徐尉力，聶 穩(wěn)，張凱麗，郭海南，朱守明，馬國祥，王志兵*

基于離子液體的基質(zhì)固相分散萃取結合高效液相色譜法測定肌肉組織中的氟喹諾酮類抗生素

徐尉力，聶 穩(wěn)，張凱麗，郭海南，朱守明，馬國祥，王志兵*

（長春工業(yè)大學化學與生命科學學院，吉林 長春 130012）

將基質(zhì)固相分散、離子液體均相液-液微萃取和高效液相色譜法相結合，建立一種用于肌肉組織中依諾沙星、培氟沙星、諾氟沙星和恩諾沙星4 種氟喹諾酮類藥物的分析方法。首先以硅膠為分散劑，以200 μL 1-己基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽（[C6mim]BF4）離子液體為萃取劑，pH 1.0水溶液為洗脫劑，采用基質(zhì)固相分散法處理樣品，目標分析物被轉(zhuǎn)移至洗脫液中后，再以六氟磷酸銨為離子對試劑，采用均相液-液微萃取法分離、富集目標分析物于離子液體相中，最后通過高效液相色譜-二極管陣列檢測器對目標物進行定量分析。結果表明，各化合物在線性范圍內(nèi)具有較好的線性關系（r＞0.997 4），檢出限為2.9～8.6 μg/kg，加標回收率在87.9%～105.3%之間，其相對標準偏差為2.2%～8.6%。本法操作簡單，不使用有機溶劑，可廣泛應用于動物肌肉組織中氟喹諾酮類抗生素的萃取與檢測。

基質(zhì)固相分散；離子液體均相液-液微萃取；氟喹諾酮類藥物；肌肉樣品；高效液相色譜

氟喹諾酮類抗菌劑屬于吡酮酸類抗生素的衍生物，是20世紀70年代初發(fā)展起來的第3代喹諾酮類藥物，具有廣譜、高效、低毒、吸收好等特點[1-5]。它對革蘭陽性菌、革蘭陰性菌、細胞內(nèi)病原菌、支原體、衣原體及某些耐藥菌株均有很好的抗菌活性，是獸醫(yī)臨床上治療各種感染性疾病的常用藥物[1,5-6]。但其在食品中殘留可能會產(chǎn)生蓄積毒性和細菌耐藥性，并引發(fā)一系列不良反應如神經(jīng)中毒、腎功能損傷、過敏反應等[7-9]。因此，食品中獸藥殘留檢測與監(jiān)控對保證消費者飲食安全和身體健康至關重要。但由于各種食品組成十分復雜、干擾物質(zhì)多，而且樣品中獸藥殘留水平很低，不易進行待測組分的分離富集，這使樣品前處理方法成為獸藥殘留分析檢測技術中的關鍵環(huán)節(jié)。

基質(zhì)固相分散是近些年國外新興的一種在固相萃取基礎上發(fā)展起來的新型樣品提取分離方法[10-11]，它集樣品均勻化、組織細胞裂解、提取、過濾、凈化于一體，避免了試樣均化、轉(zhuǎn)溶、乳化、濃縮等造成的待測物損失[12]，使樣品處理變得簡單，尤其適合于固體、半固體和高黏稠的生物樣品的分離分析[12-17]。但此法常以乙腈、甲醇、乙醚等有機溶劑作為萃取劑，不僅污染環(huán)境，還會危害實驗操作人員的健康，而且有機溶劑缺乏對目標分析物的萃取選擇性。由有機陽離子和有機或無機陰離子組成的離子液體[18-19]，具有熱穩(wěn)定性好、密度大、不易燃、不揮發(fā)、環(huán)境友好、陰陽離子可設計性強等特點[20-21]，且對各種無機和有機化合物有良好的溶解能力[21-24]，是一種理想的代替?zhèn)鹘y(tǒng)有機溶劑用于萃取分離過程的綠色溶劑[25-26]。

本研究以硅膠為分散劑，離子液體水溶液為洗脫劑，將基質(zhì)固相分散提取和離子液體均相液-液微萃取相結合，用于肌肉組織中氟喹諾酮類抗生素的提取、分離與富集，并且結合高效液相色譜法對多種食品進行了定量分析與檢測。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

不同品牌的肌肉組織樣品，包括牛肉（樣品1、2）、豬肉（樣品3、4）、羊肉（樣品5、6）和雞肉（樣品7、8），均購自于長春市湖西路農(nóng)貿(mào)市場。

標準品依諾沙星（enoxacin，ENO）、培氟沙星（pefloxacin，PEF）、諾氟沙星（norfloxacin，NOR）和恩諾沙星（enrofloxacin，ENR）（純度均大于99%）美國Sigma公司；六氟磷酸銨（NH4PF6）、1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽（[C4mim]BF4）、1-己基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽（[C6mim]BF4）和1-辛基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽（[C8mim]BF4） 上海成捷化學有限公司；硅膠、硅藻土、弗羅里硅土、酸性氧化鋁、中性氧化鋁和堿性氧化鋁 上海阿拉丁生化科技股份有限公司；乙腈、甲醇（色譜級） 美國費舍爾公司；其他試劑均為分析純。1.2 儀器與設備

1100型高效液相色譜儀（配有二極管陣列檢測器）、Zorbax SB-C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，3.5 μm）、C18預柱（7.5 mm×2.1 mm，5 μm） 美國Agilent公司；Allegra 64R高速離心機 美國貝克曼公司；KQ-100DE超聲波清洗器 江蘇昆山市超聲儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 標準溶液的配制

分別準確稱取ENO、PEF、NOR和ENR標準品各5 mg于10 mL容量瓶中，用含有冰醋酸濃度為4.72 mmol/L的乙腈溶液溶解，并定容至10 mL，配制成質(zhì)量濃度為500 μg/mL的標準儲備液，于4 ℃冰箱中保存，備用。工作溶液是由各標準儲備液經(jīng)乙腈稀釋得到的。

1.3.2 樣品的制備

將所有樣品去骨、去皮后，用組織搗碎機絞碎，形成肉泥，然后裝入保鮮袋中，于-20 ℃冰箱中保存，備用。含有氟喹諾酮類藥物的加標樣品是通過向樣品中添加混合標準溶液得到的。在本研究中，除實際樣品分析外，其余實驗結果均通過樣品1獲得的。

1.3.3 基質(zhì)固相分散-均相離子液體微萃取

圖1 基質(zhì)固相分散-均相離子液體微萃取操作流程圖Fig. 1 Schematic flow chart of the IL-based MSPD-HLLME procedure

基質(zhì)固相分散-均相離子液體微萃取操作流程如圖1所示。準確稱取0.20 g加標樣品、1.0 g 分散劑硅膠和200 μL水溶性離子液體[C6mim]BF4于瑪瑙研缽中，充分研磨5 min。當研磨均勻后，將此混合物轉(zhuǎn)移至底部有一層脫脂棉的萃取柱中，在柱口上方用一層脫脂棉塞緊，并用玻璃棒輕輕壓實，避免萃取柱中出現(xiàn)空隙。采用pH 1.0的蒸餾水作為洗脫劑在重力作用下淋洗萃取柱，離子液體和目標分析物則被從萃取柱中洗脫出來，收集6 mL洗脫液于10 mL離心管中，隨后用一次性注射器將1.0 mL 2.0 mol/L的NH4PF6溶液快速注入到洗脫液中，此時NH4PF6與離子液體發(fā)生原位反應，使原來的親水性離子液體轉(zhuǎn)變?yōu)槭杷噪x子液體，并形成均勻的乳濁液，然后用10 000 r/min冷凍離心5 min，溶液分成兩相，疏水性離子液體結合目標分析物沉積在離心管底部。吸除上層水相，將離子液體部分用乙腈稀釋至300 μL，過0.22 μm濾膜，將得到的樣品溶液進行色譜分析。

1.3.4 色譜條件

流動相：0.1%甲酸溶液（A）和乙腈（B），流動相梯度洗脫條件如表1所示；流動相流速：0.5 mL/min；進樣體積：20 μL；柱溫：35 ℃；檢測波長：280 nm。

表1 流動相梯度洗脫條件Table 1 Mobile phase composition for gradient elution

2 結果與分析

2.1 萃取條件優(yōu)化

2.1.1 離子液體的種類和體積

離子液體的組成、結構和物理化學性質(zhì)對目標分析物的提取效率有顯著影響。在本研究中，考察了[C4mim]BF4、[C6mim]BF4和[C8mim]BF43 種離子液體對氟喹諾酮類藥物回收率的影響。結果表明，[C4mim]BF4獲得的目標分析物的回收率顯著低于[C6mim]BF4和[C8mim]BF4，其原因可能是萃取過程中產(chǎn)生的疏水性離子液體[C4mim]PF6在水中的溶解度比[C6mim]PF6和[C8mim]PF6要高，從而導致目標分析物在離心后更多的殘留于水相中，使回收率降低。此外，離子液體烷基鏈越長，目標物回收率越高，但使用[C8mim]BF4作為提取劑時，在色譜圖的中間部分出現(xiàn)一些干擾峰，影響PEF和NOR的準確測定。因此，選擇[C6mim]BF4為萃取劑。

本研究又考察[C6mim]BF4體積（120～240 μL）對目標分析物回收率的影響。如圖2所示，當離子液體體積200 μL時，目標分析物的回收率達到較大值。當離子液體體積從200 μL增加到240 μL時，回收率基本保持不變。因此，選擇離子液體[C6mim]BF4的最佳用量為200 μL。

圖2 離子液體體積對回收率的影響Fig. 2 Effect of ionic liquid volume on recovery

2.1.2 分散劑的種類和用量

圖3 分散劑對回收率的影響Fig. 3 Effect of dispersants on recovery

分散劑不僅可以破壞樣品的組織結構，還能增加萃取劑與目標物分子的接觸面積。如圖3所示，當硅膠為分散劑時，各分析物回收率最高。當硅藻土、Florisil和活性炭為分散劑時，可能由于分散劑對離子液體的吸附作用減弱了洗脫劑對離子液體和目標物的洗脫效果，從而使回收率降低。當中性氧化鋁為分散劑時，所獲得的回收率最低，色譜圖很干凈，這說明氧化鋁不僅能吸附雜質(zhì)，同時也吸附了大量目標分析物。因此，本實驗選擇硅膠作為分散劑。

本實驗還考察了當樣品用量為0.20 g時，樣品與硅膠質(zhì)量比（1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6和1∶7）對目標分析物回收率的影響。實驗結果表明，當質(zhì)量比為1∶3時，目標分析物的回收率最高。因此，選擇樣品與分散劑的質(zhì)量比為1∶3。

2.1.3 洗脫劑的種類和體積

在本研究中，洗脫劑應具備兩個重要功能：1）應具有一定的極性，能將目標分析物和水溶性離子液體從萃取柱中洗脫出來；2）當離子對試劑NH4PF6加入到洗脫液中后，新形成的疏水性離子液體[C6mim]PF6應不溶于原洗脫劑中，以便形成均相體系。顯然，常用的有機溶劑并不適合作為本實驗的洗脫劑，因為[C6mim]PF6在有機溶劑中有較高的溶解性。因此，本實驗選擇蒸餾水為洗脫劑。

本實驗還考察了洗脫劑體積（3、4、5、6、7、8 mL和9 mL）對目標分析物回收率的影響。結果表明，當體積從3～6 mL時，回收率逐漸增加；從6～9 mL時，回收率略有下降。因此，選擇洗脫劑體積為6 mL。

2.1.4 洗脫劑的pH值

圖4 洗脫劑pH值對回收率的影響Fig. 4 Effect of pH value of elution solvent on recovery

本實驗考察洗脫溶劑pH值在1.0～11.0范圍內(nèi)各化合物的回收率，結果見圖4。目標物的回收率隨著pH值的升高而顯著降低，當pH值為1.0時，回收率達到最大值，這與文獻報道的結果一致[27]。其原因可能是氟喹諾酮類化合物的等電點接近于7，使其在中性水溶液中的溶解度大大降低，因此，化合物更容易被酸性或堿性水溶液洗脫。然而，當pH值過高時，離心后產(chǎn)生的疏水性離子液體體積顯著減少，從而導致目標分析物回收率明顯降低。因此，本研究選擇洗脫劑pH值為1.0。

2.1.5 NH4PF6的濃度

為了研究離子對試劑對目標物回收率的影響，將1 mL不同濃度（0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4 mol/L和2.8 mol/L）的NH4PF6溶液加入到洗脫液中，隨之發(fā)生原位生成反應，萃取劑[C6mim]BF4中的BF4-被陰離子PF6-所取代，從而產(chǎn)生疏水性離子液體[C6mim]PF6，該離子液體生成量的多少，將直接決定目標分析物的提取效率，結果見圖5。

圖5 NH4PF6溶液濃度對回收率的影響Fig. 5 Effect of NH4PF6 concentration on recovery

結果表明，隨著NH4PF6的濃度從0.4 mol/L增加至2.0 mol/L時，目標分析物的回收率不斷增加；但從2.0 mol/L增加至2.8 mol/L時，目標物的回收率沒有明顯變化。一方面，PF6-有利于[C6mim]PF6的形成和離子液體沉淀相的增加。另一方面，鹽的增加可以促進相分離。因此，本研究選擇NH4PF6溶液濃度為2.0 mol/L。

2.2 方法評價結果

2.2.1 線性關系、檢出限和定量限

配制含有4 種氟喹諾酮藥物的一系列不同濃度的加標樣品（樣品1），按1.3.2節(jié)和1.3.3節(jié)所述方法，在最佳條件下提取和分析樣品。以分析物含量（c）為橫坐標，峰面積（A）為縱坐標，制作工作曲線，得到線性回歸方程。檢出限和定量限是信噪比分別為3和10時實驗方法所能檢出和定量的目標化合物的最低含量。結果表明，各化合物在線性范圍內(nèi)具有較好的線性關系（r＞0.997 4），檢出限和定量限分別為2.9～8.6 μg/kg和9.5～28.5 μg/kg，結果見表2。

表2 目標化合物的工作曲線、檢出限及定量限Table 2 Linear regressions, limits of detection and limits of quantitation for the analytes

2.2.2 精密度實驗結果

本研究對測定加標牛肉樣品（樣品1）中目標分析物的重復性進行了評價。通過對日內(nèi)和日間相對標準偏差的測定評估其精密度。日內(nèi)精密度是通過1 d之內(nèi)平行分析5 次加標樣品所得到回收率的相對標準偏差。日間精密度是通過每天分析1 次加標樣品，連續(xù)分析5 d所得到回收率的相對標準偏差。如表3所示，日內(nèi)和日間精密度分別為1.9%～7.5%和2.4%～8.6%之間，說明該方法的重復性結果令人滿意。

表3 分析物的日內(nèi)精密度和日間精密度Table 3 Intra- and inter- day precision for the analytes

2.2.3 回收率實驗結果

為了考察本法的準確度，本研究分析了8 種肌肉組織樣品的加標回收率（表4）。結果表明，各樣品加標回收率為87.9%～105.3%，相對標準偏差在2.2%～8.6%之間，說明本法可提供令人滿意的回收率和精密度，可用于動物肌肉樣品中氟喹諾酮類抗生素的提取分析。

表4 牛肉、羊肉、豬肉和雞肉樣品分析Table 4 Analytical results of beef, mutton, pork and chicken samples

表5 方法比較Table 5 Comparison between the proposed method and other methods

2.2.4 實際樣品分析結果

圖6 標準溶液（A）、加標樣品1（B）和空白樣品（C）色譜圖Fig. 6 Chromatograms of standard solution (A), spiked sample 1 (B) and blank sample (C)

為考察本法的適用性，本研究分析了牛肉、豬肉、羊肉和雞肉等8 種肌肉組織樣品（表4）。結果表明，實際樣品中并未檢出氟喹諾酮類抗生素，且在各化合物保留時間內(nèi)也無干擾峰出現(xiàn)?？瞻讟悠泛图訕藰悠返纳V圖見圖6。

2.2.5 方法比較結果

與參考方法相比，本法使用離子液體代替?zhèn)鹘y(tǒng)有機溶劑作為萃取劑，大大減少了萃取溶劑的用量，提高了樣品回收率，有效地保護了環(huán)境和實驗操作人員的健康（表5）?；|(zhì)固相分散和離子液體均相液-液微萃取技術相結合，使樣品的制備、提取和凈化于一體，從而使整個提取過程變得簡單、快速，大大縮短了提取時間。因此，與其他方法相比，本法在萃取溶劑用量、保護環(huán)境、實驗成本和簡化實驗操作等方面有一定優(yōu)勢。

3 結 論

本研究將基質(zhì)固相分散、均相離子液體微萃取和高效液相色譜相結合，建立了一種簡單、快速、綠色的分析方法用于檢測肌肉組織中的氟喹諾酮類抗生素。該方法以離子液體作為萃取溶劑，避免了大量有機溶劑的使用，無需蒸發(fā)有機溶劑和回溶的操作步驟，不僅提高了目標物的回收率，而且使樣品前處理技術更加簡單、高效和環(huán)保。與其他方法相比，本法具有提取效率高、萃取溶劑用量少、環(huán)境污染小和操作簡單快速等特點，可用于動物源性食品中氟喹諾酮類抗生素的提取分析。

[1] 黃優(yōu)生, 劉波平, 朱筱玲, 等. 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測定魚肉中4 種氟喹諾酮類藥物殘留[J]. 食品科學, 2010, 31(2): 127-130.

[2] 李丹, 張玉潔, 孫志文, 等. 高效液相色譜法測定羊奶中五種氟喹諾酮類藥物殘留量的研究[J]. 中國獸藥雜志, 2016, 50(1): 31-35.

[3] HO C, SIN D, TANG H, et al. Determination and on-line clean-up of (fluoro) quinolones in bovine milk using column-switching liquid chromatography fluorescence detection[J]. Journal of Chroatography A, 2004, 1061(2): 123-131. DOI:10.1016/j.chroma.2004.11.003.

[4] CHO H, yI H, CHO S, et al. Single-step extraction followed by LC determination of (fluoro) quinolone drug residues in muscle, eggs, and milk[J]. Journal of Separation Science, 2010, 33(8): 1034-1043. DOI:10.1002/jssc.200900772.

[5] TANG Q, yANG T, TAN X, et al. Simultaneous determination of fluoroquinolone antibiotic residues in milk sample by solid-phase extraction-liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2009, 57(11): 4535-4539. DOI:10.1021/jf900513b.

[6] ZHAO S, JIANG H, LI X, et al. Simultaneous determination of trace levels of 10 quinolones in swine, chicken, and shrimp muscle tissues using HPLC with programmable fluorescence detection[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2007, 55(10): 3829-3834. DOI:10.1021/jf0635309.

[7] 池永紅, 云雅光. SPE-HPLC檢測動物源性食品中3 種氟喹諾酮類藥物殘留[J]. 食品研究與開發(fā), 2015, 36(20): 152-155. DOI:10.3969/ j.issn.1005-6521.2015.20.041.

[8] 劉媛, 謝孟峽, 丁嵐, 等. 高效液相色譜同時測定雞蛋中4 種氟喹諾酮類藥物殘留[J]. 分析化學, 2004, 32(3): 352-355.

[9] POSYNIAK A, ZMUDZKI J, SEMENIUK S. Effects of the matrix and sample preparation on the determination of fluoroquinolone residues in animal tissues[J]. Journal of Chromatography A, 2001, 914(1/2): 89-94. DOI:10.1016/S0021-9673(00)01088-8.

[10] 王重洋, 王遠鵬, 王寧, 等. 基質(zhì)固相分散-超快速液相色譜法測定牛肉中磺胺類獸藥[J]. 分析化學, 2013, 41(1): 83-87. DOI:10.3724/ SP.J.1096.2013.20535.

[11] 薛平, 史惠娟, 杜利君, 等. 5 種基質(zhì)中19 種有機磷農(nóng)藥殘留的基質(zhì)固相分散-氣相色譜法測定[J]. 食品科學, 2010, 31(18): 227-231.

[12] LI J, LI y, XU D, et al. Determination of metrafenone in vegetables by matrix solid-phase dispersion and HPLC-UV method[J]. Food Chemistry, 2017, 214: 77-81. DOI:10.1016/j.foodchem.2016.07.061.

[13] HUANG Z, PAN X, HUANG B, et al. Determination of 15 β-lactam antibiotics in pork muscle by matrix solid-phase dispersion extraction (MSPD) and ultra-high pressure liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. Food Control, 2016, 66: 145-150. DOI:10.1016/ j.foodcont.2016.01.037.

[14] SILVA M C, ORLANDO R M, FARIA A F. Electrical field assisted matrix solid phase dispersion as a powerful tool to improve the extraction efficiency and clean-up of fluoroquinolones in bovine milk[J]. Journal of Chromatography A, 2016, 1461: 27-34. DOI:10.1016/j.chroma.2016.07.063.

[15] PéREZ-PARADA A, COLAZZO M, BESIL N, et al. Determination of coumaphos, chlorpyrifos and ethion residues in propolis tinctures by matrix solid-phase dispersion and gas chromatography coupled to flame photometric and mass spectrometric detection[J]. Journal of Chromatography A, 2011, 1218: 5852-5857. DOI:10.1016/ j.chroma.2011.06.097.

[16] MICHEL R, CyBELLE O, TAMIRES G, et al. Validation of a matrix solid phase dispersion (MSPD) technique for determination of pesticides in lyophilized eggs of the chicken Gallus gallus domesticus[J]. Microchemical Journal, 2013, 110: 395-401. DOI:10.1016/j.microc.2013.05.001.

[17] GA?AN J, SILVA M, MORANTE-ZARCERO S, et al. Application of hybrid mesoporous silica for extraction of hormones in milk by matrix solid phase dispersion[J]. Materials Letters, 2014, 119: 56-59. DOI:10.1016/j.matlet.2013.12.107.

[18] 張琰, 張耀海, 焦必寧. 離子液體-分散液液微萃取在食品及環(huán)境污染物檢測中的應用[J]. 食品科學, 2015, 36(5): 250-259. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201505046.

[19] GAO S, yANG X, yU W, et al. Ultrasound-assisted ionic liquid/ionic liquid-dispersive liquid-liquid microextraction for the determination of sulfonamides in infant formula milk powder using high-performance liquid chromatography[J]. Talanta, 2012, 99: 875-882. DOI:10.1016/ j.talanta.2012.07.050.

[20] WANG Z, HU J, DU H, et al. Microwave-assisted ionic liquid homogeneous liquid-liquid microextraction coupled with high performance liquid chromatography for the determination of anthraquinones in Rheum palmatum L.[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2016, 125: 178-185. DOI:10.1016/ j.jpba.2016.03.046.

[21] HU H, LIU B, yANG J, et al. Sensitive determination of trace urinary 3-hydroxybenzo[a]pyrene using ionic liquids-based dispersive liquidliquid microextraction followed by chemical derivatization and high performance liquid chromatography-high resolution tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography B, 2016, 1027: 200-206. DOI:10.1016/j.jchromb.2016.05.041.

[22] GAO J, WANG H, QU J, et al. Development and optimization of a naphthoic acid-based ionic liquid as a “non-organic solvent microextraction” for the determination of tetracycline antibiotics in milk and chicken eggs[J]. Food Chemistry, 2017, 215: 138-148. DOI:10.1016/j.foodchem.2016.07.138.

[23] FARAJZADEH M, BAMOROWAT M, MOGADDAM M. Ringer tablet-based ionic liquid phase microextraction: application in extraction and preconcentration of neonicotinoid insecticides from fruit juice and vegetable samples[J]. Talanta, 2016, 160: 211-216. DOI:10.1016/j.talanta.2016.03.097.

[24] WANG Z, ZHANG L, LI N, et al. Ionic liquid-based matrix solid-phase dispersion coupled with homogeneous liquid-liquid microextraction of synthetic dyes in condiments[J]. Journal of Chromatography A, 2014, 1348: 52-62. DOI:10.1016/j.chroma.2014.04.086.

[25] XU X, SU R, ZHAO X, et al. Ionic liquid-based microwaveassisted dispersive liquid-liquid microextraction and derivatization of sulfonamides in river water, honey, milk, and animal plasma[J]. Analytica Chimica Acta, 2011, 707: 92-99. DOI:10.1016/ j.aca.2011.09.018.

[26] WANG Z, CAO B, yU A, et al. Ultrasound-assisted ionic liquidbased homogeneous liquid-liquid microextraction high-performance liquid chromatography for determination of tanshinones in Salvia miltiorrhiza Bge. root[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2015, 104: 97-104. DOI:10.1016/j.jpba.2014.11.034.

[27] GAO S, JIN H, yOU J, et al. Ionic liquid-based homogeneous liquid-liquid microextraction for the determination of antibiotics in milk by high-performance liquid chromatography[J]. Journal of Chromatography A, 2011, 1218: 7254-7263. DOI:10.1016/ j.chroma.2011.08.063.

[28] 于輝, 趙萍. 快速溶劑萃取-高效液相色譜-紫外串聯(lián)熒光檢測法測定太平湖白魚中4 種氟喹諾酮類藥物殘留[J]. 中國食品衛(wèi)生雜志, 2011, 23(4): 322-325. DOI:10.13590/j.cjfh.2011.04.024.

[29] 李維鋮, 姬長云, 張靜潔, 等. 高效液相色譜法檢測雞肉中氟喹諾酮類藥物殘留量前處理方法的優(yōu)化[J]. 華南農(nóng)業(yè)大學學報, 2014, 35(5): 14-18. DOI:10.7671/j.issn.1001-411X.2014.05.003.

[30] 李慧芳, 殷軍港, 劉永明. 魚肉中喹諾酮類藥物殘留檢測前處理方法的研究[J]. 中國漁業(yè)質(zhì)量與標準, 2012, 2(1): 62-66.

Determination of Fluroquinolones in Muscle Samples by Ionic Liquid-Based Matrix Solid Phase Dispersion Extraction Coupled with High Performance Liquid Chromatography

XU Weili, NIE Wen, ZHANG Kaili, GUO Hainan, ZHU Shouming, MA Guoxiang, WANG Zhibing*
(College of Chemistry and Life Science, Changchun University of Technology, Changchun 130012, China)

A new method based on matrix solid phase dispersion, ionic liquid-based homogeneous liquid-liquid microextraction and high performance liquid chromatography was developed for the determination of fluroquinolones (FQs), including enoxacin (ENO), pefloxacin (PEF), norfloxacin (NOR) and enrofloxacin (ENR) in muscle samples. Muscle samples were directly treated by matrix solid phase dispersion using silica gel as dispersant, 200 μL of 1-hexyl-3-methylimidazolium hexafluorophosphate ([C6mim]BF4) was used as extraction solvent, and aqueous solution of pH 1.0 was used as elution solvent. After the target analytes were transferred into eluate, ammonium hexafluorophosphate was added. The eluate obtained was treated by ionic liquid-based homogeneous liquid-liquid microextraction and the analytes were enriched into the ionic liquid phase. High performance liquid chromatography with diode array detection was applied to separate and determine the target analytes. The experimental results showed that the calibration curve exhibited a good linear relationship (r ＞ 0.997 4). The limits of detection (LODs) of the method were in the range of 2.9 to 8.6 μg/kg. The recoveries were between 87.9% and 105.3% with relative standard deviations (RSDs) of 2.2%–8.6%. The proposed method has the advantages of simple operation and no need for organic solvent and can be extensively applied for determination of fluroquinolones in animal tissue samples.

matrix solid phase dispersion; ionic liquid-based homogeneous liquid-liquid microextraction; fluroquinolones;

10.7506/spkx1002-6630-201716033

TS207.3

A

1002-6630（2017）16-0210-06

徐尉力, 聶穩(wěn), 張凱麗, 等. 基于離子液體的基質(zhì)固相分散萃取結合高效液相色譜法測定肌肉組織中的氟喹諾酮類抗生素[J]. 食品科學, 2017, 38(16): 210-215. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201716033. http://www.spkx.net.cn

2016-09-21

國家自然科學基金青年科學基金項目（21401011）；吉林省教育廳“十二五”科學技術研究項目（2015105）

徐尉力（1995—），男，學士，研究方向為食品分析。E-mail：1441842257@qq.com

*通信作者：王志兵（1982—），男，講師，博士，研究方向為食品分析。E-mail：wangzhibing1012@163.com

XU Weili, NIE Wen, ZHANG Kaili, et al. Determination of fluroquinolones in muscle samples by ionic liquid-based matrix solid phase dispersion extraction coupled with high performance liquid chromatography[J]. Food Science, 2017, 38(16): 210-215. (in Chinese with English abstract)

10.7506/spkx1002-6630-201716033. http://www.spkx.net.cn

muscle samples; high performance liquid chromatography (HPLC)