河南省南陽(yáng)市中心血站（473000）靖春旭

在現(xiàn)代醫(yī)療中，臨床輸血已成為挽救人們生命安全的必要手段，一旦出現(xiàn)差錯(cuò)，可能會(huì)危及生命，因此除了慎重應(yīng)對(duì)其操作外，必須選擇更為妥善的技術(shù)方法，保證其準(zhǔn)確性和及時(shí)性，保障受血者的生命健康。在臨床輸血中，血型免疫抗體的檢出率維持在為0.30%～2.00%，進(jìn)行輸血前的篩查可以排除不同血型的免疫抗體，對(duì)于保障受血者生命安全有著積極意義。現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步已經(jīng)能夠?qū)BO血型鑒定[1]誤差的發(fā)生率控制在一個(gè)很低的水平，然而對(duì)于因輸血、妊娠導(dǎo)入不規(guī)則抗體所引起的溶血性不良反應(yīng)還難以避免。眾所周知，人體血型抗體分為規(guī)則抗體和不規(guī)則抗體，前者由ABO血型中的抗-A、抗-B[2]和抗-AB等規(guī)則抗體組成，后者來(lái)自于ABO血型以外的免疫抗體，如IgG抗體、IGM抗體等。臨床輸血不良反應(yīng)的主要原因即是不規(guī)則抗體的篩查，輸血前如不能合理選擇血型，將加大溶血性不良反應(yīng)的發(fā)生率。本文分析大樣本臨床資料，旨在探討輸血前不規(guī)則抗體篩查的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取我院2013年5月～2015年8月入治的1600名受血者的臨床資料，男性971人，女性529人，年齡在15～65歲之間，平均年齡為(35.4±2.5)歲。所有患者均為符合臨床輸血適應(yīng)證的患者。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)臨床確診，具有輸血指征；②臨床資料完整；③年齡不超過(guò)85歲，具備穩(wěn)定的生命體征[3]；④主動(dòng)配合治療。另有排除標(biāo)準(zhǔn)如下：①有急性感染、各種心肌炎、心肌病者，須通過(guò)CT、MRI等頭部檢查來(lái)證實(shí)排除；②患者存在心肝腎功能不全；③近期服用糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑；④凝血功能障礙者；⑤臨床資料不完整者；⑥病例有感染性心內(nèi)膜炎[4]、風(fēng)濕性心臟病。⑦沒(méi)有取得患者及其家屬的同意和簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法 對(duì)受血者的操作須遵照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》。采集其靜脈血3～5mL，需注意取血前3d空腹，進(jìn)行10分鐘的3000r/min離心操作，分離出血清標(biāo)本。做好臨床常規(guī)操作指導(dǎo)，并詳細(xì)記錄其個(gè)人信息，篩選標(biāo)記紅細(xì)胞并制作抗人球蛋白凝膠卡。采用低濃度溶液調(diào)整紅細(xì)胞或譜細(xì)胞至0.7%左右，實(shí)驗(yàn)微管注意制作標(biāo)記，繼續(xù)加檢者血清入微管，37℃溫度下孵育試劑15分鐘進(jìn)行離心操作，本次研究使用BYL型血型離心機(jī)，觀測(cè)結(jié)果。受血者的血液中存在不規(guī)則抗體是導(dǎo)致其出現(xiàn)遲發(fā)性免疫反應(yīng)和溶血性輸血反應(yīng)的重要原因。在篩選不規(guī)則抗體的操作中，先在待測(cè)管中滴入受血者血清和紅細(xì)胞懸液，對(duì)照1-H號(hào)譜細(xì)胞進(jìn)行鑒定，篩查陽(yáng)性細(xì)胞抗體使用抗人球蛋白凝膠卡輔助鹽水試管法來(lái)鑒定抗體，繼而完成抗體類型的堅(jiān)定。

1.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 陽(yáng)性(+)判定標(biāo)準(zhǔn)：凝膠柱上部或中部出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集、懸浮[5]。陰性(-)判定標(biāo)準(zhǔn)：紅細(xì)胞的沉降發(fā)生在凝膠柱底部，顯示為陽(yáng)性的游離篩檢抗體與譜細(xì)胞進(jìn)行對(duì)照，相符者可判斷為抗體陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù) 本次使用的統(tǒng)計(jì)軟件為SPSS19.0，以計(jì)量資料t來(lái)代表計(jì)算臨床數(shù)據(jù)并檢驗(yàn)分析，以x2來(lái)進(jìn)行單因素分析的檢驗(yàn)，視P<0.05為差異有效，具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則抗體篩查結(jié)果 在1600例患者中，共篩出不規(guī)則抗體陽(yáng)性者6例，男4例，女2例，陽(yáng)性檢出率為0.37%。6例不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者均存在妊娠史[6]或輸血史，而其中4人患血液系統(tǒng)疾病，占比66.67%，其他疾病患者2例，占33.33%，二者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)附表1。

2.2 不規(guī)則抗體特異性鑒定 本次研究中的不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者有4例Rh系統(tǒng)抗體陽(yáng)性(66.67%)，其中抗-D抗體、抗-DC抗體各1例，分別占16.67%，抗-E抗體[7]陽(yáng)性2例(33.33%)。另檢出MNS系統(tǒng)抗-M抗體陽(yáng)性2例，占33.33%。見(jiàn)附表2。

3 討論

輸血患者在入院后需輸注血液以展開(kāi)治療，而輸血安全檢驗(yàn)是臨床輸血的前提。現(xiàn)代血型鑒定技術(shù)快速發(fā)展，由血型鑒定而引發(fā)的輸血事故已幾乎杜絕，但是由于血型系統(tǒng)本身的不規(guī)則抗體導(dǎo)致的不良反卻仍難以控制。近10年來(lái)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，臨床輸血中不規(guī)則抗體的檢出率維持在為0.30%～2.00%，然而一旦出現(xiàn)未被篩查出的情況，多會(huì)導(dǎo)致遲發(fā)性輸血反應(yīng)，情況嚴(yán)重時(shí)甚至危及受血者生命安全。血型免疫抗體是引發(fā)輸血不良反應(yīng)（如溶血反應(yīng)）的關(guān)鍵原因，所以必須確認(rèn)患者體內(nèi)存在不規(guī)則抗體[8]的可能性，這對(duì)于輸血安全來(lái)說(shuō)至關(guān)重要。

附表1 患者不規(guī)則抗體篩查結(jié)果[n(%)]

附表2 不規(guī)則抗體特異性鑒定結(jié)果[n(%)]

為提高配血的準(zhǔn)確性，受血者多會(huì)在提前一天篩查體內(nèi)的特異性不規(guī)則抗體?？谷饲虻鞍捉橘|(zhì)法和酶介質(zhì)法是使用最多的兩種配血方法，前者主要用于檢測(cè)有輸血史或流產(chǎn)史患者的血型抗體。而檢測(cè)患者體內(nèi)的Rh系統(tǒng)免疫性抗體則主要通過(guò)酶介質(zhì)法，一般適用于有輸血史和妊娠史的患者。在快速配血、排除血漿特異性蛋白干擾方面，抗人球蛋白介質(zhì)法有著更大優(yōu)勢(shì)[9]。檢測(cè)患者不規(guī)則抗體可以強(qiáng)化抗體特異性的發(fā)現(xiàn)，幫助患者匹配血型，有效降低輸血后發(fā)生溶血反應(yīng)的可能，提高了輸血的安全性。

輸血和妊娠是產(chǎn)生ABO血型系統(tǒng)以外的不規(guī)則抗體的主要原因，共有特點(diǎn)是引發(fā)溶血和紅細(xì)胞致敏，導(dǎo)致血細(xì)胞在鹽水介質(zhì)不能中發(fā)生凝集。Rh系統(tǒng)的抗-E抗體，抗-DC抗體，抗-D抗體和抗-e抗體是ABO血型系統(tǒng)以外最主要的不規(guī)則抗體，包括MNS系統(tǒng)的抗-M抗體。在Rh抗原中，D抗原、DC抗原、e抗原的陽(yáng)性率都高于E抗原[10]，所以抗-E抗體的檢出率高于其他抗體。在低離子介質(zhì)進(jìn)入后，能夠較好地實(shí)現(xiàn)介質(zhì)離子強(qiáng)度的降低，促進(jìn)抗體和紅細(xì)胞發(fā)生相關(guān)反應(yīng)[10][11][12]。作為陽(yáng)離子聚合物，溶解后帶有大量的正電荷，能夠使得紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷得到中和，緩解唾液酸的作用，同時(shí)減少非特異性的凝集。酌情加入重懸液，紅細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)散開(kāi)的景象，而假陽(yáng)性發(fā)生率的減少正得益于非特異性凝集的緣故，使得假陽(yáng)性的誤檢率大衛(wèi)減少甚至避免[13]。輸血后一周左右是免疫性抗體的效價(jià)高峰，也是發(fā)生溶血反應(yīng)的高峰期，因抗體效價(jià)和溶血反應(yīng)強(qiáng)度存在正相關(guān)關(guān)系，所以應(yīng)對(duì)其加強(qiáng)臨床重視。部分較少見(jiàn)的抗體，如抗-Lea抗體也能導(dǎo)致輸血后溶血反應(yīng)，所以輸血前的檢查力度不能松懈[14][15][16]。

總的來(lái)說(shuō)，ABO血型系統(tǒng)以外的不規(guī)則抗體多出現(xiàn)在Rh系統(tǒng)和MNS系統(tǒng)中，輸血或妊娠是其產(chǎn)生的重要誘發(fā)因素。不規(guī)則抗體檢測(cè)在臨床輸血中檢驗(yàn)效果是影響患者的重要因素，降低甚至避免發(fā)生溶血性輸血反應(yīng)的可能性，還可以幫助患者匹配血型，提高患者輸血的安全性，可以進(jìn)行臨床推廣。