佟 彤 李愛勇 龔 稻 廖 磊 劉紅旭

(1 首都醫(yī)科大學附屬北京中醫(yī)醫(yī)院心血管科，北京，100010； 2 北京市臨床藥學研究所，北京，100035)

冠心靜膠囊對心梗后抑郁模型大鼠行為學表現(xiàn)及5-HT的影響

佟 彤1李愛勇1龔 稻2廖 磊2劉紅旭1

(1 首都醫(yī)科大學附屬北京中醫(yī)醫(yī)院心血管科，北京，100010； 2 北京市臨床藥學研究所，北京，100035)

目的：觀察冠心靜對心梗后抑郁模型大鼠行為學的影響。方法：通過冠狀動脈結扎后進行慢性輕度不可預見性刺激制造心梗后抑郁模型，測定治療前后大鼠行為學指標以及5-羥色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)變化。結果：模型組大鼠治療后水平及垂直運動分值、體重、液體消耗及糖水偏愛,5-羥色胺水平均明顯低于空白對照組(P<0.01)，與模型組比較，冠心靜組及氟西汀組均能改善大鼠的曠場試驗評分，增加體重，提高糖水偏愛得分及5-HT水平(P<0.05)，2組間比較無明顯統(tǒng)計學意義。結論：冠心靜膠囊可以改善心梗后抑郁大鼠的行為學表現(xiàn)及5-HT水平，其治療雙心疾病的作用值得進一步研究。

冠心靜膠囊；雙心疾?。恍袨閷W；5-羥色胺

急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction，AMI)是冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的危重癥。隨著AMI治療措施的不斷進步，患者病死率逐步下降，AMI患者易出現(xiàn)抑郁情緒引起了臨床醫(yī)生的注意。諸多研究已證實，冠心病與抑郁狀態(tài)緊密相關，冠心病患者易出現(xiàn)抑郁情緒，同時抑郁狀態(tài)也是冠心病的高位因素之一?！半p心疾病”(冠心病及心理疾病)越來越受到人們的重視[1-2]。中成藥冠心靜膠囊具有活血化瘀、通絡止痛、解郁除煩、養(yǎng)心安神的功效，既往臨床研究發(fā)現(xiàn)，冠心靜聯(lián)合常規(guī)治療為主導的治療組，患者心絞痛及抑郁癥狀明顯改善[3]。本文從基礎研究角度出發(fā)，旨在探討其對心梗抑郁模型大鼠行為學及5-HT的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 SPF級雄性大鼠40只，體質量(200±20)g，購于北京維通利華實驗動物技術有限公司。合格證號：SCXK(京)2007-0001。

1.1.2 藥物 冠心靜膠囊(保定中藥制藥有限公司生產，生產批號140520)。鹽酸氟西汀分散片(簡稱氟西汀)(PATHEON FRANCE公司生產，生產批號3081A)。

1.1.3 儀器 Powerlab數(shù)據(jù)采集分析系統(tǒng)，型號：MI870；動物用生物電放大器，型號：ML136；小動物呼吸機：上海奧爾科特生物科技有限公司，型號ALC-V8；Thermo MULTISKAN MK3。

1.2 方法

1.2.1 分組與模型制備 大鼠腹腔注射3%戊巴比妥鈉麻醉，連接小型動物呼吸機行人工呼吸，呼吸頻率90次/min，潮氣量(10～12)mL，呼吸比設為1:1。胸骨左旁第3～4肋間切開皮膚，逐層鈍性分離皮下組織、肌肉，暴露心臟及大血管根部，剪開心包，用6-0 Prolene線結扎前降支血管。結扎部位以下心肌變白搏動減弱，且心電圖II導聯(lián)出現(xiàn)ST段弓背向上明顯抬高為造模成功標志。將手術成功的動物隨機分為空白對照組，模型組，冠心靜組和氟西汀組。

除空白對照組除外，其余各組大鼠連續(xù)10 d每天給予給中慢性輕度不可預見性刺激，第1天160 HZ頻率搖晃5 min；第2天禁食24 h；第3天夾尾1 min；第4天禁水24 h；第5天160 HZ頻率搖晃5 min；第6天4 ℃冰水游泳5 min；第7天行為限制2 h；第8天40 ℃熱應激刺激3 min；第9天晝夜顛倒24 h；第10天夾尾1 min。

1.2.2 給藥方法 術后第2天開始各組動物給藥?？瞻讓φ战M正常喂養(yǎng)，不孤養(yǎng)，每日灌胃給予蒸餾水5 mL/kg。模型組、冠心靜組和氟西汀組均孤籠飼養(yǎng)，模型組按體重灌胃給予蒸餾水，冠心靜組按0.378 g/kg、氟西汀組按2.1 mg/kg灌胃給藥，連續(xù)給藥10 d。

1.2.3 檢測指標與方法 行為學測定：實驗結束并進行24 h的禁食禁水后，進行動物的基礎/純水消耗試驗，同時給予每只大鼠事先定量好的2瓶水：1瓶1%蔗糖水，1瓶純水。60 min后，取兩瓶水定量，計算動物的總液體消耗、糖水消耗、純水消耗、糖水偏愛(糖水偏愛=糖水消耗/總液體消耗×100%)。液體消耗實驗后再次用敞箱試驗對各組動物進行行為學評分。敞箱裝置由木板制成，底面為75 cm×75 cm的正方形并被等分為25個等邊方格，周圍有高40 cm的墻壁，內面用黑漆涂滿。7:30～12:00之間在安靜的房間內進行此項觀察。將大鼠置于中心方格內，觀察大鼠在5 min水平穿越格數(shù)(4爪均進入的方格方可記數(shù))記為水平運動得分、豎立次數(shù)(兩前爪騰空或攀附墻壁即可記數(shù))為垂直運動得分。徹底清潔敞箱后再進行下1只大鼠的觀察。通過比較大鼠水平運動和豎直運動評分。

5-HT水平的測定：大鼠麻醉后心臟取血5 mL置于EP管重靜置30 min，2 000 r/min離心5 min分離血清，-80 ℃凍存?zhèn)溆?，酶?lián)免疫吸附法測定血清中5-HT的含量。

1.3 統(tǒng)計學方法 數(shù)據(jù)采用SPSS 15.0統(tǒng)計軟件包(PN：32119001，SN：5045602)進行分析。實驗結果以均數(shù)±標準差表示，使用student-Newman-Keuls Test法進行組間差異性比較。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義，以P<0.01為差異有顯著統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 冠心靜對心梗抑郁模型大鼠曠場試驗評分的影響 實驗顯示，模型組大鼠治療后水平及垂直運動分值明顯低于空白對照組(P<0.01)，與模型組比較，冠心靜組及氟西汀組均能改善大鼠的水平和垂直運動得分(P<0.05)，2組間比較無統(tǒng)計學意義。見表1。

表1 冠心靜對心梗抑郁模型大鼠曠場試驗評分的影響(分

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.05；與空白對照組比較，△P<0.05，△△P<0.01

2.2 冠心靜對心梗抑郁模型大鼠體重及糖水偏愛的影響 實驗顯示，模型組大鼠治療后第8天及第11天測量體重均低于空白對照組(P<0.01)，且總液體消耗及糖水偏愛也顯著低于空白對照組(P<0.01)。冠心靜組及氟西汀組在模型大鼠體重增長方面優(yōu)于模型組(P<0.01)，且2組大鼠的糖水偏愛得分均高于模型組(P<0.05)。2組間比較無統(tǒng)計學意義。見表2。

2.3 冠心靜對心梗抑郁模型大鼠血清中5-HT的影響 實驗顯示，模型組大鼠血清中5-HT顯著下降，與空白對照組比較具有統(tǒng)計學意義。經(jīng)過冠心靜及氟西汀干預后，大鼠血清中5-HT均有不同程度的升高，與模型組有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)，但2組間無統(tǒng)計學意義。

表2 治療前后各組大鼠體重、液體消耗及糖水偏愛的比較

注：給藥組與模型組比較，*P<0.05，**P<0.05；與空白對照組比較，△P<0.05，△△P<0.01

表3 實驗各組大鼠血清5TH含量比較

注：給藥組與模型組比較，**P<0.01；模型組與空白對照組比較，△△P<0.01

3 討論

冠心病與抑郁癥之間有著緊密的聯(lián)系，許多心血管疾病的患者合并心理問題，特別是冠心病、心絞痛合并情緒障礙的患者具有較高的死亡率和較差的預后[4]。有資料顯示，心血管疾病并發(fā)情緒障礙的概率為8%～44%[5]，而在心肌梗死后，合并抑郁的發(fā)生率則可達到45%左右[6]，且抑郁程度與死亡率之間存在線性關系[7]，數(shù)據(jù)顯示，心梗后合并有抑郁癥的患者24個月內風險較正常人提高1.6～2.7倍[8]。但多年來該癥始終未受到充分重視，發(fā)病機理尚不明確，這在一定程度上影響了冠心病合并抑郁疾病治療策略的制定[3,9]。

冠心靜膠囊由丹參、赤芍、川芎、紅花、玉竹、三七、人參、蘇合香及冰片9種中藥組成。臨床證明其可以明顯改善冠心病常見癥狀，包括胸悶、胸痛、心悸、氣短、心煩、失眠等心臟和心理癥狀，起到調神和調心雙重治療作用[10]。其中丹參為君藥，有活血化瘀、清心除煩、養(yǎng)血安神之功；川芎、赤芍、紅花、三七、人參共為臣藥，起到活血化瘀、通絡止痛、補氣生津之效；佐藥玉竹有清熱養(yǎng)陰之功；使藥為蘇合香及冰片，兩藥可解郁開竅止痛。諸藥合用，共奏活血化瘀、通絡止痛、解郁除煩、養(yǎng)心安神的作用。現(xiàn)代研究證明，冠心靜膠囊治療“雙心疾病”的作用機理主要是改善心肌供血和鎮(zhèn)靜抗抑郁作用[10]。

慢性不可預見性溫和應激模型與人類抑郁癥臨床特征相似，被廣泛應用為抑郁動物模型[11]。本實驗通過冠狀動脈結扎法制作心肌梗死模型，并通過慢性輕度不可預見刺激模型模擬心梗后抑郁狀態(tài)。通過冠心靜進行藥物干預，觀察模型大鼠的行為學變化，采用曠場實驗評分，糖水偏愛觀察評價大鼠心肌梗死后行為學變化情況。糖水偏好可以反映動物的獎賞反應程度，糖水偏愛降低是衡量快感缺乏的有效客觀指標。水平活動得分反映動物的活動度，垂直活動則反映動物對新鮮環(huán)境的好奇程度。3者是對動物行為學評價的重要指標[12]。1965年Schildkraut JJ首次提出抑郁癥發(fā)病的單胺遞質學說以來，5-HT被認為是與抑郁癥發(fā)生關系最為密切的腦內單胺神經(jīng)遞質，其具有調節(jié)情感、睡眠、記憶、食欲、體溫、下丘腦-垂體-內分泌等多種功能。在5-HT的合成，釋放，轉運，再攝取過程中的任何一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)異常都會導致抑郁癥的發(fā)生，腦內5-HT的減少直接與精神及情緒變化有關，它還可以通過影響其他遞質的活動誘發(fā)抑郁癥[13]。

實驗結果顯示與模型組大鼠水平及垂直運動分值明顯低于對照組，且體重下降，總液體消耗及糖水偏愛也較對照組降低，表明心梗后大鼠活動度以及對外界新鮮環(huán)境的好奇程度下降，快感缺乏，說明大鼠出現(xiàn)了心梗后抑郁狀態(tài)。比較之下，冠心靜可以顯著改善心梗抑郁大鼠的曠場水平及垂直運動得分，增加大鼠體重，增加糖水偏愛得分，大鼠的行為學表現(xiàn)顯著得到改善。同時，大鼠的血清中5-HT水平也顯示，在模型組中大鼠5-HT水平顯著下降，與行為學的變化相吻合，而冠心靜及氟西汀組大鼠血清中的5-HT含量則高于模型組，2組間未見顯著統(tǒng)計學意義，提示冠心靜可以改善心梗后抑郁狀態(tài)從而改善預后，而其作用機理值得進一步研究。

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(2016-08-19收稿 責任編輯：徐穎)

Effects of Guanxinjing Capsule on Behavioral Manifestations And Level of 5-hydroxytryptamine in Post-myocardial Infarction Depression Model Rats

Tong Tong1, Li Aiyong1, Gong Tao2, Liao Lei2, Liu Hongxu1

(1BeijingHospitalofTraditionalChineseMedicine,AffiliatedwithCapitalMedicalUniversity,departmentofcardiology,Beijing100010,China; 2BeijingInstituteofTraditionalChineseMedicine,Beijing100035,China)

Objective:To observe the effects of Guanxinjing(GXJ) capsule on behavioral phenomenon of post-myocardial infarction depression model rats. Methods:Model was induced by chronic mild and unpredictability stress after coronary artery ligation in rats, and behavior index of rats as well as the level of 5-HT before and after treatment was measured respectively. Results:The score of horizontal and vertical motion score, weight, rate of liquid consumption, sucrose preference test score and level of 5-HT in model group were significantly lower than blank control group(P<0.01). Compared with model group, the GXJ capsule group and fluoxetine group can improve the score of open field test, increase the body weight of rats, and improve the sucrose preference test score as well as the level of 5-HT(P<0.05). There was no significant difference between the two groups. Conclusion:GXJ capsule can improve behavioral manifestations and 5-HT level of post-myocardial infarction depression model rats. Further study on GXJ capsule treating psycho-Cardiological disease is worthy to go on.

Guanxinjing capsule; Psycho-Cardiological disease; Behavioral manifestations; 5-hydroxytryptamine

佟彤(1986.07—)，女，碩士，主治醫(yī)師，研究方向：心血管疾病中西醫(yī)結合治療研究，Tel：(010)52176633，E-mail：tongtong7200@163.com

劉紅旭(1963.01—)，男，本科，主任醫(yī)師，研究方向：心血管疾病中西醫(yī)結合治療研究，Tel：(010)52176633，E-mail：lhx_@263.net

R277.7；R242

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2017.08.040