賈順蓮，劉誼蓉，金 磊，汪曉玲

(西寧市第一人民醫(yī)院，青海 西寧 810000)

西寧地區(qū)成人紫癜性腎炎患者血漿及尿液ET-1水平及臨床意義※

賈順蓮，劉誼蓉，金 磊，汪曉玲

(西寧市第一人民醫(yī)院，青海 西寧 810000)

目的觀察西寧及西安地區(qū)成人紫癜性腎炎血漿、尿液內(nèi)皮素-1水平變化特征，分析其在判定西寧患者腎臟受損程度相關(guān)指數(shù)域。方法選擇西安地區(qū)和西寧地區(qū)單純性紫癜性腎炎患者各30例，健康人群各30例，共120例，分為西安地區(qū)腎臟損害組(18例)和無腎臟損害組(12例)、西寧地區(qū)腎臟損害組(19例)和無腎臟損害組(11例)作研究組，兩地區(qū)健康人群組作健康對照組。采用 ELISA方法測定血漿及尿液內(nèi)皮素 - 1含量，并行組間差別分析。常規(guī)檢測24小時尿蛋白定量，設(shè)定為亞組進行相關(guān)性分析。采用SPSS 22.0軟件行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果1. 西寧地區(qū)紫癜性腎損害組、無腎損害組血漿、尿液內(nèi)皮素-1與于西安地區(qū)相比較，結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05 )。2.西寧地區(qū)紫癜性腎損害組的血漿內(nèi)皮素-1水平與無腎損害組相比較，結(jié)果無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05 )。3.西寧地區(qū)紫癜性腎損害組的尿液內(nèi)皮素-1水平高于無腎損害組，但結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05 )。進一步分析西寧地區(qū)紫癜性腎損害組中不同程度尿蛋白定量水平尿液內(nèi)皮素-1的變化，結(jié)果顯示：1.尿蛋白定量>1.0 g/24 h時尿液內(nèi)皮素-1表達(dá)明顯高于尿蛋白定量0.15 g～1.0 g/24 h和尿蛋白定量<0.15 g/24 h 時，存在統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；尿蛋白定量0.15 g～1.0 g/24 h 組尿液內(nèi)皮素-1水平高于尿蛋白定量<0.15 g/24 h組，存在統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05 )。2.經(jīng)Pearson相關(guān)性分析顯示，紫癜性腎損害組患者尿液內(nèi)皮素-1水平與24 h尿蛋白定量呈正相關(guān)(r=0.597，P<0.007 )。結(jié)論高海拔地區(qū)紫癜性腎損害組患者血漿、尿液內(nèi)皮素-1水平的變化具有地域性特點，要視具體情況判斷不同程度紫癜性腎炎的腎臟受損情況。

成人 過敏性紫癜性腎炎 蛋白尿 血 尿 內(nèi)皮素-1

過敏性紫癜性腎炎(Henoch-schonlein’s purpura nephritis，HSPN )是過敏性紫癜(Henoch-schonlein’s purpura，HSP)最常見的一個合并癥。有報道認(rèn)為HSPN病理特點主要為系膜細(xì)胞增生伴上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞增生[1]，內(nèi)皮素-1(enaothelin -1，ET-1)可能介入了HSPN腎臟損傷進程，不同水平的ET-1在HSP患兒腎臟組織的表達(dá)均不同，高ET-1水平時在腎臟組織中的表達(dá)也會增高。近年來關(guān)于ET-1與HSPN之間關(guān)系的研究越來越多，但多見于對兒童患者的研究[2-4]。之前也有研究報道ET-1的代謝在高原地區(qū)缺氧環(huán)境下會受到較大影響，存在地域性特點。本研究選擇典型的高海拔地區(qū)[西寧，海拔2260m，大氣壓為78.0 kPa(580mmHg)，大氣氧分壓為16.4kPa)]病例，對西寧地區(qū)成人HSPN患者血漿、尿液ET-1的表達(dá)水平，及尿ET -1水平與尿蛋白的相關(guān)性及臨床意義開展研究，分析其在判定西寧患者腎臟受損程度相關(guān)指數(shù)域。

1 對象與方法

1.1 研究對象

隨機收集2014年9月至2016年1月西安地區(qū)(第四軍醫(yī)大學(xué)附屬西京醫(yī)院)初發(fā)成人HSPN患者及健康病例各30例，西寧地區(qū)(西寧市第一人民醫(yī)院)各30例，兩地區(qū)共120例。兩地區(qū)健康對照組分別為30例、HSP組分別為30例。HSP組分為西安地區(qū)腎臟損害組(18例)和無腎臟損害組(12例)、西寧地區(qū)腎臟損害組(19例)和無腎臟損害組(11例)作研究組，兩地區(qū)健康人群組作為健康對照組。西寧地區(qū)HSP組平均年齡31.67±16.31歲，對照組平均年齡32.17±10.08；西安地區(qū)HSP組平均年齡32.27±10.16 歲，對照組平均年齡35.7±6.82，組間相比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 研究方法

留取被研究者清晨空腹血液標(biāo)本5 mL注入生化管內(nèi)，尿液標(biāo)本10 mL注入無菌中段尿管中，離心(2000r/min)15 min后將血漿及尿上清液注入離心管內(nèi)，保存于-80 ℃冰箱，統(tǒng)一送檢。血漿、尿液ET-1采用固相免疫法檢測并記錄，試劑盒由武漢華美公司生產(chǎn)。比濁法常規(guī)檢測24小時尿蛋白定量。

2 結(jié)果

2.1 尿液、血漿 ET-1水平測定結(jié)果

兩地區(qū)無腎損害HSP組、HSPN組、健康對照組成人尿液ET-1水平測定結(jié)果見表1。兩地區(qū)無腎損害HSP組、HSPN組尿液ET-1水平與該地區(qū)健康對照組尿ET-1水平相比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05 )。兩地區(qū)HSPN組尿液ET-1水平相比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05 )。兩地區(qū)無腎損害HSP組尿液ET-1水平相比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05 )。兩地區(qū)無腎損害HSP組、HSPN組、健康對照組成人血漿ET-1水平測定結(jié)果見表1。兩地區(qū)無腎損害HSP組、HSPN組血漿ET-1水平與該地區(qū)健康對照組血漿ET-1水平相比較，差異有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05 )。兩地區(qū)HSPN組血漿ET-1水平相比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05 )。兩地區(qū)無腎損害HSP組相比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05 )。

Table 1 ET-1 levels of adult Plasma and urine in both HSPN group，HSP without renal damage group and healthy control group in the two regions(±s)

☆：與西安健康組比較P<0.05；◆：與西安無腎損害HSP組比較P<0.05；△：與西寧健康組比較P<0.05；▼：與西安HSPN組比較P<0.05.

2.2 西寧地區(qū)HSPN組24小時尿蛋白定量與尿液ET-1變化水平

進一步設(shè)定亞組分析兩地區(qū)HSPN組中24小時尿蛋白定量與尿液ET-1水平變化的相關(guān)性，腎損害程度根據(jù)患者24小時尿蛋白定量的不同分成三組：24小時尿蛋白定量<0.15 g組(Ⅰ組)，共4例；24小時尿蛋白定量0.15～1.00 g組(Ⅱ組)，共8例；24小時尿蛋白定量 >1.0 g組(Ⅲ組 )，共7例。分析三組尿液ET-1之間是否存在統(tǒng)計學(xué)差異，結(jié)果發(fā)現(xiàn)高的尿液ET-1含量時24小時尿蛋白定量也會增多，各組也隨之升高，各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05 )，見表2。

Table 2 The changes of the quantitative level for 24 h urinary protein and the level of urinary

※：與II組比較P<0.05；▲：與I組比較P<0.05.

2.3 相關(guān)性分析結(jié)果

Pearson相關(guān)性分析見圖1。西寧地區(qū)HSPN組尿液ET-1與24小時尿蛋白定量呈正性相關(guān)(r=0.597，P<0.01 )。

圖1HSPN組尿液ET- 1與24小時尿蛋白定量相關(guān)性圖

Figure1Therelativityofthequantitativelevelfor24hurinaryproteinandthelevelofurinaryET-1inHSPNgroup

3 討論

HSP是一種白細(xì)胞碎屑血管炎，并以IgA介導(dǎo)損傷為特征。腎臟受損程度是疾病預(yù)后預(yù)測的一個重要指標(biāo)，但是對于慢性腎臟疾病預(yù)測率在兒童中要低于成人[5，6]。HSP其發(fā)病率為8%～22%，可以發(fā)生在任何年齡段，HSPN發(fā)病率高達(dá)87.9%以上，在年齡較大兒童與成人較為普遍[7-9]。有關(guān)研究提示[10-13]，HSP腎臟受損的兒童大多在10歲以上，最常見的臨床表現(xiàn)為血尿伴或不伴不同程度的蛋白尿，血肌酐、蛋白尿和高血壓為腎臟受損的危險因素。HSPN基本病理變化為系膜細(xì)胞、上皮細(xì)胞的增生、新月體的形成以及腎小球系膜區(qū)免疫復(fù)合物IgA1的沉積[1，4，14]。發(fā)病與血管內(nèi)皮細(xì)胞(endothelial cells，EC)的受損，免疫復(fù)合物、活化的補體沉積有關(guān)，當(dāng)腎小球基底膜受損不能夠盡快被修復(fù)，長期存在持續(xù)性蛋白尿及血尿，促使腎微血管病變。

HSP屬于血管壁變態(tài)炎癥反應(yīng)病變，發(fā)生內(nèi)皮功能紊亂，釋放內(nèi)源性血管收縮調(diào)節(jié)因子ET-1。ET-1是由21個氨基酸殘基構(gòu)成的血管活性多肽，介入人類各種疾病的發(fā)展過程。現(xiàn)已證明，ET-1主要見于血管內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞以及系膜細(xì)胞，腎臟不僅是ET-1的靶器官，也是其產(chǎn)生和分泌的一個場所。腎臟相對于其他器官對ET-1縮血管效應(yīng)更敏感，這大概與 ET-1受體集中會合在腎臟阻抗性血管的血管平滑肌上有關(guān)。同時，ET-1在保持腎小球濾過，水、電解質(zhì)紊亂過程當(dāng)中占有非常重要的地位。病理情況下ET-1因縮血管效應(yīng)導(dǎo)致球后毛細(xì)血管收縮，發(fā)生小管間質(zhì)缺血缺氧，導(dǎo)致低氧損害。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)合成的ET-1可以促使系膜細(xì)胞增生。也有研究顯示ET-1介入了HSPN患兒腎受損的全部進程。

本研究發(fā)現(xiàn)西安和西寧兩地區(qū)HSPN組與無腎臟損害HSP組患者血漿及尿液ET-1水平明顯高于健康對照組，而兩地區(qū)HSPN組、HSP組分別相比較結(jié)果均有統(tǒng)計學(xué)差異，這說明ET-1在HSP的疾病發(fā)展過程中起到重要的作用，這與國內(nèi)外的報道相一致。同時也提示西寧地處高海拔缺氧地區(qū)，缺氧情況下血漿及尿液ET-1表達(dá)顯著增高的原因可能是：1.高海拔地區(qū)缺氧后二氧化碳分壓增多，組織缺氧，促紅細(xì)胞生成增加，血液黏滯度升高，血流動力學(xué)改變，血流速減慢，發(fā)生微循環(huán)毛細(xì)血管血流停滯。2.組織缺氧后血液中一些衍生物、血栓素轉(zhuǎn)化生長因子B等損害物質(zhì)過多。3.高海拔地區(qū)缺氧時，肺泡表面活性物質(zhì)減少，使內(nèi)皮素首次通過肺時滅活減少引起ET-1 水平升高，缺氧可促進血管EC產(chǎn)生氧自由基，影響EC的增殖和修復(fù)。上述這些因素均可以導(dǎo)致ET-1 合成及分泌異常。本研究通過對不同海拔地域HSP、HSPN及健康對照組血、尿ET-1數(shù)據(jù)的觀察分析，得出結(jié)果為西寧高海拔缺氧地區(qū)可能對ET-1的代謝水平有一定影響，具有地域特點。

蛋白尿是慢性腎臟疾病進展的主要獨立危險因素，其定量的多少也是HSPN病情程度及預(yù)后的參考指標(biāo)[11-13]。越來越多的證據(jù)表明蛋白尿不僅是腎臟損害的標(biāo)志，而且是腎臟進展及預(yù)后至關(guān)重要的因素，比如HSPN腎病范圍的蛋白尿往往提示預(yù)后不良。以往研究結(jié)果顯示，HSPN關(guān)于兒童尿液ET-1水平與尿蛋白定量呈線性正相關(guān)的關(guān)系。也有報道糖尿病腎病患者尿液ET-1含量與24小時尿蛋白尿定量水平相一致，這也可以說明尿液ET-1的表達(dá)與蛋白尿定量、腎臟受損程度緊密相關(guān)。

同樣我們的研究結(jié)果也顯示HSPN組尿液ET-1水平與24小時尿蛋白定量的多少呈顯著正相關(guān)關(guān)系，說明在高海拔地區(qū)HSPN成人ET-1水平的升高可能與腎臟損害程度密切相關(guān)。尿液ET-1水平升高也提示腎臟組織局部表達(dá)ET-1水平增高，這可能與HSPN初發(fā)未治療時的血清炎性物質(zhì)增多，腎臟上皮細(xì)胞受損，促進ET-1的分泌和釋放增多，腎血管收縮阻力增加，導(dǎo)致小球濾過濾降低并抑制腎小管對蛋白的重吸收有關(guān)。因此在評估HSPN方面通過檢測尿液ET-1水平的含量可能會反應(yīng)HSPN腎臟損害的程度及預(yù)后，可作為簡便無創(chuàng)檢測HSPN腎臟損害程度的生物學(xué)指標(biāo)。

我們目前的研究存在樣本量小、單中心的研究問題，仍然需要大樣本、多中心的數(shù)據(jù)來證實本研究結(jié)果，進一步評估尿液ET-1在HSPN診斷中作為生物標(biāo)記物的敏感性和特異性。

[1]Fu H，Mao J，Xu Y，et al.Clinical features and outcomes of diffuse endocapillary proliferation Henoch-Sch nlein purpura nephritis in children[J].Clinics(Sao Paulo)，2016，71(9)：550-4.

[2]楊華彬，何小解，易著文， 等.過敏性紫癜性腎炎患兒血中VEGF、ET-1變化及臨床意義[J].臨床兒科雜志，2005，23(11)：790-2.

[3]曾華松，熊小燕，陳耀勇，等.兒童過敏性紫癜性腎炎血管內(nèi)皮生長因子基因多態(tài)性的研究(英文)[J].中國當(dāng)代兒科雜志，2009，11(6)：417-421.

[4]Liu LJ，Yu J，Li YN.[Clinical characteristics of Henoch-Sch nlein purpura in children][J].Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi，2015，17(10)：1079-83.

[5]Rostoker G.Sch nlein-henoch purpura in children and adults：diagnosis，pathophysiology and management[J].BioDrugs，2001，15(2)：99-138.

[6]Feng D，Huang WY，Hao S，et al.A single-center analysis of Henoch-Schonlein purpura nephritis with nephrotic proteinuria in children[J].Pediatr Rheumatol Online J，2017，15(1)：15.

[7]Fillastre JP，Morel-Maroger L，Richet G. Sch nlein-Henoch purpura in adults[J].Lancet，1971，1(11)：1243-4.

[8]Lee HS，Koh HI，Kim MJ，et al.Henoch-Schoenlein nephritis in adults：a clinical and morphological study[J].Clin Nephrol，1986，26(3)：125-30.

[9]Lee YH，Kim YB，Koo JW，et al.Henoch-Schonlein Purpura in Children Hospitalized at a Tertiary Hospital during 2004-2015 in Korea：Epidemiology and Clinical Management[J].Pediatr Gastroenterol Hepatol Nutr，2016，19(3)：175-185.

[10]Jafar TH，Stark PC，Schmid CH，et al.Progression of chronic kidney disease：the role of blood pressure control，proteinuria，and angiotensin-converting enzyme inhibition：a patient-level meta-analysis[J].Ann Intern Med，2003，139(4)：244-52.

[11]Jafar TH，Stark PC，Schmid CH，et al.Proteinuria as a modifiable risk factor for the progression of non-diabetic renal disease[J].Kidney Int，2001，60(3)：1131-40.

[12]Shuiai Z，Huijun S，Weizhong G，et al.Evaluation of TGF-β1 and MCP-1 expression and tubulointerstitial fibrosis in children with Henoch-Sch nlein purpura nephritis and IgA nephropathy：A clinical correlation[J].Clinics(Sao Paulo)，2017，72(2)：95-102.

[13]Müller D，Greve D，Eggert P.Early tubular proteinuria and the development of nephritis in Henoch-Sch nlein purpura[J].Pediatr Nephrol，2000，15(1-2)：85-9.

[14]Lu S，Liu D，Xiao J，et al.Correlation Between Clinicaland Pathological Characteristics of Henoch-Sch nlein Purpura Nephritis in Adults[J].Iran J Kidney Dis，2016，11(1)：12-17.

ThelevelandclinicalsignificanceofPlasmaandurineendothelin-1inadultpatientswithHenoch-schonleinpurpurainXiningregion

JIA Shun-lian，LIU Yi-rong，JIN Lei，WANG Xiao-ling

(Xining No.1 people′s hospital，Xining，Qinghai，810000)

ObjectiveIn this study，we observed the change of Plasma and urine endothelin-1(ET-1)in adult patients with Henoch-schonlein purpura nephritis(HSPN)in Xining region，also，we analyzed the relativity of these changes with renal damage.Methods30 cases with HSPN patients and 30 healthy cases in Xining and Xi′an region were collected respectively，total 120 cases.Including 18 cases of HSPN group in Xi′an region and 19 cases of HSPN group in Xining region with renal damage，the other patients in both regions are without renal damage，while healthy people was used as control group in each region.The levels of ET-1 in plasma and urine were detected respectively by double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay(ABC-ELISA)，and further，we analyzed the difference in two group.At the same time，the levels of 24 h urine protein of each patients were routinely detected，and the correlation for ET-1 in urine and urine protein were analyzed.Finally，SPSS 22.0 software was used to analyze all data statistically.Results 1.ET-1 levels of Plasma and urine in both HSPN and HSP without renal damage group were significantly higher than that of the control group in the two regions(P<0.05).2.The difference without statistical significant(P>0.05)in the level of plasma ET-1 of the HSPN group compared with the usp group in the Xining region.3.The difference without statistical significant(P>0.05)in the level of urine ET-1 of the HSPN group compared with the HSP group in the Xining region.Further，we analyzed the changes of the quantitative level for urinary protein and the level of urinary ET-1 in Xining region.The result showed：(1)The levels of urinary ET-1 were the highest in group Ⅲ(urinary protein>1.0g/24h)，secondary were those in group Ⅱ(urinary protein 0.15～1.0g/24h)and then group Ⅰ(urinary protein <0.15g/24h)，the difference between each group was statistically significant(P<0.05).(2)The results of Pearson′ correlation analysis indicated that the urinary ET-1 levels have a strong correlation with the levels 24 h urinary protein in patients of HSPN group(r=0.597，P<0.007).ConclusionThe change of ET-1 level in patients with HSPN possessing regional characteristics at high altitudes.It should make decisions in accordance with specific conditions，and further estimate the situation of renal damage in different degrees of Henoch-schonlein purpura nephritis(HSPN).

Henoch-Schonlein purpura Henoch-Schonlein Purpura nephritis Proteinuria Endothelin-1

R593

A

10.13452/j.cnki.jqmc.2017.03.010

2017-01-09

※：西寧市科技開發(fā)計劃項目(26331766) 賈順蓮(1965～)，女，漢族，青海籍，副主任醫(yī)師