張阿娥 福建省泉州市洛江區(qū)動物疾病預防控制中心 福建泉州 362011
Ⅰ型鴨肝炎病毒變異株感染雛番鴨的臨床癥狀及病理學變化
張阿娥 福建省泉州市洛江區(qū)動物疾病預防控制中心 福建泉州 362011
為研究Ⅰ型鴨肝炎病毒變異株感染雛番鴨的臨床癥狀及病理變化,采用Ⅰ型鴨肝炎病毒變異株(VFY株)感染雛番鴨,觀察感染雛番鴨的臨床癥狀及其死亡時組織病理學變化。結(jié)果表明:Ⅰ型鴨肝炎病毒變異株感染雛鴨24 h時開始死亡,死亡高峰期為48~72 h,死亡率60%;發(fā)病雛番鴨短時間內(nèi)停止運動,蹲伏并半閉眼,打盹,死前抽搐,雙腳做劃水樣,死亡鴨呈角弓反張姿勢。感染雛番鴨肝、腎、脾、胰、腦的組織病理變化分別表現(xiàn)為出血性、壞死性肝炎,腎小管變性及異嗜性白細胞浸潤,壞死性脾炎,胰臟局灶性壞死及異嗜性粒細胞浸潤和神經(jīng)細胞的變性壞死。
鴨肝炎變異株 臨床癥狀 病理學變化
AbstractTo observe the clinical symptoms and pathologic changes,the experiment used the variant of DHV type I to infect 1-dayold young muscovy ducks.The results showed that the ducks started to die from 24 h after infected by the variant of DHV type I.its peak of death was from 48 h to 72 h,and its mortality rate reached 60%.The diseased muscovy ducklings in a short period of time to stop movement,crouch and half closed,nap,convulse before death,paddled spasmodically showing acute opisthotonos for the death ducks.The histopathological changes were orrhagic necrotic hepatitis,renal degeneration and heterophil infiltrating into renal canaliculus,necrotic splenitis,pancreas limitation coagulation necrosis and heterophil infiltrating into pancreas,degenerative necrotic neurocyte,respectively.
Key wordsA variant of DHV type I Clinical symptoms Pathologic changes
鴨肝炎(Duck Hepatitis,DH)是雛鴨的一種急性接觸傳染性疾病,以急性發(fā)病、肝臟病變和高死亡率為特征,可由Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型鴨肝炎病毒(DHV)引起。1992年,Sandhu等[1]發(fā)現(xiàn)一種Ⅰ型鴨肝炎病毒的變異株,將其命名為Ia型DHV。Sandhu提出的Ia型,指Ⅰ型抗血清可部分中和Ia型病毒,但Ia型抗血清對Ⅰ型病毒缺乏中和作用。國內(nèi)林世棠等[2]發(fā)現(xiàn)我國也有Ⅰ型變異株存在,其試驗結(jié)果與Sandhu報道相似:該變異株可使雛鴨從7日齡開始發(fā)病,15~20日齡為發(fā)病高峰,病死率為30%~40%,青年鴨多在15~45日齡發(fā)病,病死率為40%~50%。本試驗以Ⅰ型鴨肝炎病毒變異株感染雛番鴨,觀察其臨床癥狀及組織病理學變化,現(xiàn)報道如下。
1.1 試驗毒株與處理 Ⅰ型鴨肝炎病毒變異株(VFY株),福建農(nóng)林大學動物保健研究所保存。VFY株分離自某番鴨場連續(xù)幾批免疫過Ⅰ型鴨肝炎弱毒疫苗后自然發(fā)病的雛番鴨。經(jīng)交叉中和試驗鑒定:DHVI型抗血清能部分中和VFY株病毒,而VFY株病毒的抗血清對DHVI型弱毒沒有中和作用。按照杜念興[3]介紹的判斷標準,VFY株和DHV I型的相關(guān)系數(shù)分別為35.73%。將VFY株經(jīng)尿囊腔接種于10日齡鴨胚,收集第5代尿囊液,測定VFY株病毒的毒價為10-5.6/0.2 mL。
1.2 試驗動物及分組處理 1日齡雛番鴨20羽,購自莆田溫氏鴨場,分為 2組:PBS組5羽,腿部肌肉注射PBS液,0.2 mL/羽;VFY株組15羽,腿部肌肉注射VFY株病毒尿囊液,0.2 mL/羽。觀察并記錄試驗雛番鴨的臨床表現(xiàn)及死亡數(shù)量。雛鴨死亡后立即剖檢,采取心、肝、腎、脾、胰、腦、腺胃等臟器觀察病變,10%中性福爾馬林溶液固定,制作石蠟切片,HE染色,光鏡下觀察。
2.1 臨床癥狀 感染病毒的雛番鴨主要表現(xiàn)為短時間內(nèi)停止運動,蹲伏并半閉眼,打盹?;鉴喩眢w倒臥,死前抽搐,雙腳做劃水樣,一般在出現(xiàn)癥狀后1 h左右死亡,死亡鴨呈角弓反張姿勢。24 h開始死亡,48~72 h為死亡高峰,感染VFY株組共死亡雛番鴨9羽,死亡率60%。PBS組正常,未出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。
2.2 剖檢病變 剖檢死番鴨,上喙淤血;肝臟腫大、出血,表面有出血斑,出血點;膽囊膽汁充盈,呈青褐色;有的雛鴨可見腎臟有出血;還有部分雛鴨脾臟見有壞死。
2.3 感染雛番鴨的組織病理學變化
肝臟:接毒后死亡的雛番鴨,肝臟表現(xiàn)為肝細胞腫脹變圓,細胞質(zhì)內(nèi)有大小不等的空泡(見圖1),嚴重者呈氣球樣,細胞核淡染、濃縮、崩解或消失,細胞膜不完整,肝細胞間散在分布有大量聚集成團的紅細胞(見圖2),肝索結(jié)構(gòu)紊亂,肝細胞周圍有多量的散在炎性細胞浸潤,主要是淋巴細胞(見圖3)。
腎臟:接毒后死亡的雛番鴨腎臟主要表現(xiàn)為腎小管上皮細胞脫離基底膜(見圖4),大部分腎小管結(jié)構(gòu)紊亂,有的腎小管上皮細胞腫脹,細胞質(zhì)內(nèi)有大小不一的空泡,呈空泡變性(見圖5),有的腎小管周圍有異嗜性白細胞浸潤。
胰臟:接毒后死亡的雛鴨,胰腺上皮細胞變性,胰臟腺細胞呈均質(zhì)紅染,其中可見濃縮或碎裂的細胞核。腺細胞間有異嗜性粒細胞浸潤。
圖1 肝臟空泡變性,脂肪變性(10×100)
圖2 肝臟出血(10×4)
圖3 肝臟炎性細胞浸潤(淋巴細胞,10×40)
圖4 腎小管上皮細胞脫離基底膜(10×40)
脾臟:接毒后不同時間死亡的雛鴨,脾臟均呈現(xiàn)壞死性脾炎的變化(見圖6);脾臟紅髓、白髓結(jié)構(gòu)清楚,白髓比例增加,白髓內(nèi)淋巴細胞減少,網(wǎng)狀細胞腫大,細胞質(zhì)內(nèi)有大小不一的空泡,細胞核濃縮、碎裂或消失,內(nèi)皮細胞腫脹,管腔縮小甚至消失;紅髓內(nèi)分布有大量的異嗜性粒細胞。
腦:接毒后死亡的雛鴨,腦組織主要表現(xiàn)為神經(jīng)細胞與周圍脫落,腫脹,變圓,細胞質(zhì)淡染或消失,細胞核濃縮,呈變性壞死。毛細血管周圍間隙增寬,神經(jīng)膠質(zhì)細胞少量增生(見圖7)。
圖5 腎小球旁,腎小管上皮細胞空泡變性,脫落(10×100)
圖6 脾臟白髓壞死(10×4)
圖7 血管周圍間隙增寬,神經(jīng)細胞與周圍脫落,腫脹,變圓(10×100)
其他臟器未見特殊病理變化。
3.1 Ⅰ型鴨肝炎病毒變異株的病理變化特點 Ⅰ型鴨肝炎病毒變異株感染雛番鴨的大體病變與自然發(fā)病情況一致。主要表現(xiàn)為死亡率高、發(fā)病急,死亡高峰在48~72 h,感染雛番鴨死亡時有角弓反張的神經(jīng)癥狀;特征性的剖檢病變是肝臟出血。對死亡雛鴨的組織病理學檢查結(jié)果表明,Ⅰ型鴨肝炎病毒變異株主要侵害肝、胰、脾、腎、腦等組織,造成實質(zhì)器官的變性壞死。早期以出血性、壞死性變化為主。有肝臟的出血性壞死性肝炎、胰臟的局灶性壞死、腎小管變性及炎癥反應、脾臟的壞死性脾炎、神經(jīng)細胞的變性壞死。結(jié)果說明,鴨肝炎病毒變異株進入機體后,很快造成一些主要臟器的組織細胞變性壞死,尤其是肝臟的大面積出血與壞死,導致雛鴨迅速死亡。
3.2 Ⅰ型鴨肝炎病毒變異株與Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型鴨肝炎病毒在病理變化上的區(qū)別 Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型鴨肝炎病毒,雖然是3種獨立的病原體,但對患病雛鴨可造成相似的病理變化[4]。將該次Ⅰ型鴨肝炎病毒變異株所致的病理變化與Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型鴨肝炎病毒比較發(fā)現(xiàn),它們之間有許多相同點,特別是在一些特征性病變上,如肝臟的出血性壞死性變化,胰臟的局灶性壞死,脾臟的壞死性脾炎,神經(jīng)細胞變性壞死,而且早期以壞死性變化為主。在組織病理變化上的明顯不同之處主要有:感染Ⅰ型鴨肝炎病毒變異株雛番鴨的腎臟、胰臟出現(xiàn)炎癥反應,有異嗜性粒細胞浸潤。胡薛英等[4]報道過感染新型鴨肝炎雛鴨的肝臟出現(xiàn)的是異嗜性粒細胞浸潤,但本試驗中出現(xiàn)的是淋巴細胞浸潤肝組織,與Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型鴨肝炎病毒造成相同的病理變化,這是否是變異株與新型鴨肝炎的區(qū)別,有待更多的病例來證實。Farmer等[5]、程國富[6]報道,鴨病毒性肝炎的另一個特征性病變是脂肪腎綜合征,本試驗沒有做脂肪染色,有待進一步研究。
[1]Sandhu T S,CalnEk B W,Zeman L.Pathologic and serologic characterization of a variant of duck hepatitis type I virus[J].Avian Dis,1992,36:932-936.
[2]林世棠,黃瑜,黃紀銓,等.一種新的鴨傳染病研究Ⅰ.流行情況與初步診斷[J].中國畜禽傳染病,1996(4):14-17.
[3]杜念興.獸醫(yī)免疫學[M].2版.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1995:133-137.
[4]胡薛英,蘇敬良,程國富,等.新型鴨肝炎病毒試驗感染雛鴨的組織病理學[J].中國獸醫(yī)學報,2002,22(6):549-551.
[5]Farmer F,Chalmers W S K,Woolcock P R.The duck fatty kidneysyndrome-an aspect of duck viral hepatitis[J].Avian Pathol,1987,16:227-236.
[6]程國富.鴨病毒性肝炎的病理學研究進展[J].國外獸醫(yī)學-畜禽疾病,1993,14(2):10-13.
Clinical symptoms and pathologic changes of young muscovy ducks infected by a variant of DHV type I
Zhang Ae
(Animal disease prevention and control center of Luojiang county,Quanzhou Fujian 362011)
A
1003-4331(2017)05-0005-03