廖康瓊

摘 要：隨著畜牧產(chǎn)業(yè)的規(guī)?；?、集約化程度地提高，為促進動物疫病控制，縣級獸醫(yī)實驗室監(jiān)測能力逐步得到提升，現(xiàn)不僅能開展凝集試驗、酶聯(lián)免疫吸附實驗、試管凝集實驗等血清學檢測，隨著分子生物學實驗室的建立，可以開展聚合酶鏈式反應進行病原學檢測。因為監(jiān)測任務的加大，各養(yǎng)殖場（戶）及基層獸醫(yī)人員在采樣送樣中因技術(shù)水平、思想認識等方面的原因，存在不少問題，影響檢測效果和疫病診斷，筆者根據(jù)多年來在獸醫(yī)實驗室工作的經(jīng)驗，針對當前動物疫病監(jiān)測采樣中存在的一些問題并提出相應注意事項，以便保證采樣質(zhì)量，促進動物疫病診斷工作。

關(guān)鍵詞： 動物疫??；監(jiān)測采樣；問題；注意事項

中圖分類號：S852.4 文獻標識碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20170932107

1 采集樣品中存在的問題

1.1 采集血樣中存在的問題

溶血，是實驗室收取血樣中最常出現(xiàn)的問題，是因放置不穩(wěn)、倒置或送樣中受到劇烈震蕩、采血管受污染等原因所致；腐敗變質(zhì)，因未冷藏保存、未及時送到實驗室引起；血清不析出，在牛、雞血樣品中易出現(xiàn)這種現(xiàn)象；呈膠凍狀，血清分離放置后呈膠凍狀，可能因為采集血液前動物剛剛采食或血液中脂肪含量過高等原因所致；采血量不足3mL甚至更少，分離出的血清量難以進行檢測。

1.2 棉拭子采樣中存在的問題

棉拭子一般采用2mL離心管保存，往往出現(xiàn)離心管中未加保存液、或離心管蓋沒扣緊保存液流失、禽流感、雞新城疫監(jiān)測采樣未按規(guī)定采集咽喉和泄殖腔雙拭子及保存不當?shù)葐栴}。

1.3 組織病料采集中常存在的問題

采集的組織病料沒有代表性、病畜禽死亡過久采集的病料不新鮮、采集的病料已受污染、采集的病料體積過大、多個組織病料混在一起等。

1.4 采樣記錄不規(guī)范不完整

采樣前準備不充分，不帶采樣登記表或采樣登記表記錄不規(guī)范、不完整，未按要求進行樣品編號等。

2 樣品采集應注意的事項

2.1 做好采樣前的準備工作

根據(jù)采樣目的，準備好采樣所需的器械、采樣記錄用品、樣品保存液、防護用品等。

2.2 血樣采集應注意的事項

2.2.1 注意采血目的和用途

用于制備血清時，一般使用一次性不加抗凝劑的真空采血管，雞血不好分離血清可采用加枸緣酸鈉的采血管；用于制備血漿時，應使用加抗凝劑的采血管，采血后，來回搖動幾次，以便使抗凝劑和血液充分混合。

2.2.2 掌握好采血時間和免疫間隔時間

用于免疫抗體檢測的血樣采集應注意各種疫苗免疫后抗體產(chǎn)生的時間，如高致病性禽流感、雞新城疫、口蹄疫、豬瘟、小反芻獸疫等一般在免疫21d采血，高致病性豬藍耳病在免疫28d后采血。采血前應提前通知養(yǎng)殖場（戶）主，血液樣品采集前動物一般禁食8h。

2.2.3 注意采集血樣的方法

不同種類的動物采血方法不同。雞采用心臟或翼下靜脈采血；鴨一般采用跖內(nèi)側(cè)靜脈采血；牛、羊一般采用頸靜脈采血，奶牛、奶山羊可采用乳房靜脈采血；豬一般采用耳靜脈或前腔靜脈采血。

2.2.4 注意樣品的標記和采樣記錄的規(guī)范性

采血結(jié)束后，應立即在采血管上做好標記，在采樣登記表上標明樣品順序號、采血管編號、畜禽標識號，必須一一對應。采樣登記表上的其他內(nèi)容也必須填寫完整、規(guī)范，送樣前采樣登記表要復印1份自行留存?zhèn)洳椤?/p>

2.3 采集棉拭子應注意的事項

高致病性禽流感、雞新城疫、H7N9流感等監(jiān)測采樣應采集咽喉和泄殖腔雙拭子，取無菌棉簽，插入雞喉頭內(nèi)或泄殖腔轉(zhuǎn)動3圈取出，插入離心管中剪去露出部分，蓋緊瓶蓋，做好標記，密封低溫保存；豬腔拭子、咽拭子、肛拭子采集用滅菌的棉拭子采集鼻腔、咽喉、肛門的分泌物；羊小反芻獸疫應采集口鼻分泌物拭子。拭子應密封低溫保存，其常用的保存液為含抗生素的PBS液或30%甘油鹽水緩沖液。

2.4 采集組織病料應注意的事項

懷疑炭疽病的動物嚴禁剖檢；采樣時應從胸腔到腹腔，先采實質(zhì)臟器后采腔腸器官，盡量做到無菌；采取的病料必須有代表性，采取的臟器組織應為病變明顯部位；病料最好在使用治療藥物前采取，死亡動物的內(nèi)臟病料采取，最遲不超過死后6h，否則尸體腐敗，難以采到合格的病料。

2.5 樣品的保存及送樣應注意的事項

血液樣品如不能現(xiàn)場分離血清，應冷藏保存，必須在48h內(nèi)用冷藏箱送往實驗室，血清低溫保存；棉拭子、組織病料采集后應迅速用冷藏箱送往實驗室檢測，如不能立即檢測，應低溫保存。

參考文獻

[1]喬麗.淺談獸醫(yī)實驗室工作幾點注意事項[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘，2016（12）.endprint