邴國(guó)霞 ， 董昕欣 ， 劉 偉 ， 張劭俁 ， 李文京 ， 王傳彬 ，原 霖 ， 劉華雷 ， 李雁冰 ， 郭建宏

(1.中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心， 北京 朝陽(yáng) 100125； 2.中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生流行病學(xué)中心， 山東 青島 266032；3.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所， 黑龍江 哈爾濱 150001； 4.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所， 甘肅 蘭州 730046)

2016年全國(guó)省級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析

邴國(guó)霞1， 董昕欣1， 劉 偉1， 張劭俁1， 李文京1， 王傳彬1，原 霖1， 劉華雷2， 李雁冰3， 郭建宏4

(1.中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心， 北京 朝陽(yáng) 100125； 2.中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生流行病學(xué)中心， 山東 青島 266032；3.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所， 黑龍江 哈爾濱 150001； 4.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所， 甘肅 蘭州 730046)

獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室能力比對(duì)是農(nóng)業(yè)部加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室管理的重要舉措，也是評(píng)價(jià)和提高實(shí)驗(yàn)室管理水平和技術(shù)能力的重要手段。按照《農(nóng)業(yè)部辦公廳關(guān)于開(kāi)展2016年獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作的通知》[1]要求，中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心組織實(shí)施了2016年獸醫(yī)系統(tǒng)省級(jí)實(shí)驗(yàn)室能力比對(duì)，全國(guó)31個(gè)省級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室參加，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成了比對(duì)樣品制備、分發(fā)、檢測(cè)和結(jié)果回收。通過(guò)能力比對(duì)，驗(yàn)證了各實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)水平，發(fā)現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)室在質(zhì)量管理方面存在的問(wèn)題，為農(nóng)業(yè)部今后如何做好實(shí)驗(yàn)室管理提供了政策建議。

1 比對(duì)計(jì)劃

本次比對(duì)依據(jù)中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心有關(guān)2016年獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)的文件[2]要求，共設(shè)置4個(gè)比對(duì)項(xiàng)目，分別是禽流感病毒(AIV)HA亞型鑒別檢測(cè)、口蹄疫病毒(FMDV)型別鑒定檢測(cè)、新城疫病毒抗體檢測(cè)(ND Ab)、高致病性豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV)檢測(cè)。除貴州外，全國(guó)共有31個(gè)省級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室(含新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán))參加此次比對(duì)。

2 比對(duì)方法

2.1 試驗(yàn)方法與標(biāo)準(zhǔn) 針對(duì)4個(gè)檢測(cè)能力比對(duì)項(xiàng)目，采用國(guó)家獸醫(yī)參考實(shí)驗(yàn)室或?qū)I(yè)實(shí)驗(yàn)室推薦的方法和試劑，其中部分試劑由參加比對(duì)的省級(jí)實(shí)驗(yàn)室自行準(zhǔn)備，見(jiàn)表1。

2.2 比對(duì)樣品制備

2.2.1 制備方式 各國(guó)家獸醫(yī)參考實(shí)驗(yàn)室和專(zhuān)業(yè)實(shí)驗(yàn)室分別完成相應(yīng)樣品的制備、標(biāo)定、分裝和編號(hào)，并將樣品和標(biāo)定值送交中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心統(tǒng)一保存，作為盲樣下發(fā)使用。

表1 比對(duì)試驗(yàn)的方法、標(biāo)準(zhǔn)和主要試劑

2.2.2 AIV HA亞型鑒別樣品 尿囊液提取物樣品6份，參考值設(shè)為H5亞型、H7亞型、H9亞型以及陰性，各參考值樣品數(shù)目不確定。

2.2.3 FMDV 型別鑒定樣品 口蹄疫病毒樣品6份，參考值分別設(shè)為O型、O型、A型、A型、亞洲I型、陰性。

2.2.4 ND Ab檢測(cè)樣品 雞血清樣品6份，參考值分別設(shè)為10、9、7、7、5、<1。

2.2.5 PRRSV檢測(cè)樣品 高致病性豬藍(lán)耳病病毒樣品6份，樣品參考值分別設(shè)為強(qiáng)陽(yáng)性、強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性、弱陽(yáng)性、陰性、陰性。

2.3 比對(duì)樣品傳遞 比對(duì)樣品為具有生物學(xué)活性的血清、尿囊液，為保持其良好的生物學(xué)活性，樣品存放在-20 ℃以下冰柜中。分發(fā)時(shí)將樣品和試劑放入裝有冰袋的保溫箱中保存，由參加比對(duì)的省級(jí)實(shí)驗(yàn)室派專(zhuān)人在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)統(tǒng)一領(lǐng)取，并在12 h之內(nèi)送達(dá)參加比對(duì)的實(shí)驗(yàn)室。

2.4 評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)

2.4.1 AIV HA亞型鑒別評(píng)判標(biāo)準(zhǔn) H5亞型、H7亞型、H9亞型樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)分別為“H5”、“H7”、“H9”；陰性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

2.4.2 FMDV 型別鑒定評(píng)判標(biāo)準(zhǔn) O型、A型、亞洲I型樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)分別為“O”、“A”、“亞I”；陰性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

2.4.3 ND Ab檢測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn) 與參考值的偏差不超過(guò)一個(gè)滴度，判為結(jié)果準(zhǔn)確。

2.4.4 PRRSV檢測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn) 強(qiáng)陽(yáng)性和弱陽(yáng)性樣品的檢測(cè)結(jié)果為“陽(yáng)性”；陰性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

3 比對(duì)結(jié)果

3.1 總體結(jié)果 根據(jù)比對(duì)結(jié)果評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)， 31個(gè)參加省級(jí)實(shí)驗(yàn)室的所有項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果全部準(zhǔn)確，具體見(jiàn)表2。

表2 31個(gè)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

3.2 AIV HA亞型鑒別檢測(cè)比對(duì)結(jié)果 30個(gè)實(shí)驗(yàn)室對(duì)該項(xiàng)目6份樣品檢測(cè)結(jié)果全部準(zhǔn)確，1個(gè)實(shí)驗(yàn)室有1份樣品的檢測(cè)結(jié)果錯(cuò)誤，將參考值為“陰性”樣本檢測(cè)為“H5亞型”，見(jiàn)表3。

表3 各實(shí)驗(yàn)室AIV HA亞型鑒別檢測(cè)結(jié)果

3.3 FMDV型別鑒定檢測(cè)比對(duì)結(jié)果 31個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果全部正確，見(jiàn)表4。

表4 各實(shí)驗(yàn)室FMDV 型別鑒定檢測(cè)結(jié)果

3.4 ND Ab檢測(cè)比對(duì)結(jié)果 29個(gè)實(shí)驗(yàn)室對(duì)該項(xiàng)目6份樣品檢測(cè)結(jié)果全部準(zhǔn)確，2個(gè)實(shí)驗(yàn)室分別有5份和3份樣品的檢測(cè)值與參考值存在較大偏差，6個(gè)實(shí)驗(yàn)室對(duì)于參考值相同的兩份樣品檢測(cè)值不一致，反映出這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)室在質(zhì)控體系方面存在問(wèn)題。具體結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 各實(shí)驗(yàn)室ND Ab檢測(cè)值離散圖

3.5 PRRSV檢測(cè)比對(duì)結(jié)果 31個(gè)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果全部正確，見(jiàn)表5。

表5 各實(shí)驗(yàn)室PRRSV檢測(cè)結(jié)果頻次與參考值對(duì)照

4 討論

4.1 從比對(duì)結(jié)果來(lái)看，共31個(gè)省級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室參加了4個(gè)比對(duì)項(xiàng)目744樣品的檢測(cè)，其中735份樣品檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，準(zhǔn)確率均為98.8%。這說(shuō)明多數(shù)省級(jí)實(shí)驗(yàn)室具備出較高的檢測(cè)技術(shù)水平，同時(shí)也說(shuō)明農(nóng)業(yè)部在加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系建設(shè)方面的措施是正確有效的。

4.2 本次實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)在ND Ab檢測(cè)項(xiàng)目中設(shè)置了平行樣品，用以評(píng)估實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)體系的穩(wěn)定性。結(jié)果顯示，多數(shù)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果平行性好，但有6個(gè)省級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室對(duì)參考值相同的兩份樣品檢測(cè)結(jié)果不一致，甚至出現(xiàn)較大差異。這說(shuō)明，檢測(cè)過(guò)程存在較多的隨機(jī)性誤差，檢測(cè)系統(tǒng)的穩(wěn)定性較差。

4.3 在ND Ab檢測(cè)比對(duì)結(jié)果中，只有10個(gè)省級(jí)實(shí)驗(yàn)室所有樣品的檢測(cè)結(jié)果與參考值完全相同；有2個(gè)省級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室多份樣品檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)較大偏差。對(duì)近幾年半定量檢測(cè)項(xiàng)目比對(duì)結(jié)果縱向比較發(fā)現(xiàn)，雖總體向較理想的趨勢(shì)發(fā)展，但除2014年外，每年都有部分實(shí)驗(yàn)室在半定量檢測(cè)項(xiàng)目上出現(xiàn)問(wèn)題[3-5]。這說(shuō)明半定量檢測(cè)項(xiàng)目是薄弱環(huán)節(jié)，實(shí)驗(yàn)室仍需在這方面加以提高。此外，今后應(yīng)繼續(xù)開(kāi)展半定量檢測(cè)項(xiàng)目比對(duì)，通過(guò)反復(fù)操練提高半定量項(xiàng)目檢測(cè)的準(zhǔn)確率和穩(wěn)定性。

4.4 本次實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)首次設(shè)置了病毒的分型檢測(cè)項(xiàng)目，這種設(shè)置在提高比對(duì)檢測(cè)難度的同時(shí)，著重檢驗(yàn)了各省級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室在臨床面對(duì)疫情發(fā)生時(shí)的檢測(cè)能力，取得了較好的效果。今后應(yīng)結(jié)合《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃(2012—2020年)》[6]，繼續(xù)擴(kuò)大獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)覆蓋的病種范圍，進(jìn)一步優(yōu)化檢測(cè)能力比對(duì)項(xiàng)目的設(shè)計(jì)。

[1] 農(nóng)業(yè)部辦公廳.農(nóng)業(yè)部辦公廳關(guān)于開(kāi)展2016年獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作的通知[Z].農(nóng)辦醫(yī)[2016]13號(hào).北京：農(nóng)業(yè)部辦公廳，2016-03-07.

[2] 中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心.關(guān)于印發(fā)《2016年省級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)實(shí)施方案》的通知[Z]. 疫控(安)[2016]42號(hào).北京:中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，2016-03-15.

[3] 劉偉，張劭俁，董昕欣，等. 2013年全國(guó)省級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2013，49(10)：91-92.

[4] 董昕欣，劉偉，邴國(guó)霞，等. 2014年全國(guó)省級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2014，50(10)：101-102.

[5] 董昕欣，劉偉，邴國(guó)霞，等. 2015年全國(guó)省級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2015，51(11)：103-104.

[6] 國(guó)務(wù)院辦公廳.國(guó)務(wù)院辦公廳關(guān)于印發(fā)國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃(2012-2020年)的通知[Z].國(guó)辦發(fā)[2012]31號(hào).北京：國(guó)務(wù)院辦公廳，2012-05-20.

2017-02-09

農(nóng)業(yè)部動(dòng)物疫情監(jiān)測(cè)與防治經(jīng)費(fèi)