裴永峰，李恒聰，何寧宇，黃惠妮

(南寧中心血站，南寧輸血醫(yī)學(xué)研究所，廣西 南寧 530007)

·論著·

廣西地區(qū)壯族和漢族血小板捐獻者HLA基因多態(tài)性的初步分析

裴永峰，李恒聰，何寧宇，黃惠妮

(南寧中心血站，南寧輸血醫(yī)學(xué)研究所，廣西 南寧 530007)

目的建立廣西地區(qū)壯族和漢族血小板供者人類白細(xì)胞抗原(HLA)基因分型資料庫，分析其HLA- A、B基因頻率及單體型頻率的分布，解決臨床患者的血小板輸注無效(PTR)。方法采用聚合酶鏈反應(yīng)- 序列特異寡核苷酸探針雜交技術(shù)(PCR- SSOP)對廣西地區(qū)172名壯族和403名漢族的單采血小板捐獻者進行HLA- A、B基因分型。結(jié)果廣西地區(qū)壯族血小板捐獻者HLA- A和HLA- B位點的基因頻率都符合Hardy- Weinberg遺傳平衡(P>0.05)，共檢出 11種HLA- A等位基因、24種HLA- B等位基因和 58種單倍體型；廣西地區(qū)漢族血小板捐獻者HLA- A和HLA- B位點的基因頻率都不符合Hardy- Weinberg遺傳平衡(P<0.05)，共檢出 14種HLA- A等位基因、30種HLA- B等位基因和 100種單倍體型。結(jié)論廣西地區(qū)壯族和漢族血小板供者 HLA基因特點比較接近中國南方人群，但也有廣西地區(qū)特點，該結(jié)果可以為 PTR患者迅速尋找到HLA相合血小板提供幫助。

血小板捐獻者； 人類白細(xì)胞抗原； 基因頻率； 單倍體型； 廣西壯族； 廣西漢族

血小板攜帶的抗原可分為兩大類，即血小板相關(guān)性抗原和血小板特異性抗原(HPA)，其中人類白細(xì)胞抗原(HLA)- A、HLA- B及HPA在血小板輸注中具有臨床意義。血小板輸注無效(PTR)被定義為至少2次ABO血型相合而保存時間少于72h的血小板輸注后，輸注效果不滿意。在多次輸注血小板治療的患者中發(fā)生率為30%～70%[1]。臨床引發(fā)PTR的原因主要是由反復(fù)輸血后患者產(chǎn)生HLA抗體和HPA抗體所致[2]。

據(jù)報道，PTR患者中HLA抗體陽性率約占80%，而單純HPA抗體陽性僅占少數(shù)[1]。鑒于HLA的遺傳多態(tài)性具有人種、民族及地域上的差異，結(jié)合群體遺傳資料建立適當(dāng)規(guī)模的已知HLA分型信息的無償血小板供者庫，可迅速找到匹配供者，已成為解決PTR的有效方法[3- 4]。本研究應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)- 序列特異寡核苷酸探針雜交技術(shù)(PCR- SSOP)，對廣西地區(qū)壯族和漢族固定單采血小板捐獻者進行HLA- A、HLA- B基因分型并形成數(shù)據(jù)庫，分析其HLA- A、HLA- B基因頻率及單體型頻率，以期為解決廣西地區(qū)的PTR者提供幫助。

1 對象與方法

1.1 研究對象

廣西地區(qū)固定無償血小板捐獻者575名，且無血緣關(guān)系。每人采集血樣5 ml，乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝。其中，172名為壯族，年齡20～50歲，男109名，女63名；403名為漢族，年齡23～50歲，男235名，女168名。

1.2 儀器與試劑

Luminex- 100液態(tài)芯片檢測系統(tǒng)(美國 Luminex)，9700型PCR擴增儀(美國ABI)，Thermo SCIENTIFIC NANODROP 1000核酸蛋白測定儀(美國 Gene)，全自動凝膠成像分析系統(tǒng)(英國 Bio- best)，全功能水平電泳系統(tǒng)(美國 Embi Tec)，HLA- A、B(SSO)分型試劑(美國 Lifecodes，LOT- A：04145D，LOT- B：10135C)，DNA提取試劑(QIAamp DNA blood mini kit，51104，荷蘭)，單通道和八通道移液器(德國Eppendorf)。

1.3 實驗方法

嚴(yán)格按試劑說明書提取DNA，用核酸蛋白測定儀確定DNA質(zhì)量，DNA濃度為40～100 ng·μl-1，OD A260 nm/280 nm為1.7～1.9，并用0.8%瓊脂糖凝膠電泳檢測無DNA降解現(xiàn)象。HLA- A、B基因分型操作步驟嚴(yán)格按試劑盒說明書進行。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用直接計算法計算每個等位基因的頻率，數(shù)據(jù)用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件分析，兩組間的等位基因頻率比較采用四格表χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義，OR為比值比，CI為可信區(qū)間。每個位點的Hardy- Weinberg平衡檢驗和單倍體型頻率應(yīng)用Arlequin(3.5.2.2)軟件進行[5]。

1.5 血小板供者庫最小規(guī)模評價[6]

假設(shè)有95%的把握在供者庫中檢測到該單倍體型，采用單倍體型頻率(HP)估算供者庫規(guī)模，N=-1.3010/Lg(1-2HP+HP2)，其中N為血小板供者庫所需的最少人數(shù)，HP為單倍體型頻率。

2 結(jié) 果

2.1 廣西地區(qū)壯族和漢族血小板捐獻者HLA- A位點的基因頻率比較

具體見表1，其中壯族共檢出等位基因11個，基因頻率在前5位的等位基因分別是A*11、A*02、A*24、A*68和A*26，共占該位點基因頻率的97.39%。漢族共檢出等位基因14個，基因頻率在前5位的等位基因分別是A*11、A*02、A*24、A*33和A*26，共占該位點基因頻率的91.57%。分析可見，A*02的基因頻率壯族高于漢族(P<0.05)，A*68的基因頻率壯族顯著高于漢族(P<0.01)，A*33基因頻率壯族顯著低于漢族(P<0.01)，其余等位基因的頻率相比差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.2 廣西地區(qū)壯族和漢族血小板捐獻者HLA- B位點的基因頻率比較

具體見表2，壯族共檢出等位基因24個，基因頻率在前5位的等位基因分別是B*46、B*15∶XX/B75、B*13、B*40∶XX/B60和B*58，共占該位點基因頻率的61.34%。漢族共檢出等位基因30個，其基因頻率在前5位的等位基因分別B*46、B*40∶XX/B60、B*13、B*15∶XX/B75和B*58，共占該位點基因頻率的56.83%。兩個民族該位點所有等位基因的頻率相比，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

表1廣西地區(qū)壯族和漢族血小板捐獻者HLA-A位點基因頻率比較

等位基因/特異性廣西壯族(n=172)廣西漢族(n=403)等位基因數(shù)基因頻率等位基因數(shù)基因頻率χ2值P值OR95%CIA*11∶XX/A111270.36922660.33001.6440.200A*02∶XX/A21230.35762330.28915.2890.0211.3691.047～1.789A*24∶XX/A24440.12791320.16382.3930.122A*68∶XX/A68330.095940.005064.0720.00021.2757.475～60.548A*26∶XX/A2680.0233210.02610.0770.788A*03∶XX/A330.0087200.02483.1860.074A*30∶XX/A3020.0058140.01742.3470.126A*23∶XX/A2310.002920.00251.000A*29∶XX/A2910.002990.01120.297A*31∶XX/A3110.002970.00870.448A*33∶XX/A3310.0029860.106737.1430.0000.0240.003～0.176A*01∶XX/A100.000070.0087A*69∶XX/A6900.000010.0012A*74∶XX/A7400.000040.0050

2.3 廣西地區(qū)壯族和漢族血小板捐獻者HLA- A和HLA- B位點的Hardy- Weinberg平衡檢驗

壯族的結(jié)果見表3，兩個位點都符合Hardy- Weinberg遺傳平衡 (P>0.05)。漢族的結(jié)果見表4，兩個位點都不符合Hardy- Weinberg遺傳平衡 (P<0.05)。

2.4 廣西地區(qū)壯族和漢族血小板捐獻者HLA基因頻率(>0.1)與其他種族、群體的比較

壯族與其他種族、群體的比較結(jié)果見表5。A*11∶XX、B*15∶XX、B*40∶XX的基因頻率與中國南方漢族[7]存在的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；7個等位基因的基因頻率與日本[8]、德國[9]存在的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義；除了B*40、B*46外，其余5個等位基因的基因頻率與泰國[10]存在的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義；除了B*46在美國黑人[11]中沒有檢測到，其余6個等位基因的基因頻率與廣西壯族存在的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義。

漢族與其他種族、群體的比較結(jié)果見表6。B*40∶XX的基因頻率與中國南方漢族[7]存在的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；7個等位基因的基因頻率與日本[8]存在的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義；除了A*02、A*24和B*46外，其余4個等位基因的基因頻率與泰國[10]存在的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義；除了B*46在美國黑人[11]中沒有檢測到，其余6個等位基因的基因頻率與廣西漢族存在的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義；除了A*02∶XX，其余6個等位基因的基因頻率與德國[9]存在的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.5 廣西地區(qū)壯族和漢族血小板捐獻者2個位點單倍型及頻率(>0.01)分析

壯族中觀察到58個HLA- A- B單倍型，漢族中觀察到100個HLA- A- B單倍型，兩個民族頻率大于1%的HLA- A- B單倍型見表7，排在前3位的單倍型是一樣的，分別是A*02∶XX- B*46∶XX、A*11∶XX- B*15∶XX 和A*33∶XX- B*58∶XX。

2.6 廣西地區(qū)壯族和漢族血小板捐獻者供者庫最少規(guī)模評價

按照單倍體型頻率(HP)=0.01來計算，血小板供者庫規(guī)模約為150人。壯族HP>0.01的所有HP之和為0.820 1，即一個150人的供者庫超過82%的患者有95%的可能性找到至少1例HLA相合的供者；漢族單倍體型>0.01的所有HP之和為0.724 3，即一個150人的供者庫超過72%的患者有95%的可能性找到至少1例HLA相合的供者。

表2廣西地區(qū)壯族和漢族人群血小板捐獻者HLA-B位點基因頻率比較

等位基因/特異性廣西壯族(n=172)廣西漢族(n=403)等位基因數(shù)基因頻率等位基因數(shù)基因頻率χ2值P值B*46∶XX/B46550.15991200.14890.2260.634B*15∶XX/B75430.1250800.09931.6730.196B*13∶XX/B13420.1221910.11290.1990.655B*40∶XX/B60410.11921070.13280.3960.529B*58∶XX/B58300.0872600.07440.5450.460B*38∶XX/B38270.0785500.06201.0450.307B*55∶XX/B55200.0581340.04221.3720.242B*15∶XX/B62190.0552390.04840.2360.627B*51∶XX/B51110.0320410.05091.9930.158B*56∶XX/B56110.0320140.01742.4190.120B*48∶XX/B4860.0174230.02851.2070.272B*54∶XX/B5460.0174160.01990.0750.785B*27∶XX/B2750.0145120.01490.0020.964B*35∶XX/B3550.0145190.02360.9640.326B*52∶XX/B5240.0116100.01241.000B*40∶XX/B6140.0116160.01990.9540.329B*07∶XX/B730.0087150.01861.5300.216B*39∶XX/B3930.0087150.01861.5300.216B*57∶XX/B5720.005860.00741.000B*67∶XX/B6720.005840.00501.000B*15∶XX/B7620.005830.00370.639B*18∶XX/B1810.002930.00371.000B*44∶XX/B4410.0029120.01490.124B*50∶XX/B5010.002910.00120.509B*08∶XX/B800.000040.0050B*37∶XX/B3700.000010.0012B*41∶XX/B4100.000010.0012B*15∶XX/B7000.000020.0025B*15∶XX/B7100.000060.0074B*15∶XX/B7700.000010.0012

表3廣西地區(qū)壯族血小板捐獻者HLA-A、 -B的Hardy-Weinberg平衡檢驗結(jié)果

位點樣本數(shù)觀察值期望值P值HLA-A1720.691860.710080.46341HLA-B1720.901160.889790.79040

表4廣西地區(qū)漢族血小板捐獻者HLA-A、-B的Hardy-Weinberg平衡檢驗結(jié)果

位點樣本數(shù)觀察值期望值P值HLA-A4030.764270.768330.00437HLA-B4030.895780.898990.02624

表5廣西地區(qū)壯族血小板捐獻者HLA基因頻率(>0.1)與其他種族、群體的比較

等位基因/特異性廣西壯族(n=172)中國南方漢族(n=4707)日本(n=18604)泰國(n=16807)美國黑人(n=564)德國(n=8904)A*02∶XX/A20.35760.30710.2471b0.2924b0.1773b0.3003aA*11∶XX/A110.36920.3173a0.0934b0.2770b0.0133b0.0508bA*24∶XX/A240.12790.15600.3724b0.1734a0.0221b0.0891aB*13∶XX/B130.12210.09160.0146b0.0790b0.0106b0.0124bB*15∶XX/B750.12500.0673b0.0091b0.0770b0.0115b0.0312aB*40∶XX/B600.11920.0024b0.0536b0.10400.0106b0.0004bB*46∶XX/B460.15990.14720.0477b0.1320NT0.0478b

與廣西壯族比較，aP<0.05,bP<0.01

注：NT為未檢測

表6廣西地區(qū)漢族血小板捐獻者HLA基因頻率(>0.1)與其他種族、群體的比較

等位基因/特異性廣西漢族(n=403)中國南方漢族(n=4707)日本(n=18604)泰國(n=16807)美國黑人(n=564)德國(n=8904)A*02∶XX/A20.28910.30710.2471b0.29240.1773b0.3003A*11∶XX/A110.33000.31730.0934b0.2770b0.0133b0.0508bA*24∶XX/A240.16380.15600.3724b0.17340.0221b0.0891bA*33∶XX/A330.10670.09130.0751a0.1380a0.0753a0.0124bB*13∶XX/B130.11290.09160.0146b0.0790b0.0106b0.0312bB*40∶XX/B600.13280.0024b0.0536b0.1040b0.0106b0.0004bB*46∶XX/B460.14890.14720.0477b0.1320NT0.0478b

與廣西壯族比較，aP<0.05,bP<0.01

注：NT為未檢測

3 討 論

隨著白血病和惡性腫瘤大劑量化療的應(yīng)用，以及造血干細(xì)胞移植的大量開展，臨床上需要血小板輸注的患者日益增多。但是患者在多次輸注血小板后可產(chǎn)生血小板抗體而引起同種異體免疫，導(dǎo)致PTR[12]。通過對某地區(qū)人群HLA基因頻率和單倍型頻率的分析，可掌握該地區(qū)人群中HLA基因分布情況，為臨床上PTR患者篩選并提供相匹配的血小板制品，提高血小板輸注的安全性和有效性。

本研究參考國內(nèi)其他實驗室的做法[3- 4,13]，主要是使用無償血小板捐獻者作為資料庫的主要來源。雖然這種做法建庫成本比較高，但是因為無償血小板捐獻者的積極性比較高，在需要其捐獻血小板時，一般不會拒絕，這樣可以更好地服務(wù)于臨床。本研究對廣西地區(qū)575名血小板捐獻者(172名壯族和403名漢族)進行HLA- A、HLA- B基因分型并分析，壯族的兩個位點均符合Hardy- Weinberg遺傳平衡(P>0.05)，漢族的兩個位點不論是否包含罕見型等位基因(其等位基因個數(shù)少于3個)時，兩個位點都不符合Hardy- Weinberg平衡檢驗(P<0.05)。這可能是由于廣西漢族與其他民族通婚的結(jié)果，或者是由于廣西漢族中存在潛在的人群結(jié)構(gòu)，其原因需要進一步的研究來驗證[14]。

廣西地區(qū)壯族血小板捐獻者HLA- A、HLA- B基因頻率在前5位的等位基因共占該位點基因頻率的97.39%與61.34%，廣西地區(qū)漢族血小板供者HLA- A、HLA- B基因頻率在前5位的等位基因共占該位點基因頻率的91.57%與56.83%，但等位基因A*36、A*43、A*80、B*41、B*42、B*47、B*53、B*73、B*78、B*82和B*83等在廣西壯族和漢族中均沒有發(fā)現(xiàn)。據(jù)報道，這些等位基因在部分少數(shù)民族并不少見，比如A*36在土族人群的基因頻率約為1%，B*73在維吾爾族的基因頻率約為2%[15]。由于HLA等位基因復(fù)雜的多態(tài)性，本實驗數(shù)據(jù)相對較少，是否表現(xiàn)本地區(qū)真實的HLA等位基因分布情況，需加大樣本量進行進一步的驗證。

表7廣西地區(qū)壯族和漢族血小板捐獻者2個位點單倍型及頻率表(頻率>0.01)

單倍型廣西壯族頻率(n=172)單倍型廣西漢族頻率(n=403)A*02∶XX-B*46∶XX0.1129A*02∶XX-B*46∶XX0.0967A*11∶XX-B*15∶XX0.1090A*11∶XX-B*15∶XX0.0859A*33∶XX-B*58∶XX0.0694A*33∶XX-B*58∶XX0.0680A*11∶XX-B*13∶XX0.0645A*11∶XX-B*40∶XX0.0559A*02∶XX-B*40∶XX0.0603A*11∶XX-B*13∶XX0.0494A*02∶XX-B*15∶XX0.0560A*02∶XX-B*40∶XX0.0413A*11∶XX-B*40∶XX0.0497A*02∶XX-B*15∶XX0.0337A*02∶XX-B*38∶XX0.0471A*24∶XX-B*40∶XX0.0336A*11∶XX-B*46∶XX0.0283A*11∶XX-B*46∶XX0.0299A*24∶XX-B*13∶XX0.0245A*24∶XX-B*15∶XX0.0286A*02∶XX-B*13∶XX0.0244A*02∶XX-B*38∶XX0.0266A*02∶XX-B*55∶XX0.0220A*02∶XX-B*13∶XX0.0217A*11∶XX-B*51∶XX0.0216A*11∶XX-B*51∶XX0.0205A*24∶XX-B*55∶XX0.0196A*11∶XX-B*38∶XX0.0199A*24∶XX-B*46∶XX0.0187A*24∶XX-B*13∶XX0.0195A*24∶XX-B*40∶XX0.0179A*11∶XX-B*55∶XX0.0161A*11∶XX-B*38∶XX0.0149A*30∶XX-B*13∶XX0.0160A*11∶XX-B*54∶XX0.0144A*02∶XX-B*55∶XX0.0147A*24∶XX-B*15∶XX0.0123A*24∶XX-B*46∶XX0.0132A*11∶XX-B*56∶XX0.0117A*02∶XX-B*48∶XX0.0111A*11∶XX-B*55∶XX0.0106A*02∶XX-B*51∶XX0.0111A*02∶XX-B*56∶XX0.0103A*33∶XX-B*40∶XX0.0107

中國漢族主要分為北方漢族和南方漢族，廣西地區(qū)壯族和漢族血小板捐獻者常見基因頻率(>0.1)與其他種族、群體比較可見，廣西地區(qū)壯族和漢族血小板捐獻者HLA基因多態(tài)性比較接近中國南方漢族，在一定程度上又具有本地區(qū)的特點。這可能是由于廣西壯族和漢族與中國南方漢族具有相似的地理和歷史特征所形成。據(jù)報道，中國南方漢族與中國南方少數(shù)民族有比較密切的關(guān)系，這可能是由于歷史上南方漢族人群的大量增長后，其與南方少數(shù)民族在文化、地理和基因方面的融合導(dǎo)致[14- 16]。

在廣西壯族和漢族血小板捐獻者中，不僅發(fā)現(xiàn)一些常見的等位基因組成的單倍型有較高的頻率，比如A*02∶XX- B*46∶XX、A*11∶XX- B*15∶XX和A*33∶XX- B*58∶XX，同時也發(fā)現(xiàn)一些不常見的等位基因組成的單倍型有較高的頻率，比如在壯族中發(fā)現(xiàn)的A*11∶XX- B*54∶XX(0.014 4)和在漢族中發(fā)現(xiàn)的A*02∶XX- B*51∶XX(0.1111)。我們的結(jié)果與浙江漢族的研究結(jié)果比較相似，這些高頻率或低頻率的單倍型的出現(xiàn)，可能與選擇性的壓力有一定關(guān)聯(lián)[16]。

根據(jù)血小板供者庫最少規(guī)模估算，若一個群體的單倍型頻率較高，一個150人的庫就可以滿足大部分人的選擇要求。但據(jù)報道，不同遺傳背景的患者在同一血小板供者庫中找到配合性供者的概率差別很大，一個5 000人的血小板供者庫，才有約80%的患者可以在其中找到5個A級配合的供者[6]，若再結(jié)合ABO同型輸注的要求，供者庫的規(guī)模需要更大。因此血小板供者庫的建立要因地制宜，根據(jù)當(dāng)?shù)厝巳篐LA分布頻率建立本地區(qū)供者庫，可主要滿足本地患者需要。

研究發(fā)現(xiàn)，實時監(jiān)測腎綜合征出血熱患者的血小板參數(shù)有利于對患者疾病狀態(tài)作出判斷，也可以用于指導(dǎo)臨床治療[17]；患者血小板淋巴細(xì)胞比值和中性粒細(xì)胞比值在病毒性肝臟疾病的進展、預(yù)后中有著一定的指示作用[18]。當(dāng)患者輸注血小板捐獻者的血小板后，檢測其血小板的指標(biāo)是否對臨床有上述指導(dǎo)意義，需進一步研究。本研究在國內(nèi)首次初步分析總結(jié)了廣西地區(qū)壯族和漢族血小板捐獻者HLA基因頻率和單倍型頻率的特點，掌握該地域人群中HLA基因分布情況，可為臨床提供HLA匹配的血小板制品，節(jié)約血小板，降低免疫性PTR的發(fā)生，進一步提高臨床輸注血小板的安全性、有效性。該結(jié)果也將會對骨髓移植病人尋找匹配的HLA供者提供幫助，同時對人類遺傳學(xué)和疾病相關(guān)研究提供有用的信息。

[1] 鄧晶，徐秀章，葉欣，等.血小板輸注無效患者HLA和HPA基因型及其抗體特異性的分析[J].國際輸血及血液學(xué)雜志，2014，37(3)：197- 200.

[2] 王小芳，劉孟黎，周黨俠，等.中國西安地區(qū)血小板捐獻者HPA及HLA- Ⅰ分型的研究[J].中國實驗血液學(xué)雜志，2011，19(6)：1462- 1465.

[3] 朱祥明，楊通漢，姚富柱.云南漢族血小板獻血者HLA- A、B和HPA基因多態(tài)性的分析[J].臨床輸血與檢驗，2012，14(3)：193- 200.

[4] 代敏，粟玉萍，蘇湘暉，等.岳陽地區(qū)血小板捐獻者HPA1- 17,HLA- A和B基因多態(tài)性研究[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2014，29(3)：48- 51.

[5] EXCOFFIER L,LISCHER H E.Arlequin suite ver 3.5:a new series of programs to perform population genetics analyses under Linux and Windows[J].Mol Ecol Resour,2010,10(3):564- 567.

[6] 袁文聲，何銳洪，梁玉初.中山地區(qū)血小板供者HLA 基因分型資料庫的建立[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9(13)：1579- 1580.

[7] 吳國光，鄧志輝，高素青，等.6965名漢族骨髓庫供者HLA多態(tài)性[J].中華血液學(xué)雜志，2004，25(8):473- 477.

[8] IKEDA N,KOJIMA H,NISHIKAWA M,et al.Determination of HLA- A,- C,- B,- DRB1 allele and haplotype frequency in Japanese population based on family study[J].Tissue Antigens,2015,85(4):252- 259.

[9] SCHMIDT A H,BAIER D,SOLLOCH U V,et al.Estimation of high- resolution HLA- A,- B,- C,- DRB1 allele and haplotype frequencies based on 8862 German stem cell donors and implications for strategic donor registry planning[J].Human Immunology,2009,70(11):895- 902.

[10] KUPATAWINTU P,PHEANCHAROEN S,SRISUDDEE A,et al.HLA- A,- B,- DR haplotype frequencies in the Thai Stem Cell Donor Registry[J].Tissue Antigens,2010,75(6):730- 736.

[11] TU B,MACK S J,LAZARO A,et al.HLA- A,- B,- C,- DRB1 allele and haplotype frequencies in an African American population[J].Tissue Antigens,2007,69(1):73- 85.

[12] PAVENSKI K,FREEDMAN J,SEMPLE J W.HLA alloimmunization against platelet transfusions:pathophysiology,significance,prevention and management[J].Tissue Antigens,2012,79(4):237- 245.

[13] 焦淑賢，遲曉云，馮智慧，等.青島地區(qū)已知HLA和HPA分型血小板供者庫的建立和臨床應(yīng)用[J].中國輸血雜志，2010，23(9)：675- 678.

[14] TRACHTENBERG E,VINSON M,HAYES E,et al.HLA class I (A,B,C) and class II (DRB1,DQA1,DQB1,DPB1) alleles and haplotypes in the Han from southern China[J].Tissue Antigen,2007,70(6):455- 463.

[15] YAO Y,SHI L,TAO Y,et al.Distinct HLA allele and haplotype distributions in four ethnic groups of China[J].Tissue Antigen,2012,80(5):452- 461.

[16] HE Y,ZHANG W,CHEN N,et al.HLA- A,- B and - DRB1 allele and haplotype frequencies of 8333 Chinese Han from the Zhejiang province,China[J].Int J Immunogenet,2016,43(2):86- 95.

[17] 張菁超.腎綜合征出血熱患者血小板參數(shù)變化及其臨床意義[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，2013，41(12)：911- 913.

[18] 常謙，孟憲春，楊若男，等.血小板淋巴細(xì)胞比值與中性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞比值在HBV、HCV感染者中的臨床意義評價[J].東南大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2016，35(6)：854- 860.

ThepolymorphismstudyofplateletdonorregistrywithknownHLAtypinginZhuangandHanpopulationsinGuangxiarea

PEIYong-feng,LIHeng-cong,HENing-yu,HUANGHui-ni

(NanningInstituteofTransfusionMedicine,NanningBloodCenter,Nanning530007,China)

Objective: In order to resolve the platelet transfusion refractoriness (PTR), we established a voluntary apheresis platelet donor registry in the Guangxi Zhuang and Han population who live in Guangxi, then investigated the allele and haplotype frequencies of HLA- A, and - B loci.MethodsThe blood sample of 172 Zhuang and 403 Han regular apheresis platelet donors in Guangxi region were genotyped by PCR- SSOP.ResultsThePvalues of the HLA- A and HLA- B loci showed that the HLA allelic distribution in Guangxi Zhuang population was in accordance with Hardy- Weinberg equilibrium (P>0.05), a total of 11 HLA- A alleles, 24 HLA- B alleles and 58 A- B haplotypes were identified. ThePvalues of the HLA- A and HLA- B loci showed that the HLA allelic distribution in Guangxi Han population was not in accordance with Hardy- Weinberg equilibrium (P<0.05), a total of 14 HLA- A alleles, 30 HLA- B alleles and 100 A- B haplotypes were identified.ConclusionThe Guangxi Zhuang and Han population of platelet donor registry was genetically close to southern Chinese populations, but it still keeps its unique genetic characteristics, which can rapidly find compatible donors for patients with PTR.

platelet donor; human leukocyte antigen; gene frequency; haplotype; Guangxi Zhuang population; Guangxi Han population

2016- 11- 22

2017- 06- 22

南寧市科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計劃項目(201003048C- 3)

裴永峰(1977-)，男，山西大同人，助理研究員，醫(yī)學(xué)碩士。E- mail: 389441556@qq.com

裴永峰，李恒聰，何寧宇，等. 廣西地區(qū)壯族和漢族血小板捐獻者HLA基因多態(tài)性的初步分析[J].東南大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版,2017,36(5)：686- 692.

R392.2

A

1671- 6264(2017)05- 0686- 07

10.3969/j.issn.1671- 6264.2017.05.002

(本文編輯：何彥梅)