鶴壁市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心 李勇 張艷麗 劉宏偉 宋保軍

如何驗(yàn)證農(nóng)殘速測(cè)儀的準(zhǔn)確性

鶴壁市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心 李勇 張艷麗 劉宏偉 宋保軍

河南省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心

河南省綠色食品發(fā)展中心 主辦

河南省無(wú)公害農(nóng)產(chǎn)品認(rèn)證委辦公室

鶴壁市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心通過(guò)摸索和研究，開(kāi)展了速測(cè)儀的比對(duì)驗(yàn)證。現(xiàn)將驗(yàn)證方法介紹如下，供同行參考。

一、驗(yàn)證過(guò)程

（一）基本準(zhǔn)備

1.儀器與試劑

驗(yàn)證儀器：河南農(nóng)大迅捷公司生產(chǎn)的農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀、吉大·小天鵝農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀、北京強(qiáng)盛分析儀器制造中心快速檢測(cè)儀。

驗(yàn)證試劑：石家莊某農(nóng)殘?jiān)噭?，廣州某農(nóng)殘?jiān)噭?/p>

2.實(shí)驗(yàn)方法

按照GB/T5009.199-2003《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)》酶抑制率法(分光光度法)方法檢測(cè)。

3.樣品的預(yù)處理

（1）樣品處理：選取有代表性的蔬菜樣品，剪成1 cm左右長(zhǎng)度的碎片，取樣品1 g，放入燒杯或提取瓶中，準(zhǔn)確加入5 mL提取液，振蕩1～2 min，倒出提取液，靜置3～5 min，待用。

（2）空白溶液測(cè)試：先于試管中加入2.5 mL緩沖液，再準(zhǔn)確加入0.1 mL酶液和0.1 mL顯色劑，搖勻，在水浴溫度37℃的條件下放置15 min以上。再加入0.1 mL底物搖勻，將溶液倒入比色皿中，此時(shí)檢測(cè)溶液開(kāi)始顯色反應(yīng)，應(yīng)立即放入儀器比色池中，記錄反應(yīng)3 min的吸光度變化值。

（3）樣品溶液測(cè)試：先于試管中加入2.5 mL樣品提取液，其他操作與空白溶液測(cè)試相同，記錄反應(yīng)3 min的吸光度變化值。

（二）采用不同分組進(jìn)行多角度驗(yàn)證

1.不同操作人員使用同一樣品在同一臺(tái)儀器上進(jìn)行驗(yàn)證，以驗(yàn)證不同操作習(xí)慣對(duì)速測(cè)準(zhǔn)確性的影響。人員操作習(xí)慣影響的驗(yàn)證，是指定多名檢驗(yàn)人員，用統(tǒng)一的樣品和速測(cè)試劑，對(duì)同一臺(tái)速測(cè)儀器進(jìn)行操作。根據(jù)每個(gè)操作人員的通道誤差率判定操作人員對(duì)速測(cè)準(zhǔn)確性的影響。本驗(yàn)證指定了4名操作人員，用同一樣品和同一品牌試劑進(jìn)行，選取3臺(tái)速測(cè)儀進(jìn)行平行驗(yàn)證。以1號(hào)速測(cè)儀為例，驗(yàn)證結(jié)果見(jiàn)表1。

結(jié)果表明：在統(tǒng)一樣品、統(tǒng)一速測(cè)試劑、同一臺(tái)速測(cè)儀器的條件下，由于操作人員的習(xí)慣不同，得到的4個(gè)數(shù)據(jù)，按照Q檢驗(yàn)法，25.7屬于可疑值，說(shuō)明結(jié)果存在一定的差異。這種差異多數(shù)由于操作不規(guī)范造成的，比如吸取2.5 mL浸提劑時(shí)，不用移液槍，直接倒入小瓶，小瓶里的浸提劑數(shù)量不精確，直接影響檢測(cè)結(jié)果；又如不會(huì)正確使用移液槍，吸取時(shí)過(guò)量。也可能是器具工具造成的，比如移液槍老化，造成吸液時(shí)有漏液，或吸量不準(zhǔn)確。

表1 1號(hào)速測(cè)儀不同操作人員的通道誤差

2.同一操作人員用同一樣品對(duì)多臺(tái)同型號(hào)儀器進(jìn)行驗(yàn)證，以驗(yàn)證同型號(hào)儀器之間的差異。同型號(hào)儀器之間的驗(yàn)證就是一名檢測(cè)人員用統(tǒng)一的樣品和速測(cè)試劑在多臺(tái)同型號(hào)的速測(cè)儀上進(jìn)行檢測(cè)。本驗(yàn)證要求參與本平行驗(yàn)證的所有儀器為性能可靠的儀器，并要求不同儀器由同一名操作員進(jìn)行。 以抑制率平均值之間的絕對(duì)差判定各儀器之間的差異。本驗(yàn)證指定了1名檢測(cè)員，選取了某品牌型號(hào)的4臺(tái)速測(cè)儀，用同一樣品和同一品牌試劑進(jìn)行，驗(yàn)證結(jié)果見(jiàn)表2。

結(jié)果表明：4臺(tái)某品牌型號(hào)速測(cè)儀的抑制率平均值最高為27.6，最低為25.9，絕對(duì)差值為3.5，表明同型號(hào)速測(cè)儀的準(zhǔn)確性并非完全一致。但各臺(tái)的抑制率平均值的差別均不超過(guò)10%，表明各臺(tái)儀器均為合格產(chǎn)品，能夠承擔(dān)速測(cè)任務(wù)。

3.同一人員使用同一樣品對(duì)不同型號(hào)儀器進(jìn)行驗(yàn)證，以驗(yàn)證不同型號(hào)儀器之間的差異

不同型號(hào)速測(cè)儀的驗(yàn)證是平行驗(yàn)證，3種品牌型號(hào)的的速測(cè)儀，各選取1臺(tái)，由同一人員使用同一樣品、同一試劑進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)比較抑制率平均值判定各型號(hào)儀器的準(zhǔn)確性是否一致。本驗(yàn)證選取了河南農(nóng)大迅捷速測(cè)儀、吉大速測(cè)儀、北京強(qiáng)盛速測(cè)儀中各選取1臺(tái)，指定4名檢測(cè)員，用同一樣品和同一品牌試劑進(jìn)行，驗(yàn)證結(jié)果見(jiàn)表3。

表2 4臺(tái)某型號(hào)儀器之間的抑制率平均值

結(jié)果表明：在同一操作人員、同一樣品、同一試劑的條件下，3種品牌型號(hào)的速測(cè)儀抑制率平均值接近一致，說(shuō)明3種品牌型號(hào)速測(cè)儀的準(zhǔn)確性是一致的。

二、本次驗(yàn)證的指導(dǎo)意義

（一）速測(cè)雖然不在計(jì)量認(rèn)證和機(jī)構(gòu)考核范圍內(nèi)，但由于其作為最常用的監(jiān)管手段，必須定期對(duì)速測(cè)儀的準(zhǔn)確性進(jìn)行驗(yàn)證。這方面是大部分實(shí)驗(yàn)室的薄弱環(huán)節(jié)，必須進(jìn)行加強(qiáng)與完善。

（二）本次驗(yàn)證表明，速測(cè)儀的準(zhǔn)確性受人員操作習(xí)慣、水浴溫度、廠家試劑等多種因素影響，必須加強(qiáng)操作規(guī)范培訓(xùn)，并對(duì)速測(cè)試劑進(jìn)行準(zhǔn)確性驗(yàn)證。

（三）不同型號(hào)、品牌的速測(cè)儀，很有可能存在差異。若一個(gè)單位在使用不同型號(hào)、品牌的速測(cè)儀時(shí)，必須對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證，以掌握不同型號(hào)不同品牌速測(cè)儀的稟性。

（四）對(duì)試驗(yàn)過(guò)程所用的移液槍等器具，要定期進(jìn)行校驗(yàn)，操作人員也要正確使用移液槍等器具，減少操作誤差。

表3 不同型號(hào)儀器之間的抑制率平均值