王連平，謝昀燁，方 麗，鄭福勃，陳義重，王漢榮*

(1.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 植物保護(hù)與微生物研究所，浙江 杭州 310021； 2.浙江省瑞安市陶山鎮(zhèn)人民政府，浙江 瑞安 325200；3.浙江省瑞安市農(nóng)業(yè)局，浙江 瑞安 325200)

溫郁金細(xì)菌性枯萎病防控藥劑篩選

王連平1，謝昀燁1，方 麗1，鄭福勃2，陳義重3，王漢榮1*

(1.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 植物保護(hù)與微生物研究所，浙江 杭州 310021； 2.浙江省瑞安市陶山鎮(zhèn)人民政府，浙江 瑞安 325200；3.浙江省瑞安市農(nóng)業(yè)局，浙江 瑞安 325200)

室內(nèi)生物測(cè)定從13種藥劑中篩選出乙蒜素、福美雙、氨基寡糖素、乙蒜氯霉、鏈·土霉素和三氯異氰尿酸等7種對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病菌有較強(qiáng)的抑制作用的藥劑；盆栽試驗(yàn)明確乙蒜素、鏈·土霉素500倍液浸種能有效控制種莖傳病原細(xì)菌；田間小區(qū)試驗(yàn)表明，每667 m2施石灰氮60 kg，能有效控制土壤中的病原細(xì)菌，乙蒜素·土霉素、鏈·土霉素600倍液澆灌溫郁金喇叭口對(duì)病害防控效果在80%以上。在此基礎(chǔ)上，組配成包括種前每667 m2施用60 kg石灰氮處理土壤、種時(shí)用乙蒜素500倍液浸種莖、生長期用乙蒜素·土霉素600倍液澆灌溫郁金喇叭口等的綜合防控措施，在大田病害防控示范中，該綜合措施的防治效果為88.3%～91.4%。

勞爾氏菌； 溫郁金； 土壤消毒； 田間防效

溫郁金(Curcumawenyujin)別名黑郁金、姜黃子，為姜科姜黃屬植物，是聞名中外的“浙八味”之一。溫郁金其塊根、根莖入藥，性寒味辛苦，歸心、肝、肺經(jīng)。有行氣化瘀，清心解郁，利膽退黃的功效[1-2]。自20世紀(jì)50年代以來，溫郁金生產(chǎn)種植面積最大的年份約達(dá)500 hm2，其主要產(chǎn)區(qū)分布在浙江省瑞安的陶山、馬嶼、仙降等鄉(xiāng)鎮(zhèn)(街道)，種植面積和產(chǎn)量約分別占全省的70%以上。近年來，在溫郁金種植中，由勞爾氏菌(Ralstoniasolanacearum)引起的溫郁金細(xì)菌性枯萎病多發(fā)、重發(fā)，該病致溫郁金莖基部軟腐從而造成植株枯死，重發(fā)病田塊病株率高達(dá)100%，植株死亡率60%以上，產(chǎn)量損失率80%以上，已成為制約溫郁金產(chǎn)業(yè)發(fā)展的瓶頸[3]。本文旨在篩選防治溫郁金枯萎的高效藥劑，提出該病的有效綜合防控技術(shù)，對(duì)確?！暗赖厮幉摹睖赜艚鸬馁|(zhì)量與產(chǎn)量，保護(hù)瑞安溫郁金這一“道地藥材”有較大的實(shí)際意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株與溫郁金種莖

溫郁金細(xì)菌性枯萎病菌菌株號(hào)為WJ-004，由浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物病害室分離鑒定并保存。

供試溫郁金種莖產(chǎn)自浙江瑞安，其中細(xì)菌性枯萎病發(fā)病種莖來自瑞安的老病區(qū)重發(fā)田塊，健康種莖來自浙江云和新種植區(qū)不發(fā)病田塊。

1.1.2 供試藥劑

供試藥劑有72%農(nóng)用鏈霉素可濕性粉劑(壽光豐農(nóng)商貿(mào)有限公司)，80%乙蒜素乳油(洛陽盛寶科貿(mào)有限公司)，15%葉枯唑可濕性粉劑(陜西上格之路生物科學(xué)有限公司)，20%龍克菌懸浮劑(浙江龍灣化工有限公司)，50%福美雙可濕性粉劑(南京強(qiáng)盛農(nóng)業(yè)科技有限公司)，50%咪鮮胺可濕性粉劑(江蘇農(nóng)墾農(nóng)藥有限公司)，0.5%氨基寡糖素水劑(山東省乳山韓威生物科技有限公司)，80%乙蒜氯霉乳油(鄭州綠冠科技有限公司)，15%枯草芽孢桿菌水劑(沂源康源生物科技有限公司)，10%枯萎靈水劑(山東金山生物工程有限公司)，90%鏈·土霉素可濕性粉劑(北京大成興業(yè)科技有限公司)，42%三氯異氰尿酸粉劑(西安亞森化工有限公司)，10%次氯酸鈉粉劑(淄博東君化工有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 不同藥劑抑菌作用室內(nèi)生物測(cè)定

采用抑菌圈法測(cè)定13種供試藥劑對(duì)溫郁金細(xì)菌枯萎病的抑菌作用[4]。取上述供試藥劑加水稀釋到適宜倍數(shù)，將直徑為7 mm的濾紙片浸泡在稀釋好并混勻的藥液內(nèi)，瀝干后將濾紙片夾至混有溫郁金病原細(xì)菌的PDA(馬鈴薯培養(yǎng)基)平板中央，浸泡在無菌水中的濾紙片為空白對(duì)照。將處理好的平板放置于28 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)2～3 d后用十字交叉法測(cè)量抑菌圈的直徑，并記錄。

1.2.2 不同藥劑處理發(fā)病種莖的效果

將100個(gè)溫郁金病種莖分別浸泡在不同藥劑的500倍液中1 h，后定植在網(wǎng)室中的試驗(yàn)盆中，以清水(CK)處理為對(duì)照，在溫郁金種莖發(fā)芽至4～5葉期時(shí)調(diào)查發(fā)病株數(shù)，計(jì)算防治效果。

1.2.3 不同藥劑處理土壤的效果

設(shè)每667 m2施石灰氮60 kg、三氯異氰尿酸5 kg、次氯酸鈉20 kg和不處理(CK)共4個(gè)處理，每處理3個(gè)小區(qū)(重復(fù))，小區(qū)面積25 m2。試驗(yàn)在瑞安溫郁金細(xì)菌性枯萎病重發(fā)田塊進(jìn)行，田塊翻耕后，將處理藥劑按量均勻地投放在試驗(yàn)小區(qū)中，再覆土整地，石灰氮處理小區(qū)澆水，最后用塑料膜分別覆蓋小區(qū)，14 d后去膜，7 d后種植健康的溫郁金種莖。在溫郁金種莖發(fā)芽至4～5葉期時(shí)調(diào)查發(fā)病株數(shù)，計(jì)算防效。

1.2.4 不同藥劑和施藥方式小區(qū)試驗(yàn)

試驗(yàn)設(shè)乙蒜素·土霉素600倍液澆灌、噴霧，鏈·土霉素600倍液澆灌、噴霧，龍克菌600倍液澆灌、噴霧，福美雙600倍液澆灌、噴霧和不處理(CK)共9個(gè)處理，每處理3個(gè)小區(qū)(重復(fù))，小區(qū)面積25 m2。試驗(yàn)在瑞安溫郁金細(xì)菌性枯萎病常發(fā)田塊進(jìn)行，從4月20日開始施藥，每15 d施藥1次，連續(xù)10次。按株定量施藥，每株施藥量150 mL。在7月5日、11月6日調(diào)查發(fā)病情況。

1.2.5 溫郁金細(xì)菌性枯萎病綜合防治大田示范

大田示范點(diǎn)在瑞安陶山鎮(zhèn)溫郁金基地，面積1.67 hm2；劃為3區(qū)。其中，1區(qū)為不防治區(qū)，面積667 m2；2區(qū)為農(nóng)民常規(guī)防治區(qū)，面積2 668 m2；3區(qū)為綜合防治區(qū)，面積13 340 m2。

在綜合防治區(qū)采用以下措施。1)用“莊伯伯”石灰氮每667 m2施60 kg；2)乙蒜素500倍液浸種處理種莖；3)按1.2.4方法防治田間溫郁金細(xì)菌性枯萎病。在7月6日、11月8日調(diào)查發(fā)病情況。

1.2.6 病害調(diào)查與數(shù)據(jù)處理

病情調(diào)查分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。0級(jí)，無癥狀；1級(jí)，水漬狀病斑長0～5 mm；3級(jí)，水漬狀病斑長6～50 mm；5級(jí)，主葉脈黃化，葉片萎蔫狀；7級(jí)，整葉黃化萎蔫；9級(jí)，整株2～3葉片萎蔫。

數(shù)據(jù)處理采用DPS軟件。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同藥劑對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病菌的抑制效果

經(jīng)農(nóng)用鏈霉素、乙蒜素等13種藥劑，對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病菌進(jìn)行室內(nèi)藥效進(jìn)行初步篩選。表1表明，13種藥劑中有7種對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病菌有較強(qiáng)的抑制作用，其中乙蒜素、福美雙、氨基寡糖素、乙蒜氯霉、鏈·土霉素、三氯異氰尿酸和次氯酸鈉對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病菌抑制作用較強(qiáng)。其中以三氯異氰尿酸效果最好。農(nóng)用鏈霉素、枯草芽孢桿菌和枯萎靈也對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病菌有抑制作用。葉枯唑、龍克菌和咪鮮胺對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病菌無作用。

表1 不同藥劑對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病菌的抑制作用

2.2 不同藥劑對(duì)溫郁金種莖的處理效果

選取室內(nèi)生物測(cè)定中抑菌效果較好的乙蒜素、福美雙、鏈·土霉素、三氯異氰尿酸等4個(gè)藥劑在網(wǎng)室中對(duì)帶菌溫郁金病種莖進(jìn)行處理試驗(yàn)。表2表明，乙蒜素、鏈·土霉素500倍液浸種的防治效果均為100.0%，三氯異氰尿酸、福美雙500倍液浸種的防治效果為87.5%。乙蒜素和鏈·土霉素可以作為田間溫郁金種莖處理劑。

2.3 不同藥劑土壤處理對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病的防治效果

表3表明，每667 m2施石灰氮60 kg對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病的防治效果最好，其防效81.6%；其次是三氯異氰尿酸5 kg和次氯酸鈉20 kg處理。

表2 不同藥劑對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病種莖處理效果

表3 不同藥劑對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病種莖網(wǎng)室處理效果

注：同列無相同大、小寫字母，分別表示組間差異達(dá)極顯著和顯著水平，表4同。

2.4 不同藥劑和施藥方式對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病的防治效果

溫郁金種莖藥劑處理時(shí)間為2015年4月20日和10月30日。調(diào)查發(fā)病株數(shù)時(shí)間為2015年7月5日和11月6日。表4顯示，第1次調(diào)查結(jié)果為乙蒜素、鏈·土霉素、龍克菌和福美雙的防治效果分別為88.7%、82.3%、76.4%和71.6%，第2次調(diào)查結(jié)果為乙蒜素、鏈·土霉素、龍克菌和福美雙的防治效果分別為86.4%、81.6%、77.8%和72.5%。綜合以上結(jié)果，乙蒜素和鏈·土霉素對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病田間防治較好。

表4表明，4種供試藥劑中，乙蒜素·土霉素對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病的防治效果最好，其次鏈·土霉素，龍克菌、福美雙效果較差；澆灌施藥方法明顯好于噴霧。乙蒜素·土霉素澆灌的防效效果在86%以上，可作田間病害防治的主要方法；鏈·土霉素澆灌的防效效果在80%以上，可作田間病害防治的輔助方法，替代主要方法以免其過多使用造成的抗藥性。

表4 不同藥劑對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病田間防效

2.5 溫郁金細(xì)菌性枯萎病綜合防治大田示范

16 675 m2的溫郁金細(xì)菌性枯萎病綜合防治大田示范結(jié)果顯示(表5)，7月6日調(diào)查綜合防治試驗(yàn)區(qū)、農(nóng)民常規(guī)防治區(qū)的防治效果分別為91.4%、75.5%，11月8日調(diào)查綜合防治試驗(yàn)區(qū)、農(nóng)民常規(guī)防治區(qū)的防治效果分別為88.3%、70.1%。

表5 不同藥劑對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病田間防效

3 小結(jié)與討論

本文提出的溫郁金細(xì)菌性枯萎病綜合防治方法是，在溫郁金種前每667 m2施用60 kg石灰氮處理土壤，種時(shí)用乙蒜素500倍液浸種莖、生長期用乙蒜素·土霉素600倍液澆灌溫郁金喇叭口等措施，在大田病害防控示范中，該方法防效為88.3%～91.4%。此法在瑞安溫郁金種植區(qū)得到越來越多的藥農(nóng)認(rèn)同，將逐步替代傳統(tǒng)方法成為郁金細(xì)菌性枯萎病的主要防控方法。

作者認(rèn)為，該綜合方法顯現(xiàn)較好效果的原因有3個(gè)方面：1)通過室內(nèi)生物測(cè)定選擇乙蒜素、鏈·土霉素等對(duì)溫郁金細(xì)菌性枯萎病菌抑制作用較強(qiáng)的藥劑；2)抓住了溫郁金細(xì)菌性枯萎病防治的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，即種莖傳病、土壤傳病和生長期發(fā)病等，綜合方法提出相對(duì)應(yīng)的措施，發(fā)揮了綜合效力；3)改進(jìn)了施藥方法，變噴藥為溫郁金喇叭口澆藥提高了藥劑的利用率。究其原因，一是溫郁金地上部分較難著藥，噴藥方法藥劑浪費(fèi)大；二是溫郁金生長季中后期地上部分生物量和比表面積都特別大，需要較大噴藥量，也較難噴藥，而澆藥既省藥也易施藥。

相對(duì)真菌性病害，細(xì)菌性病害防控可選擇的措施較少，乙蒜素和鏈·土霉素等是常用殺菌劑[5-6]，在多種作物上長期使用，抗藥性問題應(yīng)高度關(guān)注。在抗生素禁止農(nóng)用的大趨勢(shì)下，溫郁金細(xì)菌性枯萎病還需研發(fā)新的細(xì)菌病害防治藥劑。在溫郁金細(xì)菌性枯萎病防控中，在采取化學(xué)防治的同時(shí)，還應(yīng)盡可能的應(yīng)用非化學(xué)措施，如選用抗病品種(系)、選用無病種莖、輪作、開溝排水、控制氮肥、增施磷鉀肥等。

[1] 方露敏，黃真. 溫郁金的研究進(jìn)展[J]. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2008，26(9)：1998-2000.

[2] 吳志剛，陶正明，冷春鴻，等. 溫郁金本草考證[J]. 中藥材，2009，32(3)：455-456.

[3] 方麗，王連平，王漢榮. 一種為害溫郁金的新病害溫郁金枯萎病[J]. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，57(7)：985-986.

[4] 方中達(dá)．植病研究法[M]．北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1998.

[5] 張惠淳，楊金琛，王立石，等. 乙蒜素乳油防治黃瓜細(xì)菌性角斑病[J]. 吉林蔬菜，2007(2)：40-41.

[6] 葉建如，顧鋼，張瀛. 幾種藥劑防治煙草青枯病的藥效評(píng)價(jià)[J]. 中國煙草科學(xué)，2013(1)：72-76.

(責(zé)任編輯：張瑞麟)

2017-06-03

浙江省科技計(jì)劃項(xiàng)目(NY2014020)；浙江省三農(nóng)六方項(xiàng)目(CTZB-F160728AWZ-SNY1-37)

王連平(1965—)，男，湖南臨澧人，副研究員，從事經(jīng)濟(jì)作物病害研究工作，E-mail：wlp8843@163.com。

王漢榮，研究員，從事經(jīng)濟(jì)作物病害及其抗病機(jī)理研究，E-mail：wanghrg@126.com。

10.16178/j.issn.0528-9017.20170837

S436

B

0528-9017(2017)08-1415-03

文獻(xiàn)著錄格式：王連平，謝昀燁，方麗，等. 溫郁金細(xì)菌性枯萎病防控藥劑篩選[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，58(8)：1415-1418.