王征帆
(渭南師范學院 化學與材料學院,陜西 渭南 714099)
大蔥不同部位抗氧化活性研究
王征帆
(渭南師范學院 化學與材料學院,陜西 渭南 714099)
以水和無水乙醇分別提取了大蔥蔥根、蔥白、蔥綠中的活性成分,采用Fenton試劑,通過測定其提取液對羥基自由基的清除率來表示抗氧化性能。研究結(jié)果表明:大蔥不同部位的提取液均具有一定抗氧化作用,其中蔥白水提取物的抗氧化效果最強。
大蔥;羥基自由基;清除率
自由基是人機體本身氧化代謝過程中不斷產(chǎn)生的小微粒[1],在生理狀態(tài)下,如果自由基產(chǎn)生過多或清除過慢,會對生物體產(chǎn)生一系列損害,它們攻擊細胞膜、線粒體膜,與膜中不飽和脂肪酸反應(yīng),造成脂質(zhì)過氧化增強,最終會引起哮喘、擴張性心肌病等疾病,甚至使基因突變,引起老年癡呆、腫瘤、心臟病等,是人體老化等多種疾病產(chǎn)生的元兇。據(jù)報道,在植物體內(nèi)存在一些抗氧化活性成分,它們可以對自由基進行清除。大蔥是百合科蔥屬類植物[2],在我國種植廣泛,大蔥的營養(yǎng)價值與品種之間存在一定差異,在很多報道中都有關(guān)于大蔥中成分和藥用價值的研究,但是大蔥不同部位抗氧化性的研究未見報道。本文用紫外分光光度法測量赤水大蔥不同部位提取液對羥基自由基的清除作用,來探究大蔥不同部位的抗氧化性。
1.1 實驗材料與儀器
大蔥(購于陜西渭南華縣赤水鎮(zhèn));乙醇(分析純);去離子水;硫酸亞鐵;過氧化氫(30%);羅丹明B(分析純);鄰苯二甲酸氫鉀(分析純);鹽酸(分析純);硫酸(分析純)。
DGB/20-002臺式干燥箱 重慶實驗設(shè)備制造廠;680型電熱恒溫水浴鍋 北京器械廠;BS2245型電子天平 上海艾德儀器系統(tǒng)有限公司;PXS-270型精密離子計 上海精密儀器公司;TU-1800PC型紫外可見分光光度計 重慶儀器廠。
1.2 實驗原理
羥基自由基是最活躍的一種活性分子,是一種重要的活性氧,也是由氫氧根失去一個電子所形成的,幾乎可以與所有的生物分子、有機物或無機物發(fā)生各種不同類型的化學反應(yīng),并伴有非常高的反應(yīng)速率常數(shù)和負電荷的親電性。Fenton試劑產(chǎn)生·OH主要過程如下:
Fe2++H2O2→Fe3++OH-+·OH Fe2++·OH→Fe3++OH-。
由于溶液中pH值對Fe2+在溶液中的存在有很大影響,在酸性環(huán)境下Fenton試劑可發(fā)生作用,而在中性和堿性環(huán)境中,不能催化H2O2產(chǎn)生·OH。研究者普遍認為,當pH值在2~4范圍內(nèi)時,效果較好,所以實驗pH設(shè)定在這個范圍內(nèi)。
1.3 材料活性成分的提取
將大蔥初處理,用自來水沖洗干凈,取蔥綠、蔥白、蔥根各自切碎至3個干凈的燒杯中,置于設(shè)定溫度60 ℃的恒溫干燥箱內(nèi)烘干,取出烘干好的樣品,用研砵研磨至粉末狀,在干燥環(huán)境下保存待用[3]。用電子天平稱取蔥白、蔥綠、蔥根0.5000 g各3份,置于貼有蔥白(無水乙醇)、蔥白(水);蔥綠(無水乙醇)、蔥綠(水);蔥根(無水乙醇)、蔥根(水)標簽的錐形瓶中并加入對應(yīng)的溶劑100 mL。將錐形瓶放入45 ℃的恒溫水浴鍋中水浴8 h,水浴后用干凈的濾紙和漏斗分別過濾至250 mL相對應(yīng)的容量瓶中,將濾渣重新倒回錐形瓶中,再倒入100 mL對應(yīng)溶劑,用上述方法處理后過濾至相應(yīng)容量瓶中,定容,待用。
1.4 溶液的配制
稱取4.0953 g的鄰苯二甲酸氫鉀,以水為溶劑定容于100 mL容量瓶中,取HCl溶液(6 mol/L)3.34 mL,同樣方法定容,將2個容量瓶中的溶液充分混合,pH調(diào)節(jié)為2.5,可得緩沖溶液(鄰苯二甲酸氫鉀-HCl);取H2O2溶液(30%)1.2 mL,以水為溶劑定容于500 mL容量瓶中,備用;用電子天平稱取0.0242 g 羅丹明B,以水為溶劑定容至250 mL容量瓶中,備用;用電子天平稱取0.3403 g FeSO4·7H2O,加入0.6 mL稀硫酸(0.5 mol/L)溶解,用水定容至250 mL容量瓶中,備用。
1.5 對羥基自由基清除率的測定
分別移取配制好的羅丹明B溶液2.00 mL和緩沖溶液5.00 mL 置于2個50 mL的容量瓶中,取其任一容量瓶加入2.5 mL Fe2+標準液和2.00 mL H2O2標準液,搖勻后靜置7 min,在554 nm下測量吸光度,記為A;另一瓶中不加,同樣操作下測量其吸光度,記為A0。取9個容量瓶(50 mL)分別加入10.00 mL樣品提取液、2.00 mL羅丹明溶液、5.00 mL緩沖溶液、2.5 mL Fe2+標準液和2.00 mL H2O2標準液,測量吸光度,記為As。提取液對羥基自由基清除率的計算公式為:D=(As-A0)/(A-A0)×100%[4]。
使用以上方法通過水和無水乙醇分別提取0.5000 g蔥白、蔥綠、蔥根的活性物質(zhì),利用所配制的標準液通過1.5的方法測定可計算得赤水蔥不同部位對羥基自由基的清除率,見表1。
表1 提取液對羥基自由基的清除率 %
該實驗以陜西產(chǎn)的赤水大蔥作為實驗材料,用不同的提取液對赤水蔥的蔥綠、蔥白、蔥根進行了提取,以分光光度法測定了其對羥基自由基的清除作用,據(jù)此評價其抗氧化性。由表1實驗數(shù)據(jù)可知,赤水蔥的不同部位對羥基自由基都有不同程度的清除作用,且清除作用各不相同,蔥白(水)提取液對羥基自由基清除率最大,為80.1%;同一部位不同溶劑提取液中蔥白、蔥綠、蔥根3個部位均是水提取液的清除率高于乙醇提取液的清除率;同一提取溶劑不同部位的清除順序為:無水乙醇:蔥綠>蔥根>蔥白;水:蔥白>蔥綠>蔥根。自由基是人體內(nèi)代謝過程中必需產(chǎn)生的,在我們生活的環(huán)境中,到處都充滿著自由基,而過多的自由基會對人體正常細胞和組織進行損壞,進而引起衰老和疾病的產(chǎn)生。實驗結(jié)果表明:大蔥提取物含有大量的抗氧化成分,對自由基有一定的清除作用,抗氧化能力較好,是一種較好的天然抗氧化植物。
[1]劉玉林.生物自由基與疾病[J].黑龍江醫(yī)學,1991(4):44.
[2]楊安,尚麗榮.赤水孤蔥生產(chǎn)技術(shù)[J].中國蔬菜,2005,10(2):167-173.
[3]陶積德,何玉鳳,楊彩霞.豆渣活性成分的提取、改性及應(yīng)用研究進展[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2012(5):702-707.
[4]田益玲,陳冠華,崔同.動力學分光光度法測定中藥對超氧陰離子自由基的清除率[J].光譜學與光譜分析,2005,25(4):617-619.
Research on Antioxidant Activity of Different Parts of Onion
WANG Zheng-fan
(School of Chemistry and Materials, Weinan Normal University, Weinan 714099, China)
Extract the active ingredients from onion roots, stalks and leaves using water and ethanol, through detecting the scavenging rate of hydroxyl radicals in extraction solution to show the antioxidant properties with Fenton reagent. The results show that the extract of onion in different parts has certain antioxidant activity, the antioxidant effect of water extract of onion stalks is the strongest.
onion;·OH;scavenging rate
2017-03-21
陜西省教育廳科研項目(16JK1279);渭南師范學院特色學科項目(14TSXK02)
王征帆(1981-),男,副教授,碩士,研究方向:食品及環(huán)境分析。
TS201.2
A
10.3969/j.issn.1000-9973.2017.09.030
1000-9973(2017)09-0123-02