鮑順梅劉國華

（1.寧夏沙坡頭區(qū)動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心，寧夏中衛(wèi) 755000；2.寧夏中衛(wèi)市動(dòng)物疾病預(yù)防控制與衛(wèi)生監(jiān)督中心，寧夏中衛(wèi) 755000）

重大動(dòng)物疫病免疫抗體水平檢測(cè)結(jié)果分析

鮑順梅1劉國華2

（1.寧夏沙坡頭區(qū)動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心，寧夏中衛(wèi) 755000；2.寧夏中衛(wèi)市動(dòng)物疾病預(yù)防控制與衛(wèi)生監(jiān)督中心，寧夏中衛(wèi) 755000）

實(shí)施動(dòng)物免疫接種是我國目前控制重大動(dòng)物疫病最根本、科學(xué)和直接有效的措施之一，確保免疫質(zhì)量成為防控重大動(dòng)物疫病工作的重中之重，而免疫抗體監(jiān)測(cè)則是檢驗(yàn)免疫質(zhì)量直接有效的方法，也是衡量基層動(dòng)物防疫人員工作效果的主要考核技術(shù)指標(biāo)?，F(xiàn)就沙坡頭區(qū)2013～2016年間雞禽流感和家畜口蹄疫免疫抗體水平監(jiān)測(cè)與檢測(cè)結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品來源及分布

檢測(cè)樣品為雞、豬、牛和羊血清。在注射禽流感和口蹄疫疫苗20～30d后，按照采樣點(diǎn)分布，隨機(jī)采集動(dòng)物血液低溫保存運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室分離血清后按檢測(cè)要求冷藏保存待檢。2013～2016年4年中采集檢測(cè)樣品覆蓋了沙坡頭區(qū)轄區(qū)的12個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)），其中，雞為9個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)），累計(jì)155個(gè)村289戶，存欄雞1296180只；豬為10個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)），累計(jì)175個(gè)村209戶，存欄豬123551頭；牛為10個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)），累計(jì)144個(gè)村241戶，存欄牛69960頭；羊?yàn)?2個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)），累計(jì)176個(gè)村269戶，存欄羊24994只。

1.1.2 檢測(cè)試劑

（1）禽流感（AI）。禽流感H5亞型病毒抗原為哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn)。

（2）口蹄疫（FMD）?？谔阋擀汀型和Asia-1型抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒為蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)。

1.1.3 檢測(cè)儀器設(shè)備及試劑。96孔V型微量反應(yīng)板、微量振蕩器、移液器、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱等；試驗(yàn)用各種試劑（液）。

1.2 方法及判定

1.2.1 禽流感。雞禽流感H5亞型抗體采用血凝/血凝抑制試驗(yàn)法進(jìn)行檢測(cè)。判定：家禽免疫21d抗體效價(jià)≥24判定為個(gè)體免疫合格。

1.2.2 口蹄疫。豬、牛和羊Ο型、A型和Asia-Ⅰ型口蹄疫均采用液相阻斷ELISA法進(jìn)行檢測(cè)。判定：豬口蹄疫免疫28d，牛、羊口蹄疫免疫21d，液相阻斷ELISA法檢測(cè)的抗體效價(jià)≥26判定為個(gè)體免疫合格。

1.2.3 免疫群體抗體合格率判定標(biāo)準(zhǔn)。按照《2013年國家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》要求進(jìn)行判定，檢測(cè)群體平均免疫抗體水平達(dá)到70%及以上為采樣動(dòng)物群體免疫合格，70%以下為群體免疫不合格。

2 檢測(cè)結(jié)果與應(yīng)用

2.1 禽流感

在4年間分別檢測(cè)了H5亞型Re4、Re6、Re7和Re8毒株所產(chǎn)生的免疫抗體效價(jià)，檢測(cè)結(jié)果見表1。

2.2 口蹄疫

2.2.1 ?？谔阋摺Ｔ?年間對(duì)免疫牛群同時(shí)檢測(cè)了Ο型、A型和Asia-Ⅰ型免疫抗體效價(jià)，檢測(cè)結(jié)果見表2。

表2 2013～2016年間?？谔阋呙庖呖贵w水平檢測(cè)結(jié)果

2.2.2 羊口蹄疫。在4年間對(duì)免疫羊群同時(shí)檢測(cè)了Ο型、A型和Asia-Ⅰ型免疫抗體效價(jià)，檢測(cè)結(jié)果見表3。

2.2.3 豬口蹄疫。4年間對(duì)免疫豬群開展了Ο型口蹄疫免疫抗體水平檢測(cè)，2016年同時(shí)開展了豬A型口蹄疫免疫抗體水平檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果見表4。

2.3 檢測(cè)結(jié)果應(yīng)用

在檢測(cè)工作結(jié)束后，及時(shí)出具檢測(cè)報(bào)告分別送達(dá)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）畜牧獸醫(yī)技術(shù)服務(wù)站和養(yǎng)殖場(chǎng)戶。對(duì)2014～2015年免疫羊群A型口蹄疫不合格的56群4062只進(jìn)行了羊A型口蹄疫疫苗的強(qiáng)制免疫接種；對(duì)2013～2016年免疫豬群Ο型口蹄疫不合格的82群30152頭、2016年免疫豬群A型口蹄疫不合格的32群11855頭分別強(qiáng)制進(jìn)行了Ο型和A型疫苗免疫接種。對(duì)這些強(qiáng)化免疫接種的畜群免疫28～30d后隨機(jī)按10%比例再次采樣進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果顯示經(jīng)強(qiáng)化免疫后，各畜群免疫抗體水平均達(dá)到70%以上的合格率標(biāo)準(zhǔn)。

3 小結(jié)與分析

（1）對(duì)2013～2016年間的禽流感和口蹄疫免疫抗體水平檢測(cè)結(jié)果表明，4年間沙坡頭區(qū)雞禽流感、?？谔阋撸é汀型和Asia-Ⅰ型）和羊口蹄疫（Ο型和Asia-Ⅰ型）平均免疫抗體水平檢測(cè)達(dá)到了國家規(guī)定免疫合格標(biāo)準(zhǔn)，但羊A型口蹄疫有2個(gè)年度免疫抗體水平和平均免疫抗體水平不合格。4年間豬Ο型口蹄疫免疫抗體水平檢測(cè)均未達(dá)到國家規(guī)定的免疫合格標(biāo)準(zhǔn)，2016年豬A型口蹄疫免疫抗體水平檢測(cè)也不合格。對(duì)免疫不合格畜群進(jìn)行了落實(shí)強(qiáng)化免疫接種和跟蹤免疫督導(dǎo)措施，收到了積極的免疫預(yù)防效果。

表3 2013～2016年間羊口蹄疫免疫抗體水平檢測(cè)結(jié)果

表4 2013～2016年間豬口蹄疫免疫抗體水平檢測(cè)結(jié)果

（2）沙坡頭區(qū)是曾經(jīng)發(fā)生過H9和H5亞型禽流感的疫區(qū)，因此養(yǎng)雞場(chǎng)戶對(duì)禽流感的防疫十分重視，能始終堅(jiān)持程序化免疫，故Re4、Re6、Re7和Re8其免疫抗體效價(jià)非常高。由于牛的飼養(yǎng)周期長，每頭牛每年基本能做到3～4次的免疫接種，其產(chǎn)生的基礎(chǔ)免疫扎實(shí)，產(chǎn)生的免疫抗體水平也比較高。羊每年能做到2～3次的免疫接種，產(chǎn)生的免疫抗體水平基本能達(dá)到規(guī)定的合格標(biāo)準(zhǔn)。豬的免疫抗體水平比較低，分析認(rèn)為，一是由于現(xiàn)代科學(xué)養(yǎng)豬技術(shù)的應(yīng)用，豬飼養(yǎng)周期變短，從仔豬補(bǔ)欄到出欄銷售的時(shí)間約5個(gè)月左右，而在這一時(shí)間內(nèi)，口蹄疫疫苗一般只注射1次（散養(yǎng)戶）～2次（規(guī)模場(chǎng)戶）；二是使用疫苗為普通苗（非抗原濃縮苗），由于每頭份疫苗中抗原組分少，接種疫苗后不能有效刺激機(jī)體產(chǎn)生足夠的抗體；三是除接種口蹄疫疫苗外，接種其他疫苗的種類也比較多，疫苗接種間隔時(shí)間短，是否疫苗間存在有相互干擾的緣故。

（3）多年來，我們將監(jiān)測(cè)結(jié)果應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐中科學(xué)指導(dǎo)動(dòng)物免疫工作的開展。要求對(duì)免疫合格畜禽群繼續(xù)堅(jiān)持程序化免疫；對(duì)免疫抗體水平不合格的畜禽群，則認(rèn)真分析免疫不合格（不達(dá)標(biāo)）原因，特別是進(jìn)一步采取了強(qiáng)制強(qiáng)化免疫措施，組織鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）、村兩級(jí)動(dòng)物防疫人員跟蹤落實(shí)強(qiáng)化免疫預(yù)防接種工作；同時(shí)依據(jù)免疫檢測(cè)結(jié)果，加大了對(duì)村級(jí)防疫員的督導(dǎo)考核力度，使村級(jí)防疫員在開展動(dòng)物免疫注射過程中更加細(xì)致、規(guī)范的進(jìn)行操作。通過采取多措并舉，確保了免疫效果和免疫質(zhì)量，近年來2種動(dòng)物疫病在沙坡頭區(qū)再未發(fā)生，從而進(jìn)一步保障了畜牧業(yè)的安全健康養(yǎng)殖。