陳哲杰，李文，王麗娟，傅超美，李杰，呂雨蒙

·炮制制劑·

三黃瀉心湯合煎液與分煎液的湯液相態(tài)差異研究

陳哲杰，李文*，王麗娟，傅超美*，李杰，呂雨蒙

目的：對(duì)比分析三黃瀉心湯合煎液與分煎液的湯液相態(tài)之間的湯液相態(tài)差異。方法：采用電導(dǎo)率儀、旋轉(zhuǎn)黏度計(jì)、表面張力測(cè)定儀、pH計(jì)，分別測(cè)定20，40，60 ℃時(shí)三黃瀉心湯分煎液與合煎液的理化指標(biāo)，并運(yùn)用激光粒度儀測(cè)定分煎液與合煎液中微粒粒徑，進(jìn)而分析三黃瀉心湯不同煎煮方法對(duì)湯液相態(tài)的影響。結(jié)果：三黃瀉心湯分煎液與合煎液的理化參數(shù)確有較為明顯差異，提示在三黃瀉心湯制備過(guò)程中由于受到溫度的影響，采用復(fù)方合煎與單煎合并的湯液其有效成分分子之間的反應(yīng)、結(jié)合程度存在差異。結(jié)論：證實(shí)不同煎煮方法對(duì)三黃瀉心湯湯液相態(tài)確實(shí)能造成較大影響，為研究三黃瀉心湯不同煎煮方法對(duì)其代謝途徑、臨床療效的影響奠定了研究基礎(chǔ)。

三黃瀉心湯；制備方法；湯液相態(tài)；理化性質(zhì)

復(fù)方合煎是中醫(yī)用藥遣方之精髓，中藥在復(fù)方合煎過(guò)程中有效物質(zhì)從藥材中釋放出來(lái)，并以水為媒介發(fā)生復(fù)雜的理化反應(yīng)，使湯液形成含大量有效成分的復(fù)雜“混相體系”[1]，加大了中藥復(fù)方制劑質(zhì)量控制難度。中醫(yī)認(rèn)為萬(wàn)事萬(wàn)物“有諸于內(nèi)必形于外”，基于此觀念，近年來(lái)有研究人員提出采用理化特征指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)中藥復(fù)方制劑質(zhì)量的新方法，試圖建立中藥復(fù)方湯劑宏觀理化參數(shù)與微觀物質(zhì)基礎(chǔ)的聯(lián)系，此中藥復(fù)方研究思路契合了中醫(yī)“思外揣內(nèi)”的思維特點(diǎn)，為中藥復(fù)方的物質(zhì)基礎(chǔ)研究與現(xiàn)代中藥的質(zhì)量控制提供了新思路。已有研究證實(shí)中藥復(fù)方湯劑的理化性質(zhì)變化與其藥效存在密切關(guān)系[2]，故中藥復(fù)方的研究不應(yīng)死守“唯成分論”，更應(yīng)重視中藥復(fù)方湯液的理化性質(zhì)研究，從而更加全面的把握中藥復(fù)方湯劑的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。

三黃瀉心湯的現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，大黃、黃芩、黃連三藥復(fù)方合煎過(guò)程中有效成分之間發(fā)生復(fù)雜理化反應(yīng)會(huì)產(chǎn)生大量絮狀物沉淀[3]，此乃三黃瀉心湯明顯的制劑特征,然而有研究認(rèn)為合煎過(guò)程中產(chǎn)生的大量沉淀在制劑生產(chǎn)中易被當(dāng)做雜質(zhì)去除，故在三黃瀉心湯的現(xiàn)代開發(fā)過(guò)程中，放棄了復(fù)方合煎制法，改用藥材單煎提取，避免沉淀物產(chǎn)生。然而提取方法不同必定導(dǎo)致物質(zhì)基礎(chǔ)各異[4]，從而影響三黃瀉心湯現(xiàn)代開發(fā)制劑的安全性與有效性。目前對(duì)三黃瀉心湯合煎液與分煎液的差異研究主要集中于成分差異研究[5～8]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)三黃瀉心湯合煎液與分煎液理化性質(zhì)差異研究，為三黃瀉心湯合煎液與分煎液在吸收代謝與藥效差異的一進(jìn)步研究提供參考。

1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器

1.1 試驗(yàn)試藥

大黃（批號(hào)：G00216P01）、黃芩（批號(hào)：G03816L01）、黃連（批號(hào)：G03616P01）均購(gòu)自四川中庸藥業(yè)有限公司，經(jīng)鑒定藥材的各項(xiàng)指標(biāo)均符合《中華人民共和國(guó)藥典》2015版規(guī)定項(xiàng)下要求，其余試劑均為分析純。

1.2 試驗(yàn)儀器

STARTER 3100C型電導(dǎo)率儀（美國(guó)Ohaus儀器（上海）有限公司）；DV-C型旋轉(zhuǎn)黏度計(jì)（美國(guó)Brookfield公司）；DCAT21型表面/界面張力測(cè)量?jī)x（德國(guó)Dataphysics公司）；Zetasizer Nano ZS型激光粒度儀（英國(guó)Malvern公司）；FE20型實(shí)驗(yàn)室pH計(jì)（梅特勒-托利多（上海）有限公司）。

2 試驗(yàn)方法

2.1 理化參數(shù)指標(biāo)選擇

三黃瀉心湯處方所含藥材配伍以后，無(wú)論復(fù)方合煎還是分煎合并都會(huì)產(chǎn)生大量絮狀物沉淀，湯液包括真溶液、膠體溶液、混懸液、乳濁液等[3]。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道顯示絮狀物的產(chǎn)生與三黃瀉心湯處方藥材中含有的酸性與堿性有效成分之間的反應(yīng)關(guān)系密切，在此基礎(chǔ)上，依據(jù)相律理論，本實(shí)驗(yàn)借助界面化學(xué)和物理化學(xué)手段，從電學(xué)、流變學(xué)、光學(xué)、表面力學(xué)等角度表征三黃瀉心湯合煎液與分煎液的相態(tài)。選擇電導(dǎo)率、鹽度、TDS、黏度、表面張力、pH值作為理化指標(biāo)，考察分煎與合煎三黃瀉心湯的理化參數(shù)差異。

2.2 樣品溶液的制備

2.2.1 藥材單煎液的制備 分別取大黃30 g，黃芩、黃連各15 g，分別置于不同容器中，大黃加入300 mL純水，黃芩、黃連各加入純水150 mL，先浸泡30 min，而后大火加熱至沸騰，轉(zhuǎn)至小火保持微沸30 min，過(guò)濾，即得三味藥材的單煎液。

2.2.2 三黃瀉心湯分煎液的制備 分別取大黃30 g，黃芩、黃連各15 g，分別置于不同圓底燒瓶中，大黃加入300 mL純水，黃芩、黃連各加入純水150 mL，先浸泡30 min，而后大火加熱至沸騰，轉(zhuǎn)至小火保持微沸30 min，過(guò)濾，得三味藥材的單煎液，待冷卻至室溫后合并三味藥的單煎液即得分煎液。

2.2.3 三黃瀉心湯合煎液的制備 分別取大黃30 g，黃芩、黃連各15 g，共置于一個(gè)容器中，加入600 mL純水，先浸泡30 min，而后大火加熱至沸騰，轉(zhuǎn)至小火保持微沸30 min， 過(guò)濾，即得三黃瀉心湯合煎液。

2.3 湯液理化指標(biāo)測(cè)定

在選定的具體理化指數(shù)考察指標(biāo)的基礎(chǔ)上，考慮到溫度對(duì)三黃瀉心湯湯液理化參數(shù)的影響，設(shè)立20、40、60 ℃低、中、高三個(gè)溫度梯度對(duì)三黃瀉心的湯液相態(tài)進(jìn)行更加詳細(xì)的測(cè)定（見(jiàn)表1）。

表1 三黃瀉心湯合煎液與分煎液理化指標(biāo)的檢測(cè)方法

2.4 湯液微粒粒徑的測(cè)定

取各個(gè)樣品適量，在12000 r．min-1的轉(zhuǎn)速下離心3 min，取上層清液，因三黃瀉心湯及類方有溫服要求[9]，故在40 ℃條件下將離心所得的上層清液恒溫水浴20 min，每個(gè)樣品取20 mL用馬爾文激光粒度儀測(cè)定各個(gè)樣品溶液中的微粒粒徑分布。

3 試驗(yàn)結(jié)果

3.1 三黃瀉心湯合煎液與分煎液的理化性質(zhì)差異

從本實(shí)驗(yàn)測(cè)得的數(shù)據(jù)（見(jiàn)表2）來(lái)看，溫度對(duì)各湯液的導(dǎo)電率、鹽度、TDS測(cè)定結(jié)果均有不同程度的影響，且影響較為明顯，隨著溫度的升高各湯液的導(dǎo)電率、鹽度、TDS值升高，但黃連單煎液除外，其導(dǎo)電率、鹽度、TDS值隨著溫度升高而降低。此外，三黃瀉心湯分煎液與合煎液的電率、鹽度、TDS值明顯高于其他藥材單煎液，且合煎液比分煎液所測(cè)得的數(shù)值更高。

就黏度與表面張力而言，三黃瀉心湯分煎液與合煎液的黏度與表面張力與各藥材單煎液差異不大，各湯液隨著溫度的升高兩個(gè)參數(shù)均出現(xiàn)不同程度的降低，三黃瀉心湯分煎液的降低程度明顯大于三黃瀉心湯合煎液。

在pH值方面，各湯液的pH值處于4.52～5.68之間，均呈弱酸性。其中三黃瀉心湯分煎液pH要稍低于三黃瀉心湯合煎液，這可能與不同煎煮方法導(dǎo)致兩種湯液的有效成分反的程度不同相關(guān)。

表2 三黃瀉心湯合煎液與分煎液湯液理化性質(zhì)測(cè)定

3.2 三黃瀉心湯合煎液與分煎液湯液微粒粒徑差異

本實(shí)驗(yàn)采用激光衍射的原理，運(yùn)用馬爾文激光粒度儀測(cè)定了不同湯液中微粒的平均粒徑（見(jiàn)表3），測(cè)定結(jié)果的“PdI”“intercept”數(shù)值均在理想范圍內(nèi)，“result quality”均顯示“good”。相關(guān)粒徑數(shù)據(jù)顯示，各湯液中微粒的平均粒徑均存在差異，其中以大黃單煎液中微粒的平均粒徑最大，黃芩與黃連單煎液中微粒的平均粒徑相差較小，而三黃瀉心湯分煎液中微粒的平均粒徑則明顯大于三黃瀉心湯合煎液。

表3 三黃瀉湯分煎液與合煎液湯液微粒粒徑測(cè)定

4 總結(jié)與討論

4.1 三黃瀉心湯不同煎煮方法與其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的關(guān)系

三黃瀉心湯處方由大黃、黃芩、黃連組成，已有研究表明三黃瀉心湯藥材復(fù)方合煎以后會(huì)產(chǎn)生大量的絮狀物沉淀。深入研究顯示絮狀物可分為兩類，一類由大黃中的鞣質(zhì)類物質(zhì)與蒽醌類物質(zhì)和黃連中的生物堿生成，另一類由黃連中的原小檗堿型生物堿與黃芩中的多酚類化合物相結(jié)合生成[10,11]。中藥復(fù)方湯劑有關(guān)的研究認(rèn)為，中藥復(fù)方合煎過(guò)程中受溫度的影響，有效物質(zhì)之間會(huì)產(chǎn)生復(fù)雜的理化反應(yīng)。三黃瀉心湯分煎液因?yàn)槿鄙購(gòu)?fù)方合煎過(guò)程，其物質(zhì)基礎(chǔ)與三黃瀉心湯合煎液之間必定存在差異，其宏觀可表現(xiàn)為湯液相態(tài)之間的差異。

本實(shí)驗(yàn)研究的數(shù)據(jù)表明，三黃瀉心湯處方藥材通過(guò)復(fù)方合煎后，其湯液的理化性質(zhì)與缺乏合煎過(guò)程的三黃瀉心湯分煎液確實(shí)存在明顯差異。三黃瀉心湯處方藥材復(fù)方合煎前后電導(dǎo)率、鹽度、TDS、黏度、表面張力均有明顯變化，分煎液與合煎液的pH值差異說(shuō)明三黃瀉心湯中所含酸性有效成分與堿性有效成分的反應(yīng)程度存在差異，并且經(jīng)過(guò)復(fù)方合煎以后合煎液中微粒平均粒徑小于分煎液中微粒的粒徑。據(jù)此推測(cè)，三黃瀉心湯復(fù)方合煎過(guò)程中由于溫度的影響，藥效物質(zhì)分子之間的相互反應(yīng)更充分，形成了粒徑較小、較為穩(wěn)定的沉淀分子結(jié)構(gòu)，而缺乏復(fù)方合煎的三黃瀉心湯分煎液，由于分子相互接觸不完全，藥效物質(zhì)分子之間形成了粒徑較大、較松散的沉淀結(jié)構(gòu)。有研究認(rèn)為中藥復(fù)方合煎產(chǎn)生的沉淀有“體外存積，體內(nèi)緩釋”以達(dá)減毒的作用[12]。因此推測(cè)三黃瀉心湯復(fù)方合煎形成粒徑較小、較為穩(wěn)定的沉淀分子結(jié)構(gòu)，起到降低藥物毒副作用，提高藥物臨床用藥安全性[3]的作用。

4.2 三黃瀉心湯不同煎煮方法與其藥效成分吸收的關(guān)系

三黃瀉心湯主要通過(guò)口服給藥，腸道是湯劑所含有效成分的主要吸收器官[12]。本研究中三黃瀉心湯合煎液與三黃瀉心湯分煎液的電導(dǎo)率、鹽度、TDS、黏度、表面張力、pH值均存在差別，而電導(dǎo)率、鹽度、TDS是衡量溶液中離子與可溶物多少的重要指標(biāo)，能直接影響藥物在胃腸道的吸收，也有研究證明黏度與表面張力對(duì)中藥湯劑在胃腸的吸收也起到了一定影響，而湯劑的pH值則通過(guò)影響胃腸道酸堿環(huán)境，從而影響藥物的吸收。本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示三黃瀉心湯合煎液中微粒的平均粒徑小于三黃瀉心湯分煎液中微粒的平均粒徑，結(jié)合其他理化參數(shù)，推測(cè)三黃瀉心湯合煎液中的有效成分在胃腸中應(yīng)具有不同的吸收行為。

三黃瀉心湯是主要用作口服給藥的傳統(tǒng)復(fù)方湯劑，其合煎液與分煎的湯液理化參數(shù)差異提示，三黃瀉心湯處方中所含藥材是否經(jīng)過(guò)復(fù)方合煎制劑過(guò)程對(duì)藥物在胃腸道的吸收行為會(huì)產(chǎn)生十分重要的影響，從而進(jìn)一步影響藥物的有效性與安全性，三黃瀉心湯復(fù)方合煎過(guò)程不容忽視。

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(責(zé)任編輯：何瑤)

Research on the different liquid phase of mixed medicine decoction and respective decoction of Sanhuang Xiexin Decoction/

CHEN Zhe-jie, LI Wen, WANG Li-juan , FU Chao-mei, Li Jie, LV Yu-meng //( School of Pharmacy, ChengduUniversity of Traditional Chinese Medicine, Chengdu, 611137)

Objective: To compare the difference of the liquid phase of mixed medicine decoction and respective decoction of Sanhuang Xiexin Decoction.Method:Conductivity meter, rotary viscometer, surface tension tester and pH tester were used to measure the physicochemical indexes of mixed medicine decoction and respective decoction of Sanhuang Xiexin Decoction at 20,40,60℃. The particle sizes of different decoctions were measured by laser particle size analyzer to analyze the effect of different decoction methods on liquid phase of Sanhuang Xiexin Decoction.Result:Signi fi cant differences were found in the physicochemical parameters of mixed medicine decoction and respective decoction of Sanhuang Xiexin Decoction. The results suggested that active ingredients of mixed medicine decoction and respective decoction of Sanhuang Xiexin Decoction had different levels of combination and reaction, due to the impact of temperature on the molecules reaction and integration degree of active ingredionts during the decoction process.Conclusion:It is proved that the different decoction methods of Sanhuang Xiexin decoction have great impact on its liquid phase. This research has set up a foundation for the research on the differences of metabolic pathways and the clinical effect caused by Sanhuang Xiexin Decoction’s different liquid phase.

Sanhuang Xiexin Decoction; preparation methods; liquid phase; physicochemical properties

R 283

] A

1674-926X(2017)02-09-03

成都中醫(yī)藥大學(xué)?；痦?xiàng)目：ZRQN1648；ZRYY1609

成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，成都 611137

陳哲杰（1991-），男，在讀碩士，從事中藥新制劑和新劑型。Emial:zhejiechen@126.com

李文（1982-），女，講師，在讀博士，從事中藥新制劑和新劑型，Emial:wander1210@sina.cn傅超美（1961-），男，教授，博士生導(dǎo)師，從事中藥新制劑和新劑型。Email: chaomeifu@126.com

2016-12-22