薛 明 王永莉 達(dá)春水

(1 寶雞市中醫(yī)醫(yī)院兒科，寶雞，721001； 2 寶雞市中醫(yī)醫(yī)院急診，寶雞，721001)

茵陳五味湯對(duì)新生兒感染性黃疸的療效及作用機(jī)制

薛 明1王永莉2達(dá)春水1

(1 寶雞市中醫(yī)醫(yī)院兒科，寶雞，721001； 2 寶雞市中醫(yī)醫(yī)院急診，寶雞，721001)

目的：觀察茵陳五味湯對(duì)新生兒感染性黃疸的療效及作用機(jī)制，并觀察其對(duì)hs-CRP和MCP-1基因表達(dá)的影響。方法：選取于2016年1月至2017年2月寶雞市中醫(yī)醫(yī)院兒科收治的新生兒感染性黃疸患者的76例。通過(guò)隨機(jī)分組法，分別將患者納入觀察組和對(duì)照組，每組38例，對(duì)照組：藍(lán)光治療聯(lián)合頭孢唑林鈉；觀察組：在對(duì)照組基礎(chǔ)上，口服茵陳五味湯，療程5 d。對(duì)患者進(jìn)行療效評(píng)定的同時(shí)采用經(jīng)皮黃疸儀于患兒眉心處每日早晚各檢測(cè)3次，分別取平均值作為患兒的經(jīng)皮膽紅素值(TCB)。治療前后乳膠免疫比濁法檢測(cè)血清hsCRP(超敏C反應(yīng)蛋白)，采用分立式全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)患兒治療前后白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)。TaqMan熒光探針檢測(cè)單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)基因表達(dá)情況。結(jié)果：1)2組治療前后的療效進(jìn)行比較，觀察組總有效率(97.37%)優(yōu)于對(duì)照組(94.74%),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。2)治療后2組經(jīng)皮膽紅素值均較治療前明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，觀察組該值下降程度明顯優(yōu)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。3)治療前2組hs-CRP、WBC、MCP-1比較均差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。2組hs-CRP、WBC均較治療前明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，治療后觀察組hs-CRP、WBC、MCP-1下降程度均明顯優(yōu)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論：茵陳五味湯能有效改善新生兒感染性黃疸，降低經(jīng)皮膽紅素值和WBC計(jì)數(shù)，其機(jī)制可能與s-CRP、MCP-1下調(diào)有關(guān)。

茵陳五味湯；新生兒感染性黃疸；療效；作用機(jī)制

新生兒黃疸是鑒于新生兒時(shí)期的常見(jiàn)癥狀之一，80%足月兒均可發(fā)生本病[1]。臨床以皮膚、黏膜及鞏膜黃染，由體內(nèi)膽紅素積聚引起，多因感染、溶血、膽道發(fā)育畸形等因素導(dǎo)致，其中感染是新生兒病理性黃疸的主要病因。新生兒感染性黃疸屬于中醫(yī)學(xué)“胎黃”“胎疸”等范疇，宋代《小兒藥證直訣》一書中寫到：“諸疸皆熱”，認(rèn)為小兒純陽(yáng)之體，正如“陽(yáng)常有余，陰常不足”之理念，素體內(nèi)熱偏盛，脾胃濕熱易于內(nèi)伏，導(dǎo)致肝膽氣機(jī)受阻，濕熱內(nèi)蘊(yùn)疏泄失調(diào)，而膽汁外溢，出現(xiàn)全身皮膚發(fā)黃的相關(guān)癥狀[2-3]。故清熱祛濕，調(diào)達(dá)氣機(jī)是治療新生兒感染性黃疸的主要治療原則，基于此，本團(tuán)隊(duì)在藍(lán)光結(jié)合頭孢唑林鈉的基礎(chǔ)上加用茵陳五味湯，證實(shí)茵陳五味湯對(duì)新生兒感染性黃疸確有理想療效，為了進(jìn)一步探析其治療機(jī)制，我們進(jìn)一步治療觀察，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取于2016年1月至2017年2月之間，在寶雞市中醫(yī)醫(yī)院兒科住院就診并確診為新生兒感染性黃疸患者的76例。通過(guò)隨機(jī)分組法，分別將患者納入觀察組和對(duì)照組，每組各38例，其中觀察組女18例，男20例；胎齡38～70周，平均胎齡(40.29±12.53)周；平均體重(5.41±0.26)kg；對(duì)照組女17例，男21例；胎齡40～70周，平均胎齡(40.67±10.42)周；平均體重(5.50±0.34)kg。2組患者在胎齡、性別、體重等方面，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 1)西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn):參照第四版《實(shí)用新生兒學(xué)》中新生兒病理性黃疸所制定的有關(guān)新生兒感染性黃疸診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；2)中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)1994年國(guó)家中醫(yī)藥管理局制度的《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》及2002年《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》制定黃疸濕熱內(nèi)蘊(yùn)證的診斷及療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)[5-6]。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn) 1)符合上述中西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)，且只選足月兒；2)血象和尿培養(yǎng)均支持細(xì)菌感染；3)經(jīng)皮膽紅素足月兒>12.9 mg/dL，且每天上升量>5 mg/dL；4)經(jīng)過(guò)院倫理委員會(huì)同意，并簽署知情同意書。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn) 1)不符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)及納入標(biāo)準(zhǔn)者；2)低于2.5 kg出生體重的新生兒；3)需要進(jìn)行外科手術(shù)治療的高結(jié)合膽紅素血癥患者；4)新生兒溶血性黃疸需要進(jìn)行換血治療的患兒。

1.5 治療方法 1)對(duì)照組：藍(lán)光治療聯(lián)合頭孢唑林鈉(國(guó)藥準(zhǔn)字H13021636，中諾藥業(yè)有限公司)加入100 mL生理鹽水靜脈滴注,每次50 mg/kg,Q12 h/次，共治療5 d。2)觀察組：在對(duì)照組基礎(chǔ)上，口服茵陳五味湯，茵陳10 g、梔子5 g、黃芩5 g、板藍(lán)根5 g、大黃2 g，濃縮水煎劑，母乳或配方奶粉喂養(yǎng)前30 min口服2.5 mL，8次/d，共治療5 d。

1.6 觀察指標(biāo)

1.6.1 經(jīng)皮膽紅素檢查 采用經(jīng)皮黃疸儀于患兒眉心處每日早晚各檢測(cè)3次，分別取平均值作為患兒的經(jīng)皮膽紅素值(TCB)，以觀察患兒TCB的變化。特別注意納入的患兒中，若出現(xiàn)TCB短時(shí)間內(nèi)迅速升高且超過(guò)18 mg/dL，需及時(shí)脫落并根據(jù)患兒病情改變治療方案。

1.6.2 感染性指標(biāo)檢測(cè) 患兒晨起空腹時(shí)采血2 mL，治療前后血清hsCRP(超敏C反應(yīng)蛋白)在QuikRead CRP分析儀(上海科華生物工程股份有限公司)，采用乳膠免疫比濁法檢測(cè)，hsCRP試劑盒購(gòu)于上海西塘生物試劑有限公司。采用分立式全自動(dòng)生化分析儀(北京奕瑞祥科技有限公司)檢測(cè)患兒治療前后白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)。

1.6.3 TaqMan熒光探針檢測(cè)單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)基因表達(dá) 治療前后2組空腹采集4 mL靜脈血，根據(jù)DNA提取試劑盒操作提取DNA，MCP-1的引物序列為F：5‘CAGGAGACCGAGACCGACC-3’，R：5‘GTGTCTCCGCCGTCCCTCTA-3’，因此合成MCP-1的TaqMan熒光探針(美國(guó)ABI公司)，根據(jù)TaqMan熒光探針試劑盒進(jìn)行操作，預(yù)變性、循環(huán)、變性、退火、延伸和循環(huán)進(jìn)行檢測(cè)。GAPDH作為內(nèi)參，結(jié)果用2-△△Ct值表示并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

1.7 療效判定標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》制定臨床療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)。痊愈：黃疸消退，經(jīng)皮膽紅素值在正常值范圍內(nèi)；顯效：黃疸明顯減輕，僅面部有輕度黃染，但經(jīng)皮膽紅素值尚未恢復(fù)正常范圍內(nèi)；無(wú)效：黃疸未見(jiàn)明顯消退，面部、軀干、鞏膜及手足心均有明顯黃染，經(jīng)皮膽紅素值維持高值或進(jìn)行性升高。

2 結(jié)果

2.1 2組療效比較 2組治療前后的療效進(jìn)行比較，觀察組總有效率(97.37%)優(yōu)于對(duì)照組(94.74%),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

2.2 2組治療前后經(jīng)皮膽紅素值比較 對(duì)2組治療前后的經(jīng)皮膽紅素值進(jìn)行比較，2組均較治療前明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，治療后觀察組下降程度明顯優(yōu)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表1 2組療效比較[例(%)]

表2 2組治療前后經(jīng)皮膽紅素值比較

注：與治療前比較，*P<0.05；與對(duì)照組比較，△P<0.05

2.3 2組治療前后感染性指標(biāo)分析 治療前2組hs-CRP、WBC比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。2組hs-CRP、WBC均較治療前明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，治療后觀察組hs-CRP、WBC下降程度均明顯優(yōu)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 2組治療前后hs-CRP、WBC計(jì)數(shù)的比較

注：與治療前比較，*P<0.05；與對(duì)照組比較，△P<0.05

2.4 2組治療前后MCP-1基因表達(dá)情況 對(duì)2組治療前后的MCP-1基因表達(dá)情況進(jìn)行比較，2組MCP-1基因表達(dá)均較治療前明顯下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，治療后觀察組MCP-1基因表達(dá)下調(diào)程度明顯優(yōu)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表4和圖1。

表4 2組MCP-1基因的2-△△Ct比較

注：與治療前比較，*P<0.05；與觀察組比較，△P<0.05

3 討論

新生兒感染性黃疸屬于新生兒病理性黃疸的一種，主要因?yàn)楦腥緦?dǎo)致新生兒時(shí)期體內(nèi)膽紅素水平異常升高，臨床上多出現(xiàn)皮膚發(fā)黃、小便黃等癥狀[7]。其發(fā)病機(jī)制主要有細(xì)菌、病毒、支原體等感染因素，在我國(guó)細(xì)菌感染是臨床上最多見(jiàn)的，感染造成新生兒的紅細(xì)胞被加速破壞或肝功能代謝異常，增加了血中膽紅素的來(lái)源，嚴(yán)重者可能威脅新生兒的生命[8-10]。查閱諸多古代醫(yī)賢著作，《幼科全書》一文指出：“凡小兒生下遍身面目皆黃，狀如金色，身上壯熱，大便不通，小便如梔子汁，乳食不思，此胎黃也?！毙律鷥撼錾院?，因其“陽(yáng)常有余，陰常不足”的體質(zhì)，加上外感濕邪，合而致濕熱邪困遏脾胃，壅塞肝膽，氣機(jī)逆亂疏泄失常，膽汁泛溢肌膚而發(fā)生黃疸；張仲景在《景岳全書》中寫到“脾色必黃，瘀熱以行”，明確指出單純的濕邪不能導(dǎo)致皮膚發(fā)黃，脾屬土，土為黃色，逼土色外現(xiàn)必以“濕熱淤積”為前提[11-14]。新生兒臟腑嬌嫩，行氣未充，脾運(yùn)不健，濕熱內(nèi)蘊(yùn)，輸泄無(wú)門，蘊(yùn)于內(nèi)而發(fā)于外，出現(xiàn)面黃、膚黃、目黃、便黃等癥狀?；诖宋覀冋J(rèn)為清熱祛濕，調(diào)達(dá)氣機(jī)是治療新生兒感染性黃疸的主要治療原則。

圖1 MCP-1熒光PCR擴(kuò)增曲線

本研究我們?cè)谒{(lán)光聯(lián)合唑林鈉治療基礎(chǔ)上加用茵陳五味湯，結(jié)果顯示觀察組臨床總有效率優(yōu)于單純藍(lán)光聯(lián)合唑林鈉治療，這說(shuō)明茵陳五味湯與藍(lán)光聯(lián)合唑林鈉共同治療新生兒感染性黃疸更可發(fā)揮治療效果。茵陳五味湯由茵陳、梔子、黃芩、板藍(lán)根、大黃等藥物組成，目前不乏其臨床上治療效果的報(bào)道，因其不良反應(yīng)小而逐漸受到臨床的重視。《藥性賦》云：茵陳“苦、辛、微寒”，主黃疸而利水，加之歸脾、胃、肝、膽經(jīng)，可通過(guò)清利脾胃濕熱，利水退肝膽之黃，現(xiàn)代藥理學(xué)研究顯示茵陳具有利膽保肝雙重功效；梔子是衛(wèi)生部頒布的第1批藥食兩用的中藥材，能清利下焦肝膽濕熱；黃芩有清熱瀉火之功，同時(shí)可祛濕熱；板藍(lán)根“苦、寒、無(wú)毒”，且諸多古籍證實(shí)該藥有清熱解毒，涼血燥濕的功效，加之其入肝經(jīng)，有清肝經(jīng)血分之熱的功效；板藍(lán)根與黃芩連用可相得益彰之功，現(xiàn)代藥理學(xué)顯示黃芩和板藍(lán)根均有抗菌消炎，抗氧化保肝的功效。大黃瀉火除脾胃肝膽之濕熱于大腸，可謂釜底抽薪之舉[15-17]。諸藥合用，共奏清瀉脾胃肝膽之濕熱，調(diào)達(dá)氣機(jī)去黃。研究結(jié)果顯示，對(duì)2組治療前后的經(jīng)皮膽紅素值進(jìn)行比較，治療后2組均較治療前明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，治療后觀察組下降程度明顯優(yōu)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

在進(jìn)一步治療機(jī)制探討中我們對(duì)新生兒的hs-CRP、WBC計(jì)數(shù)和MCP-1等指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示茵陳五味湯可明顯降低hs-CRP、WBC計(jì)數(shù)和MCP-1的水平。CRP是急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，通過(guò)激活補(bǔ)體系統(tǒng)，加強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬能力而導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生炎性反應(yīng)，而hs-CRP并不是另外一種CRP，而只是用更先進(jìn)的超敏檢測(cè)手段檢測(cè)CRP的表達(dá)情況，有文獻(xiàn)顯示新生兒感染性黃疸發(fā)生初期即可出現(xiàn)hs-CRP水平的急劇升高[18-19]，本研究結(jié)果也證實(shí)了這一觀點(diǎn)，治療前2組hs-CRP表達(dá)水平均較高，而茵陳五味湯可顯著改善這一狀態(tài)。研究中亦顯示W(wǎng)BC計(jì)數(shù)在新生兒感染性黃疸的發(fā)病初期明顯升高，超過(guò)正常值范圍，這一現(xiàn)象亦和新生兒感染性黃疸多由細(xì)菌引起相符，而茵陳五味湯可顯著糾正WBC計(jì)數(shù)的異常狀態(tài)，說(shuō)明茵陳五味湯的抗菌、抗感染療效顯著，這一療效的機(jī)制可能與下調(diào)MCP-1的表達(dá)有關(guān)。本研究中顯示茵陳五味湯較治療前下調(diào)MCP-1基因的表達(dá)，且下調(diào)程度優(yōu)于對(duì)照組。趨化性細(xì)胞因子家族是一類具有趨化活性的針對(duì)單核細(xì)胞和T細(xì)胞的小分子多肽，其中單核細(xì)胞趨化蛋白-1(Monocyte Chemotactic Protein-1，MCP-1)是β亞家族的代表，可趨化單核細(xì)胞[20]。本研究茵陳五味湯在趨化和激活單核細(xì)胞的過(guò)程中，通過(guò)募集各種炎性反應(yīng)細(xì)胞到病菌感染集中的部位，釋放組胺，啟動(dòng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用，調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)殺傷病菌，從而達(dá)到抗感染的療效作用，保護(hù)新生兒機(jī)體的內(nèi)環(huán)境平衡。

總之，茵陳五味湯能有效改善新生兒感染性黃疸，降低經(jīng)皮膽紅素值和WBC計(jì)數(shù)，其機(jī)制可能與s-CRP、MCP-1下調(diào)有關(guān)。

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(2017-05-05收稿 責(zé)任編輯：張文婷)

Effect of Yinchen Wuwei Decoction on Neonatal Jaundice Infection and its Mechanism

Xue Ming1, Wang Yongli2, Da Chunshui1

(1PediatricSpecialistClinicofBaojiChineseMedicineHospital,Baoji721001,China; 2Emergency
DepartmentofBaojiChineseMedicineHospital,Baoji721001,China)

Objective:To observe the effect of Yinchen Wuwei decoction on neonatal jaundice infection, and its effect on hs-CRP and MCP-1 gene expression.Methods:A total of 76 cases of neonatal infectious jaundice in our hospital from January 2016 to February 2017 were selected.The patients were randomly divided into treatment group and control group, with 38 cases in each group.Treatment for the control group:blue light treatment combined with cefazolin sodium; Treatment for the treatment group:on the basis of the control group, orally taken Yinchen decoction of five ingredients.After a course of 5 days, the clinical efficacy was assessed at the same time using transcutaneous jaundice meter between children eyebrows for 3 times in the morning and evening.The average value is taken as the children with transcutaneous bilirubin (TCB).Before and after treatment, the serum hsCRP (high sensitivity C reactive protein) was detected by latex immunoassay, and the white blood cell count (WBC) before and after treatment was detected by the automatic biochemical analyzer.The expression of monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) gene was detected by TaqMan fluorescent probe.Results:1) The curative effect was compared between the two groups before and after treatment.The total effective rate of the treatment group (97.37%) was higher than that of the control group (94.74%), but there was no significant difference (P>0.05) .2) After treatment, the values of transcutaneous bilirubin in the two groups were significantly lower than those before treatment (P<0.05), the treatment group was significantly lower than the control group (P<0.05).3) There was no significant difference in hs-CRP, WBC and MCP-1 between the two groups before treatment (P>0.05).After treatment, hs-CRP and WBC of the two groups were significantly lower (P<0.05).After treatment, hs-CRP, WBC, MCP-1 decreased significantly, and it is more obvious in the observation group (P<0.05).Conclusion:Yinchenwuwei decoction can effectively relieve neonatal jaundice infection, reduce the percutaneous value and the count of WBC, the mechanism may be related to down-regulation of s-CRP and MCP-1.

Yinchen Wuwei decoction; Neonatal jaundice infection; Curative effect; Mechanism

寶雞市衛(wèi)計(jì)局項(xiàng)目(2015-23)——“補(bǔ)腎益肝、顧護(hù)脾胃”為主的強(qiáng)調(diào)內(nèi)因治療新生兒陽(yáng)黃的臨床觀察 作者簡(jiǎn)介：薛明(1970.07—)，男，學(xué)士，在職研究生，副主任醫(yī)師，研究方向：外感高熱及新生兒黃疸、嬰幼兒腹瀉等中西醫(yī)療效觀察，Tel:(0917)3662933，E-mail:caomandr@163.com

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10.3969/j.issn.1673-7202.2017.08.031