沈冰冰，唐雪陽(yáng)，陳林，2，張水寒，2，唐純玉

(1.湖南省中醫(yī)藥研究院 中藥研究所，湖南 長(zhǎng)沙 410013；2.湖南省中藥原料質(zhì)量監(jiān)測(cè)技術(shù)服務(wù)中心，湖南 長(zhǎng)沙 410013；3.湖南省抗感染中藥工程技術(shù)研究中心，湖南 長(zhǎng)沙 410116；4.永州特色藥材高效利用創(chuàng)新研究平臺(tái)，湖南 永州 425000；5.湖南時(shí)代陽(yáng)光藥業(yè)股份有限公司，湖南 永州 425000)

天名精全草揮發(fā)油化學(xué)成分的SPME-GC/MS分析△

沈冰冰1，唐雪陽(yáng)1，陳林1，2，張水寒1，2，唐純玉3，4，5*

(1.湖南省中醫(yī)藥研究院 中藥研究所，湖南 長(zhǎng)沙 410013；2.湖南省中藥原料質(zhì)量監(jiān)測(cè)技術(shù)服務(wù)中心，湖南 長(zhǎng)沙 410013；3.湖南省抗感染中藥工程技術(shù)研究中心，湖南 長(zhǎng)沙 410116；4.永州特色藥材高效利用創(chuàng)新研究平臺(tái)，湖南 永州 425000；5.湖南時(shí)代陽(yáng)光藥業(yè)股份有限公司，湖南 永州 425000)

目的：采用固相微萃取(SPME)-GC/MS 聯(lián)用技術(shù)分析天名精全草揮發(fā)油化學(xué)成分。方法：通過(guò)4個(gè)不同的SPME萃取頭(DVB/PDMS、CAR/PDMS、PDMS和PA)，在最佳條件下，對(duì)揮發(fā)油進(jìn)行了化學(xué)成分研究。結(jié)果：總共檢測(cè)出135個(gè)揮發(fā)油化學(xué)成分，DVB/PDMS、CAR/PDMS、PDMS和PA 4種萃取頭分別檢測(cè)出88、77、56和42個(gè)揮發(fā)性成分。其中，酯類和倍半萜類化合物是天名精揮發(fā)油中主要的化學(xué)成分類型。結(jié)論：SPME-GC/MS技術(shù)可快速分析天名精全草揮發(fā)油化合物的類型以及相對(duì)含量，對(duì)天名精的進(jìn)一步研究具有一定指導(dǎo)意義。

天名精；揮發(fā)油；SPME；GC/MS

天名精為菊科天名精屬植物CarpesiumabrotanoidesL.的干燥全草，味苦、辛，性寒，具有清熱解毒、破瘀、殺蟲和止血等功效，其果實(shí)名鶴虱[1]。文獻(xiàn)總結(jié)發(fā)現(xiàn)天名精主要含有倍半萜類化合物[2-3]，具有抗氧化、抗炎、殺蟲、抗腫瘤等功效[4-7]。目前對(duì)于天名精揮發(fā)油化學(xué)成分的研究較少[8]，現(xiàn)采用固相微萃取(SPME)聯(lián)合GC/MS技術(shù)對(duì)天名精揮發(fā)油的化學(xué)成分進(jìn)行分析。

1 儀器與材料

2010/2010 plus氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(日本島津集團(tuán))；AL204型電子天平[梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司]；SPME手動(dòng)進(jìn)樣手柄和4種萃取頭(65 μm DVB/PDMS、75 μm CAR/PDMS、100 μm PDMS和85 μm PA)(美國(guó)Supelco公司)；天名精藥材(湖南時(shí)代陽(yáng)光藥業(yè)股份有限公司)，經(jīng)湖南中醫(yī)藥研究院中藥研究所助理研究員劉浩鑒定為菊科天名精屬植物天名精。

2 方法

2.1 樣品制備

稱取天名精干燥藥材50 g，粉粹，以備用。精密稱取藥材粉末1.000 0 g，于15 mL專用采樣瓶中，置于溫度為60 ℃的水浴鍋中，插入已老化(250 ℃下活化5 min)的裝有萃取頭的手動(dòng)進(jìn)樣器，推出針頭，萃取30 min后取出，立即插入氣相進(jìn)樣口，脫附5 min(250 ℃下)。

2.2 GC-MS條件

GC條件：Rxi-5MS(30 m×0.25 mm，0.25 μm)彈性石英毛細(xì)管柱；載氣為高純氦氣(純度99.999%)；進(jìn)樣口溫度：250 ℃；柱流量：1.0 mL·min-1；升溫程序：初始80 ℃，保持2 min，以6 ℃·min-1升到140 ℃，保持2 min；進(jìn)樣分流比30∶1。電離方式EI；能量70 eV；離子源溫度200 ℃；接口溫度250 ℃；四極桿溫度200 ℃；全掃描模式；掃描質(zhì)量范圍m/z10～500。采用計(jì)算機(jī)譜庫(kù)(NIST)檢索分析化合物，定量采用峰面積歸一化法計(jì)算各揮發(fā)性成分的相對(duì)含量。

3 結(jié)果與討論

3.1 4種SPME萃取頭的總離子流圖比較

通過(guò)前期條件摸索實(shí)驗(yàn)最終確定最佳條件為：萃取時(shí)間30 min、萃取溫度60 ℃、分流比30∶1。在此條件下進(jìn)行不同SPME萃取頭實(shí)驗(yàn)，得到各總離子流圖，如圖1所示。

圖1 4種不同SPME萃取頭的總離子流圖

3.2 揮發(fā)油化學(xué)成分分析

對(duì)4種不同SPME萃取頭進(jìn)行GC/MS分析，通過(guò)NIST譜庫(kù)檢索分析揮發(fā)油的分子式，并且核對(duì)標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖，確定了天名精的135個(gè)揮發(fā)油化學(xué)成分。并且用峰面積歸一化法計(jì)算出各揮發(fā)性成分的相對(duì)含量，結(jié)果見表1。

通過(guò)比較，4種SPME萃取頭檢測(cè)到的揮發(fā)油化合物各類型的相對(duì)含量和數(shù)目，發(fā)現(xiàn)存在一定差異，結(jié)果見表2。DVB/PDMS萃取頭檢測(cè)出其中88個(gè)化合物，占總峰面積95.29%。相對(duì)含量從大到?。乎ヮ惢衔?倍半萜>雜環(huán)化合物>醇類化合物。CAR/PDMS萃取頭檢測(cè)出其中77個(gè)化合物，占總峰面積91.29%，相對(duì)含量從大到小：倍半萜>雜環(huán)化合物>酯類化合物含量>單萜。PDMS萃取頭檢測(cè)出其中56個(gè)化合物，占總峰面積89.59%，相對(duì)含量從大到?。乎ヮ惢衔?倍半萜>雜環(huán)化合物>醇類化合物。PA萃取頭檢測(cè)出其中42個(gè)化合物，占總峰面積91.80%，相對(duì)含量從大到小(酯類化合物>倍半萜>醇類化合物>雜環(huán)化合物)，說(shuō)明酯類和倍半萜類化合物是天名精揮發(fā)油的主要類型成分。另外，分析檢測(cè)出的揮發(fā)油化合物數(shù)目DVB/PDMS>CAR/PDMS>PDMS>PA。

表1 GC/MS分析得到的無(wú)名精全草揮發(fā)油化合物

表1(續(xù))

表1(續(xù))

表1(續(xù))

注：N.D表示未檢測(cè)到

表2 4種SPME萃取頭揮發(fā)油類型的相對(duì)含量和數(shù)目比較

4種SPME萃取頭共同檢測(cè)出了15個(gè)化合物：酮類(植酮)，酯類(異丁酸香葉酯)，單萜(芳樟醇和橙花醇)，倍半萜[(-)-α-蒎烯、β-欖香烯、β-石竹烯、α-律草烯、(S)-β-甜沒(méi)藥烯、d-杜松烯、石竹素、環(huán)氧化蛇麻烯II、Α-畢橙茄醇和桉葉-7(11)-烯-4-醇)]，雜環(huán)化合物(正戊基2-呋喃酮)。其中，DVB/PDMS萃取頭檢測(cè)出的揮發(fā)油主要含有異丁酸香葉酯(19.19%)、丙酸香葉酯(11.56%)、橙花醇(4.46%)、β-石竹烯(5.38%)、d-杜松烯(4.68%)、正戊基2-呋喃酮(11.20%)；CAR/PDMS萃取頭檢測(cè)出的揮發(fā)油主要含有異丁酸香葉酯(10.59%)、丙酸香葉酯(4.16%)、橙花醇(4.33%)、β-石竹烯(8.21%)、佛術(shù)烯(4.18%)、d-杜松烯(4.81%)、正戊基-2-呋喃酮(16.92%)；PDMS萃取頭檢測(cè)出的揮發(fā)油主要含有異丁酸香葉酯(22.29%)、丙酸香葉酯(18.34%)、3-甲基-丁酸-1-乙基-1，5-二甲基-4-己烯酯(5.83%)、β-石竹烯(5.00%)、d-杜松烯(5.59%)，石竹素(4.30%)；PA萃取頭檢測(cè)出的揮發(fā)油主要含有異丁酸香葉酯(15.48%)、3-烯丙基-2-甲氧基苯酚(10.59%)、正戊基2-呋喃酮(12.88%)、5-甲?；?2，4-二甲基吡咯-3-甲腈(9.47%)。研究發(fā)現(xiàn)酯類化合物異丁酸香葉酯和丙酸香葉酯在4種SPME萃取頭中所占的比例都較大，是其主要揮發(fā)油成分。倍半萜類型化合物的相對(duì)含量之和都在前兩位，且數(shù)目最多，是特征性化合物類型，所以該類型化合物是研究天名精這一植物的重要方向。

使用SPME-GC/MS技術(shù)可快速分析出天名精揮發(fā)油化合物的類型以及相對(duì)含量，這為進(jìn)一步研究其化學(xué)成分具有一定指導(dǎo)作用，尤其是研究特征性化合物類型——倍半萜類。

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AnalysisofVolatileConstituentsfromAerialPartofCarpesiumabrotanoidesbySPME-GC/MS

SHEN Bingbing1，TANGXueyang1，CHENLin1，2，ZHANGShuihan1，2，TANGChunyu3，4，5*

(1.InstituteofChineseMateriaMedica，HunanAcademyofChineseMedicine，Changsha410013，China；2.HunanTCMRawMaterialsQualityMonitoringTechnicalServiceCenter，Changsha410013，China；3.HunanAnti-InfectionTCMEngineeringTechnologyResearchCenter，Changsha410116，China；4.YongzhouInnovativeResearchPlatformforEfficientUtilizationofHerbs，Yongzhou425000，China；5.HunanTimesSunshinePharmaceuticalCorp.，Yongzhou425000，China)

Objective：To analyze the volatile constituents from aerial part ofCarpesiumabrotanoidesby solid-phase microextraction (SPME)-GC/MS.Methods：The volatile constituents were analyzed by four different SPME extraction heads (DVB/PDMS，CAR/PDMS，PDMS and PA) under the optimum conditions.Results：A total of 135 volatile constituents were identified.88，77，56 and 42 compounds were detected by DVB/PDMS，CAR/PDMS，PDMS and PA，respectively.Among them，esters and sesquiterpenes were the mainly types in the volatile constituents.Conclusion：SPME-GC/MS can be used to analyze the types of volatile constituents and their relative contents，which was of great significance to the further study ofC.abrotanoides.

CarpesiumabrotanoidesL.；volatile constituents；SPME；GC/MS

中醫(yī)藥公共衛(wèi)生專項(xiàng)(財(cái)社[2011]-76)；湖南省科技計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(2012SK2008)

] 唐純玉，主管中藥師，研究方向：中藥新藥研發(fā)、工藝摸索、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究；E-mail：434733348@qq.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.7.012

2016-12-13)

*[