較好的抑殺效果，尤其是皮質(zhì)蠕形螨的抑殺效果更佳。結(jié)論 中藥揮發(fā)油混合物具有良好的體外抑殺人體蠕形螨作用。

中藥揮發(fā)油混合物；人體蠕形螨；抑殺

人體蠕形螨（human demodex）是一種條件致病螨。包括毛囊蠕形螨（D.f）和皮質(zhì)蠕形螨（D.b）兩種，可分布于全身各部位，但常見于皮脂腺分泌旺盛的顏面部，尤其是鼻尖、鼻翼、鼻唇溝處。絕大多數(shù)感染者不會出現(xiàn)明顯的臨床癥狀，偶爾感覺感染部位癢，感染嚴(yán)重者可引起皮膚暗淡無光，毛囊擴張、毛孔粗大等皮膚粗糙老化現(xiàn)象，少數(shù)人則會引起螨性的痤瘡、瞼緣炎、毛囊炎、酒渣鼻、外耳道瘙癢癥等疾病。嚴(yán)重影響人的容顏，甚至身心健康。目前尚無理想的殺螨藥物。本研究以單獨一味揮發(fā)油殺螨研究基礎(chǔ)上選用中藥揮發(fā)油混合物對兩種人體蠕形螨進(jìn)行體外抑殺作用的實驗研究，為進(jìn)一步的開發(fā)高效的殺螨類藥物提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 藥品：花椒、枳殼、桂皮各50 g。

1.1.2 主要儀器與試劑：載玻片、PP-243超透文具膠帶、粉碎機（6202）、蒸餾水提前裝置、取螨器、揮發(fā)油提取裝置、干燥劑等。

1.2 方 法

1.2.1 揮發(fā)油的提取：取花椒、枳殼、桂皮各50 g，粉碎后過2號篩，用蒸餾水浸泡10 h后，裝入揮發(fā)油提取裝置，提取揮發(fā)油，經(jīng)無水硫酸鈉干燥后攪拌混合后置棕色瓶內(nèi)備用。

1.2.2 中藥揮發(fā)油混合物體外抑殺人體蠕形螨的實驗方法：采用擠壓黏貼法獲取受檢者面部的蠕形螨，動作需輕柔，防止交叉感染，在室溫下進(jìn)行抑殺人體蠕形螨實驗，具體操作為：用雙手食指擠壓感染者面部皮膚，將毛囊內(nèi)皮脂腺擠出，然后用透明膠帶黏貼，并倒黏貼（黏面向上）于載玻片上，放置于顯微鏡下，適應(yīng)室溫2 min后開始查找活螨，發(fā)現(xiàn)后調(diào)整視野，使活螨位于視野正中央，區(qū)分人體蠕形螨的種類并記錄，實驗對象的選擇標(biāo)準(zhǔn)為，成熟螨種且活動度良好，活動度的判定一般以四對足和螯肢的活動頻率≥15次/分視為良好。選定對象后在200倍光學(xué)顯微鏡下開始給藥，然后迅速轉(zhuǎn)至400倍光學(xué)顯微鏡下觀察并記錄螯肢與4對足的運動情況，連續(xù)觀察2 min不動者初步判定死亡，用針刺激仍不動者可確認(rèn)死亡，各選擇15只活動度良好的兩種人體蠕形螨為研究對象，設(shè)定生理鹽水為空白對照組。

1.2.3 統(tǒng)計學(xué)方法：藥物殺螨時間從開始給藥到刺激后螨體不動為止，用“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。。

2 結(jié) 果

2.1 加入中藥揮發(fā)油混合物前后兩種人體蠕形螨活動度的變化比較：加藥前，兩種人體蠕形螨在室溫下活動頻率均一，未發(fā)生大幅度的運動，螯肢及4對足爪間歇性的進(jìn)行運動，平均每只足爪和螯肢的運動頻率在18次/分左右，且蟲體未發(fā)生扭曲及翻轉(zhuǎn)；加入中藥揮發(fā)油混合物后，蟲體受到揮發(fā)油的突然刺激，運動加劇，螯肢及4對足爪由間歇性運動變?yōu)槌掷m(xù)不間斷的運動，運動頻率超過30次/分，身體開始大幅度扭曲，時而伸展，時而收縮，甚者不停翻轉(zhuǎn)螨體，在經(jīng)歷了短暫的亢奮狀態(tài)后，蟲體運動形態(tài)逐漸恢復(fù)至給藥前，然后逐漸減慢，停止，最后判定死亡（圖1～4）。

圖1 給藥前

圖2 給藥后，蟲體翻轉(zhuǎn)

圖3 給藥后，蟲體收縮

圖4 給藥后，蟲體死亡

2.2 加入中藥揮發(fā)油混合物后兩種人體蠕形螨死亡時間比較：通過對中藥揮發(fā)油混合物及生理鹽水體外抑殺兩種人體蠕形螨的實驗觀察發(fā)現(xiàn)：中藥揮發(fā)油混合物對皮脂蠕形螨的體外抑殺時間為（8.94±0.43）min；對毛囊蠕形螨的體外抑殺時間為（17.12±0.14）min；對照組生理鹽水對毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨抑殺時間均超過240 min以上。

3 討 論

目前對體外抑殺人體蠕形螨的藥物報道較多，皮膚科在治療蠕形螨病時多采用西藥，最常見是甲硝唑[1]；其次是撲滅司林[2]和依維菌素[3]等，但長時間應(yīng)用西藥治療會引起不同程度的不良反應(yīng)等缺點，如甲硝唑會引起惡心、嘔吐等不良發(fā)應(yīng)。而作為天然藥物的中藥具有綠色、安全、無污染、不良反應(yīng)小的優(yōu)點，對治療人體蠕形螨病意義重大，國內(nèi)部分專家學(xué)者進(jìn)行了研究，近年來中藥治療蠕形螨病的報道主要有風(fēng)精油[4]、薄荷油[5]、桂枝揮發(fā)油[6]、桉葉油[7]等，對抑殺人體蠕形螨具有一定的療效。

花椒、桂皮和枳殼單味揮發(fā)油均有較好的體外抑殺人體蠕形螨療效。對皮脂蠕形螨的體外抑殺時間分別為（6.89±0.56）min、（6.96±0.63）min、（10.72±0.83）min；對毛囊蠕形螨的體外抑殺時間分別為（12.98±0.58）min、（13.52±0.73）min、（21.72±0.84）min[8-10]；本實驗將三種揮發(fā)油混合后進(jìn)行抑殺人體蠕形螨活性研究，擬尋找揮發(fā)油復(fù)合物的殺螨效果，實驗結(jié)果表明，三種中藥揮發(fā)油對兩種人體蠕形螨具有較強的抑殺作用，并且對皮脂蠕形螨的抑殺作用明顯強于毛囊蠕形螨，而且與對照組相比優(yōu)越性極為明顯，但與單味揮發(fā)油的抑殺效果比較，沒有優(yōu)勢，僅優(yōu)于枳殼揮發(fā)油的殺螨效果，須進(jìn)一步研究，找到最佳的組合方式。

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[2] Kocak M,Yagli S,Vahapoglu G.Permethrin 5% cream versus metronidazole 0.75% gel for the treatment of papulopustular rosacea.A randomized double-blind placebo-controlled study[J].Dermatology,2002,205(3):265-270.

[3] Forstinger C,Kittler H,Binder M.Treatment of rosacea-like demodicidosis with oral ivermectin and topical permethrin cream[J].J Am Acad Dermatol,1999,41(5 Pt 1):775-777.

[4] 吳儀,劉蓬飛,楊玉薈,等.風(fēng)油精對蠕形螨體外抑殺效果觀察[J].醫(yī)學(xué)動物防制,2015,31(2):129-131.

[5] 李航,韓文艷,玉波臘,等.薄荷油外用治療人體蠕形螨的療效研究[J].昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2011,32(7):102-103.

[6] 尹曉燕.不同劑量桂枝揮發(fā)油對人體面部蠕形螨蟲殺滅作用比較研究[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2015,17(12):109-111.

[7] 趙亞娥,郭娜,李琛,等.桉葉油對兩種蠕形螨的體外殺蟲作用[J].中國媒介生物學(xué)及控制雜志,2006,17(6):461-464.

[8] 蔣麗艷,劉繼鑫,張浩,等.花椒揮發(fā)油對兩種人體蠕形螨的體外抑殺作用[J].醫(yī)學(xué)研究雜志,2009,38(2):78-79.

[9] 孫艷宏,劉繼鑫,張浩,等.桂皮揮發(fā)油對兩種人體蠕形螨的體外抑殺作用[J].熱帶病與寄生蟲學(xué),2009, 7(1):12-19.

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Anti-mite Activity on the Volatile Oil Mixture of Traditional Chinese Medicine for Demodex

SUN Yan, WANG Hai-lan, SHI Chun-li, SUN Yan*, LIU Ji-xin
(Qiqihar Medical University, Qiqihar 161006, China)

ObjectiveTo observe the effect of the volatile oil mixture of traditional Chinese Medicine in killing demodex in vitro. Method The mites were collected with adhesive cellophane tape technique. The killing effect on human demodex was investigated by microscope with the volatile oil mixture.Results The volatile oil mixture was highly powerful to kill D.f and D.b in vitro, and to the D.b the killing effect is better.ConclusionThe volatile oil mixture of traditional Chinese Medicine is an effective component in killing demodex in vitro.

The volatile oil mixture of traditional Chinese Medicine; Human demodex; Kill

R-33

B

1671-8194（2017）28-0029-02

黑龍江省大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練項目（201611230047）

*通訊作者:E-mail: 648841978@qq.com