武彩虹 銀廣悅 錢成榮 田雪梅 徐翠玲 張維

·論著·

血清粘附分子SE-CAD、SE-SEL和sICAM-1 在肺癌診斷中的應(yīng)用*

武彩虹 銀廣悅 錢成榮 田雪梅 徐翠玲 張維

目的 探討可溶性E-鈣黏蛋白（soluble E-cadherin，SE-CAD）、可溶性E選擇素（soluble E-selectin，SESEL）、可溶性細胞間粘附分子1（soluble Intercellular adhesion molecule-1，sICAM-1）在肺癌臨床診斷中的價值。方法選取2011年6月～2014年12月在本院確診的168例患者，均經(jīng)組織學(xué)確診為肺癌，其中小細胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）98例、非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）70例，肺部良性疾病患者和健康自愿者各50例。所有患者采集靜脈血分離血清，采用抗SE-CAD、抗SE-SEL和抗sICAM-1的單克隆抗體試劑盒ELISA方法測定血清粘附分子。結(jié)果 SCLC和NSCLC患者血清SE-CAD、SE-SEL和sICAM-1水平顯著高于健康組和良性疾病組（P﹤0.05），而且腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移（III～IV期）的患者血清SE-CAD水平高于無轉(zhuǎn)移（I～II期）的患者（P﹤0.05），但SE-SEL與sICAM-1與是否發(fā)生轉(zhuǎn)移沒有相關(guān)性。結(jié)論 SE-CAD、SE-SEL和sICAM-1對肺癌臨床診斷具有一定價值，而且SE-CAD可作為判斷腫瘤是否擴散的一個有用指標(biāo)，從而進行療效觀察和愈后評估。

小細胞肺癌 非小細胞肺癌 可溶性E-鈣黏蛋白 可溶性E選擇素 可溶性細胞間粘附分子

肺癌是一種高死亡率的惡性腫瘤，5年生存率＜13%，主要原因就是肺癌一經(jīng)確診往往是晚期。血清學(xué)腫瘤標(biāo)志物是一類在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中由腫瘤細胞產(chǎn)生并釋放到血液的物質(zhì)，有助于腫瘤的早期診斷、療效觀察及預(yù)后評估等?？扇苄匝逭掣椒肿邮歉鞣N蛋白酶對細胞表面粘附蛋白降解的片段，隨著腫瘤細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移，使得腫瘤原發(fā)灶或轉(zhuǎn)移器官黏附分子在結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生改變，從而使血清粘附分子也發(fā)生變化，國內(nèi)外文獻已經(jīng)報道胃、頭頸部、膀胱、前列腺、結(jié)腸及乳腺等部位的腫瘤患者血清粘附分子顯著升高[1]，但有關(guān)肺癌患者SE-CAD、SESEL及sICAM-1水平變化的報道不多。本研究旨在探討血清SE-CAD、SE-SEL和sICAM-1與肺癌的關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

對象與方法

1 對象 2011年6月～2014年12月來本院就診的168例肺癌患者，其中70例NSCLC（腺癌34例，鱗狀細胞癌26例，大細胞癌10例）和98例SCLC，均經(jīng)臨床確診（包括胸片、頭顱、CT、支氣管鏡、骨掃描及病理檢查）。另選取同期體檢健康者和肺部良性疾病組各50例作為健康對照。在選擇研究對象時，使年齡、性別和吸煙的分布情況在3個研究組中大致相同。同時將SCLC患者分為局限型（未轉(zhuǎn)移）和擴散型（已轉(zhuǎn)移），將NSCLC分為Ⅰ～Ⅱ期（無轉(zhuǎn)移）和Ⅲ～Ⅳ期（已發(fā)生轉(zhuǎn)移）。

2 方法 所有受試對象在未接受治療時（手術(shù)、放化療）靜脈采血3 ml置非抗凝管內(nèi)靜置1 h，離心，分離血清–20℃保存?zhèn)溆?。采用抗SE-CAD、抗SE-SEL和抗sICAM-1特異性單克隆抗體試劑盒（購于上?？畦荆?，SE-CAD、SE-SEL檢測采用ELISA方法，全自動酶聯(lián)免疫分析儀（DK1504Tecan公司，瑞士）；采用美國貝克曼庫爾特ALLERRAX-15離心機3000 r/min離心30 min，取上清液，置–20℃保存，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測sICAM-1水平。

3 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS19.0軟件，多組間均數(shù)的比較采用方差分析，兩兩比較采用S-N-K-q檢驗，性別和吸煙與否的構(gòu)成比采用卡方檢驗，聯(lián)合ROC曲線評估3種檢測的臨床應(yīng)用價值，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1 S C L C、N S C L C組與對照組各指標(biāo)的比較SCLC、NSCLC組、肺部良性疾病組與健康組在年齡、性別和吸煙狀況上的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），SCLC、NSCLC組血清粘附分子水平均高于健康組和肺良性疾病組（P＜0.05），NSCLC與SCLC組血清粘附分子水平的差異無統(tǒng)計學(xué)意義，健康組與肺良性疾病組血清粘附分子水平的差異亦無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

2 血清粘附分子水平的比較 不同肺癌組中三種血清粘附分子的水平比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）見表2、圖1。

表1 SCLC、NSCLC組與對照組各指標(biāo)的比較（±s）

表1 SCLC、NSCLC組與對照組各指標(biāo)的比較（±s）

注：a與健康組相比，P＜0.05；a與肺部良性疾病組相比，P＜0.05

指標(biāo)健康組肺部良性疾病NSCLC 組SCLC 組年齡63.5±964.6±7.962.2±11.6 65.1±11.2吸煙：不吸煙 40∶1036∶1453∶1782∶26男：女 41∶938∶1260∶1078∶20 SE-CAD（ng/ml） 960±125.31335±309.23355.4±655.9a 3085.7±501.1aSE-SEL（ng/ml）501±89 854±103.4 1884.5±354.3a1768.3±299asICAM-1（ng/ml）49.8±19107±28.2 920.8±79.3a 899.2±111.6a

表2 不同肺癌組中三種血清粘附分子水平的比較（χ±SD，ng/ml）

討 論

惡性腫瘤的特性表現(xiàn)有腫瘤細胞的無限增殖、細胞的無序分化以及隨著腫瘤細胞侵襲和轉(zhuǎn)移使得腫瘤原發(fā)灶或轉(zhuǎn)移器官粘附分子在結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生改變等。有文獻報道與肺癌相關(guān)的粘附分子主要有E-CAD、ICAM-1和E-SEL，經(jīng)各種蛋白酶降解釋放到血液中成為可溶性血清粘附分子[2]。

E-CAD存在于上皮細胞，參與細胞粘附、表皮組織的生長、形態(tài)維護及信號傳導(dǎo)。SE-CAD分子量約為80～84 KD，是由組織蛋白酶降解組織表面的E-CAD并釋放到血液循環(huán)中的游離片段，由于腫瘤細胞向胞外分泌的蛋白酶增多，故使E-CAD被降解脫落的量增加，從而使患者血清SECAD水平明顯高于正常人。腫瘤組織表面E-CAD被降解的同時，其表面的結(jié)構(gòu)和功能也被破壞，導(dǎo)致腫瘤細胞間的黏附降低或喪失，促使腫瘤細胞侵襲深度和轉(zhuǎn)移增加。本研究中肺癌患者血清SE-CAD水平高于健康組和肺部良性疾病組，而且在SCLC擴散期高于局限期，在NSCLC中III～IV期高于I～II期，均具有統(tǒng)計學(xué)意義，III～IV期與I～II期的區(qū)別在于是否發(fā)生轉(zhuǎn)移，所以血清SECAD不僅可以有助于肺癌的診斷，而且其顯著升高提示腫瘤可能轉(zhuǎn)移，可作為判斷臨床分期、腫瘤轉(zhuǎn)移的間接指標(biāo)，因為早期的轉(zhuǎn)移通過常規(guī)影像不容易被發(fā)現(xiàn)[3-6]。

ICAM-1屬于免疫球蛋白超家族，在多種造血和非造血細胞中表達，包括T細胞、B細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞、成纖維細胞、角質(zhì)形成細胞、內(nèi)皮細胞和一些上皮組織，腫瘤細胞表達的ICAM-1參與機體對腫瘤的免疫應(yīng)答而顯著增加。本研究血清sICAM-1在SCLC與NSCLC患者中的表達高于正常對照組，與以往報道一致，與腫瘤的擴散及轉(zhuǎn)移沒有相關(guān)性。國外有研究發(fā)現(xiàn)臍靜脈內(nèi)皮ICAM-1表達增加，促進SCLC細胞與內(nèi)皮組織的粘附，從而促使腫瘤轉(zhuǎn)移，還有報道ICAM-1可增加惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移能力，發(fā)現(xiàn)血清sICAM-1與腫瘤的分期及進展相關(guān)，關(guān)于sICAM-1與腫瘤轉(zhuǎn)移的相關(guān)性，需要繼續(xù)收集病例進一步研究[7-9]。

E-選擇素（E-SEL）只表達于細胞因子活化的內(nèi)皮細胞，參與機體對腫瘤的免疫應(yīng)答，在腫瘤間質(zhì)的靜脈和毛細血管的上皮細胞中顯著表達，本研究中NSCLC與SCLC患者血清SE-SEL水平顯著高于對照組，國外Roselli等發(fā)現(xiàn)血清SESEL只在發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移的鱗癌中升高[10]，但是本研究未發(fā)現(xiàn)其與SCLC或者NSCLC發(fā)生轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)血清粘附分子SE-CAD、SESEL和sICAM-1在SCLC或NSCLC患者的表達水平高于健康對照組，雖然這三種粘附分子對肺癌的診斷沒有特異性，而且不能代替組織病理學(xué)診斷，但其聯(lián)合檢測有助于提高肺癌診斷的準(zhǔn)確度，尤其在肺癌的早期，更重要的是血清SE-CAD的水平與SCLC或NSCLC發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移具有一定的相關(guān)性，可以用于病情的判斷及預(yù)后評估。未來仍需要收集更多的病例，進一步研究這三種粘附分子對于肺癌診斷、預(yù)后及療效的作用。

圖1 血清SE-CAD、SE-SEL及sICAM-1診斷價值的ROC曲線

1 De Wever O，Derycke L，Hendrix A，et al.Soluble cadherins as cancer biomarkers[J] .Clin Exp Metastasis，2007，24 （ 8 ）：685-697 .

2 G o l d s t r a w P，C r o w l e y J，C h a n s k y K，e t al.International Association for the Study of Lung Cancer International Staging Committee; Participating Institutions.The IASLC Lung Cancer Staging Project：proposals for the revision of the TNM stage groupings in the forthcoming （seventh） edition of the TNM Classifi cation of malignant tumours[J] .Thorac Oncol，2007，2 （ 8 ）：706-714 .

3 Reckamp KL，Gardner BK，F(xiàn)iglin RA，et al.Tumor response to combination celecoxib and erlotinib therapy in non-small cell lung cancer is associated with a low baseline matrix metalloproteinase-9 and a decline in serum-soluble E-cadherin[J].Thorac Oncol，2008，3 （ 2 ）：117-124.

4 Tsaur I，Thurn K，Juengel E，et al.sE-cadherin serves as a diagnostic and predictive parameter inprostate cancer patients[J].Exp Clin Cancer Res，2015，14 （ 34）：43.

5 Charalabopoulos K，Gogali A，Dalavaga Y，et al.The clinical of soluble e-cadherin in nonsmall cell lung cancer[J].Exp Oncol，2006，28 （ 1 ） ：83-85.

6 Tsalikidis C，Papachristou F，Pitiakoudis M，et al.Soluble e-cadherin as a diagnostic and prognostic marker in gastric carcinoma[J].Folia Med，2013，55（3-4） ：26-32.

7 Liu Y，Yu H，Zhang C，et al.Protectiveeffects of berberine on radiation-induced lung injury via intercellular adhesion molecular-1 and transforming growth factor-beta-1 in patients with lung cancer[J]. Eur J Cancer，2008，44（16） ：2425-2432.

8 Qian Q，Zhan P，Yu L，et al. Baseline levels and decrease in serumsoluble intercellular adhesion molecule-1during chemotherapy predict objective response and survival in patients who have advanced non-small-cell lung cancer[J].Clin Lung Cancer，2011，12（2）：131-137.

9 Qian Q，Zhan P，Sun WK，et al.Vascular endothelial growth factor and soluble intercellular adhesion molecule-1in lung adenocarcinoma with malignant pleural effusion：correlations with patient survival and pleural effusion control [J].Neoplasma，2012，59（4） ：433-439.

10 Roselli M，Mineo TC，Martini F，et al .Soluble selectin levels in patients with lung cancer [J].Int J Biol Markers，2002，17 （ 1 ）：56 -62.

Serum Adhesion Molecules SE-Cadherin、SE-Selectin and sIntercellular Adhesion Molecule-1 as Lung Cancer Biomarkers

WU Cai-hong，YIN Guang-yue，QIAN Cheng-rong，
et al.Department of Clinical Laboratory，China Petroleum Natural Gas Group Central Hospital，Langfang，Hebei 065000

Objective In the present study，we investigated the role of soluble E-cadherin （SE-CAD），soluble E-selectin （SE-SEL） and soluble intercellular adhesion molecule-1 （sICAM-1） as biomarkers in lung cancer. Methods 168 patients with recently diagnosed lung cancer，98 with small cell lung cancer（SCLC），and 70 with non-small cell lung cancer （NSCLC），50 cases of patients with benign pulmonary diseases as well as 50 healthy volunteers were enrolled. Blood samples were collected at the time of diagnosis and measurement of soluble adhesion molecules in the serum samples was performed by enzyme-linked immunoassay using monoclonal antibodies against E-cadherin，E-selectin，and ICAM-1. Results Serum levels of SE-CAD，SE-SEL，and sICAM-1 in both SCLC and NSCLC were significantly higher than the healthy subjects and the group with benign pulmonary diseases （P＜0.05）. In addition，patients with SCLC or NSCLC with distant metastasis had a marked increase of SE-CAD（P＜0.05），but no such correlation with SESEL and sICAM-1 was found. Conclusions Our findings suggest that SE-CAD，SE-SEL，and sICAM-1 have an adjunctive diagnostic role in lung cancer. Furthermore，SE-CAD may also have a prognostic value and could be a useful biomarker in the prediction of lung cancer outcome.

SCLC NSCLC SE-CAD SE-SEL sICAM-1

R734.2

A

1671-2587（2017）04-0382-04

2017-02-18）

（本文編輯：王敏）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.04.021

*本課題受河北省廊坊市科技局項目（No.2014013022）資助

065000 廊坊，中國石油天然氣集團公司中心醫(yī)院

武彩虹（1979–），女，內(nèi)蒙古人，主管技師，碩士，主要從事腫瘤免疫方面工作，（Tel）13643161582。

銀廣悅，男，主任技師，主要從事實驗室診斷方面工作，（Tel）0316－2075450（E-mail）rainbowhb@sohu. com。