姚欣艷 王迎春 高曉峰 劉 侃

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，湖南 長沙，410007；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長沙410208）

化痰通絡(luò)湯對MCAO大鼠腦保護(hù)作用及HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路的影響*

姚欣艷1△王迎春2高曉峰2劉 侃2

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，湖南 長沙，410007；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長沙410208）

目的 基于HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路探討化痰通絡(luò)湯對腦缺血再灌注（MCAO）大鼠腦保護(hù)作用。方法 將54只SD大鼠隨機分成假手術(shù)組、模型組、化痰通絡(luò)湯組，其中模型組及化痰通絡(luò)湯組行MCAO術(shù)，各組均于灌胃1 d、3 d、7 d后取材；比較各組大鼠神經(jīng)功能缺損評分、腦梗死體積、腦含水量、腦組織高遷移率族蛋白 l（HMGB1）、Toll樣受體 4（TLR4）、核因子-κB（NF-κB）蛋白表達(dá)及炎癥因子腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）含量。 結(jié)果 各時間點神經(jīng)功能缺損評分比較顯示，化痰通絡(luò)湯組較模型組有明顯下降，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）；腦梗死體積比較顯示，化痰通絡(luò)湯組在各時間點腦梗死體積均小于模型組，組間比較具有明顯差異（P＜0.01）；化痰通絡(luò)湯組1 d、3 d、7 d腦組織HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表達(dá)均低于模型組，組間比較有明顯差異（P＜0.05或P＜0.01）；化痰通絡(luò)湯組1 d、3 d、7 d腦組織炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量均低于模型組，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）；結(jié)論 化痰通絡(luò)湯對MACO大鼠的腦保護(hù)作用機制可能是通過抗炎癥反應(yīng)、阻斷HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路實現(xiàn)的。

缺血性中風(fēng) 化痰通絡(luò)湯 HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路

缺血性腦血管病具有高發(fā)病率、高致殘率、高死亡率。了解其病理生理變化，對研究中藥及其復(fù)方防治缺血性腦病具有重要意義［1］。筆者采用化痰通絡(luò)湯治療缺血性中風(fēng)屢獲良效，臨床隨機對照研究發(fā)現(xiàn)化痰通絡(luò)湯能明顯降低腦卒中患者神經(jīng)功能缺損評分及中醫(yī)證候積分，總有效率達(dá)到94.29%［2］。在急性腦缺血病發(fā)生后，局部缺血會刺激高遷移率族蛋白l（HMGB1）的釋放，其參與并擴大炎癥反應(yīng)［3］。Toll樣受體 4（TLR4）可通過識別侵入體內(nèi)的微生物進(jìn)而激活免疫細(xì)胞的應(yīng)答，其與炎癥有關(guān)，并且參與了腦缺血的過程。腦缺血后核因子-κB（NF-κB）的過度表達(dá)又可調(diào)節(jié)促炎細(xì)胞因子、轉(zhuǎn)錄因子等相關(guān)基因，使其高表達(dá)［4］。HMGB1與TLR4結(jié)合后相互作用，從而促進(jìn)下游信號NF-κB的激活，進(jìn)一步加重炎癥反應(yīng)及腦缺血損傷［5］。因此，HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路是導(dǎo)致炎癥反應(yīng)激活、加重腦組織損傷的重要途徑［6］。本實驗主要采用Longa改良線栓法制造大鼠MCAO模型，通過觀察化痰通絡(luò)湯對MCAO大鼠HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路及炎癥介質(zhì)腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-lβ）、白介素-6（IL-6）含量的影響，探討其在腦缺血后調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)較為確切的作用途徑，為缺血性中風(fēng)的急性期早期使用具有腦保護(hù)作用的中藥制劑提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 雄性健康SPF級SD大鼠54只，體質(zhì)量（260±20）g，購于湖南中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心，許可證號SYXK（湘）2014-0003，飼養(yǎng)于湖南中醫(yī)藥大學(xué)SPF級實驗動物中心，許可證號SYXK（湘）2009-0001。自然籠養(yǎng)，室溫控制在22℃，12 h光照/黑暗循環(huán)，自由進(jìn)水進(jìn)食。適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后開始實驗。

1.2 實驗藥物 化痰通絡(luò)湯（陳皮10 g，法半夏9 g，茯苓 10 g，枳實 10 g，竹茹 10 g，膽南星 6 g，天麻 10 g，僵蠶 10 g，全蝎 5 g，地龍 10 g，雞血藤 15 g，熟大黃 3 g，甘草6 g，蜈蚣1條）。藥材購自湖南省中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，一煎加水500 mL煎汁150 mL；二煎加水300 mL煎汁150 mL；煎1 h后，取2次煎汁混合，熬成膏狀（含生藥2 g/mL），冷藏備用。灌胃液體量為1.4 mL/100 g大鼠，其濃度及等效劑量按體表面積折算。

1.3 試劑與儀器 眼科解剖鑷、眼科手術(shù)剪、無創(chuàng)微動脈夾、持針器、血管鉗、天平稱 （千分之一克）、2，3，5-氯化三苯基四氮唑、10%水合氯醛、4%多聚甲醛、-80℃冰箱、Bio-rad凝膠成像分析儀（上海醫(yī)療儀器廠）、臺式離心機（杭州匯爾儀器廠）、超薄組織切片機（北京冠普佳科技有限公司）、ELISA試劑盒（上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司）。1.4 模型制備 采用血管腔內(nèi)插線法即Longa法［7］制備大鼠MACO模型：動物禁水、食后采用10%水合氯醛（0.35 mL/kg）腹腔注射麻醉，然后頸部腹側(cè)正中切口暴露頸總動脈，分離頸內(nèi)動脈和頸外動脈分叉處，結(jié)扎頸內(nèi)動脈和頸外動脈近端，然后在頸總動脈稍遠(yuǎn)端剪一約0.2 mm小孔，將直徑0.20 mm的單股魚線（頭端預(yù)先加熱成直徑約0.26～0.30 mm的圓頭）緩慢插入頸內(nèi)動脈大約18～20 mm，感覺到有輕微的阻力，此時插線源頭到達(dá)Willis環(huán)頸內(nèi)動脈末端分叉處，阻塞大腦中動脈起始部位。術(shù)中保持大鼠肛溫37℃。模型制作如遇麻醉、蛛網(wǎng)膜下腔出血和手術(shù)操作等原因造成的動物死亡，隨機補充體質(zhì)量近似的大鼠。手術(shù)完畢后，將大鼠單籠飼養(yǎng)，蓋上墊料、調(diào)高室溫，讓其自然清醒。插線2 h后再次將大鼠麻醉，用直頭鑷夾住露出皮膚的栓線尾部柔和緩慢的抽出，當(dāng)栓線球前端遇到頸內(nèi)動脈結(jié)扎線時會有阻力，即停止拔線，剪除栓線的殘余末端。大鼠清醒后可以自由進(jìn)食、進(jìn)水。

1.5 分組及給藥 本實驗共分為假手術(shù)組、模型組、化痰通絡(luò)湯組，將造模成功后的大鼠按隨機數(shù)字表法分為模型組、化痰通絡(luò)湯組。假手術(shù)組除不插線外，全過程同其他各組。各組按處死時間分為缺血再灌注后1 d、3 d、7 d 3個時相組，每個組每個時相保證造模成功6只動物。假手術(shù)組、模型組予灌胃等量蒸餾水，化痰通絡(luò)湯組予化痰通絡(luò)湯灌胃。中藥劑量根據(jù)成人每日服用145 g生藥劑量進(jìn)行體表面積比值換算，灌藥體積均為20 mL/kg，每日灌胃1次。經(jīng)過預(yù)實驗已證明本方中藥劑量因素對藥效的影響無顯著性差異，因此實驗中只選用臨床常規(guī)使用的中藥劑量。

1.6 標(biāo)本采集與檢測

1.6.1 神經(jīng)功能缺損評分 各組于動物清醒后2 h后及處死前采用改良大鼠神經(jīng)功能缺損嚴(yán)重程度評分量表（m-NSS）［7-8］進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評分，各指標(biāo)評分 3次取均值納入結(jié)果。

1.6.2 腦梗死體積測定 采用TTC染色法［9］。大鼠處死后迅速取出腦組織，從前囟前2 mm處，每隔2 mm做一冠狀切片，共切取5個層面。將切片浸泡于2%TTC溶液中，37℃，30 min，每5min輕輕震蕩數(shù)次。采用Image J圖像分析軟件計算每片腦組織梗死面積，總梗死體積=總梗死面積×腦片厚度（2 mm），并通過修正公式計算腦梗死體積百分比：梗死體積百分比（%）={［總梗死體積-（梗死側(cè)半球體積-梗死對側(cè)半球體積）］/梗死對側(cè)半球體積}×100%［10］。

1.6.3 腦含水量測定 按不同時相斷頭取腦，左右半腦分開，用濾紙吸干表面水分，分別稱量左右腦濕質(zhì)量，放置烤箱95℃烘烤48 h至恒重，精確稱量干質(zhì)量后，依據(jù)下式計算腦水含量：腦水含量=（濕質(zhì)量-干質(zhì)量）/濕質(zhì)量×100%。

1.6.4 Western Blot法檢測腦組織HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路中蛋白表達(dá) 取各組凍存于-80℃冰箱的腦組織，加入細(xì)胞裂解液后采用超聲勻漿15 min，離心5 min，取上清，BCA試劑盒檢測蛋白濃度。各組取上清制備50 μg蛋白，聚丙烯酰胺凝膠電泳，轉(zhuǎn)NC膜， 分別加入 HMGB1、TLR4、NF-κB 一抗抗體，37 ℃孵育2 h；TBST洗膜3次，分別加入辣根酶標(biāo)記二抗，37℃孵育1 h，TBST洗膜，ECL發(fā)光液顯色。以βaction 作為內(nèi)參計算各組 HMGB1、TLR4、NF-κB 條帶的灰度比值。

1.6.5 ELISA 法檢測腦組織 IL-1β、IL-6、TNF-α 含量收集各組缺血腦組織，研磨成勻漿，加0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液（pH7.4）至 5 mL，3000 r/min 離心 3 min，取上清液進(jìn)行檢測。采用ELISA法檢測上清液IL-1β、IL-6、TNF-α的含量。實驗步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.7 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件。符合正態(tài)分布及方差分析，計量資料以（±s）表示，兩樣本均數(shù)的比較采用成組t檢驗，多個樣本均數(shù)的比較采用單因素方差分析，檢驗水準(zhǔn)取α＝0.05。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠神經(jīng)功能缺損評分比較 見表1。與治療前比較，模型組及化痰通絡(luò)湯組在各時間點神經(jīng)功能缺損評分均有下降，組內(nèi)前后比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05或P＜0.01）。與模型組同時間點比較顯示，化痰通絡(luò)湯組在給藥后第1、3、7天神經(jīng)功能缺損評分下降更顯著，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。

表1 各組不同時間點神經(jīng)功能缺損分值比較（分s）

表1 各組不同時間點神經(jīng)功能缺損分值比較（分s）

與本組治療前比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。 下同。

組 別 給藥3 d 給藥7 d假手術(shù)組 0 0治療前 給藥1 d 0 0模型組 8.01±0.71** 6.87±0.64**n 6 6 10.00±0.71 9.16±0.56*化痰通絡(luò)湯組 6 9.87±0.83 8.03±0.86*△ 7.00±0.75**△ 5.19±0.76**△△

2.2 各組大鼠腦梗死體積百分比比較 見表2。腦梗死體積比較顯示，給藥后化痰通絡(luò)湯組腦梗死體積百分比小于模型組，組間比較具有明顯差異（P＜0.05或P＜0.01）。

表2 各組大鼠腦梗死體積百分比比較（%s）

表2 各組大鼠腦梗死體積百分比比較（%s）

組 別 給藥3 d 給藥7 d假手術(shù)組 0 0給藥1 d 0模型組 45.34±4.21 42.73±2.27 n 6 6 50.34±4.69化痰通絡(luò)湯組 6 46.04±2.83*△ 41.01±2.79**△△ 35.06±2.61**△△

2.3 各組大鼠腦組織含水量比較 見表3。與模型組相比，給藥后化痰通絡(luò)湯組腦組織含水量小于模型組，組間比較有顯著差異（P<0.05或P<0.01）。

表3 各組大鼠腦組織含水量比較（%s）

表3 各組大鼠腦組織含水量比較（%s）

組 別 給藥3 d 給藥7 d假手術(shù)組 72.23±6.71 72.12±3.91給藥1 d 71.12±5.50模型組 83.13±7.42* 82.40±6.31*n 6 6 80.41±6.32*化痰通絡(luò)湯組 6 74.80±5.81*△ 77.60±8.13*△ 77.31±3.42*△

2.4 各組大鼠HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表達(dá)比較見表 4，圖 1。 假手術(shù)組 HMGB1、TLR4、NF-κB 蛋白在各時間點表達(dá)均無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05），組內(nèi)各時間點比較顯示，模型組、化痰通絡(luò)湯組給藥1 d、3 d及7 d HMGB1、TLR4、NF-κB 表達(dá)逐漸降低，組內(nèi)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05或P<0.01）?；低ńj(luò)湯組與模型組相應(yīng)時間點組間比較顯示，化痰通絡(luò)湯組HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白在各時間點表達(dá)均低于模型組，組間比較有明顯差異（P<0.05或P<0.01）。

表 4 各組大鼠 HMGB1、TLR4、NF-κB 蛋白表達(dá)比較（s）

表 4 各組大鼠 HMGB1、TLR4、NF-κB 蛋白表達(dá)比較（s）

組 別 時 間 NF-κB假手術(shù)組 1 d 0.11±0.01 HMGB1 TLR4 0.14±0.02 0.21±0.04（n＝6） 3 d 0.09±0.01 0.15±0.02 0.19±0.03 7 d 0.15±0.01 0.20±0.04 0.10±0.01模型組 1 d 1.17±0.10**0.87±0.13** 1.20±0.10**（n＝6） 3 d 0.98±0.08**&&0.53±0.10**&& 0.60±0.08**&7 d 0.40±0.04**&& 0.50±0.06**&& 0.72±0.06**&&化痰通絡(luò)湯組 1 d 0.66±0.03**△△ 0.67±0.05**△ 0.62±0.05**△△（n＝6） 3 d 0.43±0.06**△△&&0.49±0.06**△△&&0.53±0.06**△△&&7 d 0.32±0.02**△△&&0.39±0.07**△△&&0.45±0.07**△△&&

圖1 各組大鼠腦組織HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表達(dá)

2.5 各組大鼠 TNF-α、IL-lβ、IL-6含量比較 見表5。 假手術(shù)組 TNF-α、IL-lβ、IL-6含量在各時間點差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；模型組大鼠患側(cè)腦組織炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6均明顯升高。化痰通絡(luò)湯組與模型組相應(yīng)時間點組間比較顯示，化痰通絡(luò)湯組TNF-α、IL-1β、IL-6含量在各時間點均低于模型組，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。

表 5 各組大鼠 TNF-α、IL-1β、IL-6 含量比較（pg/gs）

表 5 各組大鼠 TNF-α、IL-1β、IL-6 含量比較（pg/gs）

組 別 時間 IL-6假手術(shù)組 1 d 36.44±18.57*TNF-α IL-lβ 72.00±10.96**42.47±11.31*（n＝6） 3 d 36.41±17.97*71.88±10.93**42.49±11.29*7 d 72.03±10.91**42.50±10.89* 35.94±17.82*模型組 1 d 72.10±27.54 136.88±24.60 88.15±11.50（n＝6） 3 d 71.90±25.34 137.18±25.80 87.25±13.80 7 d 135.37±23.80 86.75±13.76 72.23±26.66化痰通絡(luò)湯組 1 d 82.35±14.50**53.87±10.53**42.53±8.69*（n＝6） 3 d 81.15±13.76**52.07±11.06**42.44±9.60*7 d 80.32±17.53**51.21±13.07**41.94±7.62*

3 討 論

腦缺血再灌注損傷后早期產(chǎn)生的炎癥因子構(gòu)成了缺血性損傷向炎癥性損傷轉(zhuǎn)變的基礎(chǔ)，其在缺血級聯(lián)反應(yīng)中的作用越來越受到重視［11］。近年來，隨著臨床和實驗研究的進(jìn)展，已經(jīng)證明多種炎癥因子在缺血性腦損傷發(fā)病過程中起十分重要的作用［12］。研究發(fā)現(xiàn)：腦缺血損傷炎癥病理與HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路相關(guān)炎癥因子密切相關(guān)，其中HMGBl由細(xì)胞核釋放至胞外，與細(xì)胞膜上的Toll樣受體結(jié)合，通過不同途徑激活 NF-κB，誘生炎癥因子 TNF-α、IL-1β、IL-6 等的表達(dá)以及HMGB1的進(jìn)一步釋放，刺激趨化因子、細(xì)胞因子和黏附分子的釋放，破壞上皮屏障，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)并導(dǎo)致炎癥反應(yīng)擴大［13］。

本實驗采用線栓法制造大鼠MCAO模型，通過比較各組大鼠給藥后神經(jīng)功能缺損評分、腦梗死范圍、腦含水量、腦組織HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表達(dá)及炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量，探討了化痰通絡(luò)湯對MCAO大鼠腦組織中信號通路、炎癥因子的影響。結(jié)果顯示：假手術(shù)組在無炎癥刺激狀態(tài)下，各細(xì)胞因子均處于低水平表達(dá)；而模型組大鼠再灌注后缺血側(cè)腦組織出現(xiàn)明顯的梗死灶（P<0.01）、缺血側(cè)腦組織含水量明顯增多 （P<0.01）、 缺血區(qū)腦組織 HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表達(dá)明顯增多 （P<0.01）、缺血區(qū)腦組織TNF-α、IL-1β、IL-6 含量明顯增多（P<0.01），證實炎癥級聯(lián)反應(yīng)參與腦缺血再灌注損傷；化痰通絡(luò)湯對MACO大鼠的影響為：化痰通絡(luò)湯可減少MACO大鼠腦梗死范圍、減輕MACO大鼠腦水腫程度、減少缺血側(cè) HMGB1、TLR4、NF-κB 蛋白的表達(dá)及減少 TNF-α、IL-1β、IL-6的釋放。

中醫(yī)理論認(rèn)為缺血性中風(fēng)的病位在腦，與心肝脾腎密切相關(guān)。其病機則不外“風(fēng)、痰、火、氣、瘀、虛”六端，臨床研究發(fā)現(xiàn)，痰濁和瘀血是缺血性中風(fēng)的主要病理產(chǎn)物和致病因素，而中風(fēng)之痰瘀又與病理狀態(tài)下人體免疫系統(tǒng)及凝血系統(tǒng)等異常反應(yīng)密切相關(guān)［14］。急性腦缺血時 TNF-α、IL-1β、IL-6炎性細(xì)胞因子表達(dá)，局部活化的炎癥反應(yīng)及出血、凝血反應(yīng)等可能均屬于中醫(yī)痰瘀證范疇。現(xiàn)代臨床及實驗研究顯示：痰瘀同治法對急性缺血性中風(fēng)痰瘀阻絡(luò)型的臨床療效確切［15］?；低ńj(luò)湯由陳皮、法半夏、茯苓、枳實、竹茹、膽南星、天麻、僵蠶、全蝎、地龍、雞血藤、熟大黃、甘草、蜈蚣組成。方中以法半夏燥濕化痰，陳皮理氣化痰，二者為君藥合用，增強燥濕化痰之力，體現(xiàn)治痰先理氣，氣順則痰消之意。佐以茯苓健脾利濕，健脾以杜生痰之源，利濕以助化痰之力；膽南星清熱化痰，既助半夏化痰，又息風(fēng)定驚；竹茹善于滌痰，與法半夏相伍，一涼一溫，化痰和胃、除煩止嘔；地龍、蜈蚣、全蝎、僵蠶為蟲類藥，搜風(fēng)通絡(luò)之力極強，均能化痰息風(fēng)、通絡(luò)止痙，其中地龍、蜈蚣、全蝎長于活血通絡(luò)，僵蠶長于化痰息風(fēng)，合而用之，力專而效著；再佐酒大黃通腑、活血逐瘀，腑氣暢通，痰火得以清化；枳實辛苦微寒，消痰除痞、降氣導(dǎo)滯，枳實與陳皮相和，亦為一溫一涼，而理氣化痰之力增強，且與熟大黃合用蕩滌腸胃；再添天麻祛風(fēng)，雞血藤養(yǎng)血活血、通經(jīng)活絡(luò)；甘草益氣健脾，以固其本，使?jié)駸o所聚，痰無所生，兼能調(diào)和諸藥［16］。綜合全方，溫涼兼進(jìn)，共奏具有化痰祛瘀、息風(fēng)通絡(luò)之良效。因此，化痰通絡(luò)湯可以減少缺血性中風(fēng)急性發(fā)作時瘀、痰等病理產(chǎn)物，從而達(dá)到對缺血性中風(fēng)的腦保護(hù)作用。

綜上所述，化痰通絡(luò)湯可能是通過阻斷HMGB1-TLR4-NF-κB信號通路，抑制炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表達(dá)，從而發(fā)揮腦保護(hù)作用。

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Effects of Huatan Tongluo Decoction on HMGB1-TLR4-NF-κB Signal Pathway in Rats with Cerebral Protection in MCAO Rats

YAO Xinyan，WANG Yingchun，GAO Xiaofeng，et al.The First Affiliated Hospital

of Hunan University of Chinese Medicine，Hunan，Changsha 410007，China.

Objective： To explore the protective effect of Huatan Tongluo Decoction on cerebral ischemia reperfusion（MCAO） rats，based on the HMGB1-TLR4-NF-κB signaling pathway.Methods： 54 SD rats were randomly divided into the sham operation group，the model group，Huatan Tongluo Decoction group.The model group and Huatan Tongluo Decoction group

MCAO operation，and were drawn on 1 d，3 d and 7 d after gavage.The neurological deficit score，cerebral infarction volume，cerebral water content，brain tissue HMGB1，the expression of TLR4，NF-κB and inflammatory factor kappa TNF-α，IL-lβ and IL-6 content were compared.Results： The comparison of the neurological deficit scores at each time point showed that Huatan Tongluo Decoction group decreased significantly，compared with the model group，and there was significant difference between groups （P<0.05 or P<0.01）.The comparison of infarction volume showed that the cerebral infarction volume of Huatan Tongluo Decoction group at each time point were less than that of the model group；the comparison between groups had statistical differences （P<0.01）.The expression of HMGB1，TLR4 and NF-κB protein of Huatan Tongluo Decoction group on 1 d，3 d and 7 d were lower than that of the model group，and there was significant difference between groups （P<0.05 or P<0.01）；inflammatory factor TNF-α，IL-lβ and IL-6 content of Huatan Tongluo Decoction group on 1 d，3 d and 7 d was lower than that of the model group，and there was significant difference between groups （P<0.05 or P<0.01）.Conclusion： The protective mechanism of Huatan Tongluo Decoction on the brain of MACO rats may be achieved by the anti-inflammatory reaction and blocking the HMGB1-TLR4-NF-κB signaling pathway.

Ischemic stroke；Huatan Tongluo Decoction；HMGB1-TLR4-NF-κB signaling pathway

R285.5

A

1004-745X（2017）09-1536-05

10.3969/j.issn.1004-745X.2017.09.010

2017-05-06）

中醫(yī)內(nèi)科學(xué)湖南省部共建教育部重點實驗室（ZYNK201508）

△通信作者（電子郵箱：734060164@qq.com）