賈青輝，張召興，張香齋，高桂生，高光平，張艷英，李蘊(yùn)玉，李佩國，史秋梅

（河北科技師范學(xué)院，河北省預(yù)防獸醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北秦皇島 066604）

紫錐菊復(fù)方超微粉對貉生長性能、免疫功能及抗氧化能力的影響

賈青輝，張召興，張香齋，高桂生，高光平，張艷英，李蘊(yùn)玉，李佩國，史秋梅*

（河北科技師范學(xué)院，河北省預(yù)防獸醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北秦皇島 066604）

將120只45日齡體重相近的斷奶仔貉，平均分成4組，I組飼喂基礎(chǔ)日糧，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組在基礎(chǔ)日糧中分別添加0.5%、1.0%、1.5%紫錐菊復(fù)方超微粉，各組在飼喂后的2、4、6、8、10周采血，檢測免疫指標(biāo)及抗氧化能力指標(biāo)。結(jié)果表明：Ⅲ、Ⅳ組提高了平均采食量和日增重、降低了耗料增重比（P＜0.05）；試驗(yàn)組血清IgA、IgM、IgG含量均于高于I組，其中，Ⅲ、Ⅳ組血清中IgA含量顯著高于I組（P＜0.05），Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組血清中IgG含量顯著高于I組（P＜0.05）；各組血清中IgM含量差異不明顯（P＞0.05）；在試驗(yàn)2、4、6周時(shí)，Ⅲ、Ⅳ組血清中總超氧化物歧化酶（T-SOD）活力顯著高于I組（P＜0.05）；Ⅲ、Ⅳ組血清中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活力較I組差異顯著（P＜0.05）；各組血清中總抗氧化能力（T-AOC）活力差異不明顯（P＞0.05）。在本試驗(yàn)條件下，基礎(chǔ)日糧中添加比例1%紫錐菊復(fù)方超微粉能顯著提高貉的生產(chǎn)性能、免疫功能及抗氧化能力，為下一步研發(fā)貉中草藥添加劑提供理論基礎(chǔ)。

貉；紫錐菊復(fù)方超微粉；生產(chǎn)性能；免疫功能；抗氧化能力

貉屬于犬科動(dòng)物屬，我國養(yǎng)殖的貉主要以烏蘇里貉亞種為主[1]。貉皮是制作高檔衣服及裝飾品的原料，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值[2-3]。相關(guān)研究表明，貉膽可以作為藥物使用，貉糞可生產(chǎn)有機(jī)肥料[4]。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，我國貉的養(yǎng)殖數(shù)量逐漸增加，在養(yǎng)殖的過程中一些不合理的養(yǎng)殖模式，長期大量的使用抗生素，導(dǎo)致很強(qiáng)的耐藥性，使貉生產(chǎn)性能降低，造成很大的經(jīng)濟(jì)損失，同時(shí)也威脅著人類的健康[5]。

紫錐菊具有抗腫瘤、抗病毒、抗細(xì)菌等作用，在抗感染免疫中具有很強(qiáng)的作用，被稱為神奇的“免疫植物”，廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖業(yè)中[6-7]。中藥超微粉碎技術(shù)是一種新型的粉碎技術(shù)，可以使中草藥的有效成分更好釋放，提高藥效和生物利用度，廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖業(yè)中[8-9]。本研究旨在探討在日糧中添加不同濃度的紫錐菊復(fù)方超微粉對貉的生長性能、免疫功能及抗氧化能力的影響，為下一步研發(fā)貉綠色飼料添加劑代替抗生素的使用，推廣綠色高效的養(yǎng)殖技術(shù)提供了理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 紫錐菊復(fù)方超微粉由紫錐菊與黃芪組成，按照一定比例，制成超微粉劑型；IgG、IgM、IgA ELISA Kit試劑盒購于Elabscience公司；超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、總抗氧化能力（T-AOC）試劑盒均購于南京建成生物工程公司。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，選擇120只45日齡體重相近的斷奶仔貉，公、母各半，隨機(jī)分成4組，每組30只；I組飼喂基礎(chǔ)日糧，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組在基礎(chǔ)日糧中分別添加0.5%、1.0%、1.5%紫錐菊復(fù)方超微粉。基礎(chǔ)日糧參照NRC（1982）貉營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，飼糧組成及營養(yǎng)成分見表1。試驗(yàn)在昌黎縣毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖基地進(jìn)行，試驗(yàn)期為10周，采用單只籠養(yǎng)給料，自由采食飲水，按常規(guī)的免疫程序進(jìn)行免疫與飼養(yǎng)。

1.3 指標(biāo)測定

1.3.1 生長性能指標(biāo)的測定 從試驗(yàn)開始到結(jié)束分別進(jìn)行斷料空腹稱重，并記錄試驗(yàn)期間飼料的消耗量，計(jì)算平均日增重、日采食量和耗料增重比。平均日增重=（試驗(yàn)?zāi)┢骄w重-開始試驗(yàn)平均體重）/試驗(yàn)天數(shù)；平均日采食量=試驗(yàn)期總耗料量/試驗(yàn)天數(shù)；耗料增重比=平均日采食量/平均日增重。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)成分

1.3.2 免疫指標(biāo)及抗氧化指標(biāo)的檢測 在飼喂后的第2、4、6、8、10周，每組隨機(jī)抽取10只貉，用一次性靜脈采血針和促凝真空采血管在后肢外側(cè)跗關(guān)節(jié)上方隱靜脈采血2 mL，室溫靜置待析出血清后，3 000 r/min離心5 min，取血清，-20℃保存，按說明書檢測免疫指標(biāo)（IgG、IgM、IgA）及抗氧化能力指標(biāo)（T-SOD、GSH-Px、T-AOC）。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-Way ANOVA），采用Duncan’s法進(jìn)行均值比較，以P＜0.05表示差異顯著，試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié) 果

2.1 紫錐菊復(fù)方超微粉對貉生長性能的影響 由表2可知，隨著基礎(chǔ)日糧中添加紫錐菊復(fù)方超微粉濃度的增高，貉的平均采食量、日增重均呈現(xiàn)出先增高后降低的趨勢。Ⅲ組平均日采食量、日增重最高，Ⅲ、Ⅳ組的平均日采食量、平均日增重較I組差異顯著（P＜0.05），Ⅲ、Ⅳ組間差異不顯著（P＞0.05）；耗料增重比呈先降低后升高的趨勢，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的耗料增重比均低于I組，其中Ⅲ、Ⅳ組的耗料增重比顯著降低（P＜0.05），各試驗(yàn)組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 紫錐菊復(fù)方超微粉對貉血清中IgA、IgM、 IgG含量的影響 由表3可知，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組貉血清中IgA含量均高于I組，其中，Ⅲ、Ⅳ組較I組差異顯著（P＜0.05），試驗(yàn)組間差異不顯著（P＞0.05）；其中，Ⅲ組在4、6、8、10周時(shí)較I組分別提高了39.39%、30.95%、28.89%、27.27%（P＜ 0.05）。在不同階段，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組貉血清中IgM含量均高于I組（P＞0.05）。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組貉血清中IgG含量均顯著高于I組（P＜0.05），各試驗(yàn)組間差異不顯著（P＞0.05）；其中Ⅲ組在2、4、6、8、10周時(shí)較I組分別提高了22.86%、26.83%、23.68%、18.60%和26.72%（P＜0.05）。

表3 紫錐菊復(fù)方超微粉對貉血清中IgA、IgM、IgG含量的影響 ng/mL

表4 紫錐菊復(fù)方超微粉對貉血清中T-SOD、GSH-Px、T-AOC活力的影響

2.3 紫錐菊復(fù)方超微粉對貉血清中T-SOD、GSHPx、T-AOC活力的影響 由表4可知，不同階段，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的T-SOD活力均高于I組，其中Ⅲ、Ⅳ組在2、4、6周表現(xiàn)為差異顯著（P＜0.05），Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組之間T-SOD活力差異性不顯著（P＞0.05）；Ⅲ組的T-SOD活力最好，其在2、4、6、8、10周時(shí)較I組分別提高了18.32%、23.58%、19.59%、9.61%和10.41%（P＜0.05）。不同階段，Ⅲ、Ⅳ組的GSH-Px活力較I組差異顯著（P＜0.05），各試驗(yàn)組間GSH-Px活力差異不顯著（P＞0.05）；Ⅲ組的GSH-Px活力最好，其在2、4、6、8、10周時(shí)與I組相比分別提高了17.57%、14.96 %、16.40%、14.60%和13.02%（P＜0.05）。試驗(yàn)不同階段，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組T-AOC的活力均高于I組（P＞0.05），Ⅲ組的T-AOC活力最好，在4、6、8周時(shí)與I組比較分別提高了15.27%、14.81%和14.56%（P＞0.05）。

3 討 論

3.1 紫錐菊復(fù)方超微粉對貉生長性能的影響 許多研究表明，紫錐菊富含揮發(fā)油、有機(jī)酸、多糖等多種活性成分，具有改善機(jī)體免疫功能，降低動(dòng)物的發(fā)病率，從而提高動(dòng)物的生長性能[10]。林秋敏等[11]研究表明，在豬的飼料中添加中草藥，能提高豬的生產(chǎn)性能與免疫功能。本研究表明，在貉的基礎(chǔ)日糧中添加0.5%、1.0%、1.5%劑量紫錐菊復(fù)方超微粉，可以提高貉的平均日采食量、日增重，降低耗料增重比，表明紫錐菊復(fù)方在一定程度上改善了貉的生長性能，其中以1.0%添加量效果最好。與姚維平等[6]報(bào)道的在斷奶仔豬日糧中添加0.5%、1.0%、1.5%劑量紫錐菊復(fù)方可以顯著改善斷奶仔豬生長性能一致。王曉珊[12]報(bào)道了在雞的飼料中添加1.0%紫黃散能明顯提高雞的生長性能與免疫功能。

3.2 紫錐菊復(fù)方超微粉對貉血清中IgA、IgM、IgG含量的影響 IgA具有多種抗體活性，一般出現(xiàn)比較晚，主要由腸系膜淋巴組織中的漿細(xì)胞分泌，在機(jī)體免疫應(yīng)答中起重要作用[13]。IgM是一種具有高效能的抗體，出現(xiàn)最早的抗體，具有很強(qiáng)的免疫活性[14]。IgG是主要的免疫球蛋白，具有含量最高、中和細(xì)菌毒素、抵抗外界病原菌及病毒侵襲等作用，是介導(dǎo)體液免疫的主要免疫球蛋白[14]。本試驗(yàn)證明在貉的基礎(chǔ)日糧中添加1.0%紫錐菊復(fù)方超微粉，可以顯著提高貉血清中的IgA、IgG含量，證實(shí)了紫錐菊復(fù)方超微粉能夠改善貉免疫機(jī)能，提高細(xì)胞與體液免疫水平，從而增強(qiáng)貉抵抗力。這與紫錐菊的藥理作用有很大關(guān)系，紫錐菊多糖能增強(qiáng)單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)功能，增強(qiáng)T、B細(xì)胞免疫功能，能雙向調(diào)節(jié)免疫功能和細(xì)胞因子生成[7]。另外，中藥超微粉碎技術(shù)可以使中草藥的有效成分更好地釋放與利用，從而增強(qiáng)免疫效果。姚維平等[6]報(bào)道，在斷奶仔豬日糧中添加1.0%紫錐菊復(fù)方可以顯著改善斷奶仔豬的免疫功能。葛明等[15]研究表明，日糧中添加1.0%的復(fù)方中草藥可以提高烏蘇里貉的免疫功能。

3.3 紫錐菊復(fù)方超微粉對貉血清中T-SOD、GSHPx、T-AOC含量的影響 仔貉在飼養(yǎng)過程中，以分窩后30 d內(nèi)飼養(yǎng)管理最為關(guān)鍵，這一階段受到的應(yīng)激最為明顯，主要以斷奶、換料、環(huán)境改變和采食量增加等為主，導(dǎo)致動(dòng)物體內(nèi)物質(zhì)新陳代謝出現(xiàn)異常，有害的代謝產(chǎn)物增加，其中包括的氧化自由基，容易發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，對機(jī)體造成不同程度的損傷，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，造成組織細(xì)胞損傷，使動(dòng)物機(jī)體免疫機(jī)能下降[16]。機(jī)體內(nèi)主要的抗氧化酶系統(tǒng)包括T-SOD、GSH-Px、T-AOC等，在體內(nèi)經(jīng)過系列的轉(zhuǎn)化能消除體內(nèi)有害的氧自由基，起到抗氧化、保護(hù)機(jī)體內(nèi)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能，抗氧化能力越強(qiáng)，機(jī)體的抵抗力越強(qiáng)[17]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在基礎(chǔ)日糧中添加1.0%紫錐菊復(fù)方超微粉，能提高貉血清中T-SOD、GSH-Px、T-AOC等抗氧化指標(biāo)活力，說明紫錐菊復(fù)方超微粉能減輕應(yīng)激對仔貉造成的影響，提高貉機(jī)體的抗氧化能力，增強(qiáng)免疫功能。

4 結(jié) 論

在貉的日糧中添加1.0%紫錐菊復(fù)方超微粉，能提高貉的平均采食量、日增重，降低耗料增重比；提高血清中免疫指標(biāo)IgA、IgM、IgG水平及抗氧化能力指標(biāo)T-SOD、GSH-Px、T-AOC活力。

[1] 楊春山. 貉子生長性狀部分候選基因的遺傳學(xué)研究[J]. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2008, (8):1‐4.

[2] 侯志軍, 魏韜, 邢明偉, 等. “白鼻子病”貉血清、被毛微量元素銅、鋅、鐵、硒測定方法的建立及應(yīng)用[J]. 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào), 2010, 30(5): 685‐689.

[3] 王士勇. 梅花鹿、水貂、藍(lán)狐及貉—牛異種體細(xì)胞核移植技術(shù)研究[D]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院, 2014: 3‐4.

[4] 鄭姍姍. 狐、貉胴體營養(yǎng)成分分析的研究[D]. 秦皇島: 河北科技師范學(xué)院, 2015: 23‐30.

[5] 房海, 陳翠珍. 中國食物中毒細(xì)菌[M]. 北京: 科學(xué)技術(shù)出版社, 2014: 193‐196.

[6] 姚維平, 馬少鵬, 李婷婷, 等. 紫錐菊復(fù)方對斷奶仔豬生產(chǎn)性能和免疫功能的影響[J]. 中國獸醫(yī)雜志, 2016, 52(8): 105‐107.

[7] 陳洪亮, 禚寶山, 陳嘉琪, 等. 神奇的“免疫植物”‐紫錐菊[J].飼料研究, 2005, (10): 28‐30.

[8] 張國祖, 王偉偉, 郭振環(huán), 等. 超微微粉碎技術(shù)在獸用中藥現(xiàn)代化生產(chǎn)上的應(yīng)用和前景[J]. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志, 2013, 32(1):58‐59.

[9] Wang C, Wang M Q, Ye S S, et al. Effects of copper loaded chitosan nanoparticles on growth and immunity in broilers[J]. Poult Sci, 2011, 90(10): 2223‐2228.

[10] 徐建忠, 史秋梅, 倪耀娣, 等. 紫錐菊藥理作用的研究現(xiàn)狀[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī), 2010, (7): 41‐42.

[11] 林秋敏, 賴寶色, 林伯全, 等. 復(fù)方中草藥對仔豬免疫功能的效果影響[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī), 2015, (24):144‐146.

[12] 王曉珊. “紫黃散”抗病毒作用及對雞免疫功能影響的研究[D]. 秦皇島: 河北科技師范學(xué)院, 2015:33‐40.

[13] 楊漢春. 動(dòng)物免疫學(xué)[M]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社, 2003:113‐126.

[14] 劉建欣, 鄭昌學(xué). 現(xiàn)代免疫學(xué)‐免疫的細(xì)胞和分子基礎(chǔ)[M]. 北京: 清華大學(xué)出版社, 2002: 153‐160.

[15] 葛銘, 李瑩, 周瑤. 復(fù)方中草藥對烏蘇里貉免疫功能和毛皮品質(zhì)的影響[J]. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志, 2015, (3): 58‐60.

[16] 董亮, 何永志, 王遠(yuǎn)亮, 等. 超氧化物歧化酶SOD的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào), 2013, 15(5): 53‐58.

[17] 李建喜, 楊志強(qiáng), 王學(xué)智. 活性氧自由基在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的生物學(xué)作用[J]. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展, 2006, 27(10): 33‐36.

S865.2+40.5

A

10.19556/j.0258-7033.2017-09-132

2017-03-23；

2017-05-10

科技部星火計(jì)劃項(xiàng)目（2015GA620002）；河北省科技廳科技支撐計(jì)劃（14826613D）；河北省科技廳科技支撐計(jì)劃（16236605D-3）；秦皇島市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院項(xiàng)目（2014-04）

賈青輝（1979-），男，河北圍場人，副教授，博士，主要從事動(dòng)物疫病防控技術(shù)研究，E-mail：qinghuijia@126. com；并列第一作者：張召興，(1988-)，男，河北威縣人，碩士研究生，主要從事動(dòng)物病原微生物及其防控，E-mail：keshiyjszzx0224@126.com

*通訊作者：史秋梅（1965-），女，教授，博士，主要從事動(dòng)物傳染病學(xué)研究，E-mail：shiqiumei@126.com