河南省農(nóng)藥檢定站 王青霞 馬麗娜 郝小磊 呂穎賢 馬南方

高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測(cè)玉米中噻蟲嗪及噻蟲胺的殘留量

河南省農(nóng)藥檢定站 王青霞 馬麗娜 郝小磊 呂穎賢 馬南方

噻蟲嗪是一種全新結(jié)構(gòu)的第2代煙堿類高效低毒殺蟲劑，對(duì)害蟲具有胃毒、觸殺及內(nèi)吸活性，用于葉面噴霧及土壤灌根處理。其施藥后迅速被內(nèi)吸，并傳導(dǎo)到植株各部位，對(duì)刺吸式害蟲如蚜蟲、飛虱、葉蟬、粉虱等有良好的防效。本文研究了玉米中噻蟲嗪及噻蟲胺的殘留量檢測(cè)方法，該方法簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確度和靈敏度高，符合殘留分析的要求。

一、試驗(yàn)部分

（一）儀器與材料

1.儀器。1200液相色譜-6410三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀，低速離心機(jī)，振蕩器，電子天平。

2.試劑。乙腈：色譜純。

3.標(biāo)準(zhǔn)品。噻蟲嗪純度99.0%，由沈陽(yáng)化工研究院提供；噻蟲胺100 μg/mL，由農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所提供。

（二）實(shí)驗(yàn)步驟

1.提取。用50 mL的離心管稱取10g樣品加25 mL乙腈振蕩30 min，加入 3 gNaCl，震蕩 10 min后以3000轉(zhuǎn)/min離心3 min，最終取上清液乙腈相4 mL于燒杯中，濃縮1 mL于離心試管中。

2.凈化。將1 mL濃縮液加入0.2 gPSA和0.05 g石墨化碳黑渦旋，過(guò)0.22 μm有機(jī)系濾膜，待測(cè)。

（三）儀器條件

1.液相色譜條件

色譜柱：ZORBAX Eclipse Plus C18色譜柱（100 mm×3 mm，1.8 μm）。

柱溫：30 ℃。

流速：0.4 mL/ min。

進(jìn)樣量：5 μL。

梯度洗脫條件見表1。

表1 梯度洗脫條件

2.質(zhì)譜條件

離子源：電噴霧離子源ESI。

掃描方式：正離子源。

毛細(xì)管電壓：3.5 KV。

錐孔電壓：35 V。

離子源溫度：110 ℃。

脫溶劑溫度：450 ℃。

脫溶劑氣流量：600 L/h。

錐孔氣流量：90 L/h。

檢測(cè)方式：多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）見表2。

表2 多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）

二、結(jié)果與討論

（一）標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖1 噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2 噻蟲胺標(biāo)準(zhǔn)曲線

將 10 μg/mL的噻蟲嗪、噻蟲胺標(biāo)準(zhǔn)溶液用乙腈稀釋配得0.01μg/mL、0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.5 μg/mL、1 μg/mL 系 列標(biāo)準(zhǔn)溶液，在上述液相色譜/質(zhì)譜條件下進(jìn)行測(cè)定，以噻蟲嗪、噻蟲胺標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度與監(jiān)測(cè)離子峰面積作標(biāo)準(zhǔn)曲線。噻蟲嗪線性方程為：y=214 601x+3 377.1，相關(guān)系數(shù)為：r= 0.999；噻蟲胺線性方程為：y=157 094x+94.383，相關(guān)系數(shù)為：r= 0.999 9；其中，y為噻蟲嗪、噻蟲胺峰面積，x為標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度見圖1和圖2。

（二）最低檢出量

噻蟲嗪、噻蟲胺的最低檢出量均為 2.0×10-3ng。

（三）最低檢測(cè)濃度

根據(jù)添加回收率實(shí)驗(yàn)，在上述色譜條件下噻蟲嗪、噻蟲胺在玉米中的最低檢出濃度均為0.02 mg/kg。

（四）相對(duì)保留時(shí)間

噻蟲嗪保留時(shí)間約為2.2 min、噻蟲胺保留時(shí)間約為2.3 min。

（五）添加回收率與相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

取對(duì)照區(qū)的玉米粒樣品，按上述方法做添加回收率試驗(yàn)。添加濃度 為 0.02 mg/kg、0.04 mg/kg 和0.4mg/kg，每個(gè)濃度做5個(gè)平行試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果表明平均回收率在76.3%～112.0%，變異系數(shù)0.4%～1.7%，結(jié)果見表3和表4。

表3 玉米中噻蟲嗪的添加回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

表4 玉米中噻蟲胺的添加回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

（六）液相色譜條件優(yōu)化

分別用乙腈加0.1%甲酸水、乙腈加0.2%甲酸水、甲醇加0.1%甲酸水、甲醇加0.2%甲酸水作為流動(dòng)相。結(jié)果表明，以乙腈加0.1%甲酸水作為流動(dòng)相時(shí)，噻蟲嗪和噻蟲胺均有較強(qiáng)的離子豐度，并且分離度高、對(duì)稱性好，因此本方法選用乙腈加0.1%甲酸水作為流動(dòng)相。

（七）質(zhì)譜條件優(yōu)化

根據(jù)噻蟲嗪和噻蟲胺的分子量和結(jié)構(gòu)分析，分別對(duì)兩種物質(zhì)進(jìn)行質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化，最終分別找到合適的錐孔電壓和碰撞電壓，編輯成兩種物質(zhì)的方法，連接高效液相色譜儀，并設(shè)置梯度洗脫程序。結(jié)果表明，在1.3的分析條件下，噻蟲嗪和噻蟲胺均可得到離子豐度強(qiáng)、峰形良好的色譜峰。

三、實(shí)驗(yàn)譜圖

試驗(yàn)譜圖見圖3、圖4、圖5。

圖3 噻蟲嗪、噻蟲胺標(biāo)樣

圖4 玉米添加

圖5 玉米空白

四、結(jié)論

進(jìn)樣量均為5 μL。

本文對(duì)噻蟲嗪及噻蟲胺檢測(cè)的前處理、流動(dòng)相條件及質(zhì)譜條件進(jìn)行優(yōu)化，建立了利用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測(cè)玉米中噻蟲嗪及噻蟲胺的殘留分析方法。該方法簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好、靈敏度高，可以作為檢測(cè)玉米中噻蟲嗪及噻蟲胺殘留量較為理想的方法。