王 琳，陸丹玉，方 晨(.蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院藥學(xué)院，江蘇蘇州 25009;2.蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)院，江蘇蘇州 252;.香港浸會(huì)大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院，中國(guó)香港)

去甲斑蝥素納米膠束的制備及抑瘤作用研究

王 琳1，2＊，陸丹玉1，方 晨3(1.蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院藥學(xué)院，江蘇蘇州 215009;2.蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)院，江蘇蘇州 215213;3.香港浸會(huì)大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院，中國(guó)香港)

目的:制備去甲斑蝥素納米膠束，并研究其抑瘤作用。方法:采用三嵌段共聚物二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-馬來酰亞胺在水中自組裝形成去甲斑蝥素納米膠束。觀察所制納米膠束形態(tài)，考察其載藥率、包封率、粒徑和Zeta電位。通過MTT法考察陰性對(duì)照組(磷酸鹽緩沖液)、載體組(空白納米膠束)、陽性對(duì)照組(去甲斑蝥素原料藥，5～320μg/m L)和去甲斑蝥素納米膠束組(以去甲斑蝥素計(jì)，5～320μg/m L)人肺癌A549細(xì)胞在作用不同時(shí)間(24、48、72 h)后的細(xì)胞生存率。將荷瘤裸鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、去甲斑蝥素注射液組(1mg/kg)和去甲斑蝥素納米膠束低、高劑量組(0.5、1mg/kg)，每組6只，每天尾iv相應(yīng)藥物1次，連續(xù)8周;每周測(cè)量腫瘤的大小，給藥結(jié)束后第2天檢測(cè)瘤質(zhì)量。結(jié)果:去甲斑蝥素納米膠束呈圓球狀，載藥率為(2.82±0.05)%，包封率為(83.67±1.78)%，粒徑為(138.6±45.8)nm，Zeta電位為-(12.75±0.34)mV(n=6);載體組A549細(xì)胞生存率無明顯變化，陽性對(duì)照組和去甲斑蝥素納米膠束組A549細(xì)胞生存率明顯降低，與濃度和時(shí)間呈正相關(guān)，且去甲斑蝥素納米膠束組細(xì)胞生存率降低程度較陽性對(duì)照組更明顯(P＜0.01)。與空白對(duì)照組比較，3個(gè)給藥組裸鼠的瘤質(zhì)量均減小(P＜0.05)，其中去甲斑蝥素納米膠束高劑量組減小程度較去甲斑蝥素注射液組更明顯(P＜0.05)。結(jié)論:成功制得去甲斑蝥素納米膠束，其對(duì)A549細(xì)胞具有較好的體內(nèi)外抑瘤作用。

二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-馬來酰亞胺;去甲斑蝥素;納米膠束;抑瘤作用

去甲斑螯素(Norcantharidin)是將斑螯屬昆蟲南方大斑螯和黃黑小斑螯的蟲體所含的抗癌有效成分斑螯素(Cantharidin)1，2位去甲基而得的，是我國(guó)首先研制開發(fā)的具有一定潛力的抗腫瘤藥物[1-2]。但由于其毒性很大，在人工胃液及人工腸液中以去甲斑螯酸的形式存在[3-4]，水溶性增加，導(dǎo)致其口服生物利用度低，影響了其對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制和殺傷作用，限制了其臨床應(yīng)用。本研究擬采用三嵌段共聚物二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-馬來酰亞胺(DSPE-PEG-MAL)制備在水中自組裝形成PEG在外、其他成分及藥物在內(nèi)的去甲斑螯素納米膠束，并研究其抑瘤作用。

1 材料

1.1 儀器

Acquity超高效液相色譜儀(UPLC)，包括PDA Detector光電二極管陣列檢測(cè)器(美國(guó)Waters公司);激光散射粒徑測(cè)定儀(美國(guó)Beckman Coulter有限公司); 5417R冷凍臺(tái)式離心機(jī)(德國(guó)Eppendorf公司);倒置顯微鏡(德國(guó)Leica公司);IVIS Lum ina XR活體動(dòng)物體內(nèi)成像系統(tǒng)(美國(guó)Caliper生命科學(xué)公司);HT7700透射電鏡(日本Hitachi公司);連續(xù)光譜酶標(biāo)儀(美國(guó)Bio-Rad公司)。

1.2 藥品與試劑

去甲斑螯素原料藥(南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司，批號(hào):20141206，純度:＞98%);去甲斑螯素對(duì)照品(中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào):100414-201501，純度: 100%);DSPE-PEG2000-MAL(美國(guó)Avanti公司，批號(hào): 228234);大豆卵磷脂(美國(guó)AvantiPolar Lipids公司，批號(hào):186969);膽固醇(美國(guó)Sigma公司，批號(hào):C8667-25G，純度:94%);交聯(lián)葡聚糖G50(美國(guó)Pharmacia公司進(jìn)口分裝，上海化學(xué)試劑廠，粒徑:100～300μm);胎牛血清、DMEM培養(yǎng)基、胰蛋白酶(美國(guó)Gibco公司);MTT (德國(guó)Merck公司，批號(hào):475989);正辛醇、甲醇、無水乙醇等均為分析純，乙腈為色譜純。

1.3 細(xì)胞與動(dòng)物

人肺癌細(xì)胞株A549和A549熒光酶素細(xì)胞株A 549-luc均購自上海睿星生物技術(shù)有限公司。BALA/C裸鼠36只，SPF級(jí)，♂，4～6周齡，體質(zhì)量在19 g左右，購自香港中文大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物編號(hào)為2015-0241。

2 方法

2.1 去甲斑蝥素納米膠束的制備

將一定比例的去甲斑螯素和DSPE-PEG2000-MAL，用一定量的乙醇超聲溶解后，以1滴/10 s的速度逐滴加入至磁力攪拌的蒸餾水中，揮發(fā)30m in，倒入透析袋中，封口，在1 000m L的蒸餾水中透析24 h，每4 h換1次水。最后將制得的聚合物納米膠束溶液4 000 r/min(離心半徑13.5 cm，下同)離心30min，取上清，即得去甲斑螯素納米膠束。其中，離心的目的是為了除去沉降在離心管底部的未包載的聚合物。同法制得不加去甲斑螯素的空白納米膠束。

2.2 去甲斑蝥素的含量測(cè)定

2.2.1 色譜條件色譜柱:BEH Shield RP-18(50mm× 2.1mm，1.7μm);流動(dòng)相:0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH至3.0)-甲醇(75∶35);檢測(cè)波長(zhǎng):213 nm;流速:0.6m L/m in;柱溫:35℃;進(jìn)樣量:5μL。

2.2.2 方法學(xué)考察 精密稱取去甲斑螯素對(duì)照品適量，加磷酸鹽緩沖液(PBS)溶解制成一定濃度的對(duì)照品溶液，取對(duì)照品溶液和陰性對(duì)照溶液(PBS)進(jìn)樣分析。另取經(jīng)交聯(lián)葡聚糖G50分離后的去甲斑螯素納米膠束溶液和空白納米膠束溶液，加消解液超聲消解，定容，12 000 r/m in離心5m in，取上清液進(jìn)樣分析，記錄色譜。另按方法學(xué)相關(guān)要求操作，考察去甲斑螯素的回歸方程、線性范圍、回收率、穩(wěn)定性、精密度。

2.3 納米膠束的質(zhì)量評(píng)價(jià)

2.3.1 載藥量與包封率 取去甲斑螯素納米膠束溶液適量，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定其中去甲斑螯素的含量，根據(jù)2015年版《中國(guó)藥典》(四部)中的相關(guān)規(guī)定[5]，計(jì)算載藥量和包封率。載藥量(%)=納米膠束中去甲斑螯素質(zhì)量/納米膠束的質(zhì)量×100%;包封率(%)=納米膠束中去甲斑螯素質(zhì)量/去甲斑螯素的投藥量× 100%。

2.3.2 粒徑、Zeta電位與形態(tài) 取100μL的去甲斑螯素納米膠束溶液，用PBS稀釋至2m L，混勻，采用激光散射粒徑測(cè)定儀分析其粒徑和Zeta電位。采用磷鎢酸鈉溶液對(duì)納米膠束進(jìn)行染色，透射電鏡下觀察其形態(tài)。

2.3.3 體外釋放度 取1份去甲斑螯素原料藥和3份相同質(zhì)量的去甲斑螯素納米膠束，分別用蒸餾水定容至5 m L，置于透析袋中密封。將原料藥溶液置于裝有10m L含1%十二烷基硫酸鈉(SDS)的PBS(pH為7.4)的離心管中，將膠束溶液分別置于裝有10m L PBS(pH分別為6.5、7.0、7.4)的離心管中，(37±0.5)℃下以100 r/m in恒溫振蕩。分別于0、0.5、l、2、4、6、8、12、24、36、48、60、72 h取樣，每次將10m L釋放液全部倒出，同時(shí)補(bǔ)充10m L新鮮釋放介質(zhì)。釋放液按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定去甲斑螯素含量，計(jì)算累積釋放度(Q)，以取樣時(shí)間(t)為橫坐標(biāo)、Q為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.4 體外抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)

2.4.1 細(xì)胞培養(yǎng) 采用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)A549細(xì)胞，待細(xì)胞生長(zhǎng)達(dá)90%融合狀態(tài)時(shí)以0.25%胰蛋白酶消化，根據(jù)試驗(yàn)需要接種于96孔板上。

2.4.2 細(xì)胞生存率測(cè)定 將A549細(xì)胞復(fù)蘇傳代，待生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，用胰酶消化，用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞密度為5×104m L-1，以每孔100 μL接種于96孔板中，在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后開始加藥。試驗(yàn)分為4組，分別為(1)陰性對(duì)照組:只加PBS，不加藥物;(2)載體組:加空白納米膠束溶液; (3)陽性對(duì)照組:加質(zhì)量濃度分別為5、10、20、40、80、160、320μg/m L的去甲斑螯素原料藥溶液(原料藥先溶解在二甲基亞砜中，再用PBS稀釋至所需質(zhì)量濃度); (4)去甲斑螯素納米膠束組:加去甲斑螯素質(zhì)量濃度分別為5、10、20、40、80、160、320μg/m L的去甲斑螯素納米膠束溶液(納米膠束用PBS稀釋至所需質(zhì)量濃度)，每個(gè)質(zhì)量濃度設(shè)3個(gè)復(fù)孔。加藥后繼續(xù)培養(yǎng)24、48、72 h，每孔再加入5mg/m L的MTT 20μL，培養(yǎng)4 h，取出，棄上清，加入二甲基亞砜150μL，振蕩15m in均勻溶解，在570 nm波長(zhǎng)處測(cè)定OD值，計(jì)算細(xì)胞生存率。細(xì)胞生存率(%)=加藥組OD值/陰性對(duì)照組OD值×100%。分別對(duì)影響細(xì)胞生存率的藥物質(zhì)量濃度作析因分析和單向方差分析，對(duì)藥物作用時(shí)間作重復(fù)測(cè)量的方差分析。

2.5 體內(nèi)抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)

2.5.1 荷瘤裸鼠模型建立 將A549-luc細(xì)胞復(fù)蘇，用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液于37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。待細(xì)胞生長(zhǎng)至80%瓶底面積時(shí)，用0.25%胰蛋白酶消化，收集細(xì)胞于離心管內(nèi)，1 000 r/m in離心5 min，棄上清，用PBS沖洗3次，用不含血清的DMEM培養(yǎng)液重懸細(xì)胞后調(diào)整細(xì)胞密度為5×106m L-1。將細(xì)胞懸液用注射器接種于裸鼠腋下，每只0.2m L。每次注射前將細(xì)胞搖勻，以保證腫瘤成瘤比較均勻;接種完成后用手指輕壓注射點(diǎn)，防止細(xì)胞外滲。所有細(xì)胞保證在2 h內(nèi)接種完畢，所有操作均在無菌操作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。7 d后，所有裸鼠均成為荷瘤裸鼠。

2.5.2 體內(nèi)抑瘤實(shí)驗(yàn) 將荷瘤裸鼠隨機(jī)分成空白對(duì)照組(生理鹽水)、去甲斑螯素注射液組(1mg/kg)和去甲斑螯素納米膠束低、高劑量組(0.5、1mg/kg)，每組6只。給藥劑量是根據(jù)筆者前期的急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果(裸鼠對(duì)于去甲斑螯素的最大耐受量為1mg/kg)設(shè)置的。接種成功后的第2天開始每天尾iv相應(yīng)藥物1次，連續(xù)8周。從給藥的第1天起，每天觀察裸鼠的飲食、精神狀態(tài)，測(cè)量腫瘤長(zhǎng)徑(a)和短徑(b)，按公式V=ab2/2估算腫瘤的近似體積(V，cm3)，繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線。給藥結(jié)束后的第2天，將荷瘤裸鼠處死，剝瘤，稱質(zhì)量，計(jì)算抑瘤率，抑瘤率(%)=(對(duì)照組瘤質(zhì)量-給藥組瘤質(zhì)量)/對(duì)照組瘤質(zhì)量×100%。采用SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 去甲斑蝥素的含量測(cè)定方法學(xué)考察結(jié)果

系統(tǒng)適用性結(jié)果顯示，去甲斑螯素的保留時(shí)間在6.2m in左右，陰性對(duì)照溶液及空白納米膠束溶液對(duì)其測(cè)定均無干擾。去甲斑螯素峰面積(y)對(duì)質(zhì)量濃度(x)的回歸方程為y=61.534x+169.99(r2=0.999 9，n=6)，線性范圍為25.41～813.12μg/m L;加樣回收率為(99.58± 1.95)%(n=6);10 h內(nèi)穩(wěn)定性試驗(yàn)中含量的RSD為1.11%(n=6);去甲斑螯素低、中、高濃度的精密度試驗(yàn)中峰面積的RSD分別為2.07%、1.31%、0.83%(n=6)，色譜圖見圖1。

3.2 納米膠束質(zhì)量評(píng)價(jià)

去甲斑螯素納米膠束呈圓球狀、邊緣整齊、表面光滑，載藥量為(2.82±0.05)%，包封率為(83.67±1.78)%，粒徑為(138.6±45.8)nm，Zeta電位為-(12.75±0.34) mV(n=6)，透射電鏡圖見圖2。

3.3 體外釋放度

去甲斑螯素原料藥具有突釋效應(yīng)，在2 h內(nèi)Q已達(dá)80%，6 h內(nèi)Q已達(dá)95%;去甲斑螯素納米膠束在不同pH釋放介質(zhì)中均隨著時(shí)間延長(zhǎng)緩慢持續(xù)釋放，釋放曲線呈拋物線形。pH為6.5、7.0時(shí)去甲斑螯素納米膠束呈現(xiàn)出比pH為7.4時(shí)更快的釋放速度。72 h時(shí)，去甲斑螯素納米膠束在pH 6.5、7.0、7.4釋放介質(zhì)中的Q分別為(83.5±3.5)%、(80.0±1.6)%、(72.0±1.5)%(n=6)。累積釋放曲線見圖3。

圖1 超高效液相色譜圖Fig 1 UPLC chromatogram s

圖2 去甲斑蝥素納米膠束的透射電鏡圖(×12 000)Fig 2 Transm ission electron m icroscopy figure of NCTD nano-m icelle(×12 000)

圖3 累積釋放曲線Fig 3 Cum ulative release curves

3.4 體外抗腫瘤活性

結(jié)果顯示，載體組A549細(xì)胞生存率無明顯變化，陽性對(duì)照組和去甲斑螯素納米膠束組A549細(xì)胞生存率明顯降低，且與藥物濃度和作用時(shí)間呈正相關(guān)。其中，去甲斑螯素納米膠束組細(xì)胞生存率降低程度強(qiáng)于陽性對(duì)照組(P＜0.01)。各組A549細(xì)胞的細(xì)胞生存率測(cè)定結(jié)果見圖4。

圖4 各組A549細(xì)胞在不同作用時(shí)間后細(xì)胞生存率的測(cè)定結(jié)果(n=3)Fig 4 Determ ination results of the survival rates of A549 cells after acting for different tim e in each group(n=3)

3.5 體內(nèi)抗腫瘤活性

實(shí)驗(yàn)期間裸鼠一般情況良好，未見死亡。處死后解剖各器官均未見瘤轉(zhuǎn)移。各組荷瘤裸鼠移植瘤生長(zhǎng)曲線見圖5，切除后各組裸鼠的腫瘤形狀見圖6。

圖5 各組荷瘤裸鼠移植瘤生長(zhǎng)曲線Fig 5 Grow th curves of transplanted tumor of tumor nudem ice in each group

圖6 各組荷瘤裸鼠移植瘤的圖片F(xiàn)ig 6 Pictures of transp lanted tum or of tum or nude m ice in each group

由圖5所示，在給藥的前3周，空白對(duì)照組和所有給藥組裸鼠的腫瘤大小沒有顯著變化。從給藥第3周開始到第8周，空白對(duì)照組荷瘤裸鼠的瘤體積呈持續(xù)快速增長(zhǎng)的趨勢(shì);到第8周，空白對(duì)照組荷瘤裸鼠的呼吸非常困難。與空白對(duì)照組比較，去甲斑螯素注射液組和去甲斑螯素納米膠束低、高劑量組荷瘤裸鼠的瘤體積均減小(P＜0.05)，其中去甲斑螯素納米膠束高劑量組抑瘤率明顯高于去甲斑螯素注射液組(P＜0.05)。各組荷瘤裸鼠的體質(zhì)量、瘤質(zhì)量和抑瘤率的測(cè)定結(jié)果見表1。

表1 各組荷瘤裸鼠的體質(zhì)量、瘤質(zhì)量和抑瘤率的測(cè)定結(jié)果(±s，n=6)Tab 1 Determ ination results of body mass，tumor quality，tumor inhibition rate of tumor nude m ice in each grou(p±s，n=6)

表1 各組荷瘤裸鼠的體質(zhì)量、瘤質(zhì)量和抑瘤率的測(cè)定結(jié)果(±s，n=6)Tab 1 Determ ination results of body mass，tumor quality，tumor inhibition rate of tumor nude m ice in each grou(p±s，n=6)

注:與空白對(duì)照組比較，＊P＜0.05;與去甲斑螯素注射液組比較，#P＜0.05Note:vs.blank control group，＊P＜0.05;vs.NCTD injection group，#P＜0.05

組別空白對(duì)照組去甲斑螯素注射液組去甲斑螯素納米膠束低劑量組去甲斑螯素納米膠束高劑量組54.78 45.22 64.35#給藥前體質(zhì)量，g 18.3±0.8 18.6±1.0 19.1±0.6 19.2±0.4處死時(shí)體質(zhì)量，g 30.2±1.4 28.9±2.1 28.1±1.6 26.6±1.5瘤質(zhì)量，g 1.15±0.14 0.52±0.12＊0.63±0.14＊0.41±0.21＊#抑瘤率，%

4 討論

去甲斑螯素的傳統(tǒng)劑型為片劑，盡管片劑在制備工藝上容易操作、成本低，但是不能解決去甲斑螯素生物利用度低、毒性強(qiáng)的缺點(diǎn)。國(guó)內(nèi)研究學(xué)者為了解決去甲斑螯素存在的不足，將其制成了殼聚糖納米粒、脂質(zhì)體等新劑型，但是目前國(guó)內(nèi)將去甲斑螯素制成聚合物膠束的研究并不多。將去甲斑螯素制成納米膠束不僅可以具備納米制劑的靶向性，同時(shí)還能增加藥物的溶解性。載體材料DSPE-PEG-MAL的應(yīng)用也是一個(gè)創(chuàng)新，其無毒性、無免疫原性、無抗原性以及可降解性和生物相容性的優(yōu)點(diǎn)使其在生物醫(yī)學(xué)材料界備受青睞[6-8]。

本課題初步完成了去甲斑螯素納米膠束的制備、質(zhì)量評(píng)價(jià)、體外抗腫瘤及體內(nèi)抗腫瘤研究，表明其具有較好的體內(nèi)外抑瘤作用。但是由于研究水平、實(shí)驗(yàn)條件及實(shí)驗(yàn)時(shí)間的限制，許多工作仍需要進(jìn)一步完善。今后還將開展其藥動(dòng)學(xué)研究，考察去甲斑螯素納米膠束在動(dòng)物體內(nèi)的組織分布，進(jìn)一步驗(yàn)證其對(duì)腫瘤組織的靶向性。

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Preparation of Norcantharidin Nano-m icelle and Study on Its Antitumor Effect

WANG Lin1，2，LU Danyu1，F(xiàn)ANG Chen3(1.School of Pharmacy，Suzhou Vocational Health College，Jiangsu Suzhou 215009，China;2.School of Pharmacy，Medical College of Soochow University，Jiangsu Suzhou 215213，China;3.School of Chinese Medicine，HongKong Baptist University，HongKong，China)

OBJECTIVE:To prepare the norcantharidin(NCTD)nano-micelle and study its antitumor effect.METHODS: NCTD nano-micelle was self-formed in water using Triblock copolymers distearyl phosphatidylethanolamine-polyethylene glycol-maleimide;its shape was observed，the drug-loading rate，entrapment efficiency，particle size，Zeta potential were investigated.MTT was used to investigate the cell survival rate of human lung cancer A549 cells in negative control group(Phosphate buffer solution)，carrier group(blank nano-m icelle)，positive control group(NCTD APIs，5-320μg/m L)and NCTD nano-m icelle group (NCTD，5-320μg/m L)after acting different time(24，48，72 h).Tumor nude mice were random ly divided into blank control group，NCTD injection group(1 mg/kg)，NCTD low-dose，high-dose groups(0.5，1mg/kg)，6 in each group.Allmice were intravenously injected relevantmedicines in tail，once a day，for 8 weeks.Tumor size wasmeasured every week，and tumor quality was detected after the second day of finishing adm inistration.RESULTS:NCTD nano-m icelle was round，drug-loading rate was (2.82±0.05)%，entrapment efficiency was(83.67±1.78)%，particle size was(138.6±45.8)nm，Zeta potential was-(12.75± 0.34)mV(n=6).Cell survival rate of A549 cells in carrier group had no obvious changes，and was obviously decreased in positive control group and NCTD nano-micelle group，which was positively correlated w ith concentration and time.And the decrease degree of cell survival rate in NCTD nano-m icelle group was stronger than positive control group(P＜0.01).Compared w ith blank control group，the tumor quality of m ice in 3 adm inistration groups was reduced(P＜0.05)，the reduction degree in NCTD nano-micelle high-dose group was stronger than NCTD nano-micelle injection group(P＜0.05).CONCLUSIONS:NCTD nano-m icelle is successfully prepared，which has good in vitro and in vitro anti-tumor effect on A549 cells.

Distearyl phosphatidylethanolamine-polyethylene glycol-maleimide;Norcantharidin;Nano-micelle;Antitumor effect

R943;R361+.3

A

1001-0408(2017)19-2680-05

2016-10-27

2016-12-17)

(編輯:鄒麗娟)

江蘇省衛(wèi)生廳科技項(xiàng)目(No.JZ201402)

＊副教授，博士研究生。研究方向:藥物新制劑。電話:0512-62693011。E-mail:wanglinlinda@126.com

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2017.19.25