吳婷婷 孔曉明

·藥物研究·

耐甲氧西林表皮葡萄球菌感染情況調(diào)查及藥敏分析研究

吳婷婷 孔曉明

目的探討耐甲氧西林表皮葡萄球菌的感染情況及其耐藥性。方法收集收集2013年7月至2016年4月住院患者的各類送檢標(biāo)本中分離鑒定的表皮葡萄球菌158株，由有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)員采用BIOFOSUN微生物鑒定藥敏分析系統(tǒng)對(duì)菌株進(jìn)行鑒定，采用MIC法作抗生素敏感性試驗(yàn)，分析不同科室、不同年齡、不同標(biāo)本及不同性別中MRSE菌株的分布情況；對(duì)院外與院內(nèi)MRSE的臨床特征進(jìn)行分析；對(duì)MRSE在12種抗生素的藥敏結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果在表皮葡萄球菌感染的病例中耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)占79.1%，且男性耐甲氧西林表皮葡萄球菌的檢出率高于女性，>60歲的MRSE檢出率高于30～60歲和<30歲的檢出率，院內(nèi)感染者檢出率高于院外感染者，重癥監(jiān)護(hù)室MRSE的檢出率為高于其他科室，來(lái)源于膿性分泌物標(biāo)本的MRSE檢出率高于血液標(biāo)本和其他標(biāo)本，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.000)。院內(nèi)MRSE感染的患者中存在原發(fā)疾病的比例較院外感染的多，檢出細(xì)菌前2周內(nèi)服用兩種以上抗生素的患者所占比例較院外感染的多，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；MRSE對(duì)青霉素、氨芐西林、苯唑西林、頭孢唑啉、紅霉素及克林霉素的耐藥性極強(qiáng)，均超過(guò)90.0%，而對(duì)環(huán)丙沙星、慶大霉素、四環(huán)素、利福平、甲氧芐啶/磺胺甲噁唑(SMZ)的耐藥性較強(qiáng)，而對(duì)萬(wàn)古霉素敏感。結(jié)論耐甲氧西林表皮葡萄球菌在臨床上感染情況嚴(yán)重，且普遍存在對(duì)普通抗生素的耐藥性。

耐甲氧西林表皮葡萄球菌；院內(nèi)感染；耐藥性

表皮葡萄球菌是一群凝固酶陰性的葡萄球菌，在自然界中分布廣泛，絕大多數(shù)不致病，僅少數(shù)可引起人和動(dòng)物的化膿性感染[1]。寄生于人體皮膚、陰道等部位的表皮葡萄球菌可以引起癤、癰、尿路感染、敗血癥及傷口感染等[2]。且近年來(lái)由于對(duì)抗菌藥物的大量使用，以及不斷增加的抗菌藥物種類和廣譜抗菌藥物的廣泛使用，使得表皮葡萄球菌的耐藥性在逐年增加[3]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，表皮葡萄球菌對(duì)青霉素類的耐藥性超過(guò)80.0%，其對(duì)很多抗生素耐藥的原因主要與它產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶有關(guān)，耐藥機(jī)制是mecA基因編碼低親和力的青霉素結(jié)合蛋白2a所致[1，4]。當(dāng)前國(guó)內(nèi)對(duì)耐甲氧西林表皮葡萄球菌感染率以及耐藥性的研究報(bào)道較少，而對(duì)該方面的研究又顯得較為重要[5]。因此本研究收集2013年7月至2016年4月在我院住院患者的各類送檢標(biāo)本(剔除同一患者同一部位的重復(fù)標(biāo)本)中分離鑒定的表皮葡萄球菌158株，對(duì)其耐藥性和藥敏情況進(jìn)行分析，得出結(jié)論，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2013年7月至2016年4月來(lái)我院就診的門診和住院患者標(biāo)本分離的表皮葡萄球菌158株，其中20株血標(biāo)本，42株尿標(biāo)本，13株前列腺液標(biāo)本，53株膿拭子分離標(biāo)本，7株腦脊液標(biāo)本，6株精液標(biāo)本，17株痰標(biāo)本，排除同一病例的重復(fù)株。

1.2 方法 所有患者的血液、尿液、痰液、膿液、腦脊液、前列腺液等標(biāo)本的分離與鑒定均由本院微生物實(shí)驗(yàn)室有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員用BIOFOSUN微生物鑒定藥敏分析系統(tǒng)進(jìn)行鑒定，BIOFOSUN微生物鑒定藥敏分析系統(tǒng)由中國(guó)的復(fù)星醫(yī)藥公司生產(chǎn)制造。采用MIC法進(jìn)行測(cè)定，如果苯唑西林抑菌濃度≥0.5時(shí)即為耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)。

1.3 藥敏實(shí)驗(yàn) 采用稀釋法(即MIC法)作抗生素敏感性試驗(yàn)，該法由美國(guó)國(guó)家臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(National Committee for Clinical Laboratory,NCCLS)推薦。使用NCCLS推薦的方法制備濃度為0.5麥?zhǔn)蠁挝坏木鷳乙?，按照相?yīng)的葡萄球菌藥敏板操作規(guī)程將菌懸液逐步加入板條，在35℃條件下培養(yǎng)24 h后上機(jī)讀板，共有氨芐西林、紅霉素、克林霉素、萬(wàn)古霉素、頭孢唑林、甲氧芐啶/磺胺甲噁唑(SMZ)、環(huán)丙沙星、慶大霉素、四環(huán)素、青霉素、利福平、苯唑西林12種抗生素。其中葡萄球菌藥敏板為上海星佰生物技術(shù)有限公司提供，另外本研究采用苯唑西林代替甲氧西林，用金黃色葡萄球菌ATCC25923作為質(zhì)控菌株。

1.4 觀察指標(biāo) (1)分析不同科室、不同年齡、不同標(biāo)本及不同性別中MRSE菌株的分布情況；(2)對(duì)院外與院內(nèi)MRSE的臨床特征進(jìn)行分析；(3)對(duì)MRSE在12種抗生素的藥敏結(jié)果進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 不同科室、不同年齡、不同標(biāo)本及不同性別中MRSE菌株的分布情況 本次調(diào)查共收集從我院住院患者的各類送檢標(biāo)本中分離鑒定的表皮葡萄球菌158株，其中耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)的標(biāo)本125例，占79.1%。其中125例MRSE的標(biāo)本中男性72例，女性53例，男性耐甲氧西林表皮葡萄球菌的檢出率(85.9%)高于女性(72.6%)；≥60歲的MRSE檢出率94.6%，30-60歲的MRSE檢出率64.1%，<30歲的MRSE檢出率46.2%；院內(nèi)感染者檢出率(85.0%)高于院外感染者(71.1%)；重癥監(jiān)護(hù)室MRSE的檢出率為76.2%為最高，其次是普外科(67.5%)，新生兒科為50.0%。其他科室為39.1%；來(lái)源于膿性分泌物的標(biāo)本的MRSE檢出率90.0%，其次為血液標(biāo)本(78.9%)，其他標(biāo)本MRSE發(fā)生率最低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表1。

2.2 院外與院內(nèi)MRSE的臨床特征分析 院內(nèi)感染患者中>60歲者占比、死亡率、年齡≤1歲者占比、長(zhǎng)期使用免疫抑制劑者占比及發(fā)病前有侵襲性操作者占比與院外感染間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；院內(nèi)MRSE感染的患者中存在原發(fā)疾病的比例較院外感染多，檢出細(xì)菌前2周內(nèi)服用兩種以上抗生素的患者所占比例較院外感染多(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表1 不同標(biāo)本MRSE檢出率比較

注：其他標(biāo)本包括痰標(biāo)本、前列腺液標(biāo)本、腦脊液標(biāo)本和精液標(biāo)本

表2 院外與院內(nèi)MRSE的特征分析 例(%)

注：*表示采用Fisher確切概率法計(jì)算得到的P值

2.3 MRSE對(duì)12種抗生素的藥敏結(jié)果分析 MRSE對(duì)12種抗生素的藥敏結(jié)果的分析發(fā)現(xiàn)，MRSE對(duì)青霉素、氨芐西林、苯唑西林、頭孢唑啉、紅霉素及克林霉素的耐藥性極強(qiáng)，均超過(guò)90.0%，而對(duì)環(huán)丙沙星、慶大霉素、四環(huán)素、利福平、甲氧芐啶/磺胺甲噁唑(SMZ)的耐藥性較強(qiáng)，而對(duì)萬(wàn)古霉素敏感。見(jiàn)表3。

3 討論

表皮葡萄球菌是一種重要的機(jī)會(huì)性致病菌,也是引起院內(nèi)感染的主要致病菌之一[5]。而隨著半合成青霉素甲氧西林和苯唑西林應(yīng)用于臨床，MRSE便出現(xiàn)了，且當(dāng)前MRSE感染及耐藥性已經(jīng)成為一個(gè)不容忽視的問(wèn)題[6]。另外據(jù)相關(guān)研究報(bào)道，美國(guó)約80.0%醫(yī)院感染分離的表皮葡萄球菌對(duì)甲氧西林耐藥[7]。雖然臨床指南規(guī)定，在使用抗生素之前要做病原學(xué)及藥敏試驗(yàn)，不得濫用抗菌藥物,但由于我國(guó)對(duì)抗生素的監(jiān)管機(jī)制不夠完善，使其合理利用受到很大制約，甚至由于濫用抗生素而產(chǎn)生了超級(jí)菌[8]。本耐藥菌的出現(xiàn)與機(jī)體的免疫狀態(tài)、長(zhǎng)期聯(lián)合使用抗生素、長(zhǎng)期使用免疫抑制劑、住院時(shí)間過(guò)長(zhǎng)以及侵襲性操作等有關(guān)。

表3 MRSE對(duì)12種抗生素的藥敏結(jié)果分析

本研究發(fā)現(xiàn)，在調(diào)查的158株表皮葡萄球菌中耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)占79.1%。說(shuō)明當(dāng)前表皮葡萄球菌的耐藥現(xiàn)象較為嚴(yán)重，這較黃鍵云等[9]報(bào)道的MRSE89.4%的檢出率低。較魏凌秀等[10]報(bào)道的MRSE的檢出率66.7%要高。造成MRSE的地區(qū)分離率不同的原因可能與不同地區(qū)臨床醫(yī)生用藥習(xí)慣之間的差異有關(guān)。男性發(fā)生MRSE的情況較女性多。年齡分布中以≥60歲的老年人為該菌感染的高危人群，主要可能是這些人群的自身免疫力較低，容易受到外源性致病菌的感染等有關(guān)。MRSE的標(biāo)本主要分布在重癥監(jiān)護(hù)室、普外科和新生兒科，這與表皮葡萄球菌通常的寄生部位、機(jī)體的免疫狀況等有關(guān)，重癥監(jiān)護(hù)室的患者病情重，營(yíng)養(yǎng)狀況差，抗菌能力也很差，容易合并機(jī)會(huì)性感染[11]。MRSE的標(biāo)本來(lái)源于膿性分泌物的數(shù)最多，其次為血液標(biāo)本。之后本研究又發(fā)現(xiàn)院內(nèi)MRSE感染的患者中存在原發(fā)疾病的比例較院外感染的多；院內(nèi)感染患者檢出MRSE細(xì)菌前2周內(nèi)服用兩種以上抗生素的患者所占比例較院外感染的多，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；說(shuō)明影響MRSE發(fā)生的主要危險(xiǎn)因素是對(duì)患者免疫狀態(tài)造成嚴(yán)重影響的基礎(chǔ)性疾病，以及長(zhǎng)期聯(lián)合使用抗生素。MRSE對(duì)12種抗生素的耐藥性差異較大，對(duì)青霉素、氨芐西林、苯唑西林、頭孢唑啉、紅霉素及克林霉素的耐藥性極強(qiáng)，均超過(guò)90.0%，而對(duì)環(huán)丙沙星、慶大霉素、四環(huán)素、利福平、甲氧芐啶/磺胺甲噁唑(SMZ)的耐藥性較強(qiáng)，而對(duì)萬(wàn)古霉素敏感。這與朱德妹[12]等的研究結(jié)果接近。MRSE耐藥的機(jī)制可能是由于細(xì)菌的細(xì)胞中青霉素結(jié)合蛋白發(fā)生突變，從而產(chǎn)生新的青霉素結(jié)合蛋白位點(diǎn)，導(dǎo)致其與β-內(nèi)酰胺類抗生素的親和力降低而產(chǎn)生耐藥。

綜上所述，耐甲氧西林表皮葡萄球菌在臨床上感染情況嚴(yán)重，且普遍存在對(duì)普通抗生素的耐藥性。

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10.3969/j.issn.1002-7386.2017.20.037

R 378.11

A

1002-7386(2017)20-3168-03

2017-04-05)

項(xiàng)目來(lái)源：溧陽(yáng)市重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃(社會(huì)發(fā)展)項(xiàng)目(編號(hào)：LC2015010)

213300 江蘇省溧陽(yáng)市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科