程遠(yuǎn)

黑果腺肋花楸組織培養(yǎng)研究

程遠(yuǎn)

（五常市寶龍店種子林場(chǎng)，黑龍江哈爾濱150200）

以黑果腺肋花楸植株的嫩莖作為試驗(yàn)材料對(duì)其進(jìn)行組織培養(yǎng)研究。結(jié)果表明，最適合黑果腺肋花楸誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為WPM＋6－BA2.0mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg·L－1＋2%蔗糖，誘導(dǎo)率達(dá)到96%；最適宜生根的培養(yǎng)基為WPM＋NAA0.1mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg·L－12%蔗糖，生根率為90%；移栽30d后，成活率達(dá)到90%以上。

黑果腺肋花楸；外植體；組織培養(yǎng)

黑果腺肋花楸（Aronia melanocarpaElliot），又名野櫻莓、不老莓，為薔薇科腺肋花楸屬多年生落葉灌木［1］。原產(chǎn)于北美東北部，波羅的海沿岸至太平洋沿岸均有分布。我國(guó)在20世紀(jì)90年代初開(kāi)始從朝鮮、俄羅斯、美國(guó)等引進(jìn)，至今已有較豐富的種質(zhì)資源［2］。黑果腺肋花楸果實(shí)富含豐富的黃酮、花青素、抗氧化物質(zhì)和多酚類物質(zhì)，對(duì)治療心臟病、高血壓、糖尿病等有特殊療效［3］。黑果腺肋花楸花束密集，花期較長(zhǎng)，果實(shí)宿存時(shí)間長(zhǎng)，具有四季皆宜的觀賞效果。其又可廣泛用于綠化荒山、保持水土，在生態(tài)的恢復(fù)和重建中具有廣闊的市場(chǎng)前景。所以黑果腺肋花楸是集藥用、觀賞與生態(tài)恢復(fù)于一體的珍貴樹種［4］。組織培養(yǎng)能有效縮短培育周期、保持良種特性，本文對(duì)黑果腺肋花楸的組織培養(yǎng)條件進(jìn)行了研究，為大量擴(kuò)繁推廣奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料來(lái)源于黑龍江省林科所，采用黑果腺肋花楸植株的嫩莖作為外植體。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 外植體的消毒 在植株上剪取長(zhǎng)度3cm的帶腋芽莖段，肥皂水擦洗后流水下沖洗1h。然后在超凈工作臺(tái)上用75%的酒精浸泡30s，再用0.1%的HgCl2溶液處理5min。無(wú)菌水沖洗4～5次后吸干水分，將帶芽莖段剪成1.5cm左右接種于培養(yǎng)基上。

1.2.2 誘導(dǎo)培養(yǎng)基的篩選 以WPM為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，加入不同的生長(zhǎng)激素，培養(yǎng)基配方如下：

（1）WPM＋6－BA0.5mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg ·L－1＋2%蔗糖

（2）WPM＋6－BA1.0mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg ·L－1＋2%蔗糖

（3）WPM＋6－BA1.5mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg ·L－1＋2%蔗糖

（4）WPM＋6－BA2.0mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg ·L－1＋2%蔗糖

（5）WPM＋6－BA2.0mg·L－1＋I(xiàn)BA0.5mg·L－1＋2%蔗糖

每個(gè)處理30瓶，每瓶接種3莖段。觀察記錄，30d后統(tǒng)計(jì)外植體的生長(zhǎng)狀況。

1.2.3 生根培養(yǎng)基的篩選 選取高1.5cm以上生長(zhǎng)健壯的幼苗，接種于生根培養(yǎng)基上。生根培養(yǎng)基設(shè)4種激素組合，分別為：

（1）WPM＋NAA0.1mg·L－1＋I(xiàn)BA0.1mg· L－1＋2%蔗糖

（2）WPM＋NAA0.1mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg· L－1＋2%蔗糖

（3）WPM＋NAA0.2mg·L－1＋I(xiàn)BA0.1mg· L－1＋2%蔗糖

（4）WPM＋NAA0.5mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg· L－1＋2%蔗糖

每個(gè)處理20瓶，每瓶接種3莖段，觀察記錄生根情況，50d后統(tǒng)計(jì)生根率。

1.2.4 煉苗移栽 當(dāng)組培苗的根生長(zhǎng)到1.5cm左右時(shí)，將培養(yǎng)瓶移到溫室中，挑選生根健壯的組培苗，洗凈培養(yǎng)基，移栽入配比好的苗床基質(zhì)中，澆透水后用塑料拱棚覆蓋，每日澆水1次，進(jìn)行透氣保持濕度。7d后逐漸通風(fēng)，撤走覆蓋物，30d后統(tǒng)計(jì)移栽成活率。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同激素水平對(duì)黑果腺肋花楸嫩莖誘導(dǎo)的影響

表1 不同激素水平對(duì)黑果腺肋花楸嫩莖誘導(dǎo)的影響

由表1可以看到，隨著培養(yǎng)基中6－BA濃度的逐漸增加，黑果腺肋花楸苗生長(zhǎng)的芽多，生長(zhǎng)越迅速，小苗越茁壯。當(dāng)6－BA濃度達(dá)到2.0mg·L－1時(shí)，組培苗生長(zhǎng)的芽最多，小苗最茁壯，在搭配IBA濃度0.2mg·L－1時(shí)，誘導(dǎo)率最高，達(dá)到96%。所以最適宜黑果腺肋花楸誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為WPM＋6－BA2.0mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg·L－1＋2%蔗糖。

2.2 不同培養(yǎng)基對(duì)黑果腺肋花楸的生根影響

表2 不同培養(yǎng)基對(duì)黑果腺肋花楸的生根影響

由表2可以看到，在6－BA0.1mg·L－1和IBA0.2mg·L－1的濃度下，黑果腺肋花楸的組培苗生根情況最理想，主根較長(zhǎng)且粗壯，側(cè)根生長(zhǎng)的也多。而其他配比的培養(yǎng)基，小根生長(zhǎng)的細(xì)，不夠粗壯。所以在WPM＋6－BA0.1mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2 mg·L－1＋2%蔗糖的培養(yǎng)基中，黑果腺肋花楸生根情況最好，生根率高達(dá)90%。

2.3 煉苗移栽

煉苗移栽是組培快繁中的重要環(huán)節(jié)，黑果腺肋花楸組培苗移栽30d之后統(tǒng)計(jì)的成活率高達(dá)90%以上，植株生長(zhǎng)迅速，葉片較大呈嫩綠色，莖段顏色變紅明顯健壯，為室外移栽的成活打下了良好的基礎(chǔ)。

3 結(jié)論與討論

3.1 試驗(yàn)表明，黑果腺肋花楸的嫩莖用HgCl2試劑消毒5min后，在誘導(dǎo)培養(yǎng)基WPM＋6－BA2.0mg ·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg·L－1＋2%蔗糖中誘導(dǎo)率最高，為96%。在生根培養(yǎng)基WPM＋6－BA0.1mg ·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg·L－1＋2%蔗糖中生根率最高，達(dá)到90%。而煉苗后移栽成活率高達(dá)90%以上。

3.2 我們?cè)谠囼?yàn)中發(fā)現(xiàn)，黑果腺肋花楸組培苗有部分的玻璃化現(xiàn)象，葉片呈現(xiàn)透明狀并且較脆易破碎，影響了組培苗的生長(zhǎng)與發(fā)育。對(duì)此，我們適當(dāng)?shù)脑龃罅斯庹諒?qiáng)度和培養(yǎng)瓶的透氣度，發(fā)現(xiàn)能夠控制減少玻璃化的數(shù)量。

［1］孔繁軾.黑果腺助花楸的開(kāi)發(fā)與栽培［J］.中國(guó)花卉園藝，2006（10）：38－39

［2］韓文忠，龍忠偉.黑果腺肋花楸栽培技術(shù)要點(diǎn)［J］.中國(guó)林副特產(chǎn)，2008（4）：61－62

［3］Valcheva K S，Borisova P，Galunska B.Hwpatoprotective effect of the natural fruit juice fromAronia melanocaepaon carbon tetrachloride－induced acute liver damage in rats［J］.Experimental and Toxicologic Pathology，2004（56）：195－201

［4］張利萍.黑果腺肋花楸的組培快繁技術(shù)研究［J］.價(jià)值工程，2010（18）：211－222

Tissue Culture of Aronia melanocarpa

Cheng Yuan
（Baolongdian Seed Forest Farm，Wuchang City，Harbin150200，China）

Tissue culture system was established by using the tender stems of Ficus microcarpaas experimental materials.Result shows that the optimum culture medium is WPM＋6－BA2.0mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg·L－1＋2% sucrose，and the induction rate is96%.The optimum rooting medium is WPM＋NAA0.1mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg ·L－1＋2%sucrose，and the rooting rate is90%.After30days of transplanting，the survival rate reach more than 90%.

Aronia melanocarpa；explant；tissue culture

Q813.12

A

10.13601／j.issn.1005－5215.2017.07.026

2017－05－25

程遠(yuǎn)（1982－），男，黑龍江巴彥人，大學(xué)，工程師，從事小漿果及食用菌等培養(yǎng)研究.