易芬遠(yuǎn)，楊淑蘭，羅家琪，馬就慶，梁唐敏，李 略，王 超，柯 敏

（1.廣西化工研究院，廣西 南寧 530001；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院，北京 100000；3.廣西三晶化工科技有限公司，廣西 南寧 530001）

48%苯·芐·硝草酮可濕性粉劑高效液相色譜分析

易芬遠(yuǎn)1，楊淑蘭1，羅家琪2，馬就慶1，梁唐敏1，李 略1，王 超1，柯 敏3

（1.廣西化工研究院，廣西 南寧 530001；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院，北京 100000；3.廣西三晶化工科技有限公司，廣西 南寧 530001）

建立了48%苯·芐·硝草酮可濕性粉劑的高效液相色譜分析方法。使用ODS-C18柱和可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器，以乙腈-水（體積比50∶50，pH=3）的混合溶劑為流動(dòng)相，在流速1.0mL·min-1和230nm波長(zhǎng)下，用外標(biāo)法對(duì)48%苯·芐·硝草酮可濕性粉劑中3種有效成分同柱定量分析。結(jié)果表明，苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和硝磺草酮的測(cè)定線性關(guān)系系數(shù)分別為0.9988、0.9981和0.9991，標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.192、0.060和0.036，變異系數(shù)分別為0.458%、2.013%和1.204%，平均回收率分別為98.72%、99.95%和99.52%。該方法簡(jiǎn)便、精確度高、重復(fù)性好。

苯噻酰草胺；芐嘧磺?。幌趸遣萃?；高效液相色譜；定量分析

苯噻酰草胺是選擇性?xún)?nèi)吸傳導(dǎo)型酰苯胺類(lèi)除草劑，是細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂抑制劑，對(duì)幼原母細(xì)胞的分裂有特別強(qiáng)的抑制作用，可有效防除禾本科雜草，對(duì)稗草在萌芽至2葉期有特效，對(duì)千金子、牛毛氈、澤漆、鴨舌草、節(jié)節(jié)菜、異形莎草、扁莎草、碎米莎草及多年水生莎草也有一定的防效[1]。芐嘧磺隆多用于防除水稻田一年生及多年生闊葉雜草及莎草，在作物芽后、雜草芽前及芽后施藥，對(duì)鴨舌草、節(jié)節(jié)菜、眼子菜、矮慈姑以及莎草科雜草防除效果良好，該藥劑的有效成分在水中擴(kuò)散迅速，保水時(shí)使用效果好，其對(duì)水稻、小麥等作物安全[2]。硝磺草酮是一種能夠抑制羥基苯基丙酮酸酯雙氧化酶（HPPD）的芽前和苗后廣譜選擇性除草劑，可有效防治主要的闊葉草和一些禾本科雜草。作者前期研究表明，將三者混合制成48%苯·芐·硝草酮可濕性粉劑，用于防除水稻田雜草，除草效果較單劑、二元復(fù)配制劑提高，殺草譜廣，且對(duì)環(huán)境安全，符合農(nóng)藥低毒、高效的發(fā)展趨勢(shì)。近年來(lái)有關(guān)苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和硝磺草酮檢測(cè)方法的報(bào)道不少，如王清竹[3]建立了50%苯噻酰草胺·吡嘧磺隆可濕性粉劑高效液相色譜分析方法；褚明杰[4]建立了測(cè)定除草劑芐嘧磺隆的高效液相色譜法；羅璇等[5]采用高效液相色譜儀研究了5%硝磺草酮-50%莠去津懸浮劑中硝磺草酮和莠去津同時(shí)測(cè)定的檢測(cè)方法。但苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和硝磺草酮混配制劑中3種有效成分同時(shí)測(cè)定的方法尚未見(jiàn)研究報(bào)道。作者經(jīng)過(guò)反復(fù)實(shí)驗(yàn)，采用高效液相色譜法，優(yōu)化色譜條件，一次進(jìn)樣可同時(shí)定量分析苯噻酰草胺·芐嘧磺隆·硝磺草酮可濕性粉劑復(fù)配制劑中的3種有效成分，方法簡(jiǎn)單、高效、準(zhǔn)確，靈敏度高，重復(fù)性好。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與藥劑

Ultimate 3000高效液相色譜儀，色譜工作站，可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器（色譜柱 ODS-C18，5μm，250mm×4.6mm），超聲波清洗器，過(guò)濾器（過(guò)濾膜孔徑 0.45μm）。

乙腈（色譜純級(jí)，用前經(jīng)濾膜過(guò)濾），磷酸（分析純），苯噻酰草胺標(biāo)準(zhǔn)品（已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%），芐嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)品（已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%），硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)品（已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99%，標(biāo)樣購(gòu)買(mǎi)于沈陽(yáng)化工研究院），雙蒸水，48% 苯·芐·硝草酮可濕性粉劑（廣西壯族自治區(qū)化工研究院）。

1.2 色譜條件

流動(dòng)相：乙腈∶水=50∶50（用磷酸調(diào)pH=3），經(jīng)過(guò)濾器過(guò)濾并脫氣。流速1.0 mL·min-1，柱溫為室溫，檢測(cè)波長(zhǎng)230nm，進(jìn)樣量20μL。保留時(shí)間：硝磺草酮約4.5min，芐嘧磺隆約5.7min，苯噻酰草胺約7.8min。

1.3 測(cè)定步驟

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

分別稱(chēng)取苯噻酰草胺、芐嘧磺隆、硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)品0.1g（精確至0.0002g）各加入100mL容量瓶中，量取95mL乙腈加入容量瓶，將容量瓶于超聲波容器中超聲至完全溶解，待恢復(fù)至25℃，定容至刻度，搖勻，即得苯噻酰草胺標(biāo)液a、芐嘧磺隆標(biāo)液b、硝磺草酮標(biāo)液c。將標(biāo)液a分別稀釋為50、100、200、300、400mg·L-1，將標(biāo)液 b 分別稀釋為 10、20、30、40、50mg·L-1，將標(biāo)液 c 分別稀釋為 10、20、30、40、50mg·L-1。用移液管分別移取14mL標(biāo)液a、1mL標(biāo)液b、1mL標(biāo)液c 至50mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，搖勻，即得苯噻酰草胺·芐嘧磺隆·硝磺草酮混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。

1.3.2 試樣溶液的配制

精確稱(chēng)取樣品 0.12g（精確至 0.0002g）加入50mL 容量瓶中，量取45mL乙腈加入容量瓶，將容量瓶于超聲波容器中超聲至完全溶解，待恢復(fù)至25℃，定容至刻度，搖勻。用移液管移取上述溶液14mL至50mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，搖勻，即得苯·芐·硝草酮可濕性粉劑溶液試樣，再經(jīng)0.45μm 孔徑濾膜過(guò)濾，備用。

1.3.3 樣品測(cè)定

在上述色譜條件下，待基線穩(wěn)定后，先注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值，直至相鄰的2針?lè)迕娣e比值變化小于1.5%時(shí)，按標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。標(biāo)樣和樣品的色譜圖分別見(jiàn)圖1、2。

圖1 苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和硝磺草酮混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的液相色譜圖

1.3.4 計(jì)算

將測(cè)得的2針試樣溶液及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中苯噻酰草胺、芐嘧磺隆或硝磺草酮的峰面積進(jìn)行平均。以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示的苯噻酰草胺、芐嘧磺隆或硝磺草酮的含量X（%）按下式計(jì)算：

式中：A1為標(biāo)樣溶液中苯噻酰草胺（芐嘧磺隆或硝磺草酮）峰面積平均值；A2為試樣溶液中苯噻酰草胺（芐嘧磺隆或硝磺草酮）峰面積平均值；m1為標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2為試樣的質(zhì)量，g；w為標(biāo)樣中苯噻酰草胺（芐嘧磺隆或硝磺草酮）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；f苯噻酰草胺=1；f芐嘧磺隆=14；f硝磺草酮=14。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

對(duì)苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和硝磺草酮標(biāo)樣溶液分別進(jìn)行紫外全波長(zhǎng)掃描，得到其相應(yīng)的吸收波長(zhǎng)與響應(yīng)值的紫外吸收光譜圖。苯噻酰草胺的最大吸收波長(zhǎng)在220nm左右，芐嘧磺隆的最大吸收波長(zhǎng)在238nm左右，硝磺草酮的最大吸收波長(zhǎng)在270nm左右。當(dāng)選用230nm時(shí)，苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和硝磺草酮均有較強(qiáng)吸收峰，流動(dòng)相無(wú)吸收，因此最終選擇 230nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.2 流動(dòng)相的選擇

通過(guò)分析一系列不同流動(dòng)相的試驗(yàn)結(jié)果后，得到流動(dòng)相為乙腈-水（體積比50∶50，pH=3），流速在1mL·min-1的條件下，有效成分與雜質(zhì)能較好地分離，峰形對(duì)稱(chēng)，保留時(shí)間適當(dāng)。

2.3 線性相關(guān)性試驗(yàn)結(jié)果

在上述色譜條件下進(jìn)樣，分別測(cè)定50、100、200、300、400mg·L-1苯噻酰草胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，10、20、30、40、50mg·L-1芐嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)溶液和 10、20、30、40、50mg·L-1硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)溶液，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和硝磺草酮均有很好的線性關(guān)系。擬合的線性回歸方程分別為：

2.4 準(zhǔn)確度的測(cè)定

在已知含量的48%苯·芐·硝草酮可濕性粉劑樣品中，分別加入一定量的苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和硝磺草酮標(biāo)樣，在上述色譜條件下分析其含量，計(jì)算得到的平均回收率分別為98.72%、99.95%和99.52%（表1），回收率較高，表明測(cè)量結(jié)果與被測(cè)量值真值之間的一致程度高，準(zhǔn)確度較高。

2.5 精密度的測(cè)定

為了測(cè)定分析方法的精密度，將樣品在上述色譜條件下平行測(cè)定5次。經(jīng)統(tǒng)計(jì)，苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和硝磺草酮的含量平均值分別為41.89%、2.95%和2.99%，標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.192、0.060和0.036，變異系數(shù)分別為0.458%、2.013%和1.204%（表2）。表明方法的精密度良好，多次重復(fù)測(cè)定同一量時(shí)，各測(cè)定值之間彼此相符合的程度較高，隨機(jī)誤差較小。

表1 回收率測(cè)定結(jié)果

表2 精密度測(cè)定結(jié)果

3 結(jié)論

采用高效液相色譜法，使用ODS-C18柱和可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器，以乙腈-水（體積比50∶50，pH=3）為流動(dòng)相，同柱定量分析48%苯·芐·硝草酮可濕性粉劑中的3種有效成分，準(zhǔn)確度和精密度較高，線性關(guān)系好，具有簡(jiǎn)單快速、準(zhǔn)確及分離效果好等優(yōu)點(diǎn)，可用于苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和硝磺草酮復(fù)配產(chǎn)品的質(zhì)量檢測(cè)和控制。

[1] 屈雙婷，金晨鐘，李四軍，等.三元復(fù)配除草劑對(duì)稗草和鱧腸的室內(nèi)藥效研究[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009(11)：73-74.

[2] 虞軼俊，施德.農(nóng)藥應(yīng)用大全[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2008：265-266.

[3] 王清竹. 50%苯噻酰草胺·吡嘧磺隆可濕性粉劑高效液相色譜法分析[J].化學(xué)工程師，2012(10)：31-32.

[4] 褚明杰.高效液相色譜法測(cè)定除草劑芐嘧磺隆含量研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39(32)：20301-20302.

[5] 羅璇，楊菁，李秀平. 5%硝磺草酮-50%莠去津懸浮劑高效液相色譜分析[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2013(23)：141.

Analysis of Mefenacet·Bensulfuron-methyl·Mesotrione 48% WP by HPLC

YI Fenyuan1, YANG Shulan1, LUO Jiaqi2, MA Jiuqing1, LIANG Tangmin1, LI Lue1, WANG Chao1
(1.Guangxi Research Institute of Chemical industry, Nanning 530001, China；2.College of Science, China Agriculture University,Beijing 100000, China)

HPLC analysis method for the mefenacet·bensulfuron-methyl·mesotrione 48% WP was established. Quantitative analysis of active ingredient was conducted using a ODS-C18column, a variable wavelength UV detector at UV 230 nm, CH3CN :H2O=50:50(by vol, pH=3) as the mobile phase with the fl ow rate of 1.0 mL/min, and an external standard. Results showed that the linear correlations of mefenacet, bensulfuron-methyl and mesotrione were 0.9988, 0.9981, 0.9991 respectively, standard deviations were 0.192, 0.060, 0.036, coeff i cients of variation were 0.458%, 2.013%, 1.204%, and average recovery ratios were 98.72%, 99.95%,99.52%. This method was simple with high accuracy and good repeatability.

mefenace; bensulfuron-methyl; mesotrione; HPLC; quantitative analysis

TQ 457；O 657.7+2

A

1671-9905(2017)10-0045-03

廣西科學(xué)研究與技術(shù)開(kāi)發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（桂科AB16380125；桂科AA16380006）

易芬遠(yuǎn)（1988-），女，廣西合浦人，碩士，工程師，E-mail：1150756003@qq.com。

柯敏（1977-），女，廣東廉江人，高級(jí)工程師，主要從事農(nóng)藥產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)研究，E-mail：Velaney.k@163.com

2017-07-17