趙宇婷

摘 要：有髯鳶尾是一種垂瓣上有髯毛附屬物的鳶尾花，具有花大、花形奇特且花香艷麗的特點(diǎn)得到人們的青睞，也是世界范圍內(nèi)十分重要的宿根花卉之一。早在19世紀(jì)，人們?cè)谏锟萍碱I(lǐng)域就利用了雜交技術(shù)，可以獲得更多不同性狀的品種，本文針對(duì)有髯鳶尾雜交種成熟胚培養(yǎng)成苗技術(shù)進(jìn)行分析。

關(guān)鍵詞：有髯鳶尾；雜交技術(shù)；成苗技術(shù)

有髯鳶尾的觀賞價(jià)值非常高，在近代花卉觀賞中得到迅速發(fā)展，目前我國的有髯鳶尾都是通過從國外引進(jìn)而來，有髯鳶尾的生長習(xí)性為喜排水，適合高爽的中性砂質(zhì)土壤，近年來我國在針對(duì)有髯鳶尾的育種方面均采用雜交的方式來進(jìn)行培育以及新品種的開發(fā)。

一、材料與方法

1.試驗(yàn)材料

本次試驗(yàn)選取了有髯鳶尾“白與藍(lán)”ד印度首領(lǐng)”果實(shí)。

2.試驗(yàn)方法

（1）消毒處理。將果實(shí)外包被的干黃苞片出去，使用洗衣粉浸泡后再使用自來水清洗20min，取出種子，再將種子沖洗30min后使用75%傳達(dá)的酒精進(jìn)行消毒，然后將清洗好的種子進(jìn)行解剖，取出種胚，再采取不同的處理方式并將材料放于MS培養(yǎng)基之中，再進(jìn)行接種，接種完成后才可以放于培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)。

（2）種胚萌發(fā)誘導(dǎo)培養(yǎng)基的篩選。將胚種分別接種在不同濃度的6-BA、IBA以及NAA的MS細(xì)胞培養(yǎng)基當(dāng)中，根據(jù)胚萌發(fā)和成苗的情況來研究植物生長調(diào)節(jié)劑的相應(yīng)影響，并對(duì)種胚存在的體積膨大、彎曲等情況進(jìn)行記錄并作為萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn)，以成苗的葉片形成情況來作為成苗的標(biāo)準(zhǔn)，最后根據(jù)培萌發(fā)率以及成苗率來進(jìn)行胚的培養(yǎng)方案的制定以及相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的研究。

（3）培養(yǎng)條件。向MS培養(yǎng)基中進(jìn)行添加瓊脂、白砂糖等，并采用熟料封口的方式進(jìn)行高溫滅菌，時(shí)間為19min，在進(jìn)行培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)溫度應(yīng)為24-26℃之間，光照時(shí)間應(yīng)控制在12h之內(nèi)。

（4）練苗和移栽。查看幼苗的生長情況，將良好的幼苗進(jìn)行練苗移栽，待試管苗根長到3cm左右時(shí)，將封口膜緩慢打開，分別取出進(jìn)行練苗操作，將小苗取出并將根基殘留的培養(yǎng)基清洗干凈，使用過0.2%多菌靈溶液浸泡30s然后在分別將小苗移栽到滅菌后的基石上。

二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1.不同消毒處理對(duì)種子和種胚的污染率的影響

根據(jù)不同消毒處理后對(duì)種子和種胚的污染程度來看，影響程度差異很大，但是隨著消毒處理的時(shí)間的不斷增長，對(duì)種子的污染率也就逐漸降低，并且，種子在經(jīng)過2個(gè)星期的時(shí)間后，萌發(fā)率形成由上升到下降的趨勢，再根據(jù)消毒時(shí)間的長短來看，消毒時(shí)間過長對(duì)種胚會(huì)產(chǎn)生毒害作用，并不利于種胚的發(fā)芽。

2.雜交種植成熟胚誘導(dǎo)培養(yǎng)基的篩選

不同的激素濃度對(duì)雜交中胚萌發(fā)的影響各有不同，添加7次不同的6-BA、IBA、NAA進(jìn)行處理，根據(jù)不同的激素本身的特性以及濃度可以得知，第6次的萌發(fā)率和成苗率最高，約為87%和86%，其他的幾次都要比第6次少很多。

3.增殖培養(yǎng)

（1）增殖培養(yǎng)基篩選。把叢生不定芽轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)26天后，只有1個(gè)出現(xiàn)了污染情況，并且芽叢增殖的非常明顯，通過對(duì)試管苗增殖以及生長情況的了解，增殖試管的苗可以分為三種，這三種苗都存在著增殖倍數(shù)的不同，不過三種苗的增殖倍數(shù)均在3到5之間。

4.生根培養(yǎng)

根據(jù)污染濃度的不同針對(duì)有髯鳶尾的培苗生根的程度也會(huì)不同，也就是說隨著濃度的增加，培苗生根的時(shí)間會(huì)先縮短再進(jìn)行延長，一般是7天左右的時(shí)間。

三、綜合分析

1.種胚的獲取以及消毒

在對(duì)有髯鳶尾進(jìn)行取胚時(shí)，應(yīng)當(dāng)先將種皮、胚乳等全部去除然后才能夠真正的取出完整的胚胎。完整的種子胚胎中是不會(huì)存在病毒的侵入，因此，種胚的培養(yǎng)過程中可以排除存在污染的問題，但是若種皮、胚乳處理不當(dāng)，則會(huì)容易伴有細(xì)菌的滋生和入侵，從而導(dǎo)致種胚產(chǎn)生污染，也就說明了種胚的培養(yǎng)已經(jīng)失敗了。因此，在進(jìn)行種胚的獲取工作中時(shí)，應(yīng)當(dāng)注意對(duì)種胚的二次消毒消毒，并且針對(duì)消毒時(shí)所使用的試劑以及消毒所需要的時(shí)間要進(jìn)行相應(yīng)的控制，否則，二次消毒也會(huì)給種胚帶來污染。

2.種胚的萌發(fā)

通過實(shí)驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn)，種胚在接種以后生長方式主要為脫分化形成愈傷組織后，再分化出無菌苗以及直接萌發(fā)出幼苗，然而幼苗的狀態(tài)又可以分為單苗或者是叢苗。

在日后的繁殖過程中，這兩種種胚的生長方式都能做到苗相整齊且增殖效果顯著。另外針對(duì)種胚直接萌發(fā)出幼苗的過程中，種胚在萌發(fā)時(shí)能夠首先出現(xiàn)下胚軸，接著是根環(huán)處膨大產(chǎn)生軸毛，然后是胚芽的位置開始膨大，能夠長出葉子，最后是胚根得到發(fā)育，形成根系組織。

3.繼代復(fù)壯

根據(jù)實(shí)驗(yàn)可以得知，無菌苗普遍存在增殖倍數(shù)低、生長速度緩慢等問題，也存在玻璃化苗、褐化苗等情況，其中的大部分原因是由于隨著無菌苗繼代次數(shù)的不斷增多，體內(nèi)所包含的激素量過大，從而導(dǎo)致出現(xiàn)了此類情況的發(fā)生，也就是要在無菌苗繼代生長次數(shù)達(dá)到一定程度后就需要進(jìn)行繼代復(fù)壯的培養(yǎng)了。由于無污染的程度較好，因此無菌苗生根的速度也會(huì)非常迅速，且株叢健壯，葉片顏色純正，在進(jìn)行接下來的一段時(shí)間的培養(yǎng)中，部分的苗已經(jīng)生根，針對(duì)具體情況將生根苗的根系剪去，然后將其接種到處于最佳培養(yǎng)基中去，經(jīng)過一段時(shí)間觀察，能夠發(fā)現(xiàn)株叢葉片的寬度、顏色都已經(jīng)發(fā)生了許多變化。

四、結(jié)語

胚是能夠具有形成新植株的能力且離體萌發(fā)容易，胚的培養(yǎng)技術(shù)則是可以通過將種子的休眠狀態(tài)打破，促進(jìn)萌發(fā)率的提升，進(jìn)而產(chǎn)生整齊苗的出現(xiàn)，與莖尖、根莖以及花蕾等其他植被部位相比，胚的取材往往更具有方便性，而且在消毒、萌發(fā)以及繁殖速度反面都有顯著的效果。

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